變形鏈球菌和放線菌與根面齲關(guān)系的研究

1、    變形鏈球菌和放線菌與根面齲關(guān)系的研究        摘要目的：分析變形鏈球菌和放線菌與根面齲的關(guān)系。方法：用選擇性培養(yǎng)基MS和BYS對30例根面齲中的變形鏈球菌、放線菌定量研究。結(jié)果：放線菌的檢出率100%，變形鏈球菌的檢出率93.33%，放線菌在數(shù)量上（CFU）占絕對優(yōu)勢，與變形鏈球菌數(shù)量相比有高度顯著性差異，P0.01。結(jié)論：支持放線菌是根面齲優(yōu)勢菌的觀點(diǎn)。關(guān)鍵詞變形鏈球菌； 放線菌； 根面齲中分類號R781.1文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號1000-4661(2000)0

2、2-0097-02The study on the relation ship between Streptococcus mutans, Actinomyces and dental root surface cariesXU Jing-shu, LI Chan-zhan, FAN Ming-wen, et al. （Hubei Medical University Stomotological Hospital, Hubei 430079）Abstract Objective: To analyze the relation ship between Streptococcus mutan

3、s, Actinomyces and dental root surface caries. Methods: Streptococcus mutans and Actinomyces in 30 cases of dental root surface caries are studied quantitatively by selective media. Results: The postive detection rate of Actinomyces is 100% while that of Sreptococcus mutans is 93.33%. And Actinomyce

4、s has absotrtely dominance in CFU compared with Streptococcus mutans. The result has significant difference in statistics. (P0.01). Conclustion: Actinomyces is the mainly dominant bacterium in root surface caries. Key words streptococcus mutans;actinomyces dental root；surface caries根面齲是老年口腔常見、多發(fā)病，牙根

5、暴露后，口腔內(nèi)多種細(xì)菌在根部牙骨質(zhì)上定居，形成菌斑，其中主要是變形鏈球菌和放線菌1。有的學(xué)者報(bào)道2，3變形鏈球菌是根面齲優(yōu)勢菌，放線菌次之。有的學(xué)者報(bào)道4放線菌是根面齲的優(yōu)勢菌。為了研究變形鏈球菌和放線菌與根面齲的關(guān)系，故用選擇性培養(yǎng)基對根面齲中的變形鏈球菌和放線菌進(jìn)行培養(yǎng)研究。材料和方法1. 研究對象:選擇根面齲患者30名，男15名，女15名，年齡4072歲，平均年齡57.72歲，無系統(tǒng)疾病，近一月未服用抗生素，半年內(nèi)未服用激素和免疫制劑。2. 采樣和培養(yǎng)：參照劉正2方法，用生理鹽水沖洗所采樣本的根面，隔濕、消毒，用無菌尖銳挖匙取樣本，放在預(yù)先還原的硫乙醇酸鈉傳送培養(yǎng)基內(nèi)，超聲分散30秒后連

6、續(xù)稀釋至10-5。取各稀釋液50l分別接種于MSMS（變形鏈球菌計(jì)數(shù)用），BYS（放線菌計(jì)數(shù)用）培養(yǎng)器上。在37、90%N2、10%CO2的環(huán)境中培養(yǎng)（變形鏈球菌48小時(shí)，放線菌72小時(shí)）。3. 變形鏈球菌和放線菌的鑒別:根據(jù)菌落形態(tài)挑取MS培養(yǎng)基上的各種菌落，接種于TTY液體培養(yǎng)基中，在37、90%N2、10%CO2的環(huán)境中培養(yǎng)24小時(shí)后按 Mikkelsen的生化試驗(yàn)設(shè)計(jì)，做甘露醇、菊糖、棉子糖、七葉苷和胞外多糖等試驗(yàn)，鑒定出變鏈菌，雖菌落形態(tài)類似而生化反應(yīng)不符者均未計(jì)數(shù)。根據(jù)放線菌的形態(tài)在BYS培養(yǎng)基上挑取菌落做革氏染色涂片，經(jīng)鏡檢確認(rèn)為放線菌后，做葡萄糖、乳糖、蔗糖、阿拉伯糖硝酸還原實(shí)

7、驗(yàn)，以證實(shí)之。最后對30-300CFU的平板計(jì)數(shù)變形鏈球菌、放線菌。4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用兩樣本幾何均數(shù)比較的 t 檢驗(yàn)來進(jìn)行處理。結(jié)果1. 在30例根面齲中，放線菌的檢出率100%，變鏈菌93.33%。2. 根面齲內(nèi)變鏈菌和放線菌CFU的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(見附表)。附表變鏈菌和放線菌在根面齲內(nèi)細(xì)菌數(shù)xtP值變鏈菌5.4389±0.311840.55P<0.01放線菌5.9096±0.1553由表一可見在根面齲中，放線菌與變形鏈球菌相比呈極顯著差異（P0.01）。放線菌為根面齲主要優(yōu)勢菌，而變形鏈球菌之。 討論根面齲致病菌的研究，早期研究著重在放線菌，認(rèn)為該菌與根面齲發(fā)生、

8、發(fā)展相關(guān)，在動物實(shí)驗(yàn)中證實(shí)放線菌引起根面菌齲。80年代中后期，變形鏈球菌在根面齲中的作用也引起人們的重視，大量研究結(jié)果都在報(bào)告變形鏈球菌和放線菌與根面齲的關(guān)系，結(jié)果不盡相同。Ozaki（1994）采用免疫組化法定量分析，認(rèn)為放線菌是根面齲優(yōu)勢菌（約占細(xì)菌總數(shù)的10%左右），根齲深層含量更高；Houte等（1994）對9例根面齲牙本質(zhì)進(jìn)行細(xì)菌學(xué)研究，結(jié)果也支持和強(qiáng)調(diào)了此觀點(diǎn)；Beighton等（1995）的研究發(fā)現(xiàn)，在根齲的感染牙本質(zhì)中存在的細(xì)菌主要是以放線菌為主的革蘭氏陽性多形性桿菌。本研究結(jié)果支持Ozaki等、Houte等、Beighton等的觀點(diǎn)。Keltjens等（1987）對根面齲軟化

9、牙本質(zhì)細(xì)菌學(xué)研究指出，感染牙本質(zhì)中優(yōu)勢菌為鏈球菌，而放線菌次之。劉正等2（1989）對32名釉質(zhì)齲和牙骨質(zhì)齲的主要菌叢研究結(jié)果，無論釉質(zhì)齲或牙骨齲中，鏈球菌均為菌叢中的主要細(xì)菌，特別是變鏈菌數(shù)明顯高于其它細(xì)菌，放線菌無論在釉質(zhì)齲或牙骨質(zhì)齲中所占的百分比均低于變鏈菌。由于各位學(xué)者采樣技術(shù) ,培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境各有不同，得出的根面齲細(xì)菌組成不完全一致，但放線菌、變鏈菌在根面齲發(fā)生和發(fā)展中的作用是多數(shù)學(xué)者公認(rèn)的。本研究資料中有兩例未檢出變鏈菌，可能與取樣深淺部位和根面齲的活動程度有關(guān)，淺層時(shí)變鏈菌數(shù)量相對較多，越接近深層，變形鏈球菌的數(shù)量減少，而放線菌數(shù)量相對較多，根面齲活動性強(qiáng)，變形鏈球菌檢出率高，

10、數(shù)量越多，它與齲的進(jìn)展密切相關(guān)；而放線菌與齲壞進(jìn)展無相關(guān)性。一般認(rèn)為變鏈菌主要與初始齲的發(fā)生有關(guān)，根面齲損層次不同，齲活動程度不同，其細(xì)菌組成均有所不同，它是一個(gè)連續(xù)破壞過程，致病菌組成及作用也有一定連續(xù)性和順序性。通過本試驗(yàn)研究，支持放線菌是根面齲優(yōu)勢菌，變鏈球菌次之的觀點(diǎn)。本研究得到了湖北醫(yī)科大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室熊衛(wèi)星、陳東老師，牙體牙髓科胡林英、唐三寶、張彪等諸位老師的熱情幫助，謹(jǐn)致謝意！作者簡介徐靜舒(1963)，女，云南省人，學(xué)士，副主任醫(yī)師，主要從事牙體牙髓病研究及擔(dān)任臨床工作。徐靜舒（云南省第一人民醫(yī)院，云南昆明650032）李成章（湖北醫(yī)科大學(xué)口腔學(xué)院，湖北武漢430079）樊明文（湖北醫(yī)科大學(xué)口腔學(xué)院，湖北武漢430079）劉寧慧（湖北醫(yī)科大學(xué)口腔學(xué)院，湖北武漢430079）陳文霞（湖北醫(yī)科大學(xué)口腔學(xué)院，湖北武漢430079）熊衛(wèi)星（湖北醫(yī)科大學(xué)口腔學(xué)院，湖北武漢430079）參考文獻(xiàn)1Sumrey DV. Characterization of Bacteria Isolated fr