分子生物學(xué)試題及答案_第1頁
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文檔簡介

1、分子生物學(xué)試題及答案分子生物學(xué)試題及答案一、名詞解釋1. cDNA與 cccDNA cDNA是由mRN軀過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA cccDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形 DNA 2標(biāo)準(zhǔn)折疊單位:蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元a螺旋與P折疊 通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊, 此種確定 的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。 幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以 用這些折疊類型, 乃至他們的組合型來予以描述, 因此又將其 稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。3. CAP 環(huán)腺苷酸(cAMP 受體蛋白 CRP(cAMP receptorprotein ), cAMP與 CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP( cAMP

2、 activated protein )4回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列,常是限制性酶切位點(diǎn)。5micRNA互補(bǔ)干擾RNA或稱反義RNA與mRNA序列互補(bǔ),可抑制mRNA勺翻譯。6核酶:具有催化活性的RNA在RNA的剪接加工過程xx起到自我催化的作用。7. 模體:蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu) xx 存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8. 信號(hào)肽:在蛋白質(zhì)合成過程 xxN 端有 1536 個(gè)氨基酸殘基的肽段,引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9. 弱化子:在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。10. 魔斑:當(dāng)細(xì)菌生長過程 xx ,遇到氨基酸全面缺乏時(shí),細(xì)分子生物學(xué)試題及答

3、案菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng), 停止全部基因的表達(dá)。 產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸(pppGp©)PpGpp與pppGpp的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子,而是影響一大批,所以稱他們是超級(jí)調(diào)控子或稱為魔斑。11上游啟動(dòng)子元件: 是指對(duì)啟動(dòng)子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的DNA序列,-10區(qū)的TATA -35區(qū)的TGAC般增強(qiáng)子,弱化子12. DNA探針:是帶有標(biāo)記的一段已知序列 DNA用以檢測(cè)未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。13. SD序列:是核糖體與mRN曆合序列,對(duì)翻譯起到調(diào)控作用。14. xx 抗體:只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。15. 考斯質(zhì)粒:是

4、經(jīng)過人工構(gòu)建的一種外源 DNA載體,保留噬菌體兩端的COS區(qū),與質(zhì)粒連接構(gòu)成。16. XX-白斑篩選:含LacZ基因(編碼3半乳糖苷酶)該酶 能分解生色底物X-gal(5-溴4 氯-3-吲哚-3 -D-半乳糖苷)產(chǎn) 生XX色,從而使菌株變XX。當(dāng)外源DNA插入后,LacZ基因不 能表達(dá),菌株呈白色,以此來篩選重組細(xì)菌。稱之為 XX- 白斑篩選。17. 順式作用元件:在DNAxx一段特殊的堿基序列,對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用的基因元件。18. Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是從DNA聚合酶I全外切酶活性19.錨定PCR用于擴(kuò)增已知一端序列的目的 DNA在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴

5、,然后分別用多聚dC和已知的酶XX去除了 f分子生物學(xué)試題及答案序列作為引物進(jìn)行pcrT增。20融合蛋白:真核蛋白的基因與外源基因連接,同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。二、填 空1DNA的物理圖譜是DNA分子的(限制性內(nèi)切酶酶解 )片段的排列順序。2RNA酶的剪切分為(自體催化 )、(異體催化)兩種類型。3原核生物 xx 有三種起始因子分別是( IF-1 )、( IF-2 )和( IF-3 )。4蛋白質(zhì)的跨膜需要( 信號(hào)肽 )的引導(dǎo),蛋白伴侶的作用是(輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì))。5.啟動(dòng)子 XX 的元件通??梢苑譃閮煞N:(核心啟動(dòng)子元件)和(上游啟動(dòng)子元件

6、)。6分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含 (結(jié)構(gòu)分子生物學(xué) )、(基因表達(dá)與調(diào)控 )、(DNA重組技術(shù))三部分。7.證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是(肺炎球菌感染小鼠T2噬菌體感染大腸桿菌 )這兩個(gè)實(shí)驗(yàn) xx 主要的論點(diǎn)證據(jù)是:(生物體吸收的外源DNA改變了其遺傳潛能)。8 hnRNA與 mRN之間的差別主要有兩點(diǎn):(hnRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)?mRN的過程xx經(jīng)過剪接,)、(mRNA勺5末端被加上一個(gè) m7pGpp帽子,在mRNA3末端多了一個(gè)多聚腺苷酸 (polyA) 尾巴)。9.蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點(diǎn)是(亞基對(duì)DNA的利用來說是一種經(jīng)濟(jì)的方 XX )、可以減少蛋白質(zhì)合成過程 xx 隨機(jī)的錯(cuò)誤對(duì)蛋

7、白質(zhì)活性的影響)、 (活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉)。10.蛋白質(zhì)折疊機(jī)制首先成核理論的主要內(nèi)容包括(成核 )、(結(jié)構(gòu)充實(shí))、最后重排)。分子生物學(xué)試題及答案11.半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用;一方面(可以作為碳源供細(xì)胞生長 );另一方 面(它又是細(xì)胞壁的成分 )。所以需要一個(gè)不依賴于 CAMP CRR的啟動(dòng)子S2進(jìn)行本底水平的永久型合成;同時(shí)需要一個(gè)依賴于CAMP-CRP勺啟動(dòng)子S1對(duì)XX 合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。有G時(shí)轉(zhuǎn)錄從(S2 )開始,無G時(shí)轉(zhuǎn)錄從(S1 )開始。12. DNA重組技術(shù)也稱為(基因XX)或(分子XX )。最終目的是(把一個(gè)生物 體XX的遺傳信息DNA專入另一個(gè)生物體)。典型的

8、 DNA®組實(shí)驗(yàn)通常包含以下幾個(gè)步驟: 提取供體生物的目的基因(或稱外源基因),酶接連接到另一 DNA分子上(XX載體),形成一個(gè)新的重組DNA分子。 將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞 XX復(fù)制保存,這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。 對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。 對(duì)含有重組DNA勺細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng),檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。13、質(zhì)粒的復(fù)制類型有兩種:受到宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的嚴(yán)格控制的稱為(嚴(yán)緊型質(zhì)粒 ),不受宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的嚴(yán)格控制稱為( 松弛型質(zhì)粒 )。14. PCR勺反應(yīng)體系要具有以下條件:a、被分離的目的基因兩條鏈各一端序列相互補(bǔ)的DNA引物(約20個(gè)堿基左

9、右)。b具有熱穩(wěn)定性的酶如:TagDNA聚合酶。C、dNTP d作為模板的目的DNA序列)三個(gè)階段。XX;15. PCR勺基本反應(yīng)過程包括:(變性)、(退火)、(延伸 16、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本過程通常包括:將 XX 的外源基因?qū)氲揭粋€(gè)受精卵或胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞核 接種后的受精卵或胚胎干細(xì)胞移植到雌性的 XX;完成胚胎發(fā)育,生長為后代并帶有外源基因;分子生物學(xué)試題及答案利用這些能產(chǎn)生外源蛋白的動(dòng)物作為種畜,培育新的純合系。17雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生是由(脾B)細(xì)胞與(骨髓瘤)細(xì)胞雜交產(chǎn)生的,由于(脾細(xì)胞)可以利用次黃嘌呤,(骨細(xì)胞 )提供細(xì)胞分裂功能,所以能在HAT培養(yǎng)基XX生長。18隨著研究的深入第

10、一代抗體稱為多 XX 抗體)、第二代( XX 抗體)、第三代(基因工程抗體 )。19.目前對(duì)昆蟲病毒的基因工程改造主要集 XX 于桿狀病毒,表現(xiàn)在引入(外源 毒蛋白基因 );( 擾亂昆蟲正常生活周期的基因 );( 對(duì)病毒基因進(jìn)行修 飾 )。20. 哺乳類RNA聚合酶n啟動(dòng)子XX常見的元件TATA GC CAAT所對(duì)應(yīng)的反式作用蛋白因子分別是( TFIID )、( SP-1 )和( CTF/NF1 )。21. RNA聚合酶n的基本轉(zhuǎn)錄因子有、TFn -A、TFn -B、TFII-D、TFn -E他們的結(jié)合順序是:(D、A、B、E )。其xxTFII-D的功能是(與TATA盒結(jié)合)。22. 與DN

11、A結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子大多以二聚體形式起作用,轉(zhuǎn)錄因子與DNA吉合的功能域常見有以下幾種( 螺旋-轉(zhuǎn)角- 螺旋 )、( 鋅指模體 )、(堿性 - 亮氨酸拉鏈模體 )。23限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是在對(duì)稱軸 5' 側(cè)切割產(chǎn)生 5' 粘端 )、(在對(duì)稱軸 3' 側(cè)切割產(chǎn)生 3' 粘端)在對(duì)稱軸處切割產(chǎn)生平段)。24.質(zhì)粒DNA具有三種不同的構(gòu)型分別是:SC 構(gòu)型 )、( oc 構(gòu)型 )、( L構(gòu)型)。在電泳XX最前面的是(SC構(gòu)型)。25.外源基因表達(dá)系統(tǒng),主要有(大腸桿菌)、( 酵母)、( 昆蟲 )和( 哺乳類細(xì)胞表 )。26.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的方XX有:(逆

12、轉(zhuǎn)錄病毒感染XX)、(DNA顯微注射xx)、胚胎干細(xì)胞 XX )。分子生物學(xué)試題及答案三、簡 答1. 分別說出5種以上RNA勺功能?轉(zhuǎn)運(yùn)RNA tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸;核蛋白體RNA rRNA核蛋白體組成成;信使RNA mRNAg白質(zhì)合成模板 ;不均一核RNAhnRNA成熟mRN勺前體;小核RNA5nRNA 參與hnRNA勺剪接;小胞漿RNA scRNA/7SL-RNAg白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號(hào)識(shí)別體的組成成分;反義 RNA an RNA/micRNA寸基因的表達(dá)起調(diào)節(jié)作用;核酶Ribozyme RNA 有酶活性勺 RNA2. 原核生物與真核生物啟動(dòng)子的主要差別?原核生物TTGACA - TATA

13、AT 起始位點(diǎn)-35 -10真核生物增強(qiáng)子-GC -CAATTATAA 5mGpp 起始位點(diǎn)-110 -70 -253. 寸天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面?天然質(zhì)粒往往存在著缺陷,因而不適合用作基因工程的載體,必須寸之進(jìn)行改 造構(gòu)建:a、加入合適的選擇標(biāo)記基因,如兩個(gè)以上,易于用作選擇 , 通常是抗生素基因。b、增加或減少合適的酶切位點(diǎn),便于重組。c、d、改變復(fù)制子,變嚴(yán)緊為松弛,變少拷貝為多拷貝。e、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件縮短XX,切去不必要的片段,提高導(dǎo)入效率,增加裝載量。4. 舉例說明差示篩選組織特異 cDNA的方XX ?制備兩種細(xì)胞群體,目的基因在其 XX 一種

14、細(xì)胞XX表達(dá)或高表達(dá),在另一種細(xì) 胞 xx 不表達(dá)或低表達(dá),然后通過雜交寸比找到目的基因。分子生物學(xué)試題及答案例如:在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程 XX,腫瘤細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)與正常細(xì)胞表達(dá)水平不同的 mRN,A 因此,可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關(guān)的基因。也可利用誘導(dǎo)的方XX,篩選出誘導(dǎo)表達(dá)的基因。5雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選?脾B細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞,加聚乙二醇(PEG促進(jìn)細(xì)胞融合,HAT培養(yǎng)基XX培養(yǎng)(內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T)生長出來的脾B-骨髓瘤融合細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。細(xì)胞融合物 XX 包含: 脾-脾融合細(xì)胞:不能生長,脾細(xì)胞不能體外培養(yǎng)。骨-骨融合細(xì)胞:不能利用次黃嘌呤,但可通過第二途徑利用葉酸還原酶合

15、成 嘌呤。氨基蝶呤對(duì)葉酸還原酶有抑制作用,因此不能生長。骨-脾融合細(xì)胞:在HATxx能生長,脾細(xì)胞可以利用次黃嘌呤,骨細(xì)胞提供細(xì)胞 分裂功能。6、利用雙脫氧末端終止XX (Sangerxx)測(cè)定DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的原理與方xx ? 原理是采用核苷酸鏈終止劑一2,3,-雙脫氧核苷酸終止DNA的延長。由于它 缺少形成3151磷酸二脂鍵所需要的3-0H, 旦參入到DNA鏈XX,此DNA鏈就不 能進(jìn)一步延長。根據(jù)堿基配對(duì)原則,每當(dāng) DNA聚合酶需要dNMP參入到正常延長的DNA鏈XX時(shí),就有兩種可能性,一是參入ddNTP,結(jié)果導(dǎo)致脫氧核苷酸鏈延長 的終止;二是參入dNTP,使DNA鏈仍可繼續(xù)延長,直至參入

16、下一個(gè) ddNTP根據(jù)這一方XX,就可得到一組以ddNTP結(jié)尾的長短不一的DNA片段。方XX是分成四組分別為ddAMP ddGMP ddCMP ddTMP反應(yīng)后,聚丙烯酰胺凝膠電泳按泳帶可讀出DNA序列。7、激活蛋白(CAP對(duì)轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用?。當(dāng)大腸桿菌環(huán)腺苷酸(cAMP 受體蛋白 CRP(cAMPreceptor protein ) , cAMP與 CRF結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白 CAP(cAMPactivated protein生長在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基XX時(shí),CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)分子生物學(xué)試題及答案等啟動(dòng)子的功能。一些依賴于CRP的啟動(dòng)子缺乏一般啟動(dòng)子所具

17、有的典型的-35 區(qū)序列特征(TTGACA。因此RNA聚合酶難以與其結(jié)合。CAP的存在(功能):能顯著提高酶與啟動(dòng)子結(jié)合常數(shù)。主要表現(xiàn)以下二方面:CAP通過改變啟動(dòng)子的構(gòu)象以及與酶的相互作用幫助酶分子正確定向,以便與-10 區(qū)結(jié)合,起到取代 -35 區(qū)功能的作用。CAP還能抑制RNA聚合酶與DNAxx其它位點(diǎn)的結(jié)合,從而提高與其特定啟動(dòng)子 結(jié)合的概率。8典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包括哪些步驟?a、提取供體生物的目的基因(或稱外源基因),酶接連接到另一 DNA分子上(XX載體),形成一個(gè)新的重組DNA分子。b將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞 XX復(fù)制保存,這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。C、對(duì)那些吸

18、收了重組 DNA勺受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。d對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng),檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。9、基因文庫的構(gòu)建對(duì)重組子的篩選舉出 3 種方 XX 并簡述過程。抗生素抗性篩選、抗性的插入失活、XX-白斑篩選 或PCR篩選、差式篩選、DNA 探針 多數(shù) XX 載體均帶有抗生素抗性基因(抗氨芐青霉素、四環(huán)素)。當(dāng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大 腸桿菌 XX 后,該菌便獲得抗性,沒有轉(zhuǎn)入的不具有抗性。但不能區(qū)分是否已重 組。在含有兩個(gè)抗性基因的載體XX,如果外源DNA片段插入其XX 一個(gè)基因并導(dǎo)致該如pUC質(zhì)基因失活,就可用兩個(gè)分別含不同藥物的平板對(duì)照篩選陽性重組子。粒含LacZ基因(編碼P半乳糖苷酶)該酶能分

19、解生色底物X-gal(5-溴4氯-3- 吲哚-P -D-半乳糖苷)產(chǎn)生藍(lán)色,從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源 DNA®入后,LacZ基因不能表達(dá),菌株呈白色,以此來篩選重組細(xì)菌。分子生物學(xué)試題及答案10、說明通過胚胎干細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本過程?胚胎干細(xì)胞( embryonic stem cell,ES ):是胚胎發(fā)育期的胚細(xì)胞,可以人工 培養(yǎng)增殖并具有分化成其它類型細(xì)胞的功能。ES細(xì)胞的培養(yǎng):分離胚泡的內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)。 ES在無飼養(yǎng)層xx培養(yǎng)時(shí)會(huì)分化為肌細(xì)胞、N細(xì)胞等多種功能細(xì)胞,在含有成纖維細(xì)胞 xx培養(yǎng)時(shí)ES將保持分化功能??梢詫?duì)ES進(jìn)行基因操作,不影響它的分化功能可以定點(diǎn)整合,解

20、決了隨機(jī)整合的問題。向胚胎干細(xì)胞導(dǎo)入外源基因,然后植入到待孕雌鼠xx,發(fā)育成幼鼠,雜交獲得純合鼠。蛋白質(zhì)的生物合成(一) 名詞解釋1. 翻譯(translation):以mRN為模板,氨酰-tRNA為原料直接供體,在多種蛋白質(zhì)因子和酶的參與下,在核糖體上將 mRN分子上的核苷酸順序表達(dá)為有特定氨基酸順序的蛋白質(zhì)的過程。2. 密碼子(codon) : mRNAx堿基順序與蛋白質(zhì)xx氨基酸順序的對(duì)應(yīng)關(guān)系是通過密碼實(shí)現(xiàn)的,mRNAxX每三個(gè)相鄰的堿基決定一個(gè)氨基酸, 這三個(gè)相鄰的堿基稱為一個(gè)密碼子。3.密碼的簡并性 (degeneracy) :個(gè)氨基酸具有兩個(gè)以上密碼子的現(xiàn)象。4.同義密碼子 (sy

21、nonym codon):為同種氨基酸編碼的各個(gè)密碼子,稱為同義密碼了。5. 變偶假說 (wobble hypothesis):指反密碼子的前兩個(gè)堿基 (- 端)按照分子生物學(xué)試題及答案標(biāo)準(zhǔn)與密碼子的前兩個(gè)堿基 (- 端)配對(duì),而反密碼子中的第三個(gè)堿墓則有某種程 度的變動(dòng),使其有可能與幾種不同的堿基配對(duì)。6. 移碼突變 (frame-shift mutation) :在 mRNAx,x 若插入或刪去一個(gè)核 苷酸,就會(huì)使讀碼發(fā)錯(cuò)誤,稱為移碼,由于移碼而造成的突變、稱移碼突變。7,同功受體(isoacceptor):轉(zhuǎn)運(yùn)同一種氨基酸的幾種tRNA稱為同功受體。8反密碼子(anticodon):指t

22、RNA反密碼子環(huán)中的三個(gè)核苷酸的序列,在蛋白質(zhì)合成過程中通過堿基配對(duì),識(shí)別并結(jié)合到mRNA勺特殊密碼上。9.多核糖體(polysome) : mRN同時(shí)與若干個(gè)核糖體結(jié)合形成的念珠狀結(jié)構(gòu),稱為多核糖體。(二)問答題1.參與蛋白質(zhì)生物合成體系的組分有哪些 ?它們具有什么功能 ?mRNA蛋白質(zhì)合成的模板;tRNA蛋白質(zhì)合成的氨基酸運(yùn)載工具; 核糖體:蛋白質(zhì)合成的場所;輔助因子:(a)起始因子一-參與蛋白質(zhì)合成起 始復(fù)合物形成; (b) 延長因子 - 肽鏈的延伸作用; (c) 釋放因子一 - 終止肽鏈 合成并從核糖體上釋放出來。2. 遺傳密碼是如何破譯的 ?提示:三個(gè)突破性工作 (1) 體外翻譯系統(tǒng)

23、的建立; (2) 核糖體結(jié)合技術(shù);(3) 核酸的人工合成。xx 。增加3. 遺傳密碼有什么特點(diǎn) ?(1) 密碼無標(biāo)點(diǎn):從起始密碼始到終止密碼止,需連續(xù)閱讀,不可分子生物學(xué)試題及答案或刪除某個(gè)核苷酸會(huì)發(fā)生移碼突變。(2) 密碼不重疊:組成一個(gè)密碼的三個(gè)核苷酸只代表一個(gè)氨基酸,只使用一 次,不重疊使用。(3) 密碼的簡并性:在密碼子表中,除 Met、Trp 各對(duì)應(yīng)一個(gè)密碼外,其余 氨基酸均有兩個(gè)以上的密碼,對(duì)保持生物遺傳的穩(wěn)定性具有重要意義。(4) 變偶假說:密碼的專一性主要由頭兩位堿基決定,第三位堿基重要性不 大,因此在與反密碼子的相互作用中具有一定的靈活性。(5) 通用性及例外:地球上的一切生

24、物都使用同一套遺傳密碼,但近年來已 發(fā)現(xiàn)某些個(gè)別例外現(xiàn)象,如某些哺乳動(dòng)物線粒體中的 UGA不是終止密碼而是色氨酸密碼子。(6) 起始密碼子AUG同時(shí)也代表Met,終止密碼子UAA UAG UGA使用頻率不同。4. 簡述三種RNA在蛋白質(zhì)生物合成中的作用。(1) mRNA DNA的遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄作用傳遞給 mRNAmRN作為蛋白質(zhì)合成模板,傳遞遺傳信息,指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成。tRNA :蛋白質(zhì)合成中氨基酸運(yùn)載工具,tRNA的反密碼子與mRN上的密 碼子相互作用,使分子中的遺傳信息轉(zhuǎn)換成蛋白質(zhì)的氨基酸順序是遺傳信息的 轉(zhuǎn)換器。(3)rRNA 核糖體的組分,在形成核糖體的結(jié)構(gòu)和功能上起重要作用,它與 核

25、糖體中蛋白質(zhì)以及其它輔助因子一起提供了翻譯過程所需的全部酶活性。5. 簡述核糖體的活性中心的二位點(diǎn)模型及三位點(diǎn)模型的內(nèi)容。分子生物學(xué)試題及答案(1)二位點(diǎn)模型A 位:氨酰-tRNA進(jìn)入并結(jié)合的部位;P位:起始氨酰-tRNA 或正在延伸的肽基-tRNA結(jié)合部位,也是無載的tRNA從核糖體上離開的部位。(2) 三位點(diǎn)模型大腸桿菌上的70S核糖體上除A位和P位外,還存在第三個(gè)結(jié) 合tRNA的位點(diǎn),稱為E位,它特異地結(jié)合無負(fù)載的tRNA及無負(fù)載的tRNA最后 從核糖體上離開的位點(diǎn)。6氨基酸在蛋白質(zhì)合成過程中是怎樣被活化的催化氨基酸活化的酶稱氨酰-tRNA合成酶,形成氨酰-tRNA,反應(yīng)分兩步進(jìn) 行:(

26、1) 活化需Mg2+和Mn2+由ATP供能,由合成酶催化,生成氨基酸-AMP-(2) 轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物。在合成酶催化下將氨基酸從氨基酸一AMP-酶復(fù)合物XX轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的 tRNAxx,形成氨酰 -tRNA。7簡述蛋白質(zhì)生物合成過程。蛋白質(zhì)合成可分四個(gè)步驟,以大腸桿菌為例:(1) 氨基酸的活化:游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參與蛋白質(zhì)合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP形成氨酰-tRNA。 肽鏈合成的起始:由起始因子參與,mRN與30S小亞基、50S大亞基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始復(fù)合物,整個(gè)過程需 GTP水解提供能量。(3) 肽鏈的延長

27、:起始復(fù)合物形成后肽鏈即開始延長。首先氨酰-tRNA結(jié)合到核糖體的A位,然后,由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化與 P位的起始氨基酸或肽?;纬呻逆I,tRNAf或空載tRNA仍留在P位.最后核糖體沿mRNA方向移動(dòng)一個(gè)密分子生物學(xué)試題及答案碼子距離,A位上的延長一個(gè)氨基酸單位的肽酰-tRNA轉(zhuǎn)移到P位,全部過程需 延伸因子EF-Tu、EF-Ts,能量由GTP提供。 肽鏈合成終止,當(dāng)核糖體移至終止密碼 UAA UAG或 UGA寸,終止因子RF-1、RF-2識(shí)別終止密碼,并使肽酰轉(zhuǎn)移酶活性轉(zhuǎn)為水解作用,將P位肽酰-tRNA水解,釋放肽鏈,合成終止。8蛋白質(zhì)合成中如何保證其翻譯的正確性 ?提示:(1)氨基酸與tRNA

28、的專一結(jié)合,保證了 tRNA攜帶正確的氨基酸;攜帶氨基酸的tRNA對(duì)mRNA勺識(shí)別,mRN上的密碼子與tRNA上的反密碼子的相 互識(shí)別,保證了遺傳信息準(zhǔn)確無誤地轉(zhuǎn)譯; (3) 起始因子及延長因子的作用,起 始因子保證了只有起始氨酰-tRNA能進(jìn)入核糖體P位與起始密碼子結(jié)合,延伸因 子的高度專一性,保證了起始tRNA攜帶的fMet不進(jìn)入肽鏈內(nèi)部; 核糖體三 位點(diǎn)模型的E位與A位的相互影響,可以防止不正確的氨酰-tRNA進(jìn)入A位,從 而提高翻譯的正確性;(5)校正作用:氨酰-tRNA合成酶和tRNA的校正作用;對(duì) 占據(jù)核糖體A位的氨酰-tRNA的校對(duì);變異校對(duì)即基因內(nèi)校對(duì)與基因間校對(duì)等多 種校正作

29、用可以保證翻譯的正確。9原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在合成蛋白質(zhì)的起始過程有什么區(qū)別。(1) 起始因子不同:原核為 IF-1 , IF-2 , IF-2 ,真核起始因子達(dá)十幾種。 起始氨酰-tRNA不同:原核為fMet-tRNAf,真核Met-tRNAi 核糖體不同:原核為70S核粒體,可分為30S和50S兩種亞基,真核為80S核糖體,分40S和60S兩種亞基10蛋白質(zhì)合成后的加工修飾有哪些內(nèi)容 ?分子生物學(xué)試題及答案提示: (1) 水解修飾; (2) 肽鍵中氨基酸殘基側(cè)鏈的修飾; (3) 二硫鍵的形成;(4) 輔基的連接及亞基的聚合。11蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)是怎樣形成的 ?提示:蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)是由氨基酸

30、的順序決定的,不同的蛋白質(zhì)有不同 的氨基酸順序,各自按一定的方式折疊而成該蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)。折疊是在自 然條件下自發(fā)進(jìn)行的,在生理?xiàng)l件下,它是熱力學(xué)上最穩(wěn)定的形式,同時(shí)離不 開環(huán)境因素對(duì)它的影響。對(duì)于具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),其亞基可以由一個(gè)基因 編碼的相同肽鏈組成,也可以由不同肽鏈組成,不同肽鏈可以通過一條肽鏈加 工剪切形成,或由幾個(gè)不同單順反子 mRNA羽譯,或由多順反子 mRN翻譯合成。12真核細(xì)胞與原核細(xì)胞核糖體組成有什么不同 ?如何證明核糖體是蛋白質(zhì)的合成場所 ?原核細(xì)胞:70S核糖體由30S和50S兩個(gè)亞基組成;真核細(xì)胞:80S核糖體 由40S和60S兩個(gè)亞基組成。利用放射性同位素標(biāo)記

31、法,通過核糖體的分離證 明之。13. 已知一種突變的噬菌體蛋白是由于單個(gè)核苷酸插入引起的移碼突變 的,將正常的蛋白質(zhì)和突變體蛋白質(zhì)用胰蛋白酶消化后,進(jìn)行指紋圖分析。結(jié) 果發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)肽段的差異,測(cè)得其基酸順序如下:正常肽段 Met-Val-Cys-Val-Arg突變體肽段 Met-Ala-Met-Arg1)什么核苷酸插入到什么地方導(dǎo)致了氨基酸順序的改變? 2)推導(dǎo)出編碼正常肽段和突變體肽段的核苷酸序列分子生物學(xué)試題及答案提示:有關(guān)氨基酸的簡并密碼分別為Vai: GUU GUC GUA GUGArg: CGU CGC CGA CG AGA AGGCys: UGU UGC: GCU GCC GCA

32、 CGC提示:(1)在正常肽段的第一個(gè)Vai的密碼GUA勺G后插入了一個(gè)C ;(2) 正 常肽段的核苷酸序列為:AUGGUAUG03U- CG;突變體肽段的核苷酸序列為:AUG GCU AUG CGU14.試列表比較核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。核酸(Nucleic acids )蛋白質(zhì)(Proteins )DNARNA一級(jí)結(jié)構(gòu)P rimary structure核苷酸序列AGTTCT或AGUUCU的排列順序3, 5,-磷酸二酯鍵氨基酸排列順序 肽鍵二級(jí)結(jié)構(gòu)Secon darystructure雙螺旋主要是氫鍵,堿基堆積力配對(duì)(莖-環(huán)結(jié)構(gòu)) (同左)有規(guī)則重復(fù)的構(gòu)象(a -helix ,3 sheet

33、, 3 -turn ) 氫鍵三級(jí)結(jié)構(gòu)Tertiary structure超螺旋RNA空間構(gòu)象一條肽鏈的空間構(gòu) 象范德華力氫鍵 疏水作用鹽橋二 硫鍵等四級(jí)結(jié)構(gòu)Quater narystructure多條肽鏈(或不冋蛋白)15.試比較原核生物與真核生物的翻譯。原核生物與真核生物的翻譯比較如下:僅述真核生物的,原核生物與此相反。(1).起始Met不需甲酰化;(2).無SD序列,但需要一個(gè)掃描過程;(3).tRNA先于mRNAT核糖體小亞基結(jié)合;(4).起始因子比較多;(5).只一個(gè)終止釋 放因子。分子生物學(xué)試題及答案(三)填空題1蛋白質(zhì)的生物合成是以 mRNA為模板,以 氨酰-tRNA 為原料直接供

34、體,以 _核糖體為合成 xx 所。2生物界共有64個(gè)密碼子,其中61_個(gè)為氨基酸編碼,起始密碼子為 _AUG;終止密碼子為UAA _、_ UAG _、UGA_。3.原核生物的起始tRNA以 tRNAf表示,真核生物的起始 tRNAl0 每形成一個(gè)肽鍵要消耗4個(gè)高能磷酸鍵,但在合成起始時(shí)還需tRNAi _ 表示,延伸中的甲硫氨酰tRNA以_ tRNAm _表示。4植物細(xì)胞中蛋白質(zhì)生物合成可在核糖體線粒體 和xx三種細(xì)胞器內(nèi)進(jìn)行。5.延長因子T由Tu和Ts兩個(gè)亞基組成,Tu為對(duì)熱 _不穩(wěn)定_蛋白質(zhì),Ts 為對(duì)熱_ 穩(wěn)定_蛋白質(zhì)。6.原核生物中的釋放因子有三種,其中RF-1識(shí)別終止密碼子UAAUAG

35、;_ RF-2 識(shí)別UAAUGA;_真核中的釋放因子只有RF一種。7 .氨酰-tRNA合成酶對(duì)氨基酸和相應(yīng)的 _tRNA有高度的選擇性。8原核細(xì)胞的起始氨基酸是 甲酰甲硫氨酸,起始氨酰-tRNA是 甲酰甲硫氨酰 -tRNA_。9原核細(xì)胞核糖體的小_亞基上的 _16SrRNA協(xié)助辨認(rèn)起始密碼子。分子生物學(xué)試題及答案分子生物學(xué)試題及答案多消耗1個(gè)高能磷酸鍵。11肽基轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)生物合成中的作用是催化肽鍵形成和肽酰-tRNA的水解。12肽鏈合成終止時(shí), _終止因子進(jìn)人“A”位,識(shí)別出終止密碼子,同時(shí)終止因子使 _肽基轉(zhuǎn)移酶的催化作用轉(zhuǎn)變?yōu)樗庾饔?3原核生物的核糖體由30S_小亞基和 50S大亞基

36、組成,真核生物核糖體由 _40S小亞基和60S大亞基組成。14. 蛋白質(zhì)中可進(jìn)行磷酸化修飾的氨基酸殘基主要為SerThrTyr(四)選擇題1蛋白質(zhì)生物合成的方向是 ( )。從CN端定點(diǎn)雙向進(jìn)行從N端、C端同時(shí)進(jìn)行 從NHC端2不能合成蛋白質(zhì)的細(xì)胞器是線粒體XX高爾基體核糖體3真核生物的延伸因子是 ( ) 。 EF Tu EF 一 2 EF- G EF一 14真核生物的釋放因子是 ( ) 。 RF RF一 1 RF 一 2 RF 35.能與tRNA反密碼子中的I堿基配對(duì)的是()。 A、GC UUU C A6蛋白質(zhì)合成所需能量來自 ( ) 。 ATP GTP ATR GTP GTP7. tRNA的

37、作用是()。將一個(gè)氨基酸連接到另一個(gè)氨基酸上把氨基酸帶到mRN位置上 將mRN接到核糖體上增加氨基酸的有效濃度8關(guān)于核糖體的移位,敘述正確的是 ( ) ??蛰dtRNA的脫落發(fā)生在“ A”位上 核糖體沿mRNA勺7方向相對(duì)移動(dòng)核糖體沿mRNA勺7方向相對(duì)移動(dòng)核糖體在mRNAx一次移動(dòng)的距離相當(dāng)于二個(gè)核苷酸的 XX9在蛋白質(zhì)合成中,下列哪一步不需要消耗高能磷酸鍵 ( ) 。肽基轉(zhuǎn)移酶形成肽鍵氨酰一 tRNA與核糖體的“ A,'位點(diǎn)結(jié)合核糖體沿mRN移動(dòng) fMet tRNAf與mRNA勺起始密碼子結(jié)合以及與大、小亞基的結(jié)合10在真核細(xì)胞中肽鏈合成的終止原因是 ( ) 。已達(dá)到mRN分子的盡頭

38、 具有特異的tRNA識(shí)別終止密碼子分子生物學(xué)試題及答案終止密碼子本身具有酯酶作用,可水解肽酰與tRNA之是的酯鍵終止密碼子被終止因子 (RF) 所識(shí)別11蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是 ( ) 。 UAAUAUUACUAGUGA12. 根據(jù)擺動(dòng)假說,當(dāng)tRNA反密碼子第1位堿基是I時(shí),能夠識(shí)別哪幾種密碼子 ( )ACGTU13下列哪些因子是真核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子 ( ) 。 IF1 IF2 elF2 elF4 elF14蛋白質(zhì)生物合成具有下列哪些特征 ( ) 。氨基酸必須活化 需要消耗能量 每延長一個(gè)氨基酸必須經(jīng)過進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位、稅落四個(gè)步驟合成肽鏈由C端向N端不斷延長 新生 肽鏈需加工

39、才能成為活性蛋白質(zhì)15下列哪些內(nèi)容屬于蛋白質(zhì)合成后的加工、修飾 ( ) 。切除XX,連接外顯子切除信號(hào)肽切除N-端Met形成二硫鍵氨的側(cè)鏈修飾16蛋白質(zhì)生物合成過程中,下列哪些步驟需要消耗能量 ( ) 。氨基酸分子的活化70S起始復(fù)合物的形成氨酰tRNA進(jìn)入核糖分子生物學(xué)試題及答案 肽鍵形成 核糖體移位17原核生物的肽鏈延伸過程有下列哪些物質(zhì)參與 ( ) 。肽基轉(zhuǎn)移酶鳥苷三磷酸 mRNA甲酰甲硫氨酰-tRNA EF-Tu、EF-Ts、EF-G18.Shine-Dalgarno 順序(SD-順序)是指:()在mRNA分子的起始碼上游8-13個(gè)核苷酸處的順序 在DNA分子上轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)前8-13個(gè)核

40、苷酸處的順序16srRNA3'端富含嘧啶的互補(bǔ)順序啟動(dòng)基因的順序特征以上都正確19. 在研究蛋白合成中 , 可利用嘌呤霉素 ,這是因?yàn)樗?: ( )使大小亞基解聚使肽鏈提前釋放抑制氨基酰-tRNA合成酶活性防止多核糖體形成以上都正確20. 氨基酸活化酶: ( )活化氨基酸的氨基利用 GTP乍為活化氨基酸的能量來源 催化在tRNA的磷酸與相應(yīng)氨基酸間形成酯鍵每一種酶特異地作用于一種氨基酸及相應(yīng)的tRNA以上都不正確(五)是非題1. DNA不僅決定遺傳性狀,而且還直接表現(xiàn)遺傳性狀。(X )2. 密碼子在mRNAt的閱讀方向?yàn)?。( V )3. 每一種氨基酸都有兩種以上密碼子。(X )V )

41、分子生物學(xué)試題及答案4.一種tRNA只能識(shí)別一種密碼子。(X )5.線粒體和 xx 的核糖體的亞基組成與原核生物類似。 (6大腸桿菌的核糖體的小亞基必須在大亞基存在時(shí),才能與mRN結(jié)合。7.大腸桿菌的核糖體的大亞基必須在 xx 存在時(shí),才能與mRN結(jié)合。8在大腸桿菌中,一種氨基酸只對(duì)應(yīng)于一種氨酰 -tRNA合成酶。9.氨基酸活化時(shí),在氨酰-tRNA合成酶的催化下,由ATP供能,消耗個(gè)高能磷酸鍵。 ( X )10.線粒體和 xx 內(nèi)的蛋白質(zhì)生物合成起始與原核生物相同。 (11.每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對(duì)應(yīng)。(X )12. AU哉可作為fMet-tRNAf和Met-tRNAi的密碼子

42、,又可作為肽鏈內(nèi)部Met的密碼子。(V )13.構(gòu)成密碼子和反密碼子的堿基都只是A、 U、C、G。 ( X )14.核糖體大小亞基的結(jié)合和分離與 Mg2+的濃度有關(guān)。(V15.核糖體的活性中心“ A”位和“ P'位都主要在大亞基上。(16. E.colixx , DnaA與復(fù)制起始區(qū)DNA結(jié)合,決定復(fù)制的起始。核酸的生物合成分子生物學(xué)試題及答案(一) 名詞解釋1中心法則(central dogma):生物體遺傳信息流動(dòng)途徑。最初由Crick(1958):親代雙鏈提出,經(jīng)后人的不斷補(bǔ)充和修改,現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和 RNA復(fù)制等內(nèi)容。2半保留復(fù)制 ( 簡稱復(fù)制 ) (semiconservati

43、ve replication)DNA以每條鏈為模板,按堿基配對(duì)原則各合成一條互補(bǔ)鏈, 這樣一條親代DNA雙 螺旋,形成兩條完全相同的子代 DNA螺旋,子代DNA分子中都有一條合成的新”鏈和一條來自親代的舊鏈,稱為半保留復(fù)制。3. DNA聚合酶(DNApolymerase):指以脫氧核苷三磷酸為底物,按方向合成DNA勺一類酶,反應(yīng)條件:4種脫氧核苷三磷酸、Mg+模板、引物。DNA聚合酶是多功能酶,除具有聚合作用外,還具有其它功能,不同DNA聚合酶所具有的功能不同。4. 解旋酶(helicase):是一類通過水解ATP提供能量,使DNA雙螺旋兩條鏈分開的酶,每解開一對(duì)堿基,水解 2分子 ATP。5

44、. 拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase):是一類引起DNA拓?fù)洚悩?gòu)反應(yīng)的酶,分為兩類:類型I的酶能使DNA勺一條鏈發(fā)生斷裂和再連接,反應(yīng)無需供給能量, 類型n的酶能使DNA勺兩條鏈同時(shí)發(fā)生斷裂和再連接,當(dāng)它引入超螺旋時(shí),需 要由ATP供給能量。6. 單鏈 DNA吉合蛋白(single-strandbinding protein ,SSB) :是一類 特異性和單鏈區(qū)DNA吉合的蛋白質(zhì)。它的功能在于穩(wěn)定 DNA解開的單鏈,阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈部分不被核酸酶降解。7. DNA連接酶(DNA ligase):是專門催化雙鏈 DNAxx缺口共價(jià)連接的酶,不能催化兩條游離的單鏈DNA鏈間形成磷酸二酯鍵。

45、反應(yīng)需要能量。分子生物學(xué)試題及答案8引物酶及引發(fā)體(Primase & primosome):以DNA為模板,以核糖核苷酸為底物,在DNA合成中,催化形成RNA引物的酶稱為引物酶及引物體。大腸形成一個(gè)復(fù)合體,桿菌的引物酶單獨(dú)沒有活性,只有與其它蛋白質(zhì)結(jié)合在一起,即引發(fā)體才有生物活性。9復(fù)制叉 (replication fork):復(fù)制中的DNA分子,末復(fù)制的部分是親代雙螺旋,而復(fù)制好的部分是分開的,由兩個(gè)子代雙螺旋組成,復(fù)制正在進(jìn)行的部分呈丫狀叫做復(fù)制叉。10.復(fù)制眼0結(jié)構(gòu):在一段DNAxx正在復(fù)制的部分形成眼狀結(jié)構(gòu)。復(fù)制眼在環(huán)狀DNAxx形成的結(jié)構(gòu)與希臘字母0相象,所以叫0結(jié)構(gòu)。11

46、. 前導(dǎo)鏈(1eading strand):在DNAM制過程中,以親代鏈(宀 為模板 時(shí),子代鏈的合成(T )是連續(xù)的.這條能連續(xù)合成的鏈稱前導(dǎo)鏈。12. xx 片段(Okazaki fragment)、后隨鏈(1agging strand):在 DNA復(fù)制過程中,以親代鏈(T)為模板時(shí),子代鏈的合成不能以T 方向進(jìn)行,而是按方向合成出許多小片段,因?yàn)槭?xx 等人研究發(fā)現(xiàn),因此稱 xx 片段。由許多xx 片段連接而成的子代鏈稱為后隨鏈。13. 半不連續(xù)復(fù)制(Semidiscontinuous replication):在 DNAM制過程中,一條鏈的合成是連續(xù)的,另一條鏈的合成是不連續(xù)的,所以

47、叫做半不連續(xù)復(fù)制。14. 逆轉(zhuǎn)錄(reverse transcription):以RNA為模板合成 DNA的過程。15. 逆轉(zhuǎn)錄酶(reverse transeriptase):催化以RNA為模板合成DNA的逆 轉(zhuǎn)錄過程的酶。 Temin(1960) 首次 xx 肉瘤病毒中發(fā)現(xiàn)。逆轉(zhuǎn)錄酶具有多種酶活 性:依賴RNA的 DNA聚合酶活性;依賴DNA的DNA聚合酶活性,RNA水解酶活性,DNA合成方向7。合成時(shí)需要引物與模板。分子生物學(xué)試題及答案16. 突變(mutation):基因組DNA順序上的任何一種改變都叫做突變。分點(diǎn)突變和結(jié)構(gòu)畸變。17. 點(diǎn)突變 (Point mutation) :是指

48、一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)被置換(replacement) ,這種置換又分兩種形式:轉(zhuǎn)換 (transition)一- 指用一個(gè)嘌呤 堿置換另一個(gè)嘌呤堿,一個(gè)嘧啶堿置換另一個(gè)嘧啶堿;顛換 (transversion) - 指用嘌呤堿置換嘧啶堿或用嘧啶堿置換嘌呤堿。18結(jié)構(gòu)畸變:基因中的缺口、或插入 (insertion) 或缺失 (deletion) 某些 堿基造成移碼突變使 DNA 的模板鏈?zhǔn)スδ堋?9誘變劑 (mutagen) :使基因組發(fā)生突變的物理、化學(xué)、生物因素叫誘變 劑。20.修復(fù)(repair):除去DNA上的損傷,恢復(fù)DNA勺正常結(jié)構(gòu)和功能是生物機(jī)體的一種保護(hù)功能。21.光裂合酶修復(fù)

49、( 又稱光復(fù)活 )(photoreactivation) :可見光將光裂合酶 激活,它分解DNA上由紫外線照射而形成的嘧啶二聚體,使它們恢復(fù)成兩個(gè)單 獨(dú)的嘧啶堿。22. 切除修復(fù)(excision rep air):在一系列酶的作用下,將 DNA分子中受損傷部分切除,以互補(bǔ)鏈為模板,合成出空缺的部分,使DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)的過程。23. 重組修復(fù)(recomb in ation rep air) : DNA在有損傷的情況下也可以復(fù)制,復(fù)制時(shí)子代鏈躍過損傷部位并留下缺口,通過分子間重組,從完整的另一條母 鏈上將相應(yīng)的核苷酸序列片段移至子鏈缺口處,然后用再合成的多核苷酸的序 列補(bǔ)上母鏈的空缺,此過程

50、稱重組修復(fù)。分子生物學(xué)試題及答案24. 誘導(dǎo)修復(fù)和應(yīng)急反應(yīng) (induction repair and SOSresponse)(SOS 修復(fù)) : 由于DNA受到損傷或復(fù)制系統(tǒng)受到抑制所誘導(dǎo)引起的一系列復(fù)雜的應(yīng)急效應(yīng), 稱為應(yīng)急反應(yīng)。SOS反應(yīng)主要包括兩個(gè)方面:DNA損傷修復(fù)(SOS修復(fù)或稱誘導(dǎo)修 復(fù))和誘變效應(yīng)。SOS修復(fù)是一種易出差錯(cuò)的修復(fù)過程,雖能修復(fù) DNA的損傷而避免死亡。但卻帶來高的變異率。25. DNA重組(recombination) : DNA重組是指在真核生物減數(shù)分裂過程中,細(xì)菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化中、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中等發(fā)生的 DNA片段的交換或插入。26. 基因工程 (又稱基因重組技術(shù)

51、 )(gene/genetic engineering) :是將外 源基因經(jīng)過剪切加工,再插入到一個(gè)具有自我復(fù)制能力的載體 DNAxx將新組合的DNA專移到一個(gè)寄主細(xì)胞XX,外源基因就可以隨著寄主細(xì)胞的分裂進(jìn)行繁殖, 寄主細(xì)胞也借此獲得外源基因所攜帶的新特性。27.轉(zhuǎn)錄(transcription):由依賴于DNA的RNA聚合酶催化,以 DNA勺一條鏈的一定區(qū)段為模板,按照堿基配對(duì)原則,合成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA鏈28.的過程。模板鏈 (template strand) 又稱負(fù) (-) 鏈,反意義鏈 (antisensestrand):轉(zhuǎn)錄過程中用作模板的這條 DNA鏈,稱模板鏈。29.非

52、模板鏈 (nontemplate strand) 又稱正 (+) 鏈,編碼鏈 (codingstrand),有意義鏈(sense strand):與模板鏈互補(bǔ)的那條 DNA鏈,稱非模板鏈。30.不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄(asymmetric transcription):因?yàn)?RNA的轉(zhuǎn)錄只在 DNA的任一條鏈上進(jìn)行,所以把 RNA勺合成叫做不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄。31.啟動(dòng)子(Promoter) : DNA鏈上能指示RNA專錄起始的DNA序列稱啟動(dòng)子。分子生物學(xué)試題及答案32.轉(zhuǎn)錄單位(transcriptionunit) : RNA的轉(zhuǎn)錄只在 DNA勺一個(gè)片段上進(jìn)行,這段DNA序列叫轉(zhuǎn)錄單位。33. xx(intr

53、on):真核生物基因中,不為蛋白質(zhì)編碼的、在mRNA口工過程中消失的DNA序列,稱xx。34. 外顯子(exon):真核生物基因中,在 mRNAx出現(xiàn)并代表蛋白質(zhì)的DNA序列,叫外顯子。:細(xì)菌中很多RNA分子35. 轉(zhuǎn)錄加工 (post-transcriptional processing)和幾乎全部真核生物的RNA在合成后都需要不同程度的加工,才能形成成熟的RNA分子,這個(gè)過程叫轉(zhuǎn)錄后加工。36. 核內(nèi)不均一 RNA(hnRNA)是真核生物細(xì)胞核內(nèi)的 mRN前體分子,分子量較大,并且不均一,含有許多 xx。37. RNA的復(fù)制(RNA replication):某些病毒RNA既可以做為模板合

54、成病毒蛋白質(zhì)又可在RNA復(fù)制酶(RNAreplicase)的催化下,以自身RNA為模板,合 成互補(bǔ)的RNA新鏈,合成方向5' 7,這一過程叫RNA復(fù)制。(二) 問答題1試述Meselson和Stahl關(guān)于DNA半保留復(fù)制的證明實(shí)驗(yàn)。提示:將E. coli放入以15NH4CI為唯一氮源的培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)十幾代,使所有DNA分子標(biāo)記XX15N;將15N標(biāo)記的E. coli再放入普通的14N培養(yǎng)基中培養(yǎng),在細(xì)胞生長一代、二代 、n代的時(shí)間間隔內(nèi)采樣;采用氯 化銫密度梯度離心分離DNA并用紫外照相技術(shù)檢測(cè)DNA所在位置;結(jié)果如下: 其結(jié)果確切地證明DNA以半保留方式復(fù)制。分子生物學(xué)試題及答案2. 描述大腸桿菌DNA聚合酶I在DNA生物合成過程中的作用。E. coli DNA聚合酶I是多功能酶,具有:DNA聚合酶活性,能按模板要求,以T方向合成DNA在D

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