DNA的提取和分離

1、小條訓(xùn)練1#課題1DNA的粗提取與鑒定.DNA在物質(zhì)的量濃度為 0.14 moI/L的NaCI溶液中溶解度最低。.DNA不溶于酒精，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可利用 酒精將DNA和蛋白質(zhì)分開。.DNA對蛋白酶、高溫和洗滌劑有耐受性。.在加熱條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。.哺乳動物成熟的紅細(xì)胞不含細(xì)胞核，不能作為提取DNA的實(shí)驗(yàn)材料。若選取肝臟細(xì)胞或植物細(xì)胞，則必須充分研磨。.實(shí)驗(yàn)中加入檸檬酸鈉的作用：作為抗凝劑，防止血液凝固。1根據(jù)教材P54圖5-1 “DNA在NaCI溶液中的溶解度曲線”，思考下列問題:(1)描述DNA在NaCI溶液中溶解度的變化情況。(2) 如何通過控制 NaC

2、I溶液的濃度使 DNA在鹽溶液中溶解或析出?2. 可否選用哺乳動物成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料？為什么？3提取洋蔥的 DNA時，需在切碎的洋蔥中加入一定量的洗滌劑和食鹽，并進(jìn)行充分的攪拌和研磨。請思考F列問題：(1) 加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？(2) 如果研磨不充分，會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響？3提純時，為什么要選用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精？1. 下列關(guān)于“ DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯誤的是()A .酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B. DNA既溶于2 moI/L NaCI溶液也溶于蒸餾水C 向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢瑁梢姴０羯嫌邪咨鯛钗顳 . DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加

3、熱，冷卻后變藍(lán)小條訓(xùn)練2. 關(guān)于“ DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)，該實(shí)驗(yàn)依據(jù)的實(shí)驗(yàn)原理不是()A . DNA在NaCI溶液中的溶解度，隨著 NaCI溶液濃度的不同而不同B.利用DNA不溶于酒精的性質(zhì)，可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNAC . DNA是大分子有機(jī)物，不溶于水而溶于某些有機(jī)溶劑D .在沸水中DNA遇二苯胺會出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)3. 某生物興趣小組開展 DNA粗提取的相關(guān)探究活動，具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20 C,另一組置于20 C條件下保存24 hoDNA粗提取：第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入 15

4、 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注入 10 mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃 棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的 2 moI/L NaCI溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測：在上述試管中各加入 4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表：材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20 C+ + + +20 C+ + + + + + +注：“+”越多表示藍(lán)色越深。分析上述實(shí)驗(yàn)過程，回答下列問題：(1) 該探究性實(shí)驗(yàn)的課題名稱是 o(

5、2) 第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少 o(3) 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。 結(jié)論1:與20 C相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在20 C條件下保存，DNA的提取量較多。結(jié)論2: o 針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼慕忉專郝确旅芏却笥谒?，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高 DNA 純度，依據(jù)氯仿的特性，在 DNA 粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：然后用體積分?jǐn)?shù)為 95%的冷酒精溶液使 DNA析出。小條訓(xùn)練根據(jù)教材P54圖5-1 “DNA在NaCI溶液中的溶解度曲線”，思考下列問題：(1) 描述DNA在NaCI溶液中溶解度的變化情況。提示：在物質(zhì)的量濃度為 0.

6、14 mol/L的NaCI溶液中，DNA的溶解度最小。在NaCI溶液濃度低于 0.14 mol/ L 時，DNA的溶解度隨NaCI溶液濃度的增加而逐漸降低；當(dāng) NaCI溶液濃度繼續(xù)增加時，DNA的溶解度又逐漸增大。(2) 如何通過控制 NaCI溶液的濃度使 DNA在鹽溶液中溶解或析出？提示：用物質(zhì)的量濃度高于或低于0.14 moI/L的NaCI溶液可溶解 DNA，用物質(zhì)的量濃度為 0.14 mol/ L的NaCI溶液可析出DNA。2.可否選用哺乳動物成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料？為什么？提示：不可以。因?yàn)椴溉閯游锍墒旒t細(xì)胞無細(xì)胞核。3提取洋蔥的 DNA時，需在切碎的洋蔥中加入一定量的洗滌劑和食鹽，并進(jìn)行充分的攪拌和研磨。請思考 下列問題：(1) 加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？提示：洗滌劑能溶解細(xì)胞膜，釋放出DNA ;食鹽有利于 DNA的溶解。(2) 如果研磨不充分，會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響？提示：提取的DNA量少，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物，用二苯胺試劑鑒定結(jié)果不明顯等。3提純時，為什么要選用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精？提示：冷酒精提純效果更好。C C3答案(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的