XE-5000血液作業(yè)指導(dǎo)書醫(yī)院

1、SYSMEX XE-5000 血液分析儀操作規(guī)程i.分析參數(shù)和方法學(xué)名稱Sysmex XE-5000 提供43項可報告參數(shù)的結(jié)果,各檢測參數(shù)和方法見表1.表1. Sysmex XE-5000 各檢測參數(shù)和方法參數(shù)首字母縮寫檢測方法白細(xì)胞WBC流式細(xì)胞計數(shù)紅細(xì)胞RBC鞘流DC檢測方法血紅蛋白HGBSLS血紅蛋白檢測法紅細(xì)胞比積HCTRBC累積脈沖高度檢測法平均紅細(xì)胞體積MCV由RBC和HCT算出平均紅細(xì)胞血紅蛋白量MCH由RBC和HGB算出平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度MCHC由HCT和HGB算出血小板PLT鞘流DC檢測方法中性粒細(xì)胞百分比NEUT%流式細(xì)胞計數(shù)淋巴細(xì)胞百分比LYMPH%單核細(xì)胞百分比M

2、ONO%嗜酸性粒細(xì)胞百分比EO%嗜堿性粒細(xì)胞百分比BASO%中性粒細(xì)胞數(shù)NEUT#淋巴細(xì)胞數(shù)LYMPH#單核細(xì)胞數(shù)MONO#嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)EO#嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)BASO#紅細(xì)胞分布寬度-標(biāo)準(zhǔn)差RDW-SD根據(jù)紅細(xì)胞直方圖算出紅細(xì)胞分布寬度-變異系數(shù)RDW-CV根據(jù)紅細(xì)胞直方圖算出血小板分布寬度PDW根據(jù)血小板直方圖算出平均血小板體積MPV根據(jù)血小板直方圖和PLT算出 大血小板比率P-LCR根據(jù)血小板直方圖算出血小板壓積PCT根據(jù)血小板直方圖算出網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比RET%流式細(xì)胞計數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)RET#幼稚網(wǎng)織紅細(xì)胞比率IRF低熒光強度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率LFR中熒光強度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率MFR高熒光強度網(wǎng)織

3、紅細(xì)胞比率HFR網(wǎng)織血小板比率IPF網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量RET He有核紅細(xì)胞百分比NRBC%有核紅細(xì)胞數(shù)NRBC#未成熟粒細(xì)胞百分比IG%未成熟粒細(xì)胞數(shù)IG#造血祖細(xì)胞數(shù)HPC #直流+射頻白細(xì)胞數(shù)一體液WBC BF流式細(xì)胞計數(shù)紅細(xì)胞數(shù)-體液RBC BF單個核細(xì)胞比例-體液MN%單個核細(xì)胞數(shù)-體液MN #多個核細(xì)胞比例-體液PMN %單個核細(xì)胞數(shù)-體液PMN #2 .檢測原理2.1 RF/DC 檢測方法:通過直流電阻的變化測定血細(xì)胞的大小,并通過射頻電阻測定血細(xì)胞內(nèi)的密度.一個血液樣品經(jīng)過吸液、定量、稀釋為指定比,然后輸送給相應(yīng)的檢測室.檢測室內(nèi)有一個稱為小孔的圓孔,兩側(cè)均為電極.兩個電極

4、之間施以直流電和射頻電流.稀釋后樣品中懸浮的血液細(xì)胞通過該孔,使兩個電極之間的直流電阻和 射頻電阻發(fā)生變化.通過直流電阻的改變測定血細(xì)胞的體積大小,而射頻電阻的變化檢測血細(xì)胞內(nèi)的密度細(xì)胞核大小與其它信息,這種檢測是以電脈沖的形式進(jìn)行的.根據(jù)這些脈沖大小的不同,可得到血細(xì)胞大小和內(nèi)部密度的二維分布散點圖.通過對這些分布的檢測,可得到各種測量數(shù)據(jù).2.2 鞘流DC檢測方法RBC、PLT、HCT 在該檢測器內(nèi),樣品噴嘴定位在孔的前面且與中央對齊.將稀釋后的樣品由樣品噴嘴推入錐形室以后,由前鞘流內(nèi)的試劑包裹通過小孔的中央.通過小孔以后,經(jīng)過稀釋的樣品由后鞘流中的試劑包裹送入捕集管中.這樣就可以預(yù)防該區(qū)

5、域的血細(xì)胞回流,并預(yù)防產(chǎn)生假性血小板脈沖.鞘流方法改善了血液計數(shù)的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性.同時由于血細(xì)胞通過在一條直線上的小孔,所以也可預(yù)防產(chǎn)生異常血細(xì)胞脈沖.2.2.1 使用半導(dǎo)體激光器的流式細(xì)胞計數(shù)方法使用流式細(xì)胞計數(shù)法檢測細(xì)胞和其它生物粒子的物理和化學(xué)性質(zhì).使用流式細(xì)胞計數(shù)法只需很少的樣品就可對這些細(xì)胞和粒子進(jìn)行檢測.一個血液樣品經(jīng)過吸液和定量、稀釋至指定的稀釋比,并進(jìn)行染色.然后將該樣品送入流動池中.這種鞘流裝置改良了細(xì)胞計數(shù)的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性.同時,由于血細(xì)胞顆粒成行通過該流動池的中央,故而預(yù)防產(chǎn)生異常血液脈沖并可減少流動池的污染.一個半導(dǎo)體激光束通過該流動池照射到血細(xì)胞上.前向散射光由光電二

6、極管接收,側(cè)向散射光和側(cè)向熒光那么由光電倍增管接收.光信號被轉(zhuǎn)化為電脈沖,從而可以得到有關(guān)血液細(xì)胞的信息.2.2.2 前向散射光FSC和側(cè)向散射光SSC當(dāng)一束激光照射到血細(xì)胞顆粒上時,就產(chǎn)生光散射.XE-5000檢測前向散射光和側(cè)向散射光,前向散射光的強度反映血液細(xì)胞體積大小.側(cè)向散射光的強度反映細(xì)胞內(nèi)部如細(xì)胞核的體積大小的信息.2.2.3 側(cè)向熒光SFL當(dāng)光照射到經(jīng)過熒光染色的血液細(xì)胞上時,就產(chǎn)生比入射光波長更長的光.隨著染色集團(tuán)濃度的增加,熒光強度也增加.通過測量熒光強度,可以得到有關(guān)血細(xì)胞染色的信息,XE-5000檢測側(cè)向熒光.2.3 SLS-血紅蛋白測定法在稀釋的血液中參加溶血素,紅細(xì)

7、胞中的血紅蛋白被釋放出來.血紅蛋白在月桂洗硫酸鈉的作用下,二價鐵轉(zhuǎn)變成三價鐵, 并與月桂洗硫酸鈉結(jié)合形成SLS-Hb , SLS-Hb進(jìn)入血紅蛋白檢測系統(tǒng). 測定SLS-Hb在555nm波長下的吸光度值,并通過與參加樣品前稀釋液的吸光度進(jìn)行比照進(jìn)行計算.2.4 計算紅細(xì)胞指數(shù)紅細(xì)胞指數(shù)MCV、MCH和MCHC 通過RBC計數(shù)RBC、Hb濃度HGB 和紅細(xì)胞壓積 HCT 的值計算出.計算公式如下：15MCV (fl)=HCTX 1015RBC/L12MCH (pg)=HGBg/L X1012RBC/LMCHC(g/L)=HGBg/L HCT3 標(biāo)本準(zhǔn)備3.1 用真空采血管紫色蓋頭采集 EDTA-

8、K 2抗凝的靜脈血.采血后立即與抗凝劑混勻,在試管外壁貼上 單據(jù)號等病人信息或檢驗聯(lián)號后,放置室溫立即送檢.3.2 穿刺時須預(yù)防穿刺針刺扎采血員,以預(yù)防血液中傳染性病原如肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血員.3.3 標(biāo)本在室溫下最多保存 4小時.不能在4小時內(nèi)檢測的標(biāo)本,放置于冷藏冰箱2C8C中保存,8小時內(nèi)有效,使用前從冰箱中取出回復(fù)室溫后檢測.4試驗器材乳膠手套、試管架5 儀器Sysmex XE-5000 全自動血液分析儀6 試齊1J6.1 稀釋?夜(CELLPACK )6.1.1試劑品牌：Sysmex代碼：PK-30L包裝規(guī)格：20L6.1.2試劑成份:氯化鈉

9、6.38g/L硼酸1.00g/L四硼酸納0.20g/L6.1.36.1.46.1.56.1.66.26.2.16.2.26.2.36.2.46.2.56.2.6EDTA-K 20.20g/L儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,預(yù)防陽光直射,適宜溫度為使用期限：在失效期前使用；開封后的使用期限為60天.1530 C.平安事項：在使用前確認(rèn)是否有污染或顏色變化,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),請速更換.如出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,將其解凍,混勻后使用.考前須知：注意防塵.鞘液(CELLSHEATH試劑品牌：Sysmex代碼：SE-90L包裝規(guī)格：20L試劑成份:氯化鈉7.1g/L氨丁三醇緩沖液乙二胺四乙酸二鉀外表活性劑儲存條件:使用期

10、限:平安事項:考前須知:2.0g/L0.20g/L0.8g/L須存儲于干凈的環(huán)境中,預(yù)防陽光直射,適宜溫度為在失效期前使用；開封后的使用期限為60天.530 c.預(yù)防和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療舉措.假設(shè)試劑有污染或顏色的變化,更換試劑.如出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,將其解凍、混勻后使用.6.3 嗜堿細(xì)胞溶血素(STROMATOLYSER-FB )包裝規(guī)格：5L530 C.60天.3.5平安事項：預(yù)防和眼睛、皮膚接觸,6.3.1 試劑品牌：Sysmex 代碼：FBA-200A6.3.2 試劑成份：非離子外表活性劑0.4%6.3.3 儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,適宜溫度

11、為6.3.4 使用期限：在失效期前使用；開封后的使用期限為一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療舉措.6.3.5 考前須知：在試劑使用前須確認(rèn)是否有污染或顏色的變化,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),須速更換.假設(shè)試劑出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,用前將其解凍充分混勻后使用.6.4 白細(xì)胞分類溶血素(STROMATOLYSER-4DL )6.4.1 試劑品牌：Sysmex 代碼：FFD-200A 包裝規(guī)格：5L6.4.2 試劑成份：非離子外表活性劑0.18%有機季鏤鹽0.08%6.4.3 儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,適宜溫度為530C.6.4.4 使用期限：在失效期前使用；開封后的使用期限為60天.6.4.5 平安事項：

12、預(yù)防和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療舉措.6.4.6 考前須知：在試劑使用前須確認(rèn)是否有污染或顏色的變化,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),須速更換.假設(shè)試劑出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,用前將其解凍充分混勻后使用.6.5 白細(xì)胞分類染液(STROMATOLYSER-4DS )6.5.1 試劑品牌：Sysmex 代碼：FFS-800A包裝規(guī)格：42ml X 3袋6.5.2 試劑成份：聚次甲基染料0.002%甲醇3.0%1, 2-亞乙基二醇96.9%6.5.3 儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,避光,適宜溫度為 235C.6.5.4 使用期限：在失效期前使用；開封后的使用期限為60天.6.5.5 平安事項

13、：預(yù)防和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療舉措.6.5.6 考前須知：假設(shè)試劑有任何污損、渾濁、不穩(wěn)定或顏色變化的跡象,須更換.但預(yù)防凍結(jié).6.6 有核紅細(xì)胞染色液(STROMATOLYSER NR )6.6.1 試劑品牌：Sysmex 代碼：SNR-800包裝規(guī)格：12m1X3袋6.6.2 試劑成份：聚次甲基染料0.01%1, 2-亞乙基二醇99.9%6.6.3 儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,避光,適宜溫度為235C.6.6.4 使用期限：在失效期前使用；開封后的使用期限為60天.6.6.5 平安事項：預(yù)防和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必

14、要的醫(yī)療舉措.6.6.6 考前須知：假設(shè)試劑有任何污損、渾濁、不穩(wěn)定或顏色變化的跡象,須更換.但預(yù)防凍結(jié).6.7 血紅蛋白溶血素(SULFOLYSER )6.7.1 試劑品牌：Sysmex 代碼：SLS-220A包裝規(guī)格：5L6.7.2 試劑成份：月桂洗硫酸鈉1.7g/L6.7.3 儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,預(yù)防陽光直射,適宜溫度為530C.6.7.4 使用期限：在失效期前使用；開封后的使用期限為60天.6.7.5 平安事項：預(yù)防和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療舉措.6.7.6 考前須知：假設(shè)試劑有污染或顏色的變化,更換試劑.如出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,將其解凍、混勻

15、后使用.6.8 幼稚細(xì)胞溶血素(STROMATOLYSER IM)6.8.1 試劑品牌：Sysmex 代碼：SIM-220A包裝規(guī)格：10L6.8.2 試劑成份：氫氧化鈉0.03%氯化鈉0.41%非離子外表活性劑2.4%6.8.3 儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,預(yù)防陽光直射,適宜溫度為530C.6.8.4 使用期限：在失效期前使用；開封后的使用期限為60天.6.8.5 平安事項：預(yù)防和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療舉措.6.8.6 考前須知：假設(shè)試劑有污染或顏色的變化,更換試劑.如出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,將其解凍、混勻后使用.6.9 清潔劑(CELLCLEAN )6.9

16、.1 試劑品牌：Sysmex 代碼：CL-50 包裝規(guī)格：50ml6.9.2 試劑成份：次氯酸鈉(有效氯濃度為5%)6.9.3 儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,預(yù)防陽光直射,適宜溫度為130C.6.9.4 使用期限：在失效期前使用.6.9.5 平安事項：本品為強堿性洗滌劑,預(yù)防和眼睛、皮膚、衣物接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并 適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療舉措.6.9.6 考前須知：假設(shè)試劑有任何污損、渾濁、不穩(wěn)定或顏色變化的跡象,須更換.假設(shè)試劑發(fā)生凝固,須替 換.6. 10有核紅細(xì)胞溶血素(STROMATOL YSER-NR )6. 10 . 1試劑品牌：Sysmex包裝規(guī)格：1L6. 10. 2

17、試劑成份：乙二醇6. 10. 3儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,預(yù)防陽光直射,適宜溫度為130 C.6. 10. 4使用期限：在失效期前使用.6. 10. 5平安事項：預(yù)防和眼睛、皮膚、衣物接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療 舉措.6. 10. 6.考前須知：假設(shè)試劑有任何污損、渾濁、不穩(wěn)定或顏色變化的跡象,須更換.假設(shè)試劑發(fā)生凝固, 須替換.6. 11 .網(wǎng)織紅細(xì)胞稀釋液(RETSEARCH-II Dilution )6. 11 . 1試劑品牌：Sysmex包裝規(guī)格：1L6. 11.2試劑成分：甲醇和乙二醇6. 11.3儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,預(yù)防陽光直射,適宜溫度

18、為130C.6. 11. 4使用期限：在失效期前使用.6. 11. 5平安事項：預(yù)防和眼睛、皮膚、衣物接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療 舉措.6. 11. 6考前須知：假設(shè)試劑有任何污損、渾濁、不穩(wěn)定或顏色變化的跡象,須更換.假設(shè)試劑發(fā)生凝固,須 替換.6. 12 網(wǎng)織紅細(xì)胞染液RETSEARCH-II Stain 6. 12 . 1試劑品牌：Sysmex包裝規(guī)格：12ml6. 12. 2試劑成分：聚次甲基染料.6. 12. 3儲存條件：須存儲于干凈的環(huán)境中,預(yù)防陽光直射,適宜溫度為 130 C.6. 12. 4使用期限：在失效期前使用.6 . 12. 5平安事項：預(yù)防和眼

19、睛、皮膚、衣物接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,并適當(dāng)考慮必要的醫(yī)療 舉措.7 . 12. 6考前須知：假設(shè)試劑有任何污損、渾濁、不穩(wěn)定或顏色變化的跡象,須更換.假設(shè)試劑發(fā)生凝固,須 替換.8 . 13試劑的使用：以上所有試劑每瓶試劑開封后應(yīng)注明啟用日期、失效期開瓶后2個月,或有效期內(nèi)并附簽名.99.1 校準(zhǔn)品商品名稱：SCS-10009.1.1 產(chǎn)品概要：SCS-1000 校準(zhǔn)品用于 WBC、RBC、HGB、HCT/MCV 及 PLT 等參數(shù)校準(zhǔn).SCS-1000 產(chǎn)品可溯源到ICSH的國際參考方法9.1.2 配方：SCS-1000校準(zhǔn)品由人體紅細(xì)胞、人體白細(xì)胞、血小板成份和抗菌劑及類血漿水基

20、緩沖液組 成.9.1.3 警告：本產(chǎn)品的人體來源材料均經(jīng)美國食品藥品治理局 FDA指定的技術(shù)檢測,肝炎外表抗原、 丙肝病毒HCV及HIV1、HIV2抗體結(jié)果均為陰性.但是,目前沒有任何檢測能夠保證不存在這些 血液感染性病原體.操作時的預(yù)防舉措必須與人血操作相同.9.1.4 存儲：SCS-1000瓶應(yīng)垂直保存在 28C,預(yù)防冰凍.為開封的產(chǎn)品在標(biāo)簽所注明的有效期內(nèi)穩(wěn)定. 開封后必須4小時內(nèi)使用.如未用完,應(yīng)廢棄剩余局部.9.1.5 產(chǎn)品變質(zhì)跡象：上清液內(nèi)有稍微溶血是正常現(xiàn)象.溫度超出范圍可導(dǎo)致嚴(yán)重溶血,校準(zhǔn)品平均值超 出測試極限,并且實驗室內(nèi)質(zhì)控歷史數(shù)據(jù)和室間質(zhì)控數(shù)據(jù)表示良好的結(jié)果時,可視為產(chǎn)品

21、損壞跡象.應(yīng)更換校準(zhǔn)品,重新校準(zhǔn).9.1.6 局限性：9.1.6.1 SCS-1000校準(zhǔn)品用于開放、全血分析模式.封閉模式或預(yù)稀釋模式的校準(zhǔn)至少需要10個正常新鮮血樣品進(jìn)行,并對每個血樣品分析2次.9.1.6.2 如果室溫超過30 C,請不要進(jìn)行校準(zhǔn).9.1.6.3 在校準(zhǔn)前至少提前 30分鐘翻開儀器電源.9.2 校準(zhǔn)前檢查：9.2.1 確認(rèn)SCS-1000校準(zhǔn)品瓶上批號和有效期于靶值表一致,沒有過期.9.2.2 確認(rèn)是否按廠家建議進(jìn)行儀器保養(yǎng).盡可能不要再進(jìn)行保養(yǎng)或試劑更換的當(dāng)天進(jìn)行校準(zhǔn)或校準(zhǔn)校驗.9.2.3 瀏覽最近的質(zhì)控數(shù)據(jù),保證分析儀性能穩(wěn)定.9.2.4 在儀器上登記試劑的批號和有效

22、期.9.2.5 進(jìn)行自動清洗,確認(rèn)空白表示沒有超出規(guī)定范圍.9.3 校準(zhǔn)準(zhǔn)備：請嚴(yán)格遵守以下步驟,這對于保證SCS-1000校準(zhǔn)品的性能正確非常重要.從冰箱或包裝取出1瓶SCS-1000 ,放置30分鐘使其溫度升至室溫18-25 C.保持瓶子直立的狀態(tài)將其放在雙手掌中輕輕滾動20秒,然后將其顛倒后再滾動20秒以上.輕輕往返倒轉(zhuǎn) 12次使其混合均勻,保證所有細(xì)胞都已經(jīng)懸浮起來.進(jìn)行分析前在平面上靜置瓶子15秒,使泡沫散去.9.4 校準(zhǔn)步驟：注意：SCS-1000的分析必須在開放模式進(jìn)行,此時儀器設(shè)定為維修程序-特殊模式-菜單的質(zhì)控血模式使用質(zhì)控血模式可預(yù)防出現(xiàn)WBC通道錯誤.關(guān)于進(jìn)入維修程序的方

23、法,請咨詢技術(shù)效勞代表.9.4.1 在開放模式下連續(xù)進(jìn)行 6次分析.在分析當(dāng)中不要混勻校準(zhǔn)品.9.4.2 次分析結(jié)束后,使用潔凈無屑的紙巾或紗布拭凈瓶子及瓶蓋螺紋,之后蓋上瓶蓋.9.5 平均值的計算及校核數(shù)據(jù)9.5.1 排除第1次分析結(jié)果.9.5.2 計算其余5次分析結(jié)果的平均值,確認(rèn)各參數(shù)的平均值都在可接受極限范圍內(nèi).9.5.3 如果某個參數(shù)的平均值超出了可接受極限范圍,并內(nèi)部質(zhì)控和/或室間質(zhì)控的結(jié)果也顯示出類似偏差,表示需要重新校準(zhǔn)分析儀.9.6 計算新的校準(zhǔn)設(shè)定值注意：校準(zhǔn)設(shè)定值的修改是非常關(guān)鍵的操作,只能由 Sysmex現(xiàn)場技術(shù)效勞代表進(jìn)行.通常,只有在更換 了可能影響儀器計數(shù)校準(zhǔn)的特

24、定部件旋轉(zhuǎn)閥、吸樣管、泵、定量器模塊等時才進(jìn)行計數(shù)校準(zhǔn).9.7 校準(zhǔn)頻率：每年校準(zhǔn) 2次,上半年一次下半年一次用 SCS-1000進(jìn)行校準(zhǔn),由工程師進(jìn)行操作9.8 驗證：校準(zhǔn)后及時進(jìn)行驗證,內(nèi)容包括：精密度、線性、校準(zhǔn)前后病人標(biāo)本結(jié)果比對、新鮮血close和open進(jìn)樣模式結(jié)果比對、 質(zhì)控、白細(xì)胞分類手工和儀器分類方式的比對,由實驗室操作人員完成.9.8.1 精密度：取兩個不同值標(biāo)本,每份連續(xù)測11次結(jié)果,去除每份第一次結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計.要求符合表2的精密度要求.9.8.2 線性：由醫(yī)院收集一份接近預(yù)期上限的高值全血樣本H,分別按100%、80%、60%、40%、20%的比例進(jìn)行稀釋,每個稀釋度重

25、復(fù)測定 3次,計算均值.將實測值與理論值作比擬偏離應(yīng)小于10%, 計算y=ax+b ,驗證線性范圍.9.8.3 每次校準(zhǔn)完后,即取 5份樣本做OPEN和CLOSE兩種進(jìn)樣方式的比對,比對各指標(biāo)的CV%應(yīng)符合以下表2的CV%值,為合格.表2.精密度和比對要求工程比對要求 CV%精密度要求CV%RBC、HB、浮動均值B ±5%B ±2%WBCB ±7%B ±5%PLTB ±10%B ±10%分類查血常規(guī)分類Rumke表查血常規(guī)分類Rumke表9.8.4 每次校準(zhǔn)完后立即做質(zhì)控比對,質(zhì)控應(yīng)在控.9.8.5 每次校準(zhǔn)后及時做白細(xì)胞分類手工和儀

26、器分類方式的比對,選取高、中、低值各兩份樣本,制備血片染色鏡檢并進(jìn)行手工分類比對結(jié)果查R tmke表最后頁.9.9 校準(zhǔn)不能通過時需重新校準(zhǔn)直至通過,記錄,并由廠家出校準(zhǔn)報告.10 操作步驟10.1 機后先做質(zhì)控,質(zhì)控通過后進(jìn)行樣本檢測.10.2 本驗U合格,經(jīng)接收標(biāo)號打印 XE-5000樣本分配單,待檢.10.3 本檢測：為了驗證手動與自動模式,每日隨機取 2份新鮮血標(biāo)本進(jìn)行 close與open模式結(jié)果比對, 以close為靶值close-open /close來計算偏移CV% 符合比對要求,以上檢測通過后進(jìn)行病人 樣本檢測.手動模式進(jìn)樣器模式準(zhǔn)備就緒屏幕顯示準(zhǔn)備就緒READY 信息,RE

27、ADY LED 綠燈亮按手動MANUAL 鍵將樣品管放在樣品架上在數(shù)字鍵上輸入標(biāo)本號將樣品架放在進(jìn)樣器中按V鍵,激活模式選擇Mode 按和光標(biāo)鍵選擇1.手動模式Manual 按進(jìn)樣器Sampler 鍵在數(shù)字鍵上輸入標(biāo)本號顛倒試管,徹底混勻樣品 取下蓋于按V鍵,激活 樣品架編號-管位置號Rack-Tube 將樣品管放在取樣針中在數(shù)字鍵上輸入樣品架號和管位置號按開始鍵按Sampler鍵當(dāng)READY LED燈滅、連續(xù)兩次發(fā)出短促 的蜂鳴聲,取卜樣品管儀器進(jìn)行檢測準(zhǔn)備就緒屏幕顯示準(zhǔn)備就緒READY 信息,READY LED 綠燈亮準(zhǔn)備下一個/批樣品,重復(fù)以上步驟進(jìn)行檢測注：非操作人員進(jìn)行的操作用斜體表

28、示.10.4 進(jìn)樣器模式進(jìn)行急診分析按進(jìn)樣器Sampler 鍵終止進(jìn)樣器運行 一屏幕顯示“STAT READY一按手動MANUAL 鍵一在數(shù) 字鍵上輸入標(biāo)本號一手工模式分析樣本一分析完畢,屏幕顯示 “STAT READY一按進(jìn)樣器Sampler 鍵, 恢復(fù)進(jìn)樣器操作.10.5 作中注意個人平安,如標(biāo)本需翻開蓋子,應(yīng)戴好防護(hù)鏡口罩或在有機玻璃擋板后翻開.10.6 日保養(yǎng)：10.6.1 正常開機、壓縮機防逆流瓶液體檢查、背景檢測通過、溫度報警、工作時間h、使用情況、關(guān)機正常記錄在XE-5000使用維護(hù)記錄.10.6.2 關(guān)機程序：分析完畢,屏幕顯示“Ready字樣,READY LED 綠燈亮?xí)r,按

29、Shutdown鍵.將CELLCLEAN 放入手動移液針上,按 START開關(guān).在 READY LED 燈滅,且蜂鳴聲停止時,移開 CELLCLEAN .10.7 保養(yǎng)或需要時進(jìn)行的維護(hù)由工程師進(jìn)行10.7.1 清洗選旋轉(zhuǎn)閥托盤.10.7.2 清洗沖洗塊.10.7.3 清洗穿刺取樣器托盤.10.7.4 清洗IMI檢測器空.10.7.5 清洗RBC檢測器孔.10.7.6 去除光檢測器盒中流動池內(nèi)的空泡.10.7.7 清洗光檢測器盒中的流動池.10.7.8 激光單元外觀檢查.1111.1 控品4個：11.1.1 質(zhì)控品品牌：XX市臨檢中央、Sysmex 高、中、低值 3個水平e-CHECK 11.

30、1.2 儲存條件：2c8c 每日須復(fù)核一次冰箱溫度.11.1.3 使用期限：臨檢中央質(zhì)控開瓶后XX天；Sysmex e-CHECK 質(zhì)控開瓶后14天.11.1.4 質(zhì)控品開啟后應(yīng)注明開啟日期,失效期并簽名.11.2 質(zhì)控頻率：每天開機后在標(biāo)本檢測前進(jìn)行一次質(zhì)控品的分析每種質(zhì)控品均做.11.2.1 質(zhì)控頻度驗證每年一次,由崗位操作員完成.11.2.2 質(zhì)控操作：從冰箱中取出e-CHECK ,使用前檢查有效期及狀況如極度溶血或失效,應(yīng)及時更換, 在室溫環(huán)境下1830 C靜置15分鐘.保持瓶子直立狀態(tài)在雙掌中輕輕滾動20次,將其顛倒再滾動20次,再將質(zhì)控品上下顛倒20次混勻至紅細(xì)胞完全混合,在質(zhì)控模

31、式下進(jìn)行檢測.11.3 控期望值：至少滿足 2個e-CHECK在靶值土極限值內(nèi),記錄質(zhì)控結(jié)果后開始做標(biāo)本.11.4 控時應(yīng)采取的舉措：質(zhì)控結(jié)果超出期望值時,需查找原因,檢查質(zhì)控品是否在有效期內(nèi),過期或近過期需更換新的質(zhì)控品,檢查試劑情況,是否需更換.再檢查儀器的各項參數(shù)是否在控,如各項檢查操 作后質(zhì)控仍失控那么聯(lián)系工程師,責(zé)任人需通知組長.與此同時聯(lián)系急癥病人相關(guān)醫(yī)生,如為急診標(biāo)本及 時送往門急診化驗室檢測.直至質(zhì)控通過,開始做標(biāo)本.11.5 次失控必須分析原因,記錄處理過程并簽名.失控記錄夾入指定的文件夾內(nèi)保存,保存期為二年.11.6 換批號后靶值設(shè)定：取開始 10次QC結(jié)果,計算均值,為靶

32、值,靶值應(yīng)落在廠商提供的范圍內(nèi),以累方t 6個月CV%均值或近兩個月 CV%較大值,通過均值乘以 CV%=1SD,質(zhì)控范圍設(shè)定為2.7SD. 由組長或組長指定人員負(fù)責(zé)計算.11.7 期打印質(zhì)控曲線,曲線上注明使用質(zhì)控品的批號和效期,并簽上責(zé)任人姓名.11.8 有室內(nèi)質(zhì)控打印及記錄夾入指定的文件夾內(nèi)保存,保存期為二年.11.9 日由操作員記錄質(zhì)控狀況與X-barm記錄于記錄本.12 方法學(xué)特征12.1 全血模式線性：注：請實驗室通過實驗自定義 WBC : 0.41 ? 94.29 父109兒RBC : 0.23? 7.66 x1012/LHGB : 6.93? 231.91g/LPLT : 9.

33、28? 534 109/LWBC、PLT大于或小于上述范圍時,可用手工法驗證,以手工計數(shù)的結(jié)果報告.RBC、HGB大于或小于上述范圍時,以 >或< 限性值報告,如 HGB<6.93g/L. 10.2干擾：以下列出的異常樣品條件會影響檢測結(jié)果.10.2.1 WBC :標(biāo)本存在溶血反抗紅細(xì)胞、冷凝集、血小板聚集、有核紅細(xì)胞和冷球蛋白時,白細(xì)胞計數(shù)可能會假性增加.10.2.2 RBC :標(biāo)本存在冷凝集、小細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片時,紅細(xì)胞計數(shù)可能會假性減少；當(dāng)標(biāo)本的白細(xì)胞 計數(shù)增加(> 100.000/),紅細(xì)胞計數(shù)可能假性增加.10.2.3 HGB :標(biāo)本的白細(xì)胞計數(shù)增加(>

34、 100.000/囚)、脂血癥、存在異常蛋白,血紅蛋白可能假性增加.10.2.4 HCT :標(biāo)本存在冷凝集、白細(xì)胞碎片、球形紅細(xì)胞增多癥,紅細(xì)胞壓積分析可能假性減少；標(biāo)本的白細(xì)胞計數(shù)增加(> 100.000/),紅細(xì)胞壓積分析可能假性增加.10.2.5 PLT:標(biāo)本存在血小板聚集、巨幼細(xì)胞,紅細(xì)胞計數(shù)可能假性減少；標(biāo)本存在小紅細(xì)胞,血小板計 數(shù)可能假性增加.10.2.6 處理：注意儀器提示及白細(xì)胞計數(shù)增加(> 100.000/)的標(biāo)本.當(dāng)標(biāo)本存在小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、有核紅細(xì)胞時,可通過鏡檢血片確定紅細(xì)胞及血小板形態(tài),手工計數(shù)有核紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞,報告手工血小板、白細(xì)胞結(jié)果等

35、并提示臨床注意信息.10.2.7 通過復(fù)做、核對、肉眼觀察、與臨床醫(yī)生聯(lián)系,排除各方面可能的影響干擾,來糾正每個試驗工程的明顯分析錯誤和干擾.11 結(jié)果的報告Sysmex XE-5000 檢測的43項參數(shù)的結(jié)果自動傳入計算機中,在血液常規(guī)報告單(紅色)上以以下方式報告(表6).表6. Sysmex XE-5000各項參數(shù)的報告方式參數(shù)縮寫經(jīng)失氾圍白細(xì)胞WBCXX XX .X109/L紅細(xì)胞RBC.M1012/L血紅蛋白HGBXXXg/L紅細(xì)胞壓積HCTxx.x%紅細(xì)胞平均體積MCVxx.xfl紅細(xì)胞平均血紅蛋白量MCHXX.Xpg紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度MCHCXXXg/L血小板PLTXXXX1

36、09/L中性粒細(xì)胞%NEU%xx.x%淋巴細(xì)胞%LYM%XM.M%單核細(xì)胞%MON%XX.X%嗜酸性細(xì)胞%EOS%XM.M%嗜堿性細(xì)胞%BASO%XX.X%紅細(xì)胞分布寬度-標(biāo)準(zhǔn)差RDW-SDXM.Mfl紅細(xì)胞分布寬度-變異系數(shù)RDW-CVXM.M%血小板分布寬度PDWXX.X%平均血小板體積MPVxx.xfl大血小板比率P-LCRXX.X%網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量RET HeXM.Mfl幼稚網(wǎng)織紅細(xì)胞比率IRFXM.M%未成熟粒細(xì)胞百分比IG%XX X .%未成熟粒細(xì)胞數(shù)IG#XX X .M109/L造血祖細(xì)胞數(shù)HPC #.M109/L白細(xì)胞數(shù)一體液WBC BFXX X .M109/L紅細(xì)胞數(shù)-

37、體液RBC BFXX X .M1012/L單個核細(xì)胞比例-體液MN%XX X .%單個核細(xì)胞數(shù)-體液MN #XX X .M109/L多個核細(xì)胞比例-體液PMN %XX X .%單個核細(xì)胞數(shù)-體液PMN #XX X .M109/L12 讓篁XE-5000所檢測的參數(shù)不須計算.每月需驗證一次RBC浮動均值并記錄計算結(jié)果.13 參考范圍Sysmex XE-5000 各檢測參數(shù)的參考范圍見表3.表3. XE-5000全自動血液分析儀各檢驗參數(shù)參考范圍成人序列號參數(shù)男女單位1WBC3.979.153.69 9.16X10 9/L2RBC4.05.53.55.5X1012/L3HGB131 1721131

38、51g/L4HCT0.380.5080.3350.4505MCV83.999.182.699.1fL6MCH27.833.826.933.3Pg7MCHC320355322362g/L8PLT85303101320X10 9/L9RDW-SD39.053.939.0 51.5fL10RDW-CV11.914.511.9 14.5%11PDW9.816.19.8 16.2fL12MPV9.4 12.69.4 12.5fL13P-LCR19.2 47.019.1 46.6%14PCT0.16 0.350.17 0.38%15NEUT%5070%16LYMPH%2040%17MONO%310%18E

39、O%0.55.0%19BASO%01%20NEUT#27X109/L21LYMPH#0.84X109/L22MONO#0.121X10 9/L23EO#0.020.5X10 9/L24BASO#00.1X10 9/L25IG%00.500.4%26IG#00.029X10 9/L27HPC#0.00X10 9/L28NRBC%0.00%29NRBC#0.00X10 9/L30RET%0.671.920.592.07%31RET#30.493.522.482.9X10 9/L32HFR0.02.00.02.4%33MFR2.412.51.814.4%34LFR87.898.689.499.5%3

40、5IRF2.113.82.417.5%36RET-He2836pg37IPF暫無%14 臨床危急值：如遇危急值,應(yīng)上報臨床科室,并記錄在危急值報告記錄表 上報時接聽者需復(fù)述 .具體的危急值指標(biāo)如下：WBC < 1.0 父109/1_ 或 WBC > 40.0 父109/1_.PLT < 20 父109/1_ 或 PLT > 600 父109/1_.Hb<50g/L 或 Hb>180g/L15 臨床意義15.1 白細(xì)胞增多：15.1.1 中性粒細(xì)胞：見于急性化膿感染、粒細(xì)胞白血病、急性出血、溶血、手術(shù)后、尿毒癥、酸中毒、急 性汞中毒、急性鉛中毒等.15.1.2

41、 嗜酸性粒細(xì)胞：見于變態(tài)反響、寄生蟲病、某些皮膚病、手術(shù)后、燒傷等.15.1.3 嗜堿性粒細(xì)胞：慢性粒細(xì)胞白血病、何杰金病、癌轉(zhuǎn)移、鉛及鈾中毒等.15.1.4 淋巴細(xì)胞：見于百日咳、傳染性單核細(xì)胞增多癥、慢性淋巴細(xì)胞白血病、麻疹、腮腺炎、結(jié)核、傳染性肝炎等.15.1.5 單核細(xì)胞：見于結(jié)核、傷寒、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病、單核細(xì)胞白血病、急性傳染病恢復(fù)期等.白細(xì)胞減少：15.1.6 中性粒細(xì)胞：見于傷寒、副傷寒、瘧疾、流感、化學(xué)藥物中毒、X線和鐳照射、抗癌藥物化療、極度嚴(yán)重感染、再生障礙性貧血、粒細(xì)胞缺乏癥等.15.1.7 嗜酸性粒細(xì)胞：傷寒、副傷寒、應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后.15.1.

42、8 淋巴細(xì)胞：多見于傳染病急性期、放射病、細(xì)胞免疫缺陷等.15.2 紅細(xì)胞及血紅蛋白增高：15.2.1 見于各種原因引起的血液濃縮和增多性疾病.15.3 紅細(xì)胞及血紅蛋白減少：15.3.1 見于各種原因引起的紅細(xì)胞生成減少或喪失.15.4 正常人及各種貧血時紅細(xì)胞平均參考值表 4:表4.正常人及各種貧血時紅細(xì)胞平均參考值MCH (pg )MCV (fl)MCHC (g/L)正常26-3480100320360大細(xì)胞性貧血>34>100正常正常細(xì)胞性貧血正常正常正常單純小細(xì)胞性貧血<26<80正常小細(xì)胞低色素性貧血<26<80正常15.5 RDW的意義:15.

43、5.1 用于缺鐵性貧血IDA的診斷與療效觀察.15.5.2 用于小細(xì)胞低色素性貧血的鑒別診斷 IDA與地中海貧血.15.5.3 用于貧血的分類Bessman分類法.15.6 MPV的意義：15.6.1 鑒別血小板減少的原因.15.6.2 MPV增大可作為骨髓造血功能恢復(fù)的較早期指征.15.7 PDW 的意義：15.7.1 PDW增大見于急非淋化療后、巨幼細(xì)胞性貧血、慢性粒細(xì)胞性白血病、脾切除、巨大血小板綜合 征、血栓性疾病等.15.8 網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)的意義：15.8.1 外周血粒細(xì)胞計數(shù)增高是移植后的早期監(jiān)測依據(jù),但是粒細(xì)胞的絕對值可能受同時發(fā)生的感染或移 植排斥反響等影響,預(yù)防性輸入血小板影

44、響了對移植早期血小板制造水平的監(jiān)測,因此二者均不理 想.網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)是一個獨立檢測骨髓造血恢復(fù)的參數(shù).移植 21天,RET#>15 X 109/L ,通常不 與移植并發(fā)癥相關(guān).且感染和輸血也不會影響網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的趨勢；但假設(shè)RET#<15 X 109/L ,并伴隨中性粒細(xì)胞和血小板的局部上升,可能提示骨髓移植失敗.IRF是骨髓移植和腎移植的早期監(jiān)測指標(biāo),IRF在監(jiān)測移植后比網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)敏感,首先是IRF升高,其次是網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)升高.而且IRF與和血漿紅細(xì)胞生成素EPO含量聯(lián)合起來可作為檢測EPO-骨髓軸功能的早期指標(biāo).15.8.2 IRF是評價貧血藥物療效的一個重要敏感指標(biāo)

45、,尤其是在慢性腎功能衰竭或獲得性免疫缺陷病應(yīng)用EPO治療時,IRF不僅能反映療效,還能幫助調(diào)整藥物劑量和治療方案.在癌癥化療過 程中,IRF是反映骨髓抑制和恢復(fù)的一項非常敏感的指標(biāo),在骨髓完全受抑制階段,IRF可降為零；化療后骨髓受到抑制,早期恢復(fù)時,IRF首先升高,并明顯高于正常,而網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)升高得較晚.15.8.3 網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量 RET- He,用于診斷貧血,檢測機體內(nèi)貯存鐵的狀態(tài)即鐵 循環(huán).該參數(shù)對功能性缺鐵引起的貧血的診斷和治療具有重要價值,并能監(jiān)控促紅素EPO和鐵劑治療的效果.因儲存鐵損耗而引起的功能性缺鐵時,RET- H彝低,這是典型的缺鐵性貧血,可予以鐵劑口服治療；

46、在鐵充足狀態(tài)下的功能性鐵缺乏同時伴RET- H彝低時,應(yīng)予鐵劑注射+Epo治療；鐵充足時且紅細(xì)胞生成正常,那么為Epoa乏；如攝入的鐵減少,但還未形成缺鐵性紅細(xì)胞“潛 在的鐵缺乏,且血紅蛋白量正常,那么是鐵缺乏.15.8.4 網(wǎng)織血小板比率IPF:網(wǎng)織血小板的比例和絕對值均有相應(yīng)的顯著變化.在臨在血小板破壞增多或生成缺乏所致的疾病中,床上可作為特發(fā)性血小板減少性紫瘢ITP診斷的重要指標(biāo),并可與其他血小板生成缺乏性疾病如脾亢等相鑒別.ITP患者血小板破壞增加,骨髓生成血小板加快,外周血中新生血小板增多,使RP比例升高.但由于血小板壽命縮短,使網(wǎng)織血小板絕對值減少.脾亢雖有血小板減少,但網(wǎng)織血小板

47、比例接近正常,網(wǎng) 織血小板絕對值亦低于正常水平.15.9 未成熟粒細(xì)胞IG增多：見于各種原因引起的嚴(yán)重的中性粒細(xì)胞增多,如白血病、類白血病.15.10 造血祖細(xì)胞HPC HPC分析模式： 見于各型急慢性白血病.15.11 體液細(xì)胞計數(shù) WBC-BF RBC-BF、MN% MN# PMN% PMN# 用于各類型體液的性質(zhì)的鑒別.16 考前須知16.1 血液分析儀測定的適宜溫度一定要在18C25 c之間.16.2 當(dāng)出現(xiàn)RBC、WBC、HGB、PLT、MCV等和分類結(jié)果出現(xiàn)明顯升高、降低或異常, 以及儀器顯示警告信號均須復(fù)做.具體的復(fù)查指標(biāo)如下：16.2.1 WBC < 3.0 M109/L

48、 或 WBC > 20.0 M109/L, MCH>34pg 或 MCV< 26 pg ,HGB>170 g/L 或 HGB< 90g/L,RBC< 3.0 X1012/L 或 RBC>6.0 M1012/L.16.2.2 PLT < 60 M109/L或PLT > 400 M109/L.PLT < 60 X 109/L,儀器提示可能有血小板聚集、巨大血小板或血小板衛(wèi)星現(xiàn)象的標(biāo)本,除復(fù)查外,需推血片瑞氏染色,鏡下觀察是否有血小板聚集、巨大血 小板或血小板衛(wèi)星現(xiàn)象,如有血小板聚集、巨大血小板或血小板衛(wèi)星現(xiàn)象導(dǎo)致血小板計數(shù)假性降低,在報告

49、中注明.16.2.3 超過XE-5000限性值范圍的結(jié)果以 >或<限性值報告,WBC或PLT可手工計數(shù),以手工計數(shù)的結(jié) 果報告操作見WBC手工計數(shù),PLT手工計數(shù).16.2.4 HGB < 50g/L ,新發(fā)現(xiàn)有嚴(yán)重貧血的病人標(biāo)本或儀器提示RBC形態(tài)異常,需推片染色鏡檢并描述紅細(xì)胞形態(tài),如球形紅細(xì)胞增多,靶型RBC增多.16.2.5 白細(xì)胞分類檢查有以下之一須進(jìn)行手工白細(xì)胞分類：LYM% > 45% , MON% > 15% , EOS% > 7% ,BASO% > 2% , NEUT%<5%(WBC< 10.0 M109).16.2.6 WBC提示信息為有核紅細(xì)胞增高,應(yīng)推血片染色分類,根據(jù)換算公式校準(zhǔn)WBC .16.2.7 除上述指標(biāo)外,如遇特殊情況或無法解釋的結(jié)果,也應(yīng)進(jìn)行復(fù)查和聯(lián)系臨床醫(yī)生.16.2.8 所有的復(fù)核應(yīng)做好記錄.16.3 試劑應(yīng)在廠商提供的失效期前使用,開封后應(yīng)在試劑外包裝上注明開封日期、失效