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文檔簡介
1、歷年考研西醫(yī)綜合試題重要知識點 (按照 7 版教材順序):(一)生物大分子的 結(jié)構(gòu)和功能Unit 1屬于亞氨基酸的是:脯氨酸(Pro ) 蛋白質(zhì)合成加工時被修飾成:羥脯氨酸蛋白質(zhì)中有不少半胱氨酸以胱氨酸形式存在。必需氨基酸:甲硫氨酸(蛋氨酸Met)、亮氨酸(Leu)、纈氨酸(Vai )、異亮氨酸(lie )、苯丙氨酸(Phe)、賴氨酸(Lys )、色氨酸(Trp )、蘇氨酸(Thr)含有兩個氨基的氨基酸:賴氨酸( Lys )、精苷酸(Arg ) “揀來精讀”含有兩個羧基的氨基酸:谷氨酸( Glu )、天冬氨酸(Asp) “三伏天”含硫氨基酸:胱氨酸、半胱氨酸(Cys)、蛋氨酸(Met)生酮氨基
2、酸:亮氨酸(Leu )、賴氨酸(Lys ) “同樣來”生糖兼生酮氨基酸:異亮氨酸(lie )、苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr )、色氨酸(Trp )、蘇氨 酸( Thr )“一本落色書”天然蛋白質(zhì)中不存在的氨基酸:同型半胱氨酸 不出現(xiàn)于蛋白質(zhì)中的氨基酸:瓜氨酸 含有共軛雙鍵的氨基酸: 色氨酸 (Trp) 主要、 酪氨酸 (Tyr)紫外線最大吸收峰: 280nm 對穩(wěn)定蛋白質(zhì)構(gòu)象通常不起作用的化學鍵是:酯鍵 維系蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的化學鍵: 肽鍵 ;維系蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)(a -螺旋、B -折疊、B -轉(zhuǎn)角和無規(guī)卷曲)的化學鍵:氫鍵 維系蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)(整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空間位置)的化學
3、鍵: 次級鍵(疏水鍵、鹽健、氫鍵和 Van der Waais 力)維系蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的化學鍵: 氫鍵和離子鍵 蛋白質(zhì)的模序結(jié)構(gòu)(模體:具有特殊功能的超二級結(jié)構(gòu))舉例:鋅指結(jié)構(gòu)、亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu) 當溶液中的pH與某種氨基酸的 pI (等電點)一致時,該氨基酸在此溶液中的存在形式是:兼 性離子蛋白質(zhì)的變性:蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)破壞,生物活性喪失,一級結(jié)構(gòu)無改變。變性之后:溶解度降低,黏度增加,結(jié)晶能力消失,易被蛋白酶水解,紫外線(280nm吸收 增強。電泳的泳動速度取決于蛋白質(zhì)的分子量、分子形狀、所在溶液的pH值、所在溶液的離子強度:球狀桿狀;帶電多、分子量小帶電少、分子量大;離子強度低離子強度高 凝膠
4、過濾(分子篩層析) 時: 大分子蛋白質(zhì)先洗脫下來目前常用于測定多肽N末端氨基酸的試劑是:丹(磺)酰氯Unit 2 RNA與 DNA的徹底分解產(chǎn)物:核糖不同,部分堿基不同(嘌吟相同,嘧啶不同)黃嘌吟:核苷酸代謝的中間產(chǎn)物,既不存在于DNA中也不存在于 RNA中。在核酸中,核苷酸之間的連接方式是: 3',5'- 磷酸二酯鍵 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu):反向平行;右手螺旋,螺距為3.54nm,每個螺旋有10.5個堿基對;骨架由脫氧核糖和磷酸組成,位于雙螺旋結(jié)構(gòu)的外側(cè),堿基位于內(nèi)側(cè);堿基配對原則為C三G, A= T,所以 A+GZ C+T= 1生物體內(nèi)各種 mRNA長短不一,相差很大 hnRNA
5、含有許多外顯子和內(nèi)含子,在mRNA成熟過程中,內(nèi)含子被剪切掉,使得外顯子。mRNA連接在一起,形成成熟的含有稀有核苷酸的核酸: tRNA tRNA三葉草結(jié)構(gòu)(二級結(jié)構(gòu)):5'端的一個環(huán)為 DHU環(huán);有一個反密碼子環(huán);有一個T C環(huán);3'端都是以CCA-OH結(jié)構(gòu)結(jié)束的核糖體rRNA構(gòu)成:原核生物小亞基16S;大亞基 23S + 5S真核生物小亞基 18S;大亞基 28S + 5.8S + 5S核酶(ribozyme):具有催化功能的小 RNA(無蛋白質(zhì)及輔酶參與)核酸酶(RNA酶):具有催化功能的蛋白質(zhì)嘌吟和嘧啶都含有共軛雙鍵,紫外線最大吸收值在260nm附近。 DNA的變性(雙
6、鏈DNA解離為單鏈):增色效應(yīng)(DNA在 260nm處的吸光度增加,而最大吸收峰 的波長不會發(fā)生轉(zhuǎn)移) 、溶液黏度降低 。 DNA的解鏈溫度 (Tm即50%的DNA解離成單鏈時的溫度):Tm值與DNA長短(分子越長,Tm值越大)和 GC含量(GC含量越高,Tm值越大)相關(guān);此外,如果DNA是均一的則Tm值范圍較小,如果DNA是不均一的則 Tm值范圍較大;Tm值較高的核酸常常是 DNA而不是RNAUnit 3單純酶 :僅由氨基酸殘基構(gòu)成(推論:并非所有酶的活性中心都含有輔酶)結(jié)合酶 :酶蛋白 +輔助因子(金屬離子 / 輔酶) =全酶(只有全酶才有催化功能)酶蛋白決定反應(yīng)的特異性,輔酶決定反應(yīng)的種
7、類與性質(zhì) 酶的活性中心 :酶分子結(jié)合底物并發(fā)揮催化作用的關(guān)鍵性三維結(jié)構(gòu)區(qū)( 所有的酶都有活性中心 )酶活性中心內(nèi)的必需基團有兩類:結(jié)合基團、催化基團。必需基團:酶活性中心內(nèi)的必需基團+酶活性中心外的必需基團(推論:并非酶的必需基團都位于活性中心內(nèi) ; 并非所有的抑制劑都作用于酶的活性中心 )參與組成脫氫酶的輔酶: 尼克酰胺 (Vit PP );參與組成轉(zhuǎn)氨酶的輔酶: 吡哆醛參與組成輔酶 Q:泛醌;參與組成輔酶 A:泛酸;參與組成黃酶:核黃素(Vit B) 2+含有腺嘌吟的輔酶:NAD NADP FAD輔酶A (都帶“ A”同工酶 :指催化相同化學反應(yīng), 但酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、 理化性質(zhì)乃至免疫學
8、性質(zhì)不同的一組酶。人體各組織器官中 乳酸脫氫酶(LDH同工酶 的分布:LDH主要存在于 心??;LDH主要21存在于 紅細胞;LDH主要存在于胰腺;LDH主要存在于肝臟53 通常測定酶活性的反應(yīng)體系中:應(yīng)選擇 該酶作用的最適 pH;反應(yīng)溫度宜接近最適溫度;合適的(足夠的)底物濃度;合適的溫育時間;有的酶需要加入激活劑。米氏方程:V= VmaxS / Km+S(計算題要用到)當 S<<Km 時,反應(yīng)速率與底物濃度呈正比;當 S>>Km 時,反應(yīng)速率達最大速率。Km值:酶促反應(yīng)速率為最大速率一半時的底物濃度,是酶的特性常數(shù)之一(其他如:酶的最適溫度、最適pH等均不是酶的特性常
9、數(shù)),只與酶的結(jié)構(gòu)、底物和反應(yīng)環(huán)境有關(guān),與酶的濃度無 關(guān)(推論:同一種酶的各種同工酶的Km值常不同);Km值可用來表示酶對底物的親和力,Km值愈小,酶對底物的親和力愈大(舉例:腦己糖激酶的 Km值低于肝己糖激酶的 Km值血糖,因此在血糖濃度低時腦仍可攝取葡萄糖而肝不能) 。競爭性抑制作用(競爭酶的活性中心):Vmax不變,Km值增大舉例: 丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制作用; 磺胺類藥物 對二氫葉酸合成酶 的抑制 (磺胺類藥物 的化學結(jié)構(gòu)與 對氨基苯甲酸 相似)非競爭性抑制作用(結(jié)合酶活性中心外的必需基團) :Vmax降低,Km值不變 反競爭性抑制作用(與酶和底物形成的中間產(chǎn)物結(jié)合) :Vmax和
10、Km同時降低(變構(gòu)部位)可逆地結(jié)合,使酶發(fā)生變構(gòu)而改酶的變構(gòu)調(diào)節(jié):變構(gòu)劑與酶的調(diào)節(jié)部位 變其催化活性(促進或抑制) 。受變構(gòu)調(diào)節(jié)的酶稱作變構(gòu)酶或別構(gòu)酶;導(dǎo)致變構(gòu)效應(yīng)的物質(zhì)稱為 變構(gòu)效應(yīng)劑;有時底物本身就是變構(gòu)效應(yīng)劑。代謝途徑中的關(guān)鍵酶(限速酶)多受變構(gòu)調(diào)節(jié);變構(gòu)酶催化非平衡反應(yīng)(不可逆反應(yīng)) 。 變構(gòu)酶分子常含有多個(偶數(shù))亞基,酶分子的催化部位(活性中心)和調(diào)節(jié)部位有的在同一 亞基內(nèi),有的不在同一亞基內(nèi)(這種情況下才有催化亞基和調(diào)節(jié)亞基之分;推論:并非所有變構(gòu) 酶都有催化亞基和調(diào)節(jié)亞基) 。變構(gòu)酶不遵守米氏方程;酶的變構(gòu)調(diào)節(jié)是體內(nèi)代謝途徑的重要快速調(diào)節(jié)方式之一。 酶的化學修飾調(diào)節(jié)(共價修飾)
11、 :指酶蛋白肽鏈上的一些基團可與某種化學基團發(fā)生可逆的共 價結(jié)合,從而改變酶的活性(無活性/ 有活性)的過程。酶的化學修飾是體內(nèi)快速調(diào)節(jié)的另一種重要方式。 磷酸化與脫磷酸化是最常見的共價修飾方式, 屬于酶促反應(yīng) (由兩種催化不可逆反應(yīng) 的酶所催化) ,消耗 ATP。(二)物質(zhì)代謝及其調(diào)節(jié)Unit 4 糖酵解的三個關(guān)鍵酶:1. 己糖激酶:促進:胰島素;抑制:6-磷酸葡萄糖(反饋)、長鏈脂酰CoA(變構(gòu))2.6- 磷酸果糖激酶 -1 (最重要) :變構(gòu)激活劑: AMP、 ADP、 1,6- 二磷酸果糖和 2,6- 二磷酸果糖 (其中, 2,6- 二磷酸果糖是最強的變構(gòu)激活劑)變構(gòu)抑制劑:ATP、檸
12、檬酸3. 丙酮酸激酶:變構(gòu)激活劑: 1,6- 二磷酸果糖抑制:ATP丙氨酸(肝內(nèi))、胰高血糖素糖酵解過程中的兩次底物水平磷酸化:第一次:1,3-二磷酸甘油酸-3-磷酸甘油酸(磷酸甘油酸激酶,可逆)第二次:磷酸烯醇式丙酮酸t(yī)丙酮酸(丙酮酸激酶,不可逆)+ 糖酵解過程中生成 NADH+H勺反應(yīng):3-磷酸甘油醛1,3-二磷酸甘油酸(3-磷酸甘油醛脫氫酶)+ NADH+H的去向:用于還原丙酮酸生成乳酸(缺氧時);進入呼吸傳遞鏈氧化(有氧時)。產(chǎn)能:獲得 ATP的數(shù)量取決于 NADH進入線粒體的穿梭機制(2中可能):經(jīng)蘋果酸穿梭,+ 分子NADH+H產(chǎn)生2.5ATP ;經(jīng)磷酸甘油酸穿梭,一分子NADH+
13、H產(chǎn)生1.5ATP糖酵解、糖異生、磷酸戊糖途徑、糖原合成與分解代謝的交匯點:6-磷酸葡萄糖磷酸甘油酸激酶:在糖酵解和糖異生過程中均起作用(可逆反應(yīng))糖酵解的生理意義: 1.迅速提供能量; 2.機體缺氧或劇烈運動肌局部血流不足時, 能量主要通 過糖酵解獲得; 3. 紅細胞完全依賴糖酵解供應(yīng)能量。三羧酸循環(huán)的主要部位:線粒體+ 丙酮酸脫氫酶復(fù)合體的輔酶有:硫胺素焦磷酸酯( TPP、硫辛酸、FAD NAD CoA2+ ATP/AMP 比值增加可抑制丙酮酸脫氫酶復(fù)合體;Ca 可激活丙酮酸脫氫酶復(fù)合體。丙酮酸乙酰 CoA的反應(yīng)不可逆,因此乙酰 CoA不能異生為糖,只能經(jīng)三羧酸循環(huán)徹底氧化, 或是合成脂肪
14、酸;糖代謝產(chǎn)生的乙酰CoA通常不會轉(zhuǎn)化為酮體。三羧酸循化“一二三四”歸納:1. 一次底物水平磷酸化:琥珀酰CoA琥珀酸(由琥珀酰 CoA合成酶催化,生成的高能化合物為:GTP2. 二次脫羧:(1)異檸檬酸a -酮戊二酸(異檸檬酸脫氫酶)(2)a -酮戊二酸琥珀酰 CoA (a -酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體)3. 三個關(guān)鍵酶:CoA、琥珀酰NADH檸檬酸、ATP抑制:ADP檸檬酸合酶:變構(gòu)激活劑:1 (2+ATPCa;抑制:2)異檸檬酸脫氫酶:激活: ADPC+NADHCoA -酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體:激活:Ca;抑制:琥珀酰(3)a + NADH+Ha -酮戊二酸(異檸檬酸脫氫酶,生成)異檸檬酸t(yī)4.
15、四次脫氫:(1+ NADH+H a -酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體,生成2) a -酮戊二酸t(yī)琥珀酰 Co( FADH)( 3)琥珀酸t(yī)延胡索酸(琥珀酸脫氫酶,生成2+ )4)蘋果酸t(yī)草酰乙酸(蘋果酸脫氫酶,生成NADH+H (+1.5ATP生成2.5ATP ;分子FADH 經(jīng) 氧化呼吸鏈產(chǎn)能:一分子NADH+Hfc成2的代謝去路:琥珀酰Coat草酰乙酸(三羧酸循環(huán))t磷酸烯醇式丙酮酸(磷酸烯醇式CoA 1.糖異生:琥珀酰丙酮酸羧激酶)t糖異生(接上式) 磷酸烯醇式丙酮酸t(yī)丙酮酸t(yī)有氧氧化(三羧酸循環(huán))2.有氧氧化:CoA (接上式)丙酮酸t(yī)乙酰 3. 合成其他物質(zhì): )合成脂酸( 31 )合成酮體;
16、 ( 2)合成膽固醇;( CoA乙酰乙酰t琥珀酸 + 3. 參與酮體的氧化:乙酰乙酸+琥珀酰CoA+t血紅素甘氨酸 + Fe 4. 合成血紅素:琥珀酰 CoA +草酰乙酸的代謝去路: 見上述和酮體不能異生為糖, 所以脂酸、 生酮氨基酸不能進行糖異生; 除生酮氨基乙酰 CoA酸外的氨基酸都可進行糖異生。一次底9ATP、1分子丙酮酸徹底氧化可生成12.5ATP (包括四次脫氫生成的能量計算:2.5ATP )物水平磷酸化生成的 1ATP和三羧酸循環(huán)之前一步丙酮酸氧化脫羧生成的磷酸葡(與1-磷酸葡萄糖)和UTP*糖原的合成需要的高能化合物為:ATP (用于生成6-萄糖反應(yīng)生成尿苷二磷酸葡萄糖和焦磷酸)
17、糖原合成與分解的關(guān)鍵酶: 糖原合酶、 糖原磷酸化酶 (不可逆反應(yīng)) 有活性 (去磷酸化的) 沒有活性 (磷酸化的) ; 糖原合酶a糖原合酶:糖原合酶b有活性(磷酸化的)沒有活性(去磷酸化的);磷酸化酶a糖 原磷酸化酶:磷酸化酶 b )(注意:有GTP*糖異生的原料: 乳酸、甘油、生糖氨基酸、GTP ATP 肌糖原及組織中血糖濃度的維持主要靠糖異生作用;短期饑餓時,肝糖原幾乎耗盡,的葡萄糖不能轉(zhuǎn)變?yōu)檠?;長期饑餓時血糖主要來自肌蛋白降解來的氨基酸,其次為甘油。糖異生的四個關(guān)鍵酶: :輔酶為生物素(以生物素為輔基的酶:丙酮酸羧化酶和1. 丙酮酸羧化酶(最關(guān)鍵)CoA是丙酮酸羧化酶的變構(gòu)激活劑。羧化
18、酶),需消耗ATP乙酰乙酰CoA 2.磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 是其變構(gòu)激活劑 -1 : ATP 3. 果糖二磷酸酶 磷酸酶葡萄糖 6- 4. 胞質(zhì)(丙酮酸 被丙酮+糖異生的部位:線粒體(原因:丙酮酸羧化酶僅存于線粒體)需要以蘋果酸或天冬氨酸的形式酸羧基酶催化成草酰乙酸,而草酰乙酸不能透過線粒體膜,逸出線粒體,需要的酶分別是蘋果酸脫氫酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶)3-其途徑為:甘油t甘油的糖異生途徑與其他兩類原料的糖異生途徑前面部分不同,二磷酸果糖(三者共同途徑)1,6-(磷酸甘油(甘油激酶)t磷酸二羥丙酮3-磷酸甘油醛)t CoA、乙酰不能通過線粒體膜的有:草酰乙酸、脂酰CoA 靜息狀態(tài)時,體內(nèi)耗糖量最多的
19、器官是腦;產(chǎn)熱量最多的器官是肝。 糖尿病和饑餓時:促進糖異生、酮體生成增多。Unit 5)和FFA脂肪動員:指儲存在脂肪細胞中的甘油三酯被脂酶逐步水解為游離脂肪酸(. 甘油并釋放入血,通過血液運輸至其他組織氧化利用的過程。脂酸的B氧化過程:第一步:脂酸活化為脂酰 CoA2+部位:線粒體外;所需酶:脂酰CoA 合成酶(條件: ATP、 CoASH、 Mg)1分子脂酸活化消耗 2 個高能磷酸建第二步:脂酰 CoA 經(jīng)肉堿轉(zhuǎn)運進入線粒體這一步是脂酸B氧化的主要限速步驟,肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I是限速酶。 第三步:脂酰CoA在線粒體內(nèi)被氧化成乙酰CoA分脫氫、加水、再脫氫、硫解(分別對應(yīng)四種同名酶)四步連續(xù)反
20、應(yīng)。 參與的化合物: FAD、 NAD+、 CoASH+經(jīng)過一次B氧化,可產(chǎn)生1分子乙酰CoA、1分子FADH 1分子NADH+H比B氧化前少 =2個CoA。生成的乙酰 CoA通過三羧酸碳原子的脂酰 CoA;后者繼續(xù)反應(yīng),直至最終徹底分解為乙酰循環(huán)徹底氧化。含2n個碳原子的脂酸進行B氧化的能量計算:第一次脫氫生成 FADH產(chǎn)生ATP數(shù)量:(n-1 )x 1.52+ 第二次脫氫生成 NADH+HR產(chǎn)生 ATP數(shù)量:(n-1 )x 2.5產(chǎn)生的總能量=(n-1 )x 1.5 +( n-1 )x 2.5 + 10n 2= 14n-6 個 ATP舉例:一分子軟脂酸(C)徹底氧化生成:14X 8 6 =
21、 106 ATP 16一分子硬脂酸(C)徹底氧化生成: 14x 9 6= 120 ATP 18 例題( 1996 年): 1 克軟脂酸(分子量 256)較 1 克葡萄 糖(分子量180)徹底氧化所產(chǎn)生的 ATP高多少倍?1mol 軟脂酸 256g 106 ATP 1mol 葡萄糖 180g32 ATP1g x1g y解得: x/y = 2.33酮體包括:乙酰乙酸、B羥丁酸、丙酮酮體的合成:肝細胞的特有功能(但肝不能利用酮體:缺乏琥珀酰CoA轉(zhuǎn)硫酶)1. 前兩步為合成酮體和膽固醇的共同步驟:第一步:2分子乙酰CoA乙酰乙酰 CoA(乙酰乙酰 CoA硫解酶)第二步:乙酰乙酰 CoL羥甲基戊二酸單酰
22、 CoA ( HMG CoA ( HMG CoA合成酶)注意:乙酰乙酰 CoA是脂酸B氧化、酮體和膽固醇合成的共同中間產(chǎn)物2. 第三步:HMG 8爪乙酰乙酸+乙酰CoA ( HMG CoA裂解酶)其他兩種酮體的生成:乙酰乙酸羥丁酸(B羥丁酸脫氫酶)乙酰乙酸-丙酮(乙酰乙酰脫羧酶)酮體在肝外組織的利用:琥珀酰CoA轉(zhuǎn)硫酶、乙酰乙酰硫激酶、B羥丁酸脫氫酶脂酸的合成:1. 合成部位:胞液2. 合成原料:乙酰 CoA (主要來自葡萄糖)細胞內(nèi)的乙酰 CoA全部在線粒體內(nèi)產(chǎn)生,而合成脂酸的酶系存在于胞液,需要通過檸檬酸 -丙氨酸循環(huán)(可同時為機體合成脂肪酸提供NADPH)將乙酰CoA轉(zhuǎn)運到胞液-2+其他
23、原料:ATP、NADPIH主要來自磷酸戊糖途徑)、HCO(CO) Mn生物素23 3.合成過程:第一步:乙酰 CoA-丙二酰 CoA(乙酰CoA羧化酶)乙酰CoA羧化酶激活劑:檸檬酸、異檸檬酸、乙酰CoACoA羧化酶抑制劑:脂酰 CoA乙酰第二步:脂酸合成:每次加 2 個碳原子,最終生成軟脂酸 軟脂酸碳鏈的延長:在肝細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或線粒體中進行步驟:縮合、加氫、脫水、再加氫(脂酸B氧化的逆過程)甘油三酯的合成:1. 合成部位:肝(合成能力最強-合成的甘油三酯不能形成VLDL分泌入血-脂肪肝)、脂肪組織及小腸2. 原料:脂酸、甘油3. 合成過程: ( 1 )甘油一酯途徑:小腸黏膜細胞( 2)甘油二
24、酯途徑:肝細胞和脂肪細胞3- 磷酸甘油(主要由糖代謝提供;肝腎等組織含有甘油激酶,能利用游離甘油,使之生成3-磷酸甘油,而脂肪細胞缺乏甘油激酶因而不能利用甘油合成脂肪)-磷脂酸(脂酰CoA轉(zhuǎn)移酶)-1, 2-甘油二酯(磷脂酸磷酸酶)-甘油三酯(脂酰CoA轉(zhuǎn)移酶)合成前列腺素(PG)、血栓烷(TX)、白三烯(LT)的前體均為花生四烯酸,去脂飲食可造成三 種物質(zhì)的缺乏含膽堿的磷脂有:卵磷脂(磷脂酰膽堿) 、鞘磷脂磷脂合成與膽固醇合成共同的代謝場所是:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(肝、腎、腸)甘油磷脂的合成除需 ATP外,還需CTP參加。甘油磷脂合成基本過程:1. 甘油二酯(1,2-甘油二酯)途徑:腦磷脂(CDP-乙醇胺
25、)、卵磷脂(CDP-膽堿)2. CDP- 甘油二酯途徑:磷脂酰肌醇、心磷脂(磷脂酰甘油)、磷脂酰絲氨酸甘油磷酸的降解:1. 磷脂酶C-甘油二酯(特征)2. 磷脂酶D-磷酸甘油+含氮堿3. 磷脂酶A-溶血磷脂2-磷脂酶B-甘油磷酸膽堿 21 4.磷脂酶A-溶血磷脂1-磷脂酶B-甘油磷酸膽堿12溶血卵磷脂還可在血漿卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)催化下,由HDL表面卵磷脂的 2位脂?;D(zhuǎn)移至膽固醇 3 位羥基生成。 (7版教材 155 頁)膽固醇的合成:1. 合成部位:細胞胞液及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)+ 2. 原料:乙酰 CoA、 ATP、 NADPH+(H 主要來自磷酸戊糖途徑)3. 關(guān)鍵酶:HMG CoA
26、還原酶膽固醇的去路:1. 在肝細胞中轉(zhuǎn)化成膽汁酸(主要去路)2. 轉(zhuǎn)化為類固醇激素:3種性激素(睪酮、雌二醇、孕酮)、皮質(zhì)醇、醛固酮、VitD 3血漿脂蛋白(CM VLDL、LDL、HDL)比較:1. CM的密度最低,HDL密度最高;2. 密度與蛋白質(zhì)含量成正比,與脂類含量成反比(推論:CM含甘油三酯最多,HDL含蛋白質(zhì)最多);3. LDL 含膽固醇及其酯最多;其余三種密度越大含量越多各種血漿脂蛋白的功能:1. CM :外源性甘油三酯及膽固醇的主要運輸形式2. VLDL :運輸內(nèi)源性甘油三酯的主要形式3丄DL :轉(zhuǎn)運內(nèi)源性膽固醇的主要形式( LDL主要由VLDL在人血漿中轉(zhuǎn)變而來,故不是還有轉(zhuǎn)
27、運磷脂酰膽堿的LDL;另外,的主要器官)LDL肝在脂類代謝中的特有作用;肝是降解.作用(當血漿中的LDL與LDL受體結(jié)合后,受體聚集成簇,內(nèi)吞入細胞與溶酶體融合,其所含的磷脂酰膽堿伴隨而入,相當于起到了轉(zhuǎn)運磷脂酰膽堿的作用)。4. HDL :參與膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(HDL有助于防止動脈粥樣硬化)脂酰CoA膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT):使游離膽固醇酯化成膽固醇酯在胞液中儲存卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT):卵磷脂-溶血卵磷脂LCAT由肝實質(zhì)細胞合成,分泌入血,在血漿中發(fā)揮作用(推論:肝細胞受損時,合成LCAT的能力降低,血中LCAT活性降低;其他酶如LDH ACAT ALT、AST等正常情況下血
28、中酶活性很低, 當肝細胞受損時這些酶被大量釋放入血,酶活性增高)。Unit 6遞氫體同時也是遞電子體,但遞電子體則只能傳遞電子而不能起遞氫作用。硫鐵蛋白是氧化呼吸鏈的組成部分。泛醌和FMN類似,可以同時傳遞氫和電子。細胞色素( Cyt )是一類含血紅素樣輔基(以鐵卟啉為輔基)的電子傳遞蛋白,其排列順序為Cyt b f Cyt c f Cyt c f Cyt aa 31 Cyt c 是氧化呼吸鏈為一水溶性球狀蛋白,與線粒體內(nèi)膜外表面疏松結(jié)合, 不包含在呼吸鏈復(fù)合體中。Cyt c可將從Cyt c獲得的電子傳遞到復(fù)合體W(又稱細胞色素c氧化酶)。i呼吸鏈的排列順序是按照標準氧化還原電位由低到高的順序
29、排列的。氧化呼吸鏈的兩條途徑及經(jīng)該鏈傳遞的物質(zhì):1. NADH氧化呼吸鏈:丙酮酸、a -酮戊二酸、蘋果酸、B -羥丁酸、谷氨酸、異檸檬酸(推論:全都帶“酸” ,不帶“酸”的可以排出);P/O =2.52. FADH 氧化呼吸鏈(琥珀酸氧化呼吸鏈) :琥珀酸、脂酰 CoA、a - 磷酸甘油; P/O =1.5 2 抗壞血酸底物直接通過 Cyt c 傳遞 ; P/O =1三類氧化磷酸化抑制劑:1. 呼吸鏈抑制劑:可阻斷復(fù)合體I的:魚藤酮、粉蝶霉素、異戊巴比妥可阻斷復(fù)合體H的:萎銹靈可阻斷復(fù)合體皿的:抗霉素A、粘噻唑菌醇-3-可阻斷復(fù)合體W的:CN( CN中毒抑制Cyt aa)、N、C0( CO能抑
30、制電子傳遞體細 3胞色素C氧化酶,使電子不能傳遞給氧,造成氧化受阻,則偶聯(lián)的磷酸化也無法進行,以至呼吸鏈功能喪失)2. 解偶聯(lián)劑:二硝基苯酚解偶聯(lián)f ADP磷酸化停止,但氧利用繼續(xù)3. ATP合酶抑制劑:對電子傳遞及ADP磷酸化均有抑制作用,如寡霉素正常機體氧化磷酸化速率主要受ADP調(diào)節(jié),ADP濃度升高則氧化磷酸化加速。屬于高能化合物的有: 磷酸烯醇式丙酮酸、 氨基甲酰磷酸、 1,3- 二磷酸甘油酸、 磷酸肌酸、 ATP、 乙酰CoA ADP焦磷酸、1-磷酸葡萄糖(要么以“酸”結(jié)尾,要么以字母結(jié)尾;唯一的一個是 “糖”于是開頭為 1 )胞質(zhì)中NADH通過穿梭機制進入線粒體氧化呼吸鏈:1. a
31、-磷酸甘油穿梭:主要存在于腦和骨骼肌中, P/O=1.5+ 2.蘋果酸-天冬氨酸穿梭:主要存在于肝和心肌,P/O=2.5,其意義是:將胞液中NADH+H勺2H帶入線粒體內(nèi)人微粒體細胞色素 P 單加氧酶參與生物轉(zhuǎn)化過程,不伴磷酸化,也不生成ATP。 450 Unit 7。酮戊二酸(三羧酸循環(huán))-a 體內(nèi)最廣泛存在、活性最高的轉(zhuǎn)氨酶是將氨基轉(zhuǎn)移給.聯(lián)合脫氨基作用:氨基酸+a-酮戊二酸fa -酮酸+谷氨酸(轉(zhuǎn)氨酶)谷氨酸fa -酮戊二酸+ NH( L-谷氨酸脫氫酶)3轉(zhuǎn)氨酶與L-谷氨酸脫氫 酶協(xié)同作用f把氨基酸轉(zhuǎn)變成NH及相應(yīng)a -酮酸3在心肌和骨骼肌中, 氨基酸主要通過嘌吟核苷酸循環(huán)脫去氨基。氨在
32、血液中主要以丙氨酸和谷氨酰胺兩種形式轉(zhuǎn)運。 肌肉中的氨以無毒的丙氨酸形式(丙氨酸 -葡萄糖循環(huán))運往肝,同時,肝又為肌肉提供了生 成丙氨酸的葡萄糖;腦中氨的主要去路是合成谷氨酰胺(谷氨酰胺合成酶),并由血液運往肝或腎,再經(jīng)谷氨酰胺酶水解成谷氨酸及氨。因此,谷氨酰胺既是氨的解毒產(chǎn)物,又是氨的儲存及運輸形式。谷氨酰胺的代謝去路:參與嘌呤、嘧啶核苷酸合成、糖異生、氧化供能 體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝的最終產(chǎn)物是尿素(合成尿素是肝的特有功能,就像合成酮體),只有少部分氨在腎以銨鹽形式隨尿排出。鳥苷酸循環(huán):1. 部位:線粒體、胞液2. 關(guān)鍵酶:氨基甲酰磷酸合成酶I、精氨酸代琥珀酸合成酶3. 基本步驟:(1) N
33、H+ CO+ HO 2ATi氨基甲酰磷酸+ 2ADN Pi (關(guān)鍵步驟1)逸(2)鳥氨酸+氨基甲酰磷酸-瓜氨酸(鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶)(3)瓜氨酸+天冬氨酸-精氨酸代琥珀酸(關(guān)鍵步驟2)( 4)精氨酸代琥珀酸-精氨酸延胡索酸(精氨酸代琥珀酸裂解酶)( 5)精氨酸-尿素鳥氨酸(精氨酸酶)延胡索酸-蘋果酸-草酰乙酸(三羧酸循環(huán)步驟)-天冬氨酸(轉(zhuǎn)氨基)尿素中的兩個氮原子分別來源于:NH和天冬氨酸3個別氨基酸的代謝:1. 谷氨酸脫羧基-丫 -氨基丁酸(GABA2. 色氨酸-5-羥色胺;一碳單位;丙酮酸和乙酰乙酰CoA煙酸(尼克酸)3. 鳥氨酸-腐胺-精脒和精胺4. 一碳單位:四氫葉酸是一碳單位的運載
34、體一碳單位主要來自絲氨酸( Ser)、甘氨酸(Gly )、組氨酸(His )和色氨酸(Trp )的分解代 謝;另外,蛋氨酸(Met)經(jīng)活化轉(zhuǎn)變?yōu)?S腺苷蛋氨酸,也可提供一碳單位;S腺苷蛋氨酸是體內(nèi)最重要的甲基直接供體。一碳單位的主要功能是參與嘌呤、嘧啶的合成。5. 由甲硫氨酸轉(zhuǎn)甲基作用生成的生理活性物質(zhì)有:腎上腺素、肉堿、膽堿和肌酸6. 肌酸以甘氨酸為骨架,由精氨酸提供脒基, S 腺苷甲硫氨酸提供甲基而合成,肝是合成肌酸 的主要器官。肌酸+ ATP-磷酸肌酸+ ADP(肌酸激酶)甘氨酸參與的代謝過程有:肌酸的合成、嘌呤核苷酸的合成、血紅素的合成7. 半胱氨酸-?;撬?. 苯丙氨酸 羥化 -酪氨
35、酸(不可逆) ;苯丙氨酸-苯丙酮酸(少量) 先天性苯丙氨酸羥化酶缺陷者體內(nèi)產(chǎn)生大量苯丙酮酸并經(jīng)尿排出苯丙酮尿癥9. 酪氨酸 羥化 -多巴-多巴胺、 去甲腎上腺素 、腎上腺素(統(tǒng)稱兒茶酚胺) 酪氨酸-多巴(酪氨酸酶)-黑色素 先天性酪氨酸酶缺乏白化病 酪氨酸-對 -羥苯丙酮酸(酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶) -尿黑酸-延胡索酸、乙酰乙酸(酮體)分解尿黑酸的酶先天性缺陷尿黑酸尿癥 10. 支鏈氨基酸:纈氨酸(Vai)、亮氨酸(Leu)、異亮氨酸(Ile )都屬于必需氨基酸,其分解 代謝主要在骨骼肌進行。Unit 8嘌吟的合成原料:甘氨酸( Gly )、谷氨酰胺、天冬氨酸(Asp)、CO甲?;‵H) 42嘧啶的
36、合成原料:谷氨酰胺、天冬氨酸( Asp)、CO2直接聯(lián)系核苷酸合成與糖代謝的物質(zhì)是:5-磷酸核糖(磷酸戊糖途徑中產(chǎn)生)嘌吟核苷酸的從頭合成分兩個階段:合成次黃嘌吟核苷酸(IMP) - AMP和GMP1.IMP 的合成:5-磷酸核糖-磷酸核糖焦磷酸(PRPP磷酸核糖焦磷酸合成酶)- 5-磷酸核糖胺(PRA磷酸核糖酰胺轉(zhuǎn)移酶)-IMP;2.IMP -AMP-ADP-ATP; IMP-GMP-GDP-GTP補救合成:腺嘌吟 AMP次黃嘌吟IMP;鳥嘌吟GMP脫氧核苷酸的生成基本是在二磷酸核苷(NDP水平上進行的,即NDdNDP(核糖核苷酸還原酶);dTMP由dUMP甲基化而生成。嘌呤核苷酸的抗代謝物
37、:1.6-巰基嘌吟(6MF):結(jié)構(gòu)與次黃嘌吟相似,其作用為:(1)抑制IMP轉(zhuǎn)變?yōu)锳MF和GMP(即從頭合成途徑的第二階段)(2)抑制PRA的生成以及次黃嘌吟-IMP2. 氮雜絲氨酸:結(jié)構(gòu)與谷氨酰胺相似,可抑制PRA的生成、IMP- GMP等3. 甲氨蝶吟(MTX:葉酸的類似物,可抑制二氫葉酸還原酶(造成一碳單位缺乏) 嘌吟核苷酸的分解代謝終產(chǎn)物是尿酸。進食高嘌吟飲食、分解代謝f(如白血病、惡性腫瘤) 或腎疾病均可導(dǎo)致血中尿酸升高。 臨床上常用別嘌呤醇治療痛風癥。 別嘌呤醇與次黃嘌呤結(jié)構(gòu)類 似,可抑制黃嘌吟氧化酶(黃嘌吟X-尿酸)從而抑制尿酸的生成。嘧啶的合成開始于氨基甲酰磷酸,由氨基甲酰磷酸
38、合成酶H催化(細胞液中);尿素合成中所需的氨基甲酰磷酸由氨基甲酰磷酸合成酶I催化(線粒體中)。嘧啶核苷酸的合成步驟:1. 尿嘧啶核苷酸(UMP的合成2. UMP -UDP-UTP-CTP-CDP-dCDP; UMP-UDP-dUDP-dUMP-TMP( dTMP) 補救合成:嘧啶-磷酸嘧啶核苷(嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,對胞嘧啶不起作用) 嘧啶核苷酸的抗代謝物:1.5- 氟尿嘧啶(5-FU):結(jié)構(gòu)與胸腺嘧啶相似,在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)镕dUMF和FUTR FdUMP與 dUMP結(jié)構(gòu)類似,可阻斷 dTMP的合成2. 氮雜絲氨酸:可抑制 CTP的生成3. 甲氨蝶吟:抑制 dTMP的生成4. 阿糖胞苷:抑制dCDP
39、的生成Unit 9體內(nèi)的直接功能物質(zhì)為: ATP三大營養(yǎng)物質(zhì)代謝的交叉點是:乙酰 CoA(三)基因信息的傳遞Unit 10 DNA半保留復(fù)制:將一個完全被放射性標記的DNA分子放于無放射性標記的環(huán)境中復(fù)制三代后,所產(chǎn)生的全部 DNA分子中,無放射性標記的有:6個。 DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄互補結(jié)構(gòu)或反密碼子的推斷:反向(右左)讀取,正向書寫 岡崎片斷:復(fù)制中的不連續(xù)片斷參與DNA復(fù)制的物質(zhì):1. 底物(原料) : dNTP2. 聚合酶:依賴 DNA的DNA聚合酶(DNA-pol或DDDP母鏈DNA莫板:解開成單鏈的3.4. 引物:提供3'-0H的短鏈RNA分子(由引物酶催化合成)5. 其他酶和
40、蛋白質(zhì)因子:包括拓撲異構(gòu)酶、連接酶、SSB(穩(wěn)定已解開的單鏈)、。"8蛋白(?!?人- 辨認起始點;DnaB-解螺旋酶;DnaC-運送和協(xié)同DnaB; DnaG-引物酶)原核生物的3種DNA聚合酶:DNA-pol皿是原核生物復(fù)制延長中真正起催化作用的酶;3 種 DNA-pol 都具有 5' 3' 聚合活性及 3' 5' 核酸外切酶活性;只有DNA-pol I具有5' 3'外切酶活性原核生物的DNA生物合成:1. 復(fù)制起始:參與的酶有拓撲異構(gòu)酶、Dna蛋白和SSB2. 復(fù)制過程中具有催化 3',5'-磷酸二酯鍵生成的酶有:
41、引物酶、DNA聚合酶、拓撲異構(gòu)酶、DNA連接酶3. 拓撲異構(gòu)酶的作用:解開 DNA超螺旋;切斷單鏈 DNA連接3',5'-磷酸二酯鍵4. 復(fù)制的終止過程包括去除 RNA引物和換成DNA最后把DNA片段連接成完整的子鏈(片斷連 接時由ATP供能);需要的酶:RNA酶、DNA-pol I、連接酶 真核生物是以復(fù)制子為單位各自進行復(fù)制的,所以引物和隨從鏈的岡崎片段都比原核生物短;真核生物DNA合成,就酶的催化速率而言,遠比原核生物慢,但真核生物是多復(fù)制子復(fù)制,因而總體速度是不慢的。含有RNA的酶有:核酶、端粒酶端粒酶:由RNA和蛋白質(zhì)組成,兼有提供RNA模板和催化逆轉(zhuǎn)錄的功能(逆轉(zhuǎn)錄
42、酶)。逆轉(zhuǎn)錄酶:以RNA為模板合成雙鏈 DNA( cDNA)的酶,全稱是依賴 RNA的 DNA聚合酶(RDDP ; 逆轉(zhuǎn)錄酶有三種活性:RNA或 DNA作模板的dNTP聚合活性和 RNase活性(RNA水解酶活性);逆轉(zhuǎn)錄酶沒有3' -5'核酸外切酶活性,因而無校對功能,錯誤率高;逆轉(zhuǎn)錄也需要引物,該引物 現(xiàn)認為是病毒本身的一種tRNA。紫外線誘發(fā)DNA突變的機制是:生成嘧啶二聚體突變的DNA分子改變可分為錯配、缺失、插入和重排。錯配又稱點突變,可導(dǎo)致單個氨基酸置 換;缺失或插入都可導(dǎo)致框移突變,后果是翻譯出的蛋白質(zhì)可能完全不同。 DNA損傷的修復(fù)主要有錯配修復(fù)、直接修復(fù)、切除
43、修復(fù)、重組修復(fù)和SOS修復(fù)。核苷酸切除修復(fù)是細胞內(nèi)最重要和有效的修復(fù)方式,其過程包括去除損傷的DNA填補空隙和連接。后兩步與復(fù)制去除DNA引物的填補和連接相似,需要的酶有:DNA連接酶、DNA-pol I、AP內(nèi)切核酸酶(UvrA、UvrB是辨認及結(jié)合 DNA損傷部位的蛋白質(zhì);UvrC有切除作用,可能還需要有解螺旋酶)Unit 11 mRNArRNA和tRNA主要參與蛋白質(zhì)的合成;真核細胞內(nèi)核小 RN( snRNA和微小 RN( miRNA)分別與mRNA勺剪切和基因表達調(diào)控有關(guān)。轉(zhuǎn)錄中的堿基配對原則:A-U、T-A、G-C原核生物的依賴 DNA的RNA聚合酶(RNA-pol )的全酶由a、B
44、、B '、b四種亞基組2成,其 中aBB '合稱為核心酶,需要參與整個轉(zhuǎn)錄過程,而b亞基僅參與轉(zhuǎn)錄起始階段。各2個亞基的功能:a亞基:決定哪些基因被轉(zhuǎn)錄B亞基:與轉(zhuǎn)錄全過程有關(guān)(催化)B '亞基:結(jié)合 DNA模板(開鏈)b亞基:辨認起始點原核生物轉(zhuǎn)錄終止分為依賴卩(Rho)因子與非依賴p因子兩大類。的生物合成產(chǎn)物為單順反子;原核生物:多順反子。RNA真核生物.真核生物的 3 種 RNA-pol 的功能:1. RNA-pol I: rRNA 的前體(45S-rRNA) 28S、5.8S、18S-rRNA2. RNA-pol H (最活躍):hnRNA- mRNA(成熟過程
45、需進行甲基化修飾)3. RNA-pol 皿:tRNA、5S-rRNA、小 RNA分子轉(zhuǎn)錄起始點上游多數(shù)有共同的TATA序列,成為Hog nest盒或TATA盒,通常認為這就是啟動子的核心序列。參與 RNA-pol H轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子( TF)H及功能:TF n D (包括 TBP和TAF):結(jié)合TATA盒(辨認起始點)TF n A:穩(wěn)定 TFn D-DNA復(fù)合物TF n B:促進 RNA-pol n 結(jié)合TF n F:解螺旋酶TF n E: ATPaseTF n H:蛋白激酶活性外顯子:在斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上岀現(xiàn),并表達為成熟 RNA的核酸序列(即被轉(zhuǎn)錄也被翻譯的序列) ;內(nèi)含子;隔斷基因
46、的線性表達而在剪接過程中被除去的核酸序列。Unit 12起始密碼子:AUG(編碼甲硫氨酸)終止密碼子:UAA UAG UGA(不編碼任何氨基酸-遺傳密碼不只代表氨基酸)羥脯氨酸、羥賴氨酸沒有遺傳密碼遺傳密碼的簡并性: 一種氨基酸可具有兩個或兩個以上的密碼子為其編碼 (甲硫氨酸、 色氨酸 除外);遺傳密碼的特異性主要由頭兩位核苷酸決定通用性:遺傳密碼適用于生物界的所有物種擺動性: 反密碼子與密碼子之間的配對并不嚴格遵守堿基配對規(guī)律, 如反密碼子第 1 位為此黃嘌吟核苷酸(I ),則可與密碼子第 3位的A、U或C配對;第一位的 U可與A或G配對;第一位 的 G 可與 C 或 U 配對(特殊配對:
47、U-G)核糖體(核蛋白體,由rRNA和蛋白質(zhì)組成)是蛋白質(zhì)生物合成的場所。核糖體的rRNA組成:原核生物:小亞基 16S-rRNA;大亞基 23S-rRNA、5S-rRNA真核生物:小亞基 18S-rRNA;大亞基 28S-rRNA、5.8S-rRNA、5S-rRNA 蛋白質(zhì)生物合成的能源物質(zhì)為 參與的其他重要過程:糖異生氨基酸的活化形式為:氨基酰 原核生物翻譯的起始因子(ATP (氨基酸的活化過程)和 GTP(肽鏈的生物合成過程)GTP-tRNAIF , initiate): IF-1 、 IF-2 、 IF-3延長因子( EF, elongate ): EF-T、 EF-GRF-3、 eI
48、F-3 、 eIF-4 、 eIF-5 、 eIF-6釋放因子( RF, release ): RF-1 、 RF-2、 真核生物翻譯的起始因子: eIF-1 、 eIF-2延長因子: eEF-1 、 eEF-2釋放因子: eRF蛋白質(zhì)生物合成的干擾和抑制: 四環(huán)素:作用于小亞基,抑制氨基酰 -tRNA 與小亞基結(jié)合 鏈霉素:作用于小亞基,改變構(gòu)象引起讀碼錯誤、抑制起始 氯霉素:作用于大亞基,抑制轉(zhuǎn)肽酶、阻斷肽鏈延長 嘌呤霉素:作用于原核、真核核糖體失活 eEF-2 白喉毒素:主要抑制哺乳動物蛋白質(zhì)合成,使干擾素(IFN):使elF-2磷酸化而失活,抑制病毒蛋白質(zhì)的合成Unit 13并非所有基
49、因表達過程都產(chǎn)生蛋白質(zhì),轉(zhuǎn)錄過程也屬于基因表達。(即基因表達并非均經(jīng)歷基因轉(zhuǎn)錄及翻譯過程)管家基因:生物個體中在幾乎所有細胞中持續(xù)表達的基因 操縱子的基因表達調(diào)節(jié)系統(tǒng)屬于轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)。乳糖操縱子:構(gòu)成:3個結(jié)構(gòu)基因(Z、丫、A分別編碼B -半乳糖苷酶、透酶、乙酰基轉(zhuǎn)移酶)+操縱序列0+啟動序列P+調(diào)節(jié)基因I + CAP結(jié)合位點I 基因編碼阻遏蛋白,后者與0序列結(jié)合,使操縱子受阻遏處于關(guān)閉狀態(tài)。P序列能與RNA聚合酶結(jié)合。分解(代謝)物激活蛋白在DNA的結(jié)合部位是:CAP結(jié)合位點P序列、O序列和CAP結(jié)合位點共同構(gòu)成乳糖操縱子的調(diào)控區(qū)。真核基因順式作用元件分為:啟動子、增強子及沉默子啟動子是指
50、RNA聚合酶最初與 DNA結(jié)合的那段DNA序列,最具典型意義的是TATA盒。Unit 14重組DNA技術(shù)中常用的工具酶:1. 限制性核酸內(nèi)切酶:存在于細菌體內(nèi),可識別特異序列,切割DNA(“剪刀”);切割點附近的堿基順序通常為回文結(jié)構(gòu)2. DNA連接酶:將目的基因與載體DNA拼接(“針線”)3. DNA-pol I4. Klenow 片段:用于cDNA第二鏈合成、雙鏈 DNA3'-末端標記等5. 反轉(zhuǎn)錄酶:合成 cDNA替代DNA-pol I進行填補、標記或 DNA序列分析質(zhì)粒:存在于細菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子,能夠自主復(fù)制, 可攜帶抗藥性基因, 可含有克隆位點。目的基因的獲
51、取途徑:1.化學合成;2.基因組DNA文庫篩選;3.CDNA文庫在體外利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNAi補的DNA4. 聚合酶鏈反應(yīng)( PCR)(四)生化專題Unit 152+ 常見的第二信使: cAMP cGMR DAG IP、Ca、NO等 3腺苷酸環(huán)化酶(A。直接影響細胞內(nèi) CAMP的含量,磷酸二酯酶(RDE促進cAMP的水解;cAMP作用于cAMP依賴性蛋白激酶,即蛋白 激酶 A( PKA)鳥苷酸結(jié)合蛋白 (G蛋白)有a、B、丫三種亞基,具有GTP酶活性,可將GTP水解成GDP(可 被霍亂病毒抑制,使 G蛋白處于持久激活狀態(tài))。膜受體通過 G蛋白與腺苷酸環(huán)化酶偶聯(lián)。 通過胞內(nèi)受體發(fā)揮作用的激素
52、有:類固醇激素、甲狀腺激素、維A 酸、維生素 D AC-cAMP-PKA通路:腎上腺素、胰高血糖素、促腎上腺皮質(zhì)激素與細胞生長、增殖和分化有關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑主要有:Ras-MAPK途徑(表皮生長因子受體信號的主要通路)、JAK-STAT途徑(轉(zhuǎn)導(dǎo)白細胞介素受體信號)Unit 16血漿清蛋白: 人體血漿中含量最多的蛋白質(zhì); 肝臟合成最多的蛋白質(zhì); 不屬于糖蛋白的血漿蛋 白質(zhì);對血漿膠體總滲透壓貢獻最大。2+、膽紅素、磺胺等 Ca血漿清蛋白運輸:脂肪酸、. 通常血清中酶活性升高的主要原因是:細胞受損使細胞內(nèi)酶釋放入血 紅細胞的糖代謝:主要經(jīng)糖酵解通路和2,3- 二磷酸甘油酸旁路進行代謝,少部分通過
53、磷酸戊糖途徑進行代謝。1,3- 二磷酸甘油酸是高能磷酸化合物;2,3- 二磷酸甘油酸不是高能磷酸化合物。2,3- 二磷酸甘油酸在紅細胞內(nèi)含量高,由1,3- 二磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變生成,經(jīng)水解脫去磷酸后生成3-磷酸甘油酸。2,3-二磷酸甘油酸是紅細胞的能量儲存形式,也是調(diào)節(jié)血紅蛋白(Hb)運氧能力的重要因素,能降低血紅蛋白與0的親和力。2血紅蛋白由珠蛋白和血紅素組成,是體內(nèi)主要的含鐵蛋白質(zhì),在血液運輸0和CO中起22重要作用。血紅素不但是Hb的輔基,也是肌紅蛋白、細胞色素、過氧化物酶等的輔基。2+ 合成血紅素的基本原料:甘氨酸、琥珀酰CoA和Fe合成場所:線粒體(起始和終末過程) 、胞質(zhì)(中間階段)關(guān)
54、鍵酶:ALA合酶,磷酸吡哆醛是該酶的輔基(維生素B6缺乏將影響血紅素的合成),受血紅素的反饋抑制,可能屬于別構(gòu)抑制。Unit 17肝在脂類代謝中的特有作用有:合成并分泌膽汁酸;產(chǎn)生酮體;合成與分泌卵磷脂-膽固醇脂?;D(zhuǎn)移酶(LCAT);合成VLDL等除丫 -球蛋白(來源于漿細胞)外,幾乎所有的血漿蛋白均來自于肝;人血漿內(nèi)的免疫球蛋白 大多存在于丫 -球蛋白,故肝功能不良時,免疫球蛋白的合成受影響較小。血漿清蛋白的功能:非特異性運輸載體;維持血漿膠體滲透壓 肝是體內(nèi)除支鏈氨基酸(主要在肌肉組織中代謝)以外的所有氨基酸分解和轉(zhuǎn)變的重要場所。 肝是清除血氨的主要器官, 通過尿苷酸循環(huán)合成無毒的尿素。
55、 肝昏迷時, 患者血液中芳香族氨基 酸f、血NH指標f、尿素J。3 膽紅素主要來源于衰老紅細胞的破壞,以膽紅素-清蛋白復(fù)合體的形式存在和運輸, 在肝細胞中轉(zhuǎn)變?yōu)榻Y(jié)合膽紅素并泌入膽小管。 狗切除肝后, 在死亡前可觀 察到:血氨f、血清游離膽紅素f、血漿蛋白J。凝血因子大部分由肝合成,因此嚴重肝細胞損傷時,可出現(xiàn)凝血時間延長及出血傾向。 肝是機體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化最重要的器官, 最常見部位在肝臟的微粒體, 小部分在胞液。 生物轉(zhuǎn)化最 重要的意義在于使非營養(yǎng)物質(zhì)極性增加,利于排泄(具有解毒與致毒的雙重性特點)。肝的生物轉(zhuǎn)化可分為兩相反應(yīng)。第一相反應(yīng)包括氧化、 還原和水解, 其中以微粒體依賴的加單氧酶系(參 與體內(nèi)維生素 D、膽汁酸、類固醇激素等物質(zhì)的羥化過程)最重要。第3二相反應(yīng)以葡糖醛酸結(jié)合反應(yīng)最普遍。第二相反
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