抗氧化活性測定方法的比較

1、抗氧化活性測定方法的比較人體衰老和多種疾病均與自由基有關(guān)，尋找天然抗氧化劑具有重要意義。黃酮、多糖、多肽、酚類等生物活性成分均具有抗氧化活性，抗氧化活性的篩選方法可分為體外和體內(nèi) 2 種測試體系。體外：抗氧化活性可以用在特定條件下，樣品對檢測體系中自由基的清除能力、抗油脂過氧化能力及樣品的還原能力、總抗氧化能力等來衡量和表征。常用的方法有羥基自由基（·OH ）清除能力法、 1,1-二苯基苦基苯肼 （ DPPH 法）、 2,2- 聯(lián)氮基 - 雙 -(3- 乙基苯并噻唑啉 -6- 磺酸 ) 二氨鹽（ ABTS法）、超氧陰離子自由基法（O2- ·）、鄰苯三酚自氧化法、-胡蘿卜素漂

2、白法、硫代巴比妥酸法、鐵離子還原能力測定（FRAP 法）、總酚測定法、 ORAC 法等方法。體內(nèi)：主要有DNA 氧化損傷法、蛋白質(zhì)氧化損傷法、線粒體氧化損傷法。其中 DPPH 法和 ABTS 法操作較簡單便捷，不需要特殊的檢測設(shè)備，只在需固定時間下記下其紫外分光光度測量值后計算其自由基清除率，缺點(diǎn)是不同物質(zhì)具有組成和結(jié)構(gòu)的差異，與DPPH ·、 ABTS+ ·的反應(yīng)速率不同，反應(yīng)到達(dá)平衡的時間不同，將反應(yīng)時間固定在某一值時，可能對抗氧化劑的抗氧化性評價帶來錯誤的判斷，且DPPH 自由基會和其他自由基發(fā)生反應(yīng)。鄰苯三酚自氧化法缺點(diǎn)是檢測波長、緩沖液的組成及值、鄰苯三酚濃度等關(guān)

3、鍵測定條件存在供參考著較大差異。-胡蘿卜素漂白法的缺點(diǎn)是-胡蘿卜素本身有抗氧化活性，對樣品活性的測定結(jié)果有影響。FRAP 法主要用于食品業(yè)，優(yōu)點(diǎn)是簡單易操作、可以重復(fù)，缺點(diǎn)是無法測定硫醇化合物的還原能力。ORAC 法是國際上通用的評價食品氧化的標(biāo)準(zhǔn)方法，缺點(diǎn)是儀器成分較復(fù)雜，檢測成本較高。目前普遍使用的體外抗氧化活性指標(biāo)一般都采用分光光度法，使用分光光度計測量各種顏色成分含量的變化。分光光度法操作較簡單、便捷，不需要特殊的檢測設(shè)備，只在需固定時間下記下其紫外 - 可見分光光度測量值后計算其活性大小，具有成本低、效率高、樣品量少等優(yōu)點(diǎn)。分光光度法缺點(diǎn)是會受到樣本自身顏色和渾濁度的影響和限制，顏色深的樣品測得的數(shù)據(jù)誤差大，甚至得到錯誤的結(jié)果；不同物質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)存在差異，與各種自由基的反應(yīng)速率不同，反應(yīng)到達(dá)平衡的時間不同，將反應(yīng)時間固定在某一值時，可能對抗氧化劑的抗氧化性評價 帶來錯誤的判斷。外界環(huán)境因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果也存在一定程度的影響，有些抗氧化活性實(shí)驗(yàn)在冬天低溫時不易成功，測得的數(shù)據(jù)往往沒有規(guī)律。我覺得在測定樣品的抗氧化活性時，各種方法都有自己的優(yōu)缺點(diǎn)，要根據(jù)需測物質(zhì)來決定用什么方法，比如 DPPH 法的自由基選擇性強(qiáng)，不和只有一個羥基的芳香酸、無羥基的類黃酮反應(yīng)，這類物質(zhì)需用其他方法測定。若對檢測結(jié)果供參考要求高的可用ORAC 法，若是做兩個活性物質(zhì)的抗氧化活性的對比可用多種方法