血液病分子病理診斷XXXX06

1、 血液病診斷分型 定量監(jiān)測MRD 白血病預(yù)后 靶向治療 耐藥及疾病進(jìn)展監(jiān)測 范可尼貧血 嗜血細(xì)胞綜合癥等融合基因檢測基因突變檢測血液遺傳病檢測大多數(shù)情況下，某一患者只有一種融合基因陽性46,XY,t(9;22)(q34;q11),t(15;17)(q22;q21)BM morphology: APL FCM: M3 QPCR: PML/RARA + BCR/ABL(190)+ 多重巢式RT-PCR 篩查 定性檢測 用于染色體斷裂點(diǎn)跨越很大的區(qū)域的融合基因。 熒光定量RT-PCR 定量檢測 內(nèi)參基因 c-abl 結(jié)果以比值表示，全程動態(tài)監(jiān)測 融合基因的拷貝數(shù)/內(nèi)參基因 c-ablPCR-測序篩查

2、 每月定量監(jiān)測 3-6月定量監(jiān)測 每月定量監(jiān)測 CML慢性粒細(xì)胞白血病Ph染色體t(9;22)(q34;q11) ET原發(fā)性血小板增多癥JAK2 V617F*PV真性紅細(xì)胞增多癥JAK2 V617F*CIMF慢性特發(fā)性骨髓纖維化JAK2 V617F*HES特發(fā)性高嗜酸性粒細(xì)胞白血病FIP1L1-PDGFR4q12缺失CMML慢性粒單核細(xì)胞白血病TEL/PDGFR:t(5;12)(q33;p13) *William V,Stefan N. A unique activating mutation in JAK2(V617F) is at the origin of polycythemia ve

3、ra and allows a new classification of myeloproliferative diseases. Hematology . 2005,10-13:195-200約95%的CML5%的兒童ALL15%-30%的成人ALLBCR/ABLBCR/ABLJAK2V617FJAK2V617FPV(-)65%-97% (+)純合子多見少數(shù)JAK2V617F (-) 12Exon突變ET(-)50% (+)CIMF(-)50% (+)JAK2V617F (-) 5%MPL W515L/K (+)Molecular Pathology：the molecular basis

4、 of human disease by Willam B. Coleman,Gregory J. Tsongalis激活JAK2基因使細(xì)胞對生長因子敏感性增高 PV、ET、CIMF 不是獨(dú)立的診斷指標(biāo) MDS、3%CMMLFISHFISH內(nèi)參內(nèi)參缺失缺失預(yù)后預(yù)后5q-5p15.25q31差7q-7p11.1-q11.17q31差20q-20q12好+88p11-q11MDS轉(zhuǎn)AML的幾率為50%-Yq11好分子方面的理論有限，但發(fā)現(xiàn)有5q31,7q31，20q12的反復(fù)缺失，提示可能這些區(qū)域存在腫瘤抑制基因。55% L型5% V型 體外對ATRA的敏感度低 40% S型 低分化M3其他融合基

5、因t(5;17)(q32;q21)t(11;17)(q13;q21)t(11;17)(q23;q21)t(15;17)(q22;q21)PML-RARaPLZF-RARaNPM-RARaNuMA-RARa 95%A(p.E255K)和c.944CT(p.T315I)。WT1表達(dá)量檢測*約75%AML患者可檢測到WT1高水平表達(dá)，WT1是AML患者常用的MRD檢測標(biāo)志融合基因定量檢測*Current Opinion in Oncology 2010, 22:656663WT1 (Wilms tumor gene) WT1 (Wilms tumor gene) 1.WT1基因在各類型白血病中均能表

6、達(dá)(ALL，AML，CML，MDS).2.表達(dá)水平與白血病的進(jìn)程相關(guān)，可作為化療和骨髓移植后MRD檢測敏感指標(biāo)。3.鑒別白血病與反應(yīng)性白細(xì)胞增高。初診 B-ALL; MLL-AF4 t(4;11)(q21;q23)WT1 (Wilms tumor gene) WT1 (Wilms tumor gene) 00.0880.068%90.000%00.20.40.60.811.21.41.6 +59d +96d +106dMLL-AF4WT1 血液學(xué)復(fù)發(fā) FCM MRD+弟供姐異基因 造血干細(xì)胞移植+14d白細(xì)胞植活+27d血小板植活嗜血細(xì)胞綜合征相關(guān)基因突變 PRF1、UNC13D、STXBP2

7、、STX11、SH2D1A、XIAP LYST、AP3B1、RAB27A范可尼貧血基因突變FANCA 60% 、FANCC 15% 、FANCG 10% WASP綜合征純紅再障 RPS19先天性角化不良 DKC1、NHP2、TERC、TERT、NOP10、TINF2PRF1 10q21-10q22 細(xì)胞殺傷功能缺陷 FANCA 16q24.3FANCC 9q22.3 Exon1Exon1Itron4 Itron4 Exon5Exon5Exon6Exon6Exon14Exon14Q13XIVS4+4ATc.637_643delTACCGCCR185XR548XL554PRPS19 19q13.2

8、 hot spot of missense mutations - codons 52 and 62常染色體1歲 女 Exon4發(fā)現(xiàn)點(diǎn)突變：c.184CT(p.R62W)，其他外顯子未發(fā)現(xiàn)突變DKC1 Xq28X-連鎖隱性7歲 男 DKC1基因Exon11發(fā)現(xiàn)錯義突變：c.1058CT(p.A353V) PCR Secquence標(biāo)本要求標(biāo)本要求EDTAEDTA抗凝、抗凝、快速送達(dá)快速送達(dá)實(shí)驗室實(shí)驗室EDTAEDTA抗凝、抗凝、DNA DNA or cDNAor cDNA靈敏度靈敏度最高最高大于大于15-20%15-20%分辨率分辨率bpbpbpbp報告時間報告時間3-53-5天天5-75-7天天Molecular platformMolecular platform 謝謝！ 17P13- 1