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1、第四章 蛋白質(zhì)化學知識點:一、氨基酸蛋白質(zhì)的生物學功能氨基酸:酸水解:破壞全部色氨酸以及部分含羥基氨基酸。堿水解:所有氨基酸產(chǎn)生外消旋。氨基酸的分類:非極性氨基酸(8種):Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Met、Phe、Trp; 極性氨基酸(12種):帶正電荷氨基酸Lys、Arg、His;帶負電荷氨基酸Asp和Glu;不帶電荷氨基酸Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Cys、Gly。非蛋白質(zhì)氨基酸:氨基酸的酸堿性質(zhì):氨基酸的等電點,氨基酸的可解離基團的pK值, pI的概念及計算,高于等電點的任何pH值,氨基酸帶有凈負電荷,在電場中將向正極移動。氨基酸的光吸收性:芳香族側鏈有紫外吸收

2、,280nm,氨基酸的化學反應:-氨基酸與水合茚三酮試劑共熱,可發(fā)生反應,生成藍紫化合物。茚三酮與脯氨酸和羥脯氨酸反應則生成黃色化合物。二、結構與性質(zhì)肽:基本概念;肽鍵;肽;氨基酸殘基;谷胱甘肽;肽鍵不能自由轉動,具有部分雙鍵性質(zhì);肽平面蛋白質(zhì)的分子結構:一級結構,N-末端分析,異硫氰酸苯酯法;C-末端分析,肼解法蛋白質(zhì)的二級結構:是指蛋白質(zhì)分子中多肽鏈骨架的折疊方式,包括螺旋、折疊和轉角等。超二級結構:超二級結構是指二級結構的基本結構單位(螺旋、折疊等)相互聚集,形成有規(guī)律的二級結構的聚集體。結構域:蛋白質(zhì)的三級結構:蛋白質(zhì)的三級結構指多肽鏈中所有氨基酸殘基的空間關系,其具有二級結構或結構域

3、。球狀蛋白質(zhì)分子的三級結構特點:大多數(shù)非極性側鏈(疏水基團)總是埋藏在分子內(nèi)部,形成疏水核;大多數(shù)極性側鏈(親水基團),總是暴露在分子表面,形成一些親水區(qū)。蛋白質(zhì)的四級結構:蛋白質(zhì)的四級結構是由兩條或兩條以上各自獨立具有三級結構的多肽鏈(亞基)通過次級鍵相互締合而成的蛋白質(zhì)結構。變構蛋白、變構效應;血紅蛋白氧合曲線。維持蛋白質(zhì)分子構象的化學鍵:氫鍵,疏水鍵,范德華力,鹽鍵,二硫鍵等三、蛋白質(zhì)的分子結構與功能的關系蛋白質(zhì)的分子結構與功能的關系:一級結構決定高級結構,核糖核酸酶的可逆變性;變性、復性、鐮刀型紅細胞貧血癥的生化機理;四、蛋白質(zhì)的性質(zhì)及分離純化膠體性質(zhì):雙電層,水化層;1. 透析;2.

4、 鹽析;3. 凝膠過濾;酸堿性質(zhì):1. 等電點沉淀;2. 離子交換層析;3. 電泳蛋白質(zhì)的變性:蛋白質(zhì)變性后,二、三級以上的高級結構發(fā)生改變或破壞,但共價鍵不變,一級結構沒有破壞。一、氨基酸蛋白質(zhì)的生物學功能氨基酸:酸水解:破壞全部色氨酸以及部分含羥基氨基酸。堿水解:所有氨基酸產(chǎn)生外消旋。氨基酸的分類:非極性氨基酸(8種):Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Met、Phe、Trp; 極性氨基酸(12種):帶正電荷氨基酸Lys、Arg、His;帶負電荷氨基酸Asp和Glu;不帶電荷氨基酸Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Cys、Gly。非蛋白質(zhì)氨基酸:氨基酸的酸堿性質(zhì):氨基酸的等電點

5、,氨基酸的可解離基團的pK值, pI的概念及計算,高于等電點的任何pH值,氨基酸帶有凈負電荷,在電場中將向正極移動。氨基酸的光吸收性:芳香族側鏈有紫外吸收,280nm,氨基酸的化學反應:-氨基酸與水合茚三酮試劑共熱,可發(fā)生反應,生成藍紫化合物。茚三酮與脯氨酸和羥脯氨酸反應則生成黃色化合物。填空題1構成蛋白質(zhì)的氨基酸有 種,一般可根據(jù)氨基酸側鏈(R)的 大小分為 側鏈氨基酸和 側鏈氨基酸兩大類。其中前一類氨基酸側鏈基團的共同特怔是具有 性;而后一類氨基酸側鏈(或基團)共有的特征是具有 性。堿性氨基酸(pH67時荷正電)有兩種,它們分別是 氨基酸和 氨基酸;酸性氨基酸也有兩種,分別是 氨基酸和 氨

6、基酸。2紫外吸收法(280nm)定量測定蛋白質(zhì)時其主要依據(jù)是因為大多數(shù)可溶性蛋白質(zhì)分子中含有 氨基酸、 氨基酸或 氨基酸。3絲氨酸側鏈特征基團是 ;半胱氨酸的側鏈基團是 ;組氨酸的側鏈基團是 。 。這三種氨基酸三字母代表符號分別是 、 、 。 4 氨基酸與水合印三酮反應的基團是 ,除脯氨酸以外反應產(chǎn)物的顏色是 ;因為脯氨酸是a亞氨基酸,它與水合印三酮的反應則顯示 色。5 當氨基酸溶液的pHpI時,氨基酸(主要)以 離子形式存在;當pHpI時,氨基酸(主要)以 離子形式存在;當pHpI時,氨基酸(主要)以 離子形式存在。6側鏈含OH的氨基酸有 、 和 三種。側鏈含SH的氨基酸是 氨基酸。7 Ed

7、man反應的主要試劑是 ;在寡肽或多肽序列測定中,Edman反應的主要特點是 。選擇題1側鏈含有咪唑基的氨基酸是( ) A、甲硫氨酸 B、半胱氨酸 C、精氨酸 D、組氨酸2PH為8時,荷正電的氨基酸為( ) A、Glu B、Lys C、Ser D、Asn3精氨酸的Pk1=2.17、Pk2=9.04(a-NH3)Pk3=12.48(胍基)PI=( ) A、1/2(2.17+9.04) B、1/2(2.17+12.48) C、1/2(9.04+12,48) D、1/3(2.17+9。04+12。48)4谷氨酸的Pk1=2.19(a-COOH)、pk2=9.67(a-NH3)、pk3=4.25(g-

8、COOH) pl=( ) A、1/2(2.19+9。67) B、1/2(9.67+4.25) C、1/2(2.19+4.25) D、1/3(2.17+9.04+9.67) 5氨基酸不具有的化學反應是( ) A、肼反應 B、異硫氰酸苯酯反應 C、茚三酮反應 D、雙縮脲反應6氨基酸與亞硝酸反應所釋放的N2氣中,氨基酸的貢獻是( ) A、25% B、50% C、80% D、100%是非題1苯丙氨酸疏水性比纈氨酸強.2、蛋白質(zhì)經(jīng)過堿水解,可活動所有的天然氨基酸。3、蛋白質(zhì)經(jīng)酸水解可破壞全部色氨酸以及部分含羥基氨基酸。4、酶水解蛋白質(zhì)反應條件溫和,不破壞色氨酸也不產(chǎn)生外消旋,但副產(chǎn)物多。5、氨基酸在水溶

9、液中或在晶體狀態(tài)時主要時以兩性離子的形式存在。6、組成蛋白質(zhì)的二十種氨基酸都有旋光性。7由于靜電作用,在等電點時氨基酸的溶解度最小。8構成天然蛋白質(zhì)的氨基酸,其D構型和L型普遍存在。問答題1、 一溶液中含有氨基酸Asp和Lys,通入強酸性離子交換層析柱,若原溶液的PH為7,則哪一種氨基酸先被洗脫?2. 肌肉中氧攜帶者是肌球蛋白,下列哪些氨基酸最可能位于該分子內(nèi)部?Leu, Asp, Phe, Met, Val, Ala極性氨基酸通常位于分子表面,但一些氨基酸如Ser和Asn通常位于分子內(nèi)部,為什么?二、結構肽:基本概念;肽鍵;肽;氨基酸殘基;谷胱甘肽;肽鍵不能自由轉動,具有部分雙鍵性質(zhì);肽平面

10、蛋白質(zhì)的分子結構:一級結構,N-末端分析,異硫氰酸苯酯法;C-末端分析,肼解法蛋白質(zhì)的二級結構:是指蛋白質(zhì)分子中多肽鏈骨架的折疊方式,包括螺旋、折疊和轉角等。超二級結構:超二級結構是指二級結構的基本結構單位(螺旋、折疊等)相互聚集,形成有規(guī)律的二級結構的聚集體。結構域:蛋白質(zhì)的三級結構:蛋白質(zhì)的三級結構指多肽鏈中所有氨基酸殘基的空間關系,其具有二級結構或結構域。球狀蛋白質(zhì)分子的三級結構特點:大多數(shù)非極性側鏈(疏水基團)總是埋藏在分子內(nèi)部,形成疏水核;大多數(shù)極性側鏈(親水基團),總是暴露在分子表面,形成一些親水區(qū)。蛋白質(zhì)的四級結構:蛋白質(zhì)的四級結構是由兩條或兩條以上各自獨立具有三級結構的多肽鏈(

11、亞基)通過次級鍵相互締合而成的蛋白質(zhì)結構。變構蛋白、變構效應;血紅蛋白氧合曲線。維持蛋白質(zhì)分子構象的化學鍵:氫鍵,疏水鍵,范德華力,鹽鍵,二硫鍵等名詞解釋: 1二面角 2蛋白質(zhì)一級結構 3蛋白質(zhì)二級結構 4蛋白質(zhì)三級結構 5蛋白質(zhì)四級結構 6超二級結構 7別構效應 8結構域 9寡聚蛋白10構象 11構型 12肽單位13肽平面 14a-螺旋 15b-折疊或b-折疊片16超二級結構 17b-轉角 18亞基填空題1蛋白質(zhì)結構中主鍵稱為 鍵,次級鍵有 、 、 、 、 ;次級鍵中屬于共價鍵的是 鍵。2蛋白質(zhì)二級結構的基本類型有 、 、 和 。其中維持前三種二級結構穩(wěn)定鍵的次級鍵為 鍵。有關。而當多肽鏈中

12、出現(xiàn) 殘基的時候,多肽鏈的a-螺旋往往會被破壞。3蛋白質(zhì)水溶液是一種比較穩(wěn)定的親水膠體,其穩(wěn)定性主要因素有兩個,分別是 和 。選擇題1下列敘述中不屬于蛋白質(zhì)一級結構內(nèi)容的是( ) A、多肽鏈中氨基酸殘基的種類、數(shù)目、排列次序 B、多肽鏈中氨基酸殘基的鍵鏈方式 C、多肽鏈中主肽鏈的空間走向,如a-螺旋 D、胰島分子中A鏈與B鏈間含有兩條二硫鍵,分別是A7-S-S-B7,A20-S-S-B192下列敘述中哪項有誤( ) A、蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸殘基的種類、數(shù)目、排列次序在決定它的二級結構、三級結構乃至四級結構中起重要作用。 B、主肽鏈的折疊單位肽平面之間相關一個Ca碳原子。 C、蛋白質(zhì)變性過程中空

13、間結構和一級結構被破壞,因而喪失了原有生物活性。 D、維持蛋白質(zhì)三維結構的次級鍵有氫鍵、鹽鍵、二硫鍵、疏水力和范德華力。3下列因素中主要影響蛋白質(zhì)a-螺旋形成的是( ) A、堿性氨基酸的相近排列 B、酸性氨基酸的相近排列 C、脯氨酸的存在 D、甘氨酸的存在4蛋白質(zhì)中多肽鏈形成a-螺旋時,主要靠哪種次級鍵維持( ) A、疏水鍵 B、肽鍵 C、氫鍵 D、二硫鍵5關于蛋白質(zhì)結構的敘述,哪項不恰當( ) A、胰島素分子是由兩條肽鏈構成,所以它是多亞基蛋白,具有四級結構 B、蛋白質(zhì)基本結構(一級結構)中本身包含有高級結構的信息,所以在生物體系中,它具有特定的三維結構 C、非級性氨基酸側鏈的疏水性基團,避

14、開水相,相互聚集的傾向,對多肽鏈在二級結構基礎上按一定方式進一步折疊起著重要作用 D、亞基間的空間排布是四級結構的內(nèi)容,亞基間是非共價締合的6有關亞基的描述,哪一項不恰當( ) A、每種亞基都有各自的三維結構 B、亞基內(nèi)除肽鍵外還可能會有其它共價鍵存在 C、一個亞基(單位)只含有一條多肽鏈 D、亞基單位獨立存在時具備原有生物活性7關于可溶性蛋白質(zhì)三級結構的敘述,哪一項不恰當( ) A、疏水性氨基酸殘基盡可能包裹在分子內(nèi)部 B、親水性氨基酸殘基盡可能位于分子內(nèi)部 C、羧基、氨基、胍基等可解離基團多位于分子表面 D、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等殘基盡可能位于分子內(nèi)部8蛋白質(zhì)三級結構形成的驅(qū)動力是(

15、 ) A、范德華力 B、疏水作用力 C、氫鍵 D、離子鍵9以下蛋白質(zhì)中屬寡聚蛋白的是( ) A、胰島素 B、Rnase C、血紅蛋白 D、肌紅蛋白10關于二級結構敘述哪一項不正確( ) A、右手a-螺旋比左手a-螺旋穩(wěn)定,因為左手a-螺旋中L-構型氨基酸殘基側鏈空間位阻大,不穩(wěn)定; B、一條多肽鏈或某多肽片斷能否形成a-螺旋,以及形成的螺旋是否穩(wěn)定與它的氨基酸組成和排列順序有極大關系; C、多聚的異亮氨基酸R基空間位阻大,因而不能形成a-螺旋; D、b-折疊在蛋白質(zhì)中反平行式較平行式穩(wěn)定,所以蛋白質(zhì)中只有反平行式。11蛋白質(zhì)三維結構的構象特征主要取決于( ) A、氨基酸的組成、順序和數(shù)目 B、

16、氫鍵、鹽鍵、范德華力和疏水力 C、溫度、pH和離子強度等環(huán)境條件 D、肽鏈間或肽鏈內(nèi)的二硫鍵是非題1胰島素分子中含有兩條多肽鏈,所以每個胰島素分子是由兩個亞基構成。2蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的種類數(shù)目、排列次序決定它的二級、三級結構,即一級結構含有高級結構的結構信息。3肽鍵中相關的六個原子無論在二級或三級結構中,一般都處在一個剛性平面內(nèi)。4具有四級結構的蛋白質(zhì),當它的每個亞基單獨存在時仍能保持蛋白質(zhì)有的生物活性。5胰島素分子中含有A7-S-S-B7,A20-S-S-B19和A6-S-S-A11三個二硫鍵,這些屬于二級結構的內(nèi)容。6b-折疊是主肽鏈相當伸展的結構,因此它僅存在于某些纖維狀蛋白質(zhì)中。7

17、蛋白質(zhì)的亞基(或稱為亞單位)和肽是同義詞。三、蛋白質(zhì)的分子結構與功能的關系蛋白質(zhì)的分子結構與功能的關系:一級結構決定高級結構,核糖核酸酶的可逆變性;變性、復性、鐮刀型紅細胞貧血癥的生化機理;名詞解釋:變構效應,等電點填空題:1蛋白質(zhì)處于等電點時,所具有的主要特征是 、 。2在適當濃度的b-巰基乙醇和8M脲溶液中,RNase(牛)喪失原有活性。這主要是因為RNA酶的 被破壞造成的。其中b-巰基乙醇可使RNA酶分子中的 鍵破壞。而8M脲可使 鍵破壞。當用透析方法去除b-巰基乙醇和脲的情況下,RNA酶又恢復原有催化功能,這種現(xiàn)象稱為 。3蛋白質(zhì)變性的主要原因是 被破壞;蛋白質(zhì)變性后的主要特征是 ;變

18、性蛋白質(zhì)在去除致變因素后仍能(部分)恢復原有生物活性,表明 沒被破壞。這是因為一級結構含有 的結構信息,所以蛋白質(zhì)分子構象恢復后仍能表現(xiàn)原有生物功能。4鐮刀狀貧血癥是最早認識的一種分子病,患者的血紅蛋白分子b亞基的第六位 氨酸被 氨酸所替代,前一種氨基酸為 性側鏈氨基酸,后者為 性側鏈氨基酸,這種微小的差異導致紅血蛋白分子在氧分壓較低時易于聚集,氧合能力下降,而易引起溶血性貧血。選擇題1蛋白質(zhì)變性過程中與下列哪項無關( ) A、理化因素致使氫鍵破壞 B、疏水作用破壞 C、蛋白質(zhì)空間結構破壞 D、蛋白質(zhì)一級結構破壞,分子量變小2加入下列試劑不會導致蛋白質(zhì)變性的是( ) A、尿素(脲) B、鹽酸胍

19、 C、十二烷基磺酸SDS D、硫酸銨3血紅蛋白的氧合動力學曲線呈S形,這是由于( ) A、氧可氧化Fe(),使之變?yōu)镕e() B、第一個亞基氧合后構象變化,引起其余亞基氧合能力增強 C、這是變構效應的顯著特點,它有利于血紅蛋白質(zhì)執(zhí)行輸氧功能的發(fā)揮 D、亞基空間構象靠次級鍵維持,而亞基之間靠次級鍵締合,構象易變4寡肽或多肽測序時下列試劑中最好的是( ) A、2,4-二硝基氟苯 B、肼 C、異硫氰酸苯酸 D、丹酰氯是非題:1 變構效應是蛋白質(zhì)及生物大分子普遍的性質(zhì),它有利于這些生物大分子功能的調(diào)節(jié)。2 功能蛋白質(zhì)分子中,只要個別氨基酸殘基發(fā)生改變都會引起生物功能的喪失。3變性后的蛋白質(zhì)電泳行為不會

20、改變。4沉降系數(shù)S是蛋白質(zhì)以及核酸分子量大小常用的表示單位。16同源蛋白質(zhì)中,保守性較強的氨基酸殘基在決定蛋白質(zhì)三維結構與功能方面起重要作用,因此致死性突變常常與它們的密碼子突變有關。四、蛋白質(zhì)的性質(zhì)及分離純化膠體性質(zhì):雙電層,水化層;1. 透析;2. 鹽析;3. 凝膠過濾;酸堿性質(zhì):1. 等電點沉淀;2. 離子交換層析;3. 電泳蛋白質(zhì)的變性:蛋白質(zhì)變性后,二、三級以上的高級結構發(fā)生改變或破壞,但共價鍵不變,一級結構沒有破壞。名詞解釋:鹽析,分段鹽析,凝膠過濾層析,蛋白質(zhì)的變性與復性,填空題1鹽析作用是指 ;鹽溶作用是指 。2當外界因素(介質(zhì)的pHpI、電場電壓、介質(zhì)中離子強度、溫度等)確定后,決定蛋白質(zhì)在電場中泳動速度快慢的主要因素是 和 。3細胞色素C,血紅蛋白的等電點分別為10和7.1,在pH8.5的溶液中它們分別荷的電性是 、 。選擇題:1引起蛋白質(zhì)變性原因主要是( ) A、三維結構破壞 B、肽鍵破壞 C、膠體穩(wěn)定性因素被破壞 D、亞基的解聚2變構效應是多亞基功能蛋白、寡聚酶及多酶復合體的作用特征,下列動力

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