誘導(dǎo)分化劑維胺酸對卵巢癌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的阻礙

1、誘導(dǎo)分化劑維胺酸對卵巢癌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的阻礙【摘要】目的：探討誘導(dǎo)分化劑維胺酸對卵巢漿液性囊腺癌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的阻礙。方式：選取37例晚期卵巢漿液性囊腺癌患者為研究對象，隨機(jī)分為兩組，了解在手術(shù)和化療的基礎(chǔ)上聯(lián)合維胺酸誘導(dǎo)分化醫(yī)治后腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變。結(jié)果：誘導(dǎo)分化組腫瘤細(xì)胞顯現(xiàn)明顯的成熟性分化趨勢：核漿比例減小，細(xì)胞質(zhì)較豐碩；細(xì)胞間顯現(xiàn)發(fā)育較好的橋粒連接、緊密連接；線粒體數(shù)量增加形態(tài)較規(guī)那么，基質(zhì)電子密度增加；細(xì)胞質(zhì)內(nèi)糖原顆粒豐碩；部份細(xì)胞中顯現(xiàn)數(shù)量較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和形態(tài)較規(guī)那么的高爾基復(fù)合體。結(jié)論：誘導(dǎo)分化劑維胺酸可誘導(dǎo)和增進(jìn)腫瘤細(xì)胞分化，誘導(dǎo)分化療法能夠改善卵巢漿液性囊腺癌腫瘤細(xì)胞的惡性

2、生物學(xué)行為?！娟P(guān)鍵詞】卵巢漿液性囊腺癌；維胺酸：超微結(jié)構(gòu)卵巢惡性腫瘤是女性常見惡性腫瘤之一，死亡率高居女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之首，尤其晚期卵巢癌患者的5年存活率一直彷徨在30%40%左右。因此如何提高晚期卵巢癌生存率變得十分重要。本研究旨在手術(shù)和化療的基礎(chǔ)上聯(lián)合維胺酸誘導(dǎo)分化醫(yī)治后，觀看卵巢漿液性囊腺癌組織腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變，咱們在尋覓一種更為有效的醫(yī)治晚期卵巢癌的手腕。1對象和方式研究對象選取2000-01/2005-12月間，煙臺毓璜頂醫(yī)院婦科初治的晚期卵巢漿液性囊腺癌患者37例為研究對象，隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)組20例（高分化5例、中分化5例、低分化10例），年齡2478歲；對照組17例（

3、高分化4例、中分化5例、低分化8例）,年齡2075歲。方式所有患者入院后先進(jìn)行腹腔鏡探查確信為HI期（FIG01988卵巢腫瘤分期標(biāo)準(zhǔn)）卵巢漿液性囊腺癌。探查內(nèi)容包括完全抽吸腹水、準(zhǔn)確分期、腹腔轉(zhuǎn)移灶電灼、腹腔灌注DDP60mg/m2化療和標(biāo)本搜集。腹腔鏡探查后第二天進(jìn)行拓?fù)涮乜蟤g/m2（topotecan,TP）全身靜脈化療，其中實(shí)驗(yàn)組在此基礎(chǔ)上加服誘導(dǎo)分化劑維胺酸30mg/d;對照組不加任何處置。3周后兩組患者均全麻下開腹行卵巢癌腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)，手術(shù)中再次留取組織標(biāo)本，方式同±o將所搜集新鮮組織標(biāo)本切塊分成2份，1份以100g/L中性甲醛液固定，石蠟包埋，4Rm切片，HE染色，

4、光鏡觀看，另1份置25g/L戊二醛中固定，mol/L的磷酸緩沖液漂洗留宿，10g/L四氧化餓固定液固定2h,mol/L的磷酸緩沖液和蒸鐳水別離漂洗，別離用乙醇和丙酮梯度脫水，Epon812環(huán)氧樹脂包埋，置溫箱中聚合留宿，將包埋好的組織塊在一般石蠟切片機(jī)上切成Rm半薄切片，顯微鏡下觀看定位，100g/L的冰醋酸去氧化劑中浸泡，無水乙醇洗滌后烘干，制成50nm的切片，用枸椽酸二鉛染色，JEM1200EX透射電鏡對腫瘤組織標(biāo)本進(jìn)行電鏡檢查觀看分析。2結(jié)果光鏡觀看單純化療組（對照組）腫瘤組織的周邊（與腹腔內(nèi)化療藥物接觸）可見大量壞死腫瘤細(xì)胞，組織中也可見散在的壞死細(xì)胞，細(xì)胞膜消失，細(xì)胞核碎裂消失，細(xì)胞

5、質(zhì)區(qū)域無任何細(xì)胞器。另外還可見數(shù)量不一的凋亡細(xì)胞。維胺酸誘導(dǎo)分化組（實(shí)驗(yàn)組）腫瘤細(xì)胞除可見細(xì)胞凋亡壞死外，還可見細(xì)胞及細(xì)胞核形態(tài)較規(guī)那么，細(xì)胞質(zhì)豐碩,并可見大片的透明樣變。電鏡觀看對照組腫瘤細(xì)胞的形態(tài)輪廓尚在，部份細(xì)胞膜欠完整。細(xì)胞核異染色質(zhì)邊集，部份核固縮、碎裂，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器減少或消失，顯現(xiàn)較多的空泡樣結(jié)構(gòu)，溶酶體數(shù)量增加（圖l）o實(shí)驗(yàn)組除因化療所致的腫瘤細(xì)胞凋亡壞死等特點(diǎn)之外，還清楚可見存留的卵巢漿液性囊腺癌組織細(xì)胞形態(tài)漸趨規(guī)那么，細(xì)胞核形態(tài)也較規(guī)那么，核仁不明顯，核漿比例變小，異染色質(zhì)豐碩。細(xì)胞表面微絨毛減少，細(xì)胞之間顯現(xiàn)發(fā)育較好的橋粒連接和緊密連接，部份細(xì)胞之間可見較

6、典型的連接復(fù)合體。細(xì)胞質(zhì)較豐碩，細(xì)胞器發(fā)育較好、數(shù)量較多，并可見成堆的糖原顆粒和較豐碩的粗而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，部份細(xì)胞內(nèi)顯現(xiàn)較成熟的高爾基復(fù)合體。細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)量明顯增加，體積變小，形態(tài)較規(guī)那么呈圓形或桿狀，大小較一致；線粒體內(nèi)室變小，內(nèi)崎明顯，基質(zhì)電子密度增高。凋亡細(xì)胞也明顯增多（圖2）。3討論卵巢上皮性癌是最多見的卵巢腫瘤，因其在發(fā)生轉(zhuǎn)移時才顯現(xiàn)非特異性病癥，故患者在診斷時已屬晚期，是婦科腫瘤中預(yù)后最差、死亡率最高的惡性腫瘤。盡管超普遍的手術(shù)及反復(fù)大劑量的化療可臨時操縱腫瘤的進(jìn)展，必然程度上延長患者的存活時刻，但是由于其同時存在的對機(jī)體正常細(xì)胞的損傷，可造成嚴(yán)峻的毒副作用，使得部份患者無法耐受，常常

7、妨礙了療程的順利進(jìn)行，因此限制了其療效的進(jìn)一步提高，晚期患者的5年存活率一直彷徨在30%40%左右。將細(xì)胞誘導(dǎo)分化劑維胺酸作為卵巢癌化療的輔助醫(yī)治，其本身并非殺傷腫瘤細(xì)胞，自然也不殺傷正常細(xì)胞，而是通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞向高分化成熟時期分化，使其恢復(fù)部份正常細(xì)胞或接近正常的表型與功能，來完成其抗腫瘤功效。許多體外實(shí)驗(yàn)1-3也證明維甲酸類藥物對胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌等多種腫瘤細(xì)胞的生長增殖、運(yùn)動黏附、侵襲能力和轉(zhuǎn)移起抑制作用，并增進(jìn)凋亡，誘導(dǎo)分化。咱們采納維胺酸誘導(dǎo)分化聯(lián)合手術(shù)及化療后，電子顯微鏡下卵巢漿液性囊腺癌腫瘤細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)顯示出明顯的高分化趨向轉(zhuǎn)變。組織細(xì)胞形態(tài)漸趨規(guī)那么，細(xì)胞核形態(tài)也較規(guī)

8、那么，核仁不明顯，核漿比例變小，異染色質(zhì)豐碩。細(xì)胞表而微絨毛減少，細(xì)胞之間顯現(xiàn)發(fā)育較好的橋粒連接和緊密連接，部份細(xì)胞之間可見較典型的連接復(fù)合體。細(xì)胞質(zhì)較豐碩，細(xì)胞器發(fā)育較好、數(shù)量較多，并可見成堆的糖原顆粒和較豐碩的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，部份細(xì)胞內(nèi)顯現(xiàn)較成熟的高爾基復(fù)合體。細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)量明顯增加，體積變小，形態(tài)較規(guī)那么呈圓形或桿狀，大小較一致；線粒體內(nèi)室變小，內(nèi)崎明顯，基質(zhì)電子密度增高。劉琦等3用全反式維甲酸對卵巢上皮性癌荷瘤鼠干與后腫瘤細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變從體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明維甲酸類藥物對腫瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用。國內(nèi)還有研究者別離觀看了乳腺、子宮內(nèi)膜從增生性病變到癌的細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變，其結(jié)果與本研究應(yīng)用

9、維胺酸后的轉(zhuǎn)變正好相反，說明維胺酸可能具有使癌細(xì)胞逆轉(zhuǎn)的作用4-6。本研究在臨床實(shí)驗(yàn)從細(xì)胞形態(tài)學(xué)上證明了維胺酸對卵巢漿液性囊腺癌腫瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用，從而為醫(yī)治晚期卵巢癌患者提供了更有效的輔助醫(yī)治手腕。【參考文獻(xiàn)】1JiangSY,ShyuRY,ChenHY,etal.InvitroandinvivogrowthinhibitionofSCMlgastriccancercellsbyretinoicacidJ.Oncology,1996,53(4):334-340.2李良平，張正，韓盛璽，等.維甲酸對人肝癌細(xì)胞凋亡的阻礙及臨床意義J.醫(yī)學(xué)科技，2002,2(2):4-6.3劉琦，吳波，姜少軍，等.全反式維甲酸對卵巢上皮性癌荷瘤鼠干與后腫瘤細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變J.電子顯微學(xué)報，2005,24(6):584-589.4宋敏，蘇假設(shè)萍，高英賢，等.乳腺導(dǎo)管非典型增生上皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)研究J.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2001,30(5)