專題一基因工程知識(shí)點(diǎn)填空附答案

1、專題1基因工程(一)基因工程又叫或.原理是,操作水平是 水平.優(yōu)點(diǎn)：;地改造生物的遺傳性狀.(二)基因工程的根本工具1.“分子手術(shù)刀 (1)來源：主要從 中別離純化出來.(2)功能：使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的 斷開(3)特點(diǎn)具有 性.(4)結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNM段末端通常有兩種形式：和.2.“分子縫合針 一(1)兩種DNA1接酶(E - coliDNA連接酶和T,-DNA1接酶)的比擬：相同點(diǎn)：都縫合.區(qū)別：E- coliDNA連接酶只能連接 末端；而T4DNA1接酶能縫合兩種末端, 但連接 平末端的之間的效率較.(2)與DNA聚合酶作用的異同：DNAm合酶只能將 加到已有

2、的脫氧核甘酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵.DNA1接酶是連接的末端,形成磷酸二酯鍵.3. “分子運(yùn)輸營(1)載體具備的條件：能夠穩(wěn)定保存并;有一至多個(gè) 酶切位點(diǎn)含有,便于篩選.對受體細(xì)胞無害.(2)最常用的載體是 ,化學(xué)本質(zhì)是 .(3)其它載體：三基因工程的根本操作程序咳咳第一步：1.從基因文庫中直接獲取.基因文庫包括 和.二者的區(qū)別：文庫大小基因中是否有啟動(dòng) 子基因中是否有內(nèi)含 子基因多少物種間基因 交流cDNA文庫基因組義 庫2.人工合成目的基因.人工合成目的基因的兩個(gè)條件：基因比擬 ;核甘酸序列 3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因.(1) PC幅的縮寫,原理O2過程：第一步:力口熱至 9095 C

3、, DNA,不需要解旋酶；第二步:冷卻到5560 C,結(jié)合到互補(bǔ)DNAB1.注意：變性和復(fù)性利用了 DNA勺原理；:加熱至7075C,從引物起始互補(bǔ)鏈的合成.咳咳第二步：一個(gè)完整的基因表達(dá)載體的組成:除了目的基因外,還必須有 等.啟動(dòng)子是 識(shí)別和結(jié)合的部位.標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有 ,從而將篩選出來.常用的標(biāo)記基因是抗生素基因.咳咳第三步：常用的導(dǎo)入方法：1 .將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是 ,其次還有和 等.2 .將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是 .此方法的受體細(xì)胞多3 .將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是 ,最常用的原核細(xì)胞是 ,其轉(zhuǎn)

4、化方法是：先用處理細(xì)胞,使而為,再將重組表達(dá)載體 DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收 DN酚子,完成轉(zhuǎn)化過程.咳咳第四步：1 .首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體 DNAh是否插入了目的基因,方法是采用 2 .其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA方法是 .3 .最后檢測 ,方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體 進(jìn)行.4 .有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定.如：轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀.(四)基因工程的應(yīng)用1 .植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改進(jìn)植物的品質(zhì).2 .動(dòng)物基因工程：提升動(dòng)物生長速度；改善畜產(chǎn)品品質(zhì)；用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生

5、產(chǎn)藥物：如 生物反響器和_生物反響器,方法是將目的基因?qū)氩溉閯?dòng)物的 中,使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物.一3 .基因治療是把 導(dǎo)入病人的體內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而到達(dá)治療的目的,這是.(五)蛋白質(zhì)工程的概念:基因工程在原那么上只能生產(chǎn) 的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)工程是在 的根底 上,延伸出來的第二代基因工程.根本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)一設(shè)計(jì)預(yù)期的 一推測應(yīng)有的 序列一找到相對應(yīng)的 序列.專題1基因工程(一)基因工程又叫 基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù).原理是基因重組,操作水平是分子水 平.優(yōu)點(diǎn)：打破物種界限；定向地改造生物的遺傳性狀.(二)基因工程的根本工具 1.“分子手術(shù)刀一一 限制性核酸內(nèi)

6、切酶(限制酶)(1)來源：主要從 原核生物 中別離純化出來.(2)功能：使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵 斷開(3)特點(diǎn)具有專一(特異)性.(4)結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNM段末端通常有兩種形式：黏性末端 和平末端.2 .“分子縫合針 一一 DNA1接酶(1)兩種DNA1接酶(E - coliDNA連接酶和T4-DNAil接酶)的比擬：相同點(diǎn)：都縫合 磷酸二酯鍵.區(qū)別：E- coliDNA連接酶只能連接黏性末端;而T4DNA 連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低.(2)與DN咪合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將 單個(gè)脫氧核甘酸 加到已有的脫氧核甘酸 片段的末端,

7、形成磷酸二酯鍵.DNA1接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵.3 .“分子運(yùn)輸車一一載體 (1)載體具備的條件：能夠穩(wěn)定保存并有一至多個(gè)限制酶酶切位點(diǎn)含有標(biāo)記基因,便于篩選.對受體細(xì)胞無害.(2)最常用的載體是 質(zhì)粒,化學(xué)本質(zhì)是 DNA分子.(3)其它載體：入噬菌體的衍生物、 動(dòng)植物病毒(三)基因工程的根本操作程序第一步：目的基因的獲取1.目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因.2.基因文庫包括 基因組文庫 和cDNA文庫.二者的區(qū)另k文庫大小基因中是否有啟動(dòng) 子基因中是否有內(nèi)含 子基因多少物種間基因 交流cDNA文庫小王無某種生物的局部基 但可以基因組義 庫大有有某種生物的全部基 用

8、一B分基因可 以3.人工合成目的基因的兩個(gè)條件：基因比擬??；核甘酸序列 .4.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1) PC幅多聚酶鏈?zhǔn)椒错?的縮寫,原理 DNAZ鏈復(fù)制.(2)過程：第一步 變也：加熱至9095C, DNAB鏈,不需要解旋酶；第二步 復(fù)性：冷卻 至IJ5560C,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNAB1.變性和復(fù)性利用了 DNA勺熱變性 原理;第三步延伸： 加熱至7075 C,熱穩(wěn)定DNAM合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成.第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的組成: 除了目的基因外,還必須有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因 等.啟動(dòng)RNA聚合酶 識(shí)別和結(jié)合的部位.標(biāo)記基因的作用：是為亍 鑒定受體細(xì)胞中是否含有 目

9、的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞 篩選出來.常用的標(biāo)記基因 是抗生素基因.第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的導(dǎo)入方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞： 采用最多的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有 基因槍法和花粉管通道法 等.將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì) 胞：最常用的方法是 顯微注射法.此方法的受體細(xì)胞多是 受精卵.將目的基因?qū)胛⑸锛?xì) 胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌,其轉(zhuǎn)化方法是：先用 區(qū)處理細(xì)胞,使其成為 感受態(tài)細(xì)胞,再將重組 表達(dá)載體DNA子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA子,完成轉(zhuǎn)化過程.第四步：目

10、的基因的檢測和鑒定1 .首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNAh是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技花.2 .其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA方法是 分子雜交技術(shù).3 .最后檢測目的基因是否譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交.4 .有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定.如：轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀. 四基因工程的應(yīng)用1 .植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改進(jìn)植物的品質(zhì).2 .動(dòng)物基因工程：提升動(dòng)物生長速度；改善畜產(chǎn)品品質(zhì)；用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物：如 乳腺生物 反響器和膀胱生物反響器,方法是將目的基因?qū)氩溉閯?dòng)物的 受精卵中,使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物.3 .基因治療是把 正?；?qū)氩∪说捏w內(nèi),使該基因