硬脂酸鎂標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、硬脂酸鎂操作規(guī)程起草人日期20年月日審核人日20年月日批準(zhǔn)人日期20年月日生效日期頒發(fā)部門質(zhì)量部分發(fā)部門1 .目的建立硬脂酸鎂檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，規(guī)硬脂酸鎂檢驗操作2 .圍適用于硬脂酸鎂的檢驗3 .依據(jù)：中國藥典2010版二部4 .職責(zé)4.1 起草：QC 審核：QA 批準(zhǔn)人：質(zhì)量負(fù)責(zé)人4.2 QC實施本規(guī)程4.3 QA監(jiān)督本規(guī)程的實施5 .容5.1 性狀本品為白色輕松無砂性的細(xì)粉；微有特臭；與皮膚接觸有滑膩感。本品在水、乙醇或乙醛 中不溶。5.2 鑒別5.2.1 儀器及試液一般實驗儀器和高效液相色譜儀稀硝酸：取硝酸105ml,加水稀釋至1000ml,即得。氨試液：取濃氨溶液 400ml,加水使成

2、1000ml ,即得。氯化錢試液：取氯化錢 10.5g,加水使溶解成100ml,即得。磷酸氫二鈉試液：取磷酸氫二鈉結(jié)晶12g,加水使溶解成100ml,即得。氫氧化鈉試液取氫氧化鈉4.3g,加水使溶解成100ml,即得。碘試液：取用碘滴定液 0.05mol/L ,取碘13. 0g,加碘化鉀36g與水50ml溶解后，加鹽酸 3 滴與水適量使成1000ml,搖勻，用垂熔玻璃濾器濾過。5.2.2 分析步驟5.2.2.1 取本品約5.0g,置圓底燒瓶中，加無過氧化物乙醛50ml、稀硝酸20ml與水20ml,加熱回流至完全溶解，放冷，移至分液漏斗中，振搖，放置分層，將水層移至另一分液漏斗中，用水提取乙醛層

3、 2次，每次4ml,合并水層，用無過氧化物乙醛15ml清洗水層，將水層移至50ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。5.2.2.1.1 取上述溶液，加氨試液，觀察：滴加氯化鏤試液，即生成白色沉淀；再加磷酸氫二 鈉試液1滴，振搖，即生成白色沉淀；分離，沉淀加氨試液，不溶解。5.2.2.1.2 取上述溶液，加氫氧化鈉試液，即生成白色沉淀；沉淀分成兩份，一份加過量的氫氧化鈉試液，沉淀不溶解；另一份中加碘試液，沉淀轉(zhuǎn)成紅棕色。5.2.2.2 在硬脂酸與棕桐酸相對含量檢查項下記錄的色譜圖中，供試品溶液兩主峰的保留時 間應(yīng)分別與對照品溶液兩主峰的保留時間一致。5.3 檢查：5.3.1 酸堿度

4、5.3.1.1 儀器及試液一般實驗儀器澳廨香草酚藍(lán)指示液：取澳麝香草酚藍(lán)0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.2ml使溶解，再加水稀釋至200ml,即得。0.1mol/L鹽酸滴定液：取鹽酸 9ml,加水適量使成 1000ml,搖勻。0.1mol/L氫氧化鈉滴定液：取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6ml,加新沸過的冷水使成 1000ml,搖勻。5.3.1.2 分析步驟取本品1.0g,加新沸過的冷水 20ml,水浴上加熱1分鐘并時時振搖，放冷，濾過，取續(xù)濾 液10ml,加澳麝香草酚藍(lán)指示液0.05ml,用鹽酸滴定液(0.1mol/L )或氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴至溶液顏色發(fā)生變化，

5、滴定液用量不得過0.05ml o5.3.2 氯化物5.3.2.1 儀器及試液一般實驗儀器稀硝酸：取硝酸105ml,加水稀釋至1000ml,即得。標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液：稱取氯化鈉0.165g,置1000ml量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液 10ml,置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻， 即得（每1ml相當(dāng)于10 dg的Cl）。硝酸銀試液：即硝酸銀滴定液5.3.2.2 分析步驟量取鑒別（1）項下的供試品溶液 1.0ml,加水使成25ml,再加稀硝酸10ml,置50ml納氏 比色管中，加水使成約40ml,搖勻，即得供試品溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液10.0ml

6、,置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml,加水使成40ml,搖勻，即得對照溶液。于供試品溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0ml,用水稀釋使成50ml,搖勻，在暗處放置 5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較，不得更濃。5.3.3 硫酸鹽5.3.3.1 儀器及試液一般實驗儀器稀鹽酸：取鹽酸 234ml,加水稀釋至1000ml,即得標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液：稱取硫酸鉀0.181g,置1000ml量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。25%氯化鋼溶液：取氯化鋼 25g,加水使溶解成75ml,即得。5.3.3.2 分析步驟取鑒別（1）項下的供試品溶液 1.0ml,加水使成約40m

7、l置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸 2ml ,搖勻，即得供試品溶液。另取6.0ml標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液，置 50ml納氏比色管中，加水使成約40ml,加稀鹽酸2ml,搖勻，即得對照溶液。于供試品溶液與對照溶液中，分別加入25%氯化鋼溶液5ml,用水稀釋至50ml,充分搖勻，放置10分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向 下觀察、比較，不得更濃（0.6%）。5.3.4 干燥失重5.3.4.1 儀器及試液一般實驗儀器5.3.4.2 分析步驟取本品，在80c熾灼至恒重，計算減失重量不得過5.0% 。W樣+W并E-W并6+樣失重 % = X100%W樣式中W并E+樣熾灼后恒重的稱量瓶與樣品重量；W并e熾灼前恒

8、重的稱量瓶重量。W木*樣品稱樣量5.3.5 鐵鹽5.3.5.1 儀器及試液一般實驗儀器稀鹽酸：取鹽酸 234ml,加水稀釋至1000ml,即得。標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液：取硫酸鐵鏤FeNH4 （S04）2 12H2。0.863g,置1000ml量瓶中，加水溶解后， 加硫酸2.5ml,用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液 10ml,置100ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每 1ml相當(dāng)于10闖的Fe）o5.3.5.2 分析步驟取本品0.50g,熾灼灰化后，加稀鹽酸5ml與水10ml,煮沸，放冷，濾過，濾液加過硫酸鏤50mg,用水稀釋成35ml,與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液5.0ml用同一方法制成

9、的對照液比較，不得更深 （0.01%）。5.3.6 重金屬5.3.6.1 儀器及試液一般實驗儀器稀醋酸：取冰醋酸 60ml,加水稀釋至1000ml,即得。醋酸鹽緩沖液（pH3.5）:取醋酸鏤 25g,加水25ml溶5解后，加7mol/L鹽酸溶液38ml, 用2moI/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準(zhǔn)確調(diào)節(jié) pH值至3.5 （電位法指示），用水稀釋至 100ml, 即得。標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液：稱取硝酸鉛 0.1599g,置1000ml量瓶中，加硝酸 5ml與水50ml溶解后，用水 稀釋至刻度，搖勾，作為貯備液。精密量取貯備液 10ml,置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度， 搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于l0

10、g的Pb）。硫代乙酰胺試液：取硫代乙酰胺4g,加水使溶解成100ml,置冰箱中保存。臨用前取混合液（由1mol/L氫氧化鈉溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml組成）5.0ml,加上述硫代乙酰胺溶液 1.0ml,置水浴上加熱20秒鐘，冷卻，立即使用。5.3.6.2 分析步驟取本品2.0g,緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸 0.51.0ml,使恰潤濕，低溫加熱至硫 酸除盡，加硝酸 0.5ml,蒸干，至氧化氮蒸汽除盡后，放冷，在 500600 c熾灼使完全灰化， 放冷，加鹽酸2ml,置水浴上蒸干后加水 15ml與稀醋酸2ml,加熱溶解后，放冷，加醋酸鹽緩 沖液（pH3.5） 2ml ,微熱溶解后

11、，移置納氏比色管中，加水稀釋成5ml,作為甲管；另取配制Word文檔供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水15ml,微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水稀釋成 25ml,作為乙管；再在甲、乙兩管中 分別加硫代乙酰胺試液各 2ml,搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出 的顏色與甲管比較，不得更深（含重金屬不得過百萬分之十五）。5.4 硬脂酸與棕桐酸相對含量5.4.1 儀器及試液一般實驗儀器和GC-14C氣相色譜儀三氟化硼的甲醇溶液：取三氟化硼一水合物或二水合物適量（相當(dāng)于三氟化硼14g）,加甲醇溶解并稀釋至100ml,搖勻。

12、5.4.2 分析步驟取本品0.1g,精密稱定，置錐形瓶中，加三氟化硼的甲醇溶液5ml,搖勻，加熱回流10分鐘使溶解，從冷凝管加正庚烷 4ml,再回流10分鐘，放冷后加飽和氯化鈉溶液20ml,振搖，靜置使分層，將正庚烷層通過裝有無水硫酸鈉0.1g （預(yù)先用正庚烷洗滌）的玻璃柱，移入燒杯中，作為供試品溶液。照氣相色譜法試驗，用聚乙二醇20M為固定相的毛細(xì)管柱，起始柱溫70 C,維持2分鐘，以每分鐘5 c的速率升溫至 240 C,維持5分鐘；進(jìn)樣口溫度為 220 C,檢測器溫度為 260 C。 分別稱取棕桐酸甲酯與硬脂酸甲酯對照品適量，加正庚烷制成每1ml中分別約含5mg與10mg的溶液，取1 U注

13、入氣相色譜儀，棕桐酸甲酯峰與硬脂酸甲酯峰的分離度應(yīng)大于3.0。精密量取供試品溶液1ml,置100ml量瓶中，用正庚烷稀釋至刻度，搖勻，取 1 M注入氣相色譜儀，調(diào)節(jié) 檢測靈敏度，使棕桐酸甲酯峰與硬脂酸甲酯峰應(yīng)能檢出。再取供試品溶液1 口注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，按下式面積歸一化法計算硬脂酸鎂中硬脂酸在脂肪酸中的百分含量。硬脂酸百分含量（） =A X100%B式中 A為供試品中硬脂酸甲酯的峰面積；B為供試品中所有脂肪酸脂的峰面積。同法計算硬脂酸鎂中棕桐酸在總脂肪酸中百分含量。硬脂酸相對含量不得低于40%,硬脂酸與棕桐酸相對含量的總和不得低于90%。5.5 微生物限度5.5.1 儀器及試液一般實

14、驗儀器和無菌氯化鈉-蛋白月東緩沖液：取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23g、氯化鈉4. 0g、蛋白月東1.0g,加水1000ml,微溫溶解，濾清，分裝，滅菌。5.5.2 分析步驟微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度 100級的單向流空氣區(qū)域進(jìn)行。檢驗全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的 檢出。細(xì)菌及控制菌培養(yǎng)溫度為3035C；霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為2328 c5.5.2.1 細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)5.5.2.1.1 供試品檢查平皿法取供試品10g,加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白月東緩沖液至100ml,用勻漿儀或其他適宜的方法， 混

15、勻，作為1:10的供試液。取1:10的供試液1ml,加無菌氯化鈉-蛋白月東緩沖液至10ml,作為 1:100的供試液。取相應(yīng)稀釋級的供試液 1ml,置直徑90mm的無菌平皿中，注入 1520ml溫度不超過45 C 的溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉月東葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝 固，倒置培養(yǎng)。每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2個平板。5.5.2.1.2 陰性對照試驗取試驗用的稀釋液1ml,置無菌平皿中，注人培養(yǎng)基，凝固，倒置培養(yǎng)。每種計數(shù)用的培養(yǎng)基各制備2個平板，均不得有菌生長。5.5.2.1.3 培養(yǎng)和計數(shù)除另有規(guī)定外，細(xì)菌培養(yǎng)3天，霉菌、酵母菌培養(yǎng) 5天，逐日觀察菌落生長情況

16、，點(diǎn)計菌落數(shù)，必要時，可適當(dāng)延長培養(yǎng)時間至7天進(jìn)行菌落計數(shù)并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數(shù)。點(diǎn)計菌落數(shù)后，計算各稀釋級供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報告規(guī)則報告菌數(shù)。若同 稀釋級兩個平板的菌落平均數(shù)不小于15,則兩個平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。一般營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于細(xì)菌計數(shù)；玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基用于霉菌及酵母菌計數(shù)；酵母浸 出粉月東葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌計數(shù)。在特殊情況下，若營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上長有霉菌和酵 母菌、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上長有細(xì)菌，則應(yīng)分別點(diǎn)計霉菌和酵母菌、細(xì)菌菌落數(shù)。然后將營 養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上的霉菌和酵母菌數(shù)或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)，與玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 中的霉菌和酵母菌

17、數(shù)或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中的細(xì)菌數(shù)進(jìn)行比較，以菌落數(shù)高的培養(yǎng)基中的菌數(shù)為 計數(shù)結(jié)果。每1g供試品中除細(xì)菌數(shù)不得過 1000個、霉菌及酵母菌數(shù)不得過 100個。5.5.2.2 控制菌檢查5.5.2.2.1 供試品檢查取細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)的供試液10ml,直接或處理后接種至適量（不少于100ml）的膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，培養(yǎng) 1824小時，必要時可延長至 48小時。取上述培養(yǎng)物0.2ml,接種至含5mlMUG培養(yǎng)基的試管，培養(yǎng)，于5小時、24小時在366nm 紫外光下觀察，同時用未接種的M U G培養(yǎng)基作本底對照。若管培養(yǎng)物呈現(xiàn)熒光，為 MUG陽性；不呈現(xiàn)熒光，為 MUG陰性。觀察后，沿培養(yǎng)管的管壁加人

18、數(shù)滴靛基質(zhì)試液，液面呈玫瑰 紅色，為靛基質(zhì)陽性；呈試劑本色，為靛基質(zhì)陰性。本底對照應(yīng)為 MUG陰性和靛基質(zhì)陰性。如MUG陽性、靛基質(zhì)陽性，判供試品檢出大腸埃希菌；如 MUG陰性、靛基質(zhì)陰性，判供 試品未檢出大腸埃希菌；如MUG陽性、靛基質(zhì)陰性，或 MUG陰性、基質(zhì)陽性，則應(yīng)取膽鹽乳糖培養(yǎng)基的培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng) 1824小時。若平板上無菌落生長或生長的菌落與表1所列的菌落形態(tài)特征不符，判供試品未檢出大腸埃希菌。若平板上生長的菌落與表1所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似，應(yīng)進(jìn)行分離、純化、染色鏡檢和適宜的鑒定試驗，確認(rèn)是否為大腸埃希菌。本品不得檢出大腸埃希菌。5.5.2.2.2 陽性對照試驗陽性對照試驗方法同供試品的控制菌檢查，對照菌的加菌量為 10100