低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化

1、精品文檔 低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化 一、 實驗教學(xué)目標(biāo) 1. 知識目標(biāo)：理解低溫誘導(dǎo)植物細胞染色體數(shù)目變化的作用機制。 2. 能力目標(biāo)：學(xué)會低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目變化的方法。 3情感態(tài)度價值觀：體會實驗結(jié)果帶來的成就感，感受團隊合作的快樂。 二、 實驗原理 進行正常有絲分裂的植物分生組織細胞， 在有絲分裂后期， 染色體的著絲點 分裂，子染色體在紡錘絲的作用下，分別移向兩極，最終被平均分配到兩個子細 胞中去。 用低溫處理植物分生組織細胞，能夠抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被 拉向兩極，使細胞也不能分裂成兩個子細胞。 結(jié)果，植物細胞染色體數(shù)目發(fā)生變 化。 三、 實驗儀器材料 洋蔥或大蔥、蒜、

2、培養(yǎng)皿、濾紙、紗布、燒杯、鑷子、剪刀、顯微鏡、載玻 片、蓋玻片、冰箱、卡諾氏液、改良苯酚品紅染液、體積分?jǐn)?shù)為15%勺鹽酸溶液、 體積分?jǐn)?shù)為95%勺酒精溶液。 四、 實驗方法 1. 培養(yǎng)根尖：將洋蔥放在裝滿清水的廣口瓶，讓洋蔥的底部接觸水面。 2. 低溫誘導(dǎo)：待洋蔥長出1cm左右的不定根時，將整個裝置放入冰箱的低溫室 (4C)內(nèi)，誘導(dǎo)培養(yǎng)36小時。 3. 固定細胞形態(tài)：剪去誘導(dǎo)處理的根尖約0.5-1cm，放入卡諾氏液中浸泡0.5-1 小時，以固定細胞的形態(tài)，然后用體積分?jǐn)?shù)約 95%的酒精沖洗2次。 4. 制作裝片：取固定好的根尖，進行解離；漂洗；染色；制片 4個步驟，具體 操作方法與 觀察植物細

3、胞的有絲分裂”實驗相同。 5. 觀察裝片：先用低倍鏡尋找染色體形態(tài)較好的分裂相。視野中既有正常的二 倍體細胞，也有染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞，發(fā)生染色體數(shù)目變化的細胞中染色 體數(shù)目可能為正常細胞的兩倍。確認(rèn)某個細胞發(fā)生染色體數(shù)目變化后、 再用高倍 鏡觀察。 6. 記錄結(jié)果：對看到的發(fā)生染色體數(shù)目加倍的細胞拍照記錄。 試劑及用途： 1歡迎下載 精品文檔 (1) 卡諾氏液：固定細胞形態(tài)。 (2) 95% 酒精：沖洗附著在根尖表面的卡諾氏液。 (3) 解離液：(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%HC和體積分?jǐn)?shù)為95%酉精1:1混合)使組織中的細 胞分離開。 (4) 清水：洗去解離液，防止解離過度，便于染色。 (5) 改

4、良苯酚品紅染液：使染色體著色。 五、 實驗數(shù)據(jù)的采集分析 (一) 學(xué)生觀察到的較好的實驗結(jié)果后，由老師拍照記錄。 (二) 造成看不到染色體數(shù)加倍細胞原因較多，常見原因有： 1. 沒有培養(yǎng)出分生區(qū)或沒有剪取到分生區(qū) 2. 低溫誘導(dǎo)時間不足 3. 解離不充分或漂洗不干凈造成染色不足 4. 染色時間控制不當(dāng)，看不清染色體 5. 沒有低倍鏡尋找過程 六、 實驗總結(jié)反思與修正 1. 針對新洋蔥不容易生根的問題，解決方法為：先將新洋蔥放在干燥、通風(fēng)、 陽光下曬10天左右，再放入冰箱中低溫室內(nèi)(4C 左右均可)3-5天左右，可以解 除休眠，就很容易發(fā)根了。 2. 針對剪取根尖時，很多根尖已經(jīng)被上一個班級的同

5、學(xué)剪掉，導(dǎo)致實驗失敗的 問題，解決方法為：每次剪取根尖時先把根從基部剪掉，然后剪取上面的根尖， 這樣，就可以避免以上問題的出現(xiàn)。 3針對調(diào)整解離時間和解離方式的問題。解決方法為： 解離時間少于 5分鐘解 離效果不太好， 在制作裝片時細胞分散效果不好。 解離時將根尖放在培養(yǎng)皿的邊 上，傾斜放置培養(yǎng)皿，滴加 1毫升的解離液解離即可，這樣用量少，既節(jié)約又更 加安全。或者在酉精燈火焰上稍微加熱，可以節(jié)省解離的時間。 4. 針對染色液的濃度和染色時間的問題，解決方法為：將初始染液稀釋 10倍， 并且染色時間為 3分鐘，效果最好。如果染色液不稀釋， 就會把染色體染色太深， 以至于在顯微鏡下觀察時， 看到的是深藍的一片， 很難分辨一條條的染色體。 將 染液稀釋 10倍，并且染色時間減少為 3分鐘，染色清晰、而且時間長也不影響染 色效果。 2 歡迎下載 精品文檔 5. 壓片方法可以改為：將載玻片放在書本上或桌面上，直接用鑷子頂端輕輕敲 砸蓋玻片，使細胞進一步分散開，效果更好，再用吸水紙把周圍多