維生素C的含量測定直接碘量法

1、維生素C含量測定維生素C片含量的測定方法很多，各種方法各有其特點(diǎn)，如： （直接/間接）碘量法；2,6-二氯靛酚法；紫外可見分光光度法和高 效液相色譜法。中國藥典2010年版二部采用碘量法測含量，此 法雖然操作簡單，但因制劑中常有還原性物質(zhì)存在，對此法干擾明顯， 且由于碘具有揮發(fā)性，碘離子易被空氣所氧化而使滴定產(chǎn)生誤差。常 見的其他滴定法存在滴定終點(diǎn)難以準(zhǔn)確判斷，如 2, 6-二氯靛酚法：2, 6-二氯靛酚是一種染料，其氧化型在酸性介質(zhì)中為紅色，堿性介質(zhì)中 為藍(lán)色，與維生素C反應(yīng)后，生成無色的還原型酚亞胺，因此，在酸 性條件下，用2, 6-二氯靛酚滴定至溶液顯玫瑰紅色，即為終點(diǎn)；無 需另加指示劑

2、。OCo-ACHOCH C省OH述新H 2 . 6短隔/酎工正色）氯化型杭仄曲腋分光光度法運(yùn)用維生素C的旋光性能進(jìn)行含量測定，但操作費(fèi)時(shí)，而高效液相色譜法是目前發(fā)展較為迅速的一種方法，靈敏度高，選擇性好，是一個(gè)準(zhǔn)確高效的測定維生素C含量的方法。我們主要介紹的是 直接碘量法。直接碘量法一實(shí)驗(yàn)原理維生素C是人體重要的維生素之一，它影響膠元蛋白的形成，參與人體多種氧化- 還原反應(yīng) , 并且有解毒作用。人體不能自身制造維生素C,所以人體必須不斷地從食物中攝入維生素 C,通常還需儲藏 能維持一個(gè)月左右的維生素 C。缺乏時(shí)會產(chǎn)生壞血病，故又稱抗壞 血酸。維生素C屬水溶性維生素，分子式 QHQ。分子中的烯二

3、醇基具有還原性，能被I 2定量地氧化成二酮基，因而可用I 2標(biāo)準(zhǔn)溶液直接測定。簡寫為：C6H8O6 I 2= C6H6O6 2HI使用淀粉作為指示劑，用直接碘量法可測定藥片、注射液、飲料、蔬菜、水果中維生素C的含量。C 的還原性很強(qiáng)，較容易被溶液和空氣中的氧氧化，在堿性介質(zhì)中這種氧化作用更強(qiáng)，因此滴定宜在酸性介質(zhì)中進(jìn)行，以減少副反應(yīng)的發(fā)生?？紤]到I - 在強(qiáng)酸性中也易被氧化，故一般選在pH為34的弱酸性溶液中進(jìn)行滴定。由于碘具有揮發(fā)性，碘離子易被空氣所氧化而使滴定產(chǎn)生誤差；又由于碘的揮發(fā)性和腐蝕性，使碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制及標(biāo)定比較麻煩。根據(jù)維生素C在稀鹽酸溶液中，酸度小于pH3.8時(shí)，Vc吸收

4、曲線比較穩(wěn)定，在243 nm 波長處有最大吸收的特性，可建立紫外分光光度法測定維生素C 片含量的方法。二實(shí)驗(yàn)用品分析天平、酸式滴定管(50ml) 、錐形瓶 (250ml) 、I2標(biāo)準(zhǔn)碘溶液(0.05mol/L)、HAc(2mol/L);淀粉指示劑溶液( 10g/L )，紫外分光光度計(jì)；容量瓶(50ml) ，吸量管,維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取105c干燥至恒重的維生素 C 0.0500g,力口 10mL3mol溫酸7§解,并以蒸儲水定容到500mLHCl( 3mol/L)樣品維生素C片（100mg/片）（一） 直接碘量法測定維生素C的含量：1 .測定準(zhǔn)確稱取約適量（約相當(dāng)于維生素 C

5、0.2g ）研成粉末的維生素C 藥片，置于250ml錐形瓶中，加入100ml新煮沸過并冷卻的蒸儲水， 加入10mL2mo卜L-1HAc和1mL淀粉指示劑（10g/L）,立即 0.05mol/L I 2標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至穩(wěn)定的淺藍(lán)色，30s內(nèi)不褪色即 為終點(diǎn)。每1mL碘單質(zhì)滴定液（0.05mol/L ）相當(dāng)于8.806mg的維生 素Co平行測定三次。2 .計(jì)算維生素C的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，數(shù)值以 減示，按下式計(jì)算： 3 士一二事” VTFW 10 林本里%=M100 %mS標(biāo)2,6-二氯靛酚法 維生素C具有很強(qiáng)的還原性。它可分為還原型和脫氫型（氧化型）。根據(jù)它具有的還原性質(zhì)可測定其含量。還原型抗壞血酸能還

6、原染料 2, 6-二氯酚靛酚（Dichlorophenolindo phenol , 簡寫DCPIP）,本身則氧化成脫氫型。在酸性溶液中，2, 6-二氯酚靛酚呈紅色,還原后變?yōu)闊o色。因此，當(dāng)用2, 6-二氯酚靛酚滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時(shí)，在抗壞血酸尚 未被全部氧化前，則滴下的染料立即被還原成為無色。一旦溶液中的抗壞血酸 已全部被氧化時(shí)，則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色。所以，當(dāng)溶液從無色 轉(zhuǎn)變成微紅色時(shí)即表示溶液中的抗壞血酸剛剛被全部氧化，此時(shí)即為滴定終點(diǎn)。 從滴定時(shí)2, 6-二氯酚靛酚標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量，可以計(jì)算出被檢物質(zhì)中抗壞血 酸的含量。CH20H氧和受精保血核還原型2 6二M附靛第（無色）該法簡便易行，但有下列缺點(diǎn)：1。在生物組織內(nèi)和組織提取液中，抗 壞血酸能以脫氫抗壞血酸及結(jié)合抗壞血酸的形式存在。它們同樣具有 維生素的生理功能，但不能將2, 6-二氯酚靛酚還原脫色。（總抗壞 血酸的量常用2, 4-二硝基苯月井法和熒光分光光度法測定）2.生物組 織提取物和生物體液中常含有其它還原性物質(zhì)，其中有些在同樣的條 件下也可使2, 6-二氯酚靛酚還原脫色。3.在生物組織中，常有色素 類物質(zhì)存在，給滴定終點(diǎn)的觀察造成困難。2, 6-二氯靛酚法