水質(zhì)總大腸菌群和糞大腸菌群紙片快速法檢測方法確認(rèn)表

1、萬法名稱 水質(zhì)總大腸菌群和糞大腸菌群的測定 （紙片快速法） 申請人 項目負(fù)責(zé)人員 制定原因 驗證檢測方法符合實驗 室要求、確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性 寫有效性 方法適用范圍 適用于地表水、地下水及廢水中的總大腸困群和糞大腸困群的快速測定。 方法來源 HJ 755-2015水質(zhì)總大腸菌群和糞大腸菌群的測定紙片快速法 儀器、試劑和環(huán) 境的要求 1. 儀器和設(shè)備 1.1高壓蒸汽滅菌器 1.2培喬相 1.3冰箱 1.4采樣瓶 1.5試管 1.6水質(zhì)總大腸困群和糞大腸困群測試紙片 2. 試劑：2.1硫代硫酸鈉2.2乙二胺四乙酸二鈉 采樣和測試過程中，所用到的玻璃器也需滅菌后方可使用。 方法描述 按MP祛，將一定量的

2、水樣以無菌操作的方式接種到吸附有適量指示劑 （漠 甲酚紫和2,3,5-氯化 f 四氮哇即TTQ以及乳糖等營養(yǎng)成分的無菌濾紙 上，在特定的溫度（37C或44.5 C）培養(yǎng)24h,當(dāng)細(xì)菌生長繁殖時，產(chǎn)酸使 pH降低，漠甲酚紫指示劑由紫色變黃色，同時，產(chǎn)氣過程相當(dāng)?shù)拿摎涿?在適宜的p如圍內(nèi)，催化底物脫氫還原TT（成紅色的不溶性二苯甲（TTD。 即可在產(chǎn)酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點 （或紅暈）。通過上述指示劑的 顏色變化就可對是否廣酸廣氣作出判斷，從而確定是否有總大腸困群或糞 大腸困群存在，再通過查MP跳就可得出相應(yīng)總大腸困群或糞大腸困群的濃 度值。 檢測結(jié)果的判斷 1. 結(jié)果判讀： (1) 制片上

3、出現(xiàn)紅斑或紅暈且周圍變黃，為陽性。 (2) 紙片全片變黃，無紅斑或紅暈，為陽性。 (3) 紙片部分變黃，無紅斑或紅暈，為陰性。 (4) 紙片的紫色背景上出現(xiàn)紅斑或紅暈，而周圍不變黃，為陰性。 (5) 紙片無變化，為陰性。 2. 結(jié)果計算： 根據(jù)不同接種量的陽性紙片數(shù)量，查 MP跳得到MPffi,按公式換算并報告 1L水樣中總大腸菌群或糞大腸菌群數(shù)： C=100*M/Q 式中： C1水樣總大腸菌群或糞大腸菌群濃度(MPN/L 陽查MP讖得到的MPN：(MPN/100ml) Q頭際水樣耳文大接種重(ml) 100為 10*10ml，其中，10將MP值的單位 MPN/100m換為 MPN/L 10m

4、l 為MPNt中最大接種量。 3. 結(jié)果表示： 測定結(jié)果保留二位有效數(shù)字，大丁等丁 100時以科學(xué)計數(shù)法表示，結(jié)果的單 位為MPN/L平均值以幾何平均計算。 附件說明 表1 運(yùn)行說明 經(jīng)驗證該力,法符合我實驗室使用。 審批意見 技術(shù)經(jīng)理： 日 期： 總經(jīng)理： 日期： 表1附錄 B （資料性附錄） 最大可能數(shù)（MPN）表 （水樣接種量為 5 份IOEI, 5 份 Iml, 5 份 O.lmD 各接種量閉性份救 MPN 100ml 95%信限 務(wù)摟種盆取性份數(shù) MPNdOOml 10ml Iml 0. Iml 下限 上限 l(hnl Iml 0. Iml 下限 上限 0 0 0 2 3 0 0 8

5、 1 19 0 0 1 2 0.5 7 3 0 1 11 2 25 0 0 2 4 0.5 7 3 0 2 13 3 31 0 0 3 5 3 0 3 16 0 0 4 7 3 0 4 20 0 0 5 9 3 0 5 23 0 1 0 2 0.5 7 3 I 0 11 2 25 0 1 1 4 0.5 11 3 1 1 14 4 34 0 1 2 6 0.5 15 3 1 2 17 5 46 0 1 3 7 3 1 3 20 6 60 0 1 4 9 3 I 4 23 0 1 5 11 3 1 5 27 0 2 0 4 0.5 11 3 2 0 14 4 34 0 2 I 6 0.5 15

6、3 2 1 17 5 46 0 2 2 7 3 2 2 20 6 60 0 2 3 9 3 2 3 24 0 2 4 11 3 2 4 27 0 2 5 13 3 2 5 31 0 3 0 6 0.5 15 3 3 0 17 5 46 0 3 1 7 3 3 1 21 7 63 0 3 2 9 3 3 2 24 0 3 3 11 3 3 3 28 0 3 4 13 3 3 4 32 0 3 5 15 3 3 5 36 0 4 0 8 3 4 0 21 7 63 0 4 1 9 3 4 1 24 8 72 0 4 2 II 3 4 2 28 0 4 3 13 3 4 3 32 9 各接種巨用性份

7、數(shù) MPN 100ml 95%置值限 各 M 種量陽性份數(shù) MPN/IOOml 95%置信限 10ml 1ml O.l ml 下限 上限 lOnil Iml 0.1 ml 下限 上限 C 4 4 15 3 4 4 36 C 4 5 17 3 4 5 40 0 5 0 9 3 5 0 25 8 75 C 5 1 11 3 5 1 29 C 5 2 13 3 5 2 32 C 5 3 15 3 5 3 37 C 5 4 17 3 5 4 41 C 5 5 19 3 5 5 45 1 0 0 0.5 7 4 0 0 13 3 31 1 0 1 4 0.5 11 4 0 I 17 5 46 1 0 2

8、 6 0.5 15 4 0 2 21 7 63 1 0 3 8 1 19 4 0 3 25 8 75 1 0 4 10 4 0 4 30 1 0 5 12 4 0 5 36 1 1 0 4 0.5 11 4 1 0 17 5 46 1 1 1 6 0.5 15 4 1 1 21 7 63 1 1 2 8 1 19 4 1 2 26 9 78 1 1 3 10 4 1 3 31 1 1 4 12 4 1 4 36 1 1 5 14 4 1 5 42 1 2 0 6 0.5 15 4 1 0 22 7 67 1 2 1 8 I 19 4 2 1 26 9 78 1 2 2 10 2 23 4 2

9、2 32 11 91 1 2 3 12 4 2 3 38 1 2 4 15 4 2 4 44 1 2 5 17 4 2 5 50 1 3 0 8 1 19 4 3 0 27 9 80 1 3 1 10 2 23 4 3 I 33 11 93 1 3 2 12 4 3 2 39 13 110 1 3 3 15 4 3 3 45 1 3 4 17 4 3 4 52 1 3 5 19 4 3 5 59 10 各接種量田性份數(shù) MPN/IOOml 95%Jt 信限 務(wù)接種量舊性份數(shù) MPN/IOOml 95%Jt 信限 10ml 1ml O.Iml 下限 上限 !Oml 1ml 0.1ml 下限 上限 1 4 0 11 一 25 4 4 0 34 12 93 1 4 1 13 4 4 1 40 14 110 1 4 2 15 4 4 2 47 1 4 3 17 4 4 3 54 1 4 4 19 4 4 4 62 1