第二類體外診斷試劑臨床試驗指導(dǎo)原則

1、北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗 指導(dǎo)原則由于體外診斷試劑產(chǎn)品具有發(fā)展快、專業(yè)跨度大、臨床 使用目的各異的特點，不同使用目的的產(chǎn)品，臨床研究方法 及內(nèi)容不盡相同。申請人應(yīng)在完成產(chǎn)品分析性能評估，擬定 產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)后，方可申請體外診斷試劑產(chǎn)品的臨床評價。臨床 評價開始前，申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點及使用目的，確定臨床 評價的項目、方法，制定合理的臨床評價方案，合理、系統(tǒng) 地評價申報產(chǎn)品的臨床性能。本方案僅用于指導(dǎo)體外診斷試 劑檢測方法一致性臨床研究，并對臨床試驗機(jī)構(gòu)的選擇、樣 本要求、檢測前的準(zhǔn)備、臨床試驗數(shù)據(jù)的分析等具體操作提 生了 一般性要求。申請人應(yīng)根據(jù)國家法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)指導(dǎo)原則的 要求建立

2、更加可靠、可重復(fù)的臨床評價方案，合理評價產(chǎn)品 的安全性、有效性。一、臨床試驗機(jī)構(gòu)的選擇臨床評價開始前，申請人應(yīng)根據(jù)申報產(chǎn)品特點選擇臨床 試驗機(jī)構(gòu)。臨床試驗機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)具有與申報產(chǎn)品相適應(yīng)的人 員、場地、設(shè)備、儀器和管理制度，試驗機(jī)構(gòu)的選擇應(yīng)符合 以下標(biāo)準(zhǔn)要求：本方案將申報產(chǎn)品的檢測系統(tǒng)稱為試驗系統(tǒng)，所選擇的對照檢測系統(tǒng)稱為對照系統(tǒng)。（一）應(yīng)選擇至少2 家（含兩家）省級衛(wèi)生醫(yī)療機(jī)構(gòu)，特殊使用的產(chǎn)品可在市級以上的疾病控制中心、專科醫(yī)院或檢驗檢疫所、戒毒中心等臨床機(jī)構(gòu)。臨床機(jī)構(gòu)的檢驗實驗室（簡稱實驗室）應(yīng)符合醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室管理辦法要求； 應(yīng)優(yōu)先考慮經(jīng)CNAS-CL02 醫(yī)學(xué)實驗室能力認(rèn)可準(zhǔn)則（ISO

3、 15189:2007） 認(rèn)可或 GB17025 標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)可的實驗室。（二）實驗室所 采用的檢測系統(tǒng)應(yīng)為完整、有效的 ，檢測系統(tǒng)包括申報產(chǎn)品的檢測系統(tǒng)和所選擇的對照檢測系統(tǒng)。對照檢測系統(tǒng)的試劑、校準(zhǔn)品、儀器等應(yīng)是經(jīng)注冊批準(zhǔn)的；其主要分析性能指標(biāo)（如準(zhǔn)確性、精密度、線性范圍、參考區(qū)間、測量范圍等）滿足臨床要求。申報產(chǎn)品的檢測系統(tǒng)與所選擇的對照檢測系統(tǒng)最好為同一類型的檢測方法（如同為酶聯(lián)免疫反應(yīng)、同為化學(xué)發(fā)光免疫反應(yīng)等），如為非同一類型的檢測方法，盡可能選擇分析性能較近似的方法。（三）實驗室應(yīng)有完善的室內(nèi)質(zhì)控程序；應(yīng)優(yōu)先選擇連續(xù)兩年以上室間質(zhì)量評價結(jié)果為滿意的實驗室。（四）實驗室的該項目檢測人員應(yīng)具

4、有相應(yīng)資質(zhì)（項目負(fù)責(zé)人至少具有中級以上技術(shù)職稱），對選擇對照系統(tǒng)的項目檢測具有一定經(jīng)驗。（五）應(yīng)有能力提供臨床評價所需的各類樣本。二、試驗樣本的選擇（一） 應(yīng)明確臨床樣本的采集要求：血清 /血漿應(yīng)明確抗凝劑的要求、存貯條件、可否凍融等要求及避免使用的樣本。注：盡可能 采用新鮮樣品，避免貯存。如無法避免使用貯存樣品時，注明貯存條件及時間，在數(shù)據(jù)分析時應(yīng)考慮其影響。對檢測結(jié)果有明顯干擾作用的樣本,如溶血、脂血、 或渾濁的樣本盡量避免使用。試驗系統(tǒng)與對照系統(tǒng)選擇的樣本及其要求應(yīng)一致。（二）應(yīng)考慮樣本量的分布。樣本量的選擇應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)及相關(guān)指導(dǎo)原則的要求。定量測試的產(chǎn)品，樣本中待測物濃度應(yīng)覆蓋分析系統(tǒng)

5、檢測范圍，并應(yīng)包含醫(yī)學(xué)決定水平，且盡可能均勻分布。盡可能使 50% 樣本的測定值處于參考區(qū)間以外，但在測量范圍內(nèi)。定性測試的產(chǎn)品，應(yīng)該包含陽性、陰性和接近臨界值的樣本，并且樣本數(shù)目盡可能均勻分布。三、檢測前的準(zhǔn)備（一）檢測前的準(zhǔn)備負(fù)責(zé)臨床試驗的檢測人員必須熟悉評價方案；熟悉申報產(chǎn)品的檢測系統(tǒng)和對照系統(tǒng)中試劑及其檢測方法的特點，檢測程序和儀器的操作及維護(hù)程序；進(jìn)行預(yù)試驗。（二）室內(nèi)質(zhì)控檢測系統(tǒng)和對照系統(tǒng)都應(yīng)建立適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控程序，應(yīng)保證檢測結(jié)果的可靠性。四、試驗過程的管理及數(shù)據(jù)分析本文主要考慮采用已批準(zhǔn)上市產(chǎn)品作為對照系統(tǒng)，評價試驗系統(tǒng)和對照系統(tǒng)的一致性，臨床試驗研究還應(yīng)考慮診斷敏感度、診斷特異度等

6、其他性能的評估。對于定量檢測，可以通過分析檢測結(jié)果的偏倚估計來評價；定性檢測，可以通過分析檢測結(jié)果的一致性進(jìn)行等效性評價。（一）試驗過程的管理臨床試驗建議分若干天（例如5 天）內(nèi)完成，應(yīng)規(guī)定每天完成的樣本數(shù)。每天試驗時間應(yīng)根據(jù)被測物在樣本中的穩(wěn)定性及試驗時間長短決定，并作出規(guī)定，其原則為試驗時間不得長于被測物在樣本中的穩(wěn)定時間。每天試驗必須保證同一樣本在試驗系統(tǒng)和對照系統(tǒng)上在規(guī)定時間內(nèi)完成對比試 驗。試驗過程中應(yīng)規(guī)定檢測順序，可以先用對照系統(tǒng)進(jìn)行檢測，再用試驗系統(tǒng)進(jìn)行檢測；亦可先檢測試驗系統(tǒng)，再用對照系統(tǒng)進(jìn)行檢測。試驗過程中要觀察離群值，離群值的個數(shù)不得超過2.5% ，即在 100 個樣本的臨

7、床試驗中，不得出現(xiàn)3 個離群值。如出現(xiàn)3 個或 3 個以上離群值，應(yīng)尋找原因，如僅僅是樣本問題，則更換這些樣本；如找不到原因，又影響“等效”的分析時，停止試驗并通知試驗申請者。（二）偏倚估計的數(shù)據(jù)分析2.1 作圖（ 1 ）試驗系統(tǒng)每次測定值與相對應(yīng)的對照系統(tǒng)每次測定值作散布圖；以上以試驗系統(tǒng)作Y 軸，對照系統(tǒng)作X 軸，作散布圖。（ 2 ）試驗系統(tǒng)與對照系統(tǒng)每次測定值之差與相應(yīng)對照系統(tǒng)均值作圖（中心水平線為零）。2.2 目測線性，計算相關(guān)系數(shù)目測線性，非線性段可截去；如線性范圍太短，則停止評價。 對線性段作相關(guān)分析，要求 r>0.975 ， 如 r<0.975 ， 應(yīng)擴(kuò)大樣本量以擴(kuò)大

8、數(shù)據(jù)范圍。2.3 建立回歸方程并分析計算 a 值及 b 值 ,列出線性回歸方程式。Y=a+bX(3)按下列方程式計算平均偏倚B及試驗系統(tǒng)與對照系統(tǒng)測定值差值的標(biāo)準(zhǔn)差 SD。B=2(Yi-Xi)/NN2(Yi Xi) BSD 1. (N 1)(其中B是適當(dāng)濃度范圍內(nèi)的估計的預(yù)期 (平均)偏倚；X為對照系統(tǒng)測定值；Y為試驗系統(tǒng)測定值；SD為兩系統(tǒng)測定 值差值的標(biāo)準(zhǔn)差)計算醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)處預(yù)期偏倚估計值(K )及其95%區(qū)間。Bc a (b 1)Xc (6)Bc95%置信區(qū)間Bc 2SD v'N-(7)2.4 結(jié)果判斷與解釋：將醫(yī)學(xué)決定水平預(yù)期偏倚的可信區(qū)間與允許誤差的限值相比較(允許

9、誤差推薦為小于或等于1/2CLIA88 或者室間質(zhì)評可接受范圍)。預(yù)期偏倚可信區(qū)間小于規(guī)定的允許誤差的 限值,試驗系統(tǒng)可被接受；預(yù)期偏倚可信區(qū)間大于規(guī)定的允許 誤差的限值，試驗系統(tǒng)不被接受。2.5 統(tǒng)計學(xué)分析試驗系統(tǒng)與對照系統(tǒng)之間結(jié)果作配對t檢驗。如t檢驗 有顯著差異，則兩者有系統(tǒng)誤差，需要進(jìn)一步分析原因（可能與參考區(qū)間有關(guān)）必要時需要重新設(shè)計臨床試驗方案。3.一致性的數(shù)據(jù)分析對于定性檢測的產(chǎn)品，臨床試驗還應(yīng)關(guān)注診斷敏感度、 診斷特異度、陽性符合率和陰性符合率，并且對于患病和非 患病的對象應(yīng)通過臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)選取。本文僅介紹采用已 批準(zhǔn)上市、臨床公認(rèn)較好的產(chǎn)品作為對照系統(tǒng)，評價試驗系 統(tǒng)和對照系統(tǒng)的一致性。定性檢測產(chǎn)品的結(jié)果多為計數(shù)統(tǒng)計資料，可按下表進(jìn)行 統(tǒng)計分析：表1.配對計數(shù)資料統(tǒng)計表對照系統(tǒng)合計陽性陰性試驗陽性aba+b系統(tǒng)陰性cdc+d合計a+cb+da+b+c+d對上述基數(shù)資料進(jìn)行Kappa 一致性分析，Kappa系數(shù)>0.8 ,為高度一致，認(rèn)為兩系統(tǒng)等效；0.4<Kappa系數(shù)<0.8認(rèn)為一致，需進(jìn)行陽性符合率和陰性符合率比較并進(jìn)行 統(tǒng)計學(xué)分析；Kappa系數(shù)&l