保健食品中人參皂甙高效液相色譜測(cè)定

1、保健食品中人參皂甙高效液相色譜測(cè)定Determination of ginsenosides in health food byhigh-performance liquid chromatography1.適用范圍本方法規(guī)定了人參含片、人參沖劑、人參茶、人參膠囊等以人參為主要原料的保健食品中人參皂甙的含量的HPLC的測(cè)定方法。本方法適用于人參含片、人參沖劑、人參茶、人參膠囊等以人參為主要原料的保健食品中人參皂甙的含量的HPLC的測(cè)定方法。本方法的六種皂甙的最低檢出量為10 mg/kg。本方法的六種皂甙的最佳線性范圍：0.1mg/mL1mg/mL。2.原理將試樣中的人參皂甙溶解、提取，經(jīng)凈化處

2、理后，使用梯度洗脫反相高效液相色譜進(jìn)行分離，紫外檢測(cè)器(UV)檢 測(cè)，根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量，適用于保健食品中人參皂甙 Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd 的同時(shí)定量 分析。3.試劑實(shí)驗(yàn)用水為去離子水。3.1 乙腈：色譜純，200nm 吸光度值為 0.021。3.2 甲醇：分析純。3.3101 大孔吸附樹脂。3.4 高效液相色譜流動(dòng)相：梯度淋洗 A 液為乙腈，B 液為水。3.5 人參皂甙 Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd 標(biāo)準(zhǔn)品：含量大 于 98%( HPLC )。3.6 人參皂甙 Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：配制人參皂甙 Re、Rg1

3、、Rb1、Rc、Rb2、Rd 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，濃度分別為 10mg/mL ;再以此儲(chǔ)備液配制成混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶 液，濃度范圍為 0.1mg/mL1mg/mL ;所有標(biāo)準(zhǔn)溶液均用甲醇配制4. 儀器設(shè)備4.1 高效液相色譜儀：雙高壓輸液泵，附紫外檢測(cè)器。4.2 超聲波清洗器。4.3 離心機(jī)。4.4 水浴鍋。5. 分析步驟5.1 固體試樣處理：取片劑或膠囊內(nèi)容物研成粉末，并過(guò)20目篩；精確稱取該粉末樣適量于 50mL 具塞試管中，加水 50ml 于超聲波清洗器中超聲提取30 分鐘，取出，待溶液恢復(fù)常溫后，準(zhǔn)確取出 10ml，通過(guò) D - 101 大孔吸附樹脂凈化柱（大 孔吸附樹脂使用前先經(jīng)甲醇浸泡，水洗，

4、裝成 10cm 長(zhǎng)小柱），小柱先用 10ml 水沖洗，棄去水液之后，用70%甲醇 25 mL洗脫皂甙，收集甲醇溶液，水浴上蒸干，殘?jiān)约状既芙獠?定容至5mL ,該樣液離心后過(guò) 0.5 卩 m 膜，濾液進(jìn)行色譜分5.2 液體試樣處理：含的液體試樣：取一定量的試樣于水浴上蒸干，殘?jiān)?0mL 水超聲提取 30 分鐘，余下步驟與 5.1 相同。5.3 測(cè)定：5.3.1 液相色譜參考條件531.1 色譜柱：反相 C18柱,4.6 x 250 mm , 5 卩 m5.3.1.2 紫外檢測(cè)器：檢測(cè)波長(zhǎng)203nm5.3.1.3 梯度淋洗條件：時(shí)間流速（分鐘乙腈（）水（）(mL./min)梯度曲線01684

5、1.012018821.065540601.066540601.068016841.01531.4 柱溫：35C532 色譜分析5.3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備將混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液均取 5 卩 L 進(jìn) HPLC 分析，用峰面積 對(duì)濃度作各皂甙的標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線。5.3.2.2 試樣測(cè)定取 5 卩 L 試樣凈化液進(jìn)高效液相色譜分析， 以絕對(duì)保留 時(shí)間定性，用峰面積通過(guò)各皂甙的標(biāo)準(zhǔn)曲線定量計(jì)算試樣中 人參皂甙 Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd 的含量。6. 分析結(jié)果表述6.1 計(jì)算751001.05X5X00試樣中各人參皂甙的含量（g/100g）-6.2 結(jié)果表示：計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字試樣質(zhì)量，g;試樣中總?cè)藚⒃磉暗暮?g/100g )= CRe+ cRg1+CRb1+ CRc+CRb2+CRd式中：CRe(g/100g):試樣中 Re 的含量CRgi(g/100g):試樣中 Rg1 的含量CRbi(g/100g):試樣中 Rb1 的含量CRC(g/100g):試樣