【完美電子版】中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)【2000版】第一部分

1、中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)2000 版中國生物制品標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)編純化水ChunhuashuiPurified WaterH2O18.02本品是采用蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其他適應(yīng)的方法制得供藥用的水，不含任何附加劑。【性狀】本品為無色的澄明液體；無臭，無味?！緳z查】酸堿度 取本品 10ml ，加甲基紅指示液2滴，不得顯紅色；另取10ml ，加溴麝香草酚藍(lán)指示液5滴，不得顯藍(lán)色。氯化物、硫酸鹽與鈣鹽取本品，分置三支試管中，每管各50ml 。第一管中加硝酸5 滴與硝酸銀試液1ml ，第二管中加氯化鋇試液2ml ，第三管中加草酸銨試液2ml ，均不得發(fā)生渾濁。硝酸鹽 取本品 5ml 置試

2、管中，于冰浴中冷卻，加10%氯化鉀溶液0.4ml 與 .01%二苯胺硫酸溶液 01ml ，搖勻，緩緩滴加硫酸5ml ，搖勻，將試管于50 水浴中放置15 分鐘，溶液產(chǎn)生的藍(lán)色與標(biāo)準(zhǔn)硝酸鹽溶液（每1ml 相當(dāng)于 1 gNO 2） 0.3ml ，加無硝酸鹽的水4.7ml ，用同一方法處理后的顏色比較，不得更深（0.000006% ） 。亞硝酸鹽取本品 10ml ，置納氏管中，加對(duì)氨基苯硫酰胺的稀鹽酸溶液（1 100） 1ml 及鹽酸萘乙二胺溶液（ 0.1 100） 1ml 產(chǎn)生的粉紅色，與標(biāo)準(zhǔn)亞硝酸鹽溶液（每 1ml 相當(dāng)于1 gNO 2）0.2ml ，加無亞硝酸鹽的水9.8ml ，用同一方法處理

3、后的顏色比較，不得更深（0.000002% ） 。氨 取本品 50ml ，加堿性碘化汞鉀試液2ml ，放置 15 分鐘；如顯色，與氯化銨溶液（取氯化銨 31.5mg ，加無氨蒸餾水適量使溶解并稀釋成1000ml ） 1.5ml ，加無氨水48ml 與堿性碘化汞鉀試液2ml 制成的對(duì)照頁比較，不得更深（0.00003% ） 。二氧化碳取本品 25ml ，置 50ml 具塞量筒中，加氫氧化鈣試液25ml ，密塞，振搖，放置，1 小時(shí)內(nèi)不得發(fā)生渾濁。易氧化物取本品 100ml ， 置 105 恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干，并在 105 干燥至恒重，遺留殘?jiān)鼞?yīng)不高于1mg 。重金屬 取本品 40ml

4、，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5 ） 2ml ，硫代乙酰胺試液2ml ，搖勻，放置2分鐘，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2.0ml 加水 38ml ，用同一方法處理后的顏色比較，不得更深（0.00005% ） 。（藥用級(jí)參照中國藥典2000 年版）鹽酸YansuanHydrochloric AcidHCl 36.46本品含鹽酸（HCl）應(yīng)為 36.0%38.0% （ g/g ） 。【性狀】本品為無色發(fā)煙的澄清液體；有強(qiáng)烈的刺激臭；呈強(qiáng)酸性?！捐b別】亞硫酸鹽取新沸過的冷水50ml ，加碘化鉀1g、碘滴定液（0.01mol/L ） 0.15ml與淀粉指示液1.5ml ，搖勻；另取本品5ml ，加新沸過的冷水50ml 稀

5、釋后，加至上述溶液中，搖勻，溶液的藍(lán)色不得完全消失。熾灼殘?jiān)”酒?100g （ 85ml ） ，加硫酸2 滴，蒸干后，按附錄12 進(jìn)行，遺留殘?jiān)鼞?yīng)不高于2mg （ 0.002% ） 。鐵鹽 取本品 10g （ 8.5ml ） ，置水浴上蒸干后，殘?jiān)铀?5ml ，按附錄14 第一法進(jìn)行，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0ml 制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.0001% ） 。重金屬 取本品 10g （ 8.5ml ） ，置水浴上蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5 ） 2ml 與水適量使成 25ml ，按附錄15 第一法進(jìn)行，含重金屬應(yīng)不高于0.0002% 。砷鹽 取本品 2.0g（ 1.7ml ） ，加水

6、22ml 稀釋后，加鹽酸5ml ，按附錄16 進(jìn)行，砷含量應(yīng)不高于 0.0001% ?！举A藏】密閉保存。（藥用級(jí)參照中國藥典2000 年版）氯化鉀LvhuajiaPotassium ChlorideKCl 74.55本品按干燥品計(jì)算，含氯化鉀（KCl）應(yīng)不低于99.5% ?！拘誀睢勘酒窞闊o色長棱形、立方體結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無臭，味咸澀。本品在水中易溶，在乙醇或乙醚中不溶。【鑒別】本品的水溶液顯鉀鹽與氯化物的鑒別反應(yīng)（見附錄9） ?！緳z查】酸堿度取本品 5.0g，加水 50ml 溶解后，加酚酞指示液3 滴，不得顯色；加氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L ） 0.30ml 后，應(yīng)顯粉紅色。溶液

7、的澄清度取本品2.5g，加水25ml 溶解后，溶液應(yīng)澄清。鋇鹽 取本品 4.0g，加水 20ml 溶解后，濾過，濾液分為兩等份，一份中加稀硫酸2ml ，另一份中加水2ml ，靜置 15 分鐘，兩夜應(yīng)同樣澄清。鐵鹽 取本品 5.0g，按附錄14 第一法進(jìn)行，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.5ml 制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.0003% ） 。干燥失重取本品，在130 干燥室恒重，減失重量不得超過1.0%（見附錄11 ） 。重金屬 取本品 4.0g ， 加水 20ml 溶解后， 加醋酸鹽緩沖液（ pH3.5 ） 2ml 與水適量使成25ml ，按附錄 15 第一法進(jìn)行，含重金屬應(yīng)不高于0.0005% 。砷鹽

8、取本品 2.0g ，加水 23ml 溶解后，加鹽酸5ml ，按附錄16 進(jìn)行，砷含量應(yīng)不高于0.0001% ?！举A藏】密閉保存。參照中國藥典2000 年版）氯化鈉LvhuanaSodium ChlorideNaCl 58.44本品按干燥品計(jì)算，含氯化鈉（NaCl ）應(yīng)不低于99.5% 。【性狀】本品為無色、透明的立方形結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無臭，味咸。本品在水中易溶，在乙醇中幾乎不溶?！捐b別】本品的水溶液顯鈉鹽與氯化物的鑒別反應(yīng)（見附錄9） ?！緳z查】酸堿度 取本品 5.0g， 加水 50ml 溶解后， 加溴麝香草酚藍(lán)指示液2 滴，如顯黃色，加氫氧化鈉滴定液（ 0.02mol/L ） 0.10

9、ml ， 應(yīng)變?yōu)樗{(lán)色；如顯藍(lán)色或綠色，加鹽酸滴定液（ 0.02mol/L ）0.20ml ，應(yīng)變?yōu)辄S色。溶液的澄清度取本品 5.0g ，加水 25ml 溶解后，溶液應(yīng)澄清。鋇鹽 取本品 4.0g，加水 20ml 溶解后，濾過，濾液分為兩等份，一份中加稀硫酸2ml ，另一份中加水2ml ，靜置 15 分鐘，兩液應(yīng)同樣澄清。干燥失重取本品，在130 干燥至恒重，減失重量應(yīng)不高于0.5%（見附錄11 ） 。鐵鹽 取本品 5.0g，按附錄14 第一法進(jìn)行，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.5ml 制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.0003% ） 。重金屬 取本品 5.0g ， 加水 20ml ， 溶解后， 加醋酸鹽緩沖液

10、（ pH3.5 ） 2ml 與水適量使成25ml ，按附錄 15 第一法進(jìn)行，含重金屬應(yīng)不高于0.0002% 。砷鹽 取本品 5.0g ，加水 23ml 溶解后，加鹽酸5ml ，按附錄16 進(jìn)行，砷含量應(yīng)不高于0.00004% ?！举A藏】密閉保存。（藥用級(jí)參照中國藥典2000 年版）碳酸氫鈉TansuanqingnaSodium BicarbonateNaHCO 384.01本品含碳酸氫鈉（NaHCO 3）應(yīng)為 99.5%100.5% ?！拘誀睢勘酒窞榘咨Y(jié)晶性粉末；無臭，味咸；在潮濕空氣中即緩緩分解；水溶液放置稍久，或振搖，或加熱，堿性即增強(qiáng)。本品在水中溶解，在乙醇中不溶?！捐b別】本品的水溶

11、液顯鈉鹽與碳酸氫鹽的鑒別反應(yīng)（見附錄9） ?！緳z查】酸堿度 取本品 0.20g ，加水 20ml 使溶解，測pH 值（見附錄4） ， pH 值應(yīng)不高于8.6。溶液的澄清度取本品 1.0g ，加水 20ml 溶解后，溶液應(yīng)澄清。鐵鹽 取本品 3.0g，加水適量溶解后，加稀硝酸使成微酸性，煮沸1 分鐘，放冷，加水稀釋使成 25ml ， 按附錄 14 第一法進(jìn)行，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.5ml 制成的對(duì)照液比較，不得更深 （ 0.0005% ） 。重金屬 取本品 4.0g ，加稀鹽酸19ml 與水 5ml 后，煮沸5 分鐘，放冷，加酚酞指示液1 滴，并滴加氨試液至顯粉紅色，放冷，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5

12、） 2ml 與水適量使成25ml ，按附錄15第一法進(jìn)行，含重金屬應(yīng)不高于0.0005% 。砷鹽 取本品 1.0g ，加水 23ml 溶解后，加鹽酸5ml ，按附錄16 進(jìn)行，砷含量應(yīng)不高于0.0002% ?！举A藏】密閉，在干燥處保存。（藥用級(jí)參照中國藥典2000 年版）磷酸二氫鉀Linsuan erqingjiaPotassium Phosphate MonobasicKH2PO4136.09本品含磷酸二氫鉀（KH 2PO4）應(yīng)不低于99.5%【性狀】本品為無色結(jié)晶，溶于水，不溶于醇。【檢查】酸堿度 取本品 1.0g ， 加水 20ml 溶解后， 測 pH 值 （見附錄4） ， pH 值應(yīng)為

13、 4.24.5 。溶液的澄清度取本品 10.0g ， 加水 100ml 溶解， 溶液應(yīng)澄清。如顯渾濁，與 2 號(hào)澄清度標(biāo)準(zhǔn)（見附錄 6 第二法）比較，不得更濃。干燥失重精密稱取本品5g ，在 105±2干燥至恒重。減失的重量應(yīng)不高于0.2%。鐵 取本品 1.0g ， 加水 20ml 溶解， 加 10%磺基水楊酸溶液2ml ， 搖勻， 加 10%氨水溶液5ml ，搖勻，所呈黃色與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.001% ） 。重金屬 取本品 2.0g ， 加水適量使溶解，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5 ） 2ml 與水適量使成25ml ，按附錄 15 第一法進(jìn)行，重金屬

14、含量應(yīng)不高于0.0010% 。砷 取本品 0.5g ， 加鹽酸 5ml 與水適量使成28ml ， 按附錄 16 進(jìn)行， 砷含量應(yīng)不高于0.0005% 。【貯藏】密封保存。（分析純參照 GB1274 93 ）磷酸氫二鈉Linsuanqing ernaDisodium Hydrogen Phosphate DodecahydrateNa2HPO4·12H2O358.14本品含磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H2O ）應(yīng)不低于99.0% 。【性狀】本品為無色結(jié)晶。溶于水，在干燥空氣中易風(fēng)化?！緳z查】酸堿度 取本品 5.0g ， 溶于 100ml 水中， 測 pH 值 （見附錄4）

15、 ， pH 值應(yīng)為 9.19.4 。溶液的澄清度取本品 20.0g ，加水 100ml 溶解，溶液應(yīng)澄清。如顯渾濁，與3 號(hào)澄清度標(biāo)準(zhǔn)（見附錄6 第二法）比較，不得更濃。鐵 取本品 1.0g ， 加水 20ml 溶解后， 加 3mol/L 鹽酸 1ml ， 10% 磺基水楊酸溶液2ml ， 搖勻，加 10% 氨水溶液5ml ，搖勻。所顯黃色與標(biāo)準(zhǔn)鐵用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（ 0.0005% ） 。重金屬 取本品 4.0g ， 加水適量溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5 ） 2ml 與水適量使成25ml ，按附錄 15 第一法進(jìn)行，含重金屬應(yīng)不高于0.0005% 。砷 取本品 0.5

16、g ， 加鹽酸 5ml 與水適量使成28ml ， 按附錄 16 進(jìn)行， 砷含量應(yīng)不高于0.0005% ?！举A藏】密封保存。（分析純參照 GB1263 86 ）牛血清NiuxueqingBovine Serum本品系從出生14 小時(shí)內(nèi)未進(jìn)食的新生牛采血分離血清，經(jīng)除菌過濾后制成。主要供細(xì)胞培養(yǎng)之用?！拘誀睢勘酒窞闇\黃色澄清稍粘稠的液體，無溶血或異物?！緳z查】蛋白質(zhì)含量按中國生物制品規(guī)程2000 年版附錄中生物制品化學(xué)及其他鑒定方法進(jìn)行。血清蛋白質(zhì)含量應(yīng)在3.5%5.0% （ w/V ） 。無菌試驗(yàn)按中國生物制品規(guī)程2000 年版通則中生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程A 項(xiàng)進(jìn)行，應(yīng)符合規(guī)定。細(xì)菌內(nèi)毒素按附錄

17、19 進(jìn)行，血清中細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)不高于10EU/ml 。牛病毒 血清中不得有牛腹瀉病毒污染。采用下述培養(yǎng)法或其他適宜的方法檢測。培養(yǎng)法：牛腎原代細(xì)胞以MEM 制成細(xì)胞懸液，接種等量待檢血清，37培養(yǎng)， 57 天觀察細(xì)胞病變，同時(shí)設(shè)立陰性、陽性對(duì)照。血紅蛋白用氰化高鐵法或其他適宜的方法測定。血清中血紅蛋白含量應(yīng)不高于0.02%（ w/V ） 。大腸桿菌噬菌體采用噬斑法和增殖法檢測。血清中不得有噬菌體的污染。支原體 采用下述培養(yǎng)法和DNA 染色體，牛血清應(yīng)不得有支原體污染。（ 1 ）培養(yǎng)法：血清樣品接種于支原體液體培養(yǎng)基中，37 培養(yǎng)，觀察pH 值變化，如pH 值有變化取培養(yǎng)基0.2ml 接種于半固體培養(yǎng)基中觀察支原體菌落，同時(shí)做無菌試驗(yàn)，并設(shè)陰性、陽性對(duì)照。（ 2） DNA 染色法：將被檢血清加入DMEM 中配成 10%培養(yǎng)基，培養(yǎng)液中不加任何抗菌素，用此培養(yǎng)液培養(yǎng)Vero 細(xì)胞兩周后做DNA 染色。支持細(xì)胞增殖檢查用 Sp2/0-Ag14 或適宜的非貼壁傳代細(xì)胞進(jìn)行。（ 1 ）細(xì)胞生長曲線的測定：取待檢血清按10% 濃度配制細(xì)胞培養(yǎng)液，按1 × 104/ml 的細(xì)胞濃度接種細(xì)胞，每天計(jì)算活細(xì)胞，連續(xù)觀察一周，并繪制生長曲線，細(xì)胞的最大增殖濃度應(yīng)不低于1&