EP9A中文0001

1、EP9-A2 第 22 卷 第 19 冊替代EP9-A第15卷第17冊用患者樣本進行方法比對及偏倚評估批準(zhǔn)指南第二版這個文件介紹的程序供兩個臨床方法間的偏倚評估及采用一分為二的患者標(biāo)本和資 料數(shù)據(jù)的方法學(xué)比較實驗設(shè)計。通過NCCL認同過程制定全球應(yīng)用的指南NCCLS 通過自愿認同的方式服務(wù)于全世界醫(yī)學(xué)科學(xué)團體NCCLS是 一個國際性、多學(xué)科、非盈利、制定標(biāo)準(zhǔn)、教育型組織，在臨床檢驗界 內(nèi)促進標(biāo)準(zhǔn)和指南的使用和發(fā)展。為患者檢驗和相關(guān)臨床檢驗組織制定標(biāo)準(zhǔn)和指南 在全球范圍內(nèi)得到一致認同過程。NCCLS定標(biāo)準(zhǔn)的原則是從質(zhì)量效益和成本效益兩 方面考慮，為患者檢驗和臨床檢驗組織服務(wù)。除了制定和促進標(biāo)準(zhǔn)、

2、指南的推廣外，NCCLSS提供了一個開放、無偏見的論壇，供 發(fā)表影響患者檢驗和臨床檢驗質(zhì)量的批評性言論。出版物NCCLS件以標(biāo)準(zhǔn)、指南和委員會報告出版。標(biāo)準(zhǔn)：通過認同過程形成文件，對材料、方法或不能修改的實踐方式明確規(guī)定其特 定的基本要求。另外，標(biāo)準(zhǔn)也可以包含明確規(guī)定的選定要素。指南：通過認同過程形成文件，制定常規(guī)實驗操作程序、方法或材料的規(guī)范。使用者可以使用或修改指南以滿足特定的需要。報告：沒有經(jīng)過認同過程，由理事會頒布。認同過程NCCLS認同過程，建立正式規(guī)范的程序如下:1. 項目的授權(quán)；2. 文件的制定和公開評審；3. 根據(jù)使用者的反饋評論修訂文件；4. 文件被接受為標(biāo)準(zhǔn)或指南。大多數(shù)N

3、CCL安件只有“建議”和“批準(zhǔn)”兩個層次的認同過程，根據(jù)領(lǐng)域評 價或資料收集的需要，文件也可以有中間（如“試行” ）認同層次。建議：作為NCCLS的建議標(biāo)準(zhǔn)或指南處在被臨床檢驗界評審的第一階段，此文件需 接受廣泛、全面的技術(shù)審核，包括對范圍、方法、用途及技術(shù)和編寫內(nèi)容的逐行逐 字的審核。試行：當(dāng)一種推薦方法對某一領(lǐng)域的評審有明確的需要或者當(dāng)某一建議性方案需要 收集特定的數(shù)據(jù)時，才制定試行標(biāo)準(zhǔn)或指南。同樣，試行標(biāo)準(zhǔn)或指南也應(yīng)接受審核， 以保證其有效性。批準(zhǔn)：批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)或指南已在臨床檢驗界得到認同。應(yīng)審核并評價最終文件的有效 性，確保達到認同（即對以前的版本的意見已圓滿解決） ，并確定對新加的認同

4、文件 的需要。NCCLS標(biāo)準(zhǔn)和指南為實驗室實踐提供了一個認同意見。 NCCLS標(biāo)準(zhǔn)和指南的條款 較應(yīng)用規(guī)定或多或少要嚴格些，因此使用 NCCLS文件不能減輕使用者對遵守應(yīng)用規(guī) 定的責(zé)任。評論使用者的評論對認同過程很重要。 任何人均可以提出評論， 根據(jù)認同過程由編寫 文件的NCCLS委員會記錄全部評論。在下一個層次文件出版時，這些評論或者修改 了的文件由委員會在附錄中予以反饋。極力鼓勵讀者以任何方式、在任何時間對任 何NCCL文件提出評論。評論寄往NCCLS亍政辦公室 自愿參與強烈希望各專業(yè)的實驗室專家能自愿參加 NCCL項目。用患者標(biāo)本進行方法比對及偏倚評估；批準(zhǔn)指南 - 第二版摘要NCCLS

5、文件EP9-A2（用患者標(biāo)本進行方法比對及偏倚評估；批準(zhǔn)指南 -第二版）是為實驗室人員和生產(chǎn)廠商制定的。它敘述了測定兩種方法之間相對偏倚的程序， 也敘述了采用一分為二的患者樣本設(shè)計方法比對試驗時所需要考慮的因素。本文包 括實驗概述、樣品數(shù)據(jù)記錄及計算表、總流程圖及為初步數(shù)據(jù)分布的詳細流程圖， 以進行方法比對。文件為不熟悉此程序者提供了樣本散點圖和偏倚圖作為附加幫助。 最后一節(jié)包括對生產(chǎn)廠商進行偏倚評估以及表示偏倚的聲明格式的建議。目錄摘要委員會成員積極成員、, 、-前言質(zhì)量系統(tǒng)方法1. 介紹和范圍1.1 常規(guī)比對試驗的概述1.2 文本中使用的符號1.3 定義2 儀器熟悉階段3 方法比對試驗實驗

6、樣本比對方法測量范圍樣本數(shù)樣本編號時間和期限數(shù)據(jù)收集過程中的檢查質(zhì)量控制刪除數(shù)據(jù)的原則4 初步數(shù)據(jù)檢查方法內(nèi)雙份數(shù)據(jù)的離群值檢驗數(shù)據(jù)作圖線性相關(guān)的目測檢查 方法間離群值的目測檢查 值合適范圍的檢驗5 線性回歸計算分散均勻性的目測檢查6 計算預(yù)期偏倚及其可信區(qū)間 線性回歸法（當(dāng)數(shù)據(jù)通過合適范圍及均勻離散度檢查時） 當(dāng)數(shù)據(jù)未通過合適范圍及均勻離散度檢查時，使用分布個別差異計算平均偏倚（分部偏倚法） 當(dāng)數(shù)據(jù)有不恒定（可變的）精密度時，用分部殘差計算預(yù)期偏倚（分部殘差法）7 結(jié)果解釋以及內(nèi)部性能標(biāo)準(zhǔn)比較8 制造商的修改實驗設(shè)計數(shù)據(jù)分析偏倚性能的聲明參考文獻附錄A:樣本數(shù)據(jù)記錄表附錄B:散點圖舉例附錄C

7、:計算舉例附錄D:線性計算評價和工作組反饋小結(jié) 團體評價和委員會反饋小結(jié)相關(guān)的NCCLSB版物、尸、 亠前言當(dāng)前文獻中有許多使用者和生產(chǎn)廠家對產(chǎn)品評價的例子， 對測定同一樣品的兩種方法進行比較使用了許多不同實驗和統(tǒng)計方法。 方法學(xué)的差異易引起混亂，使用者已經(jīng)報道這些比較常缺乏足夠的數(shù)據(jù)及缺乏如何進行重復(fù)的說明。越來越認識到適用于診斷設(shè)備廠家的評價方法并非總是適用于他的用戶。廠家所關(guān)心的是與公認的標(biāo)準(zhǔn)和參考方法比較時能建立有效并達到性能要求的偏 倚。而用戶可能希望與另外一種候選方法進行比較，而不是廠家用于確定偏倚 的方法。對于這兩種不同的目的來說，實驗的規(guī)模及數(shù)據(jù)處理的方法都有差異。因此，在準(zhǔn)備

8、這一文件時，工作組吸收了使用者、工業(yè)代表、統(tǒng)計學(xué)家、實 驗室工作人員和醫(yī)務(wù)工作者的經(jīng)驗。由于目前已經(jīng)有了多種體外診斷方法和試 劑盒，工作組意識到一種實驗設(shè)計難以滿足各類使用者和廠家對方法比對的要 求。所以，這一指南的初始意圖是在設(shè)計兩種方法的比對試驗時提供概念上的 幫助。并提供一個實驗范例，來說明時間長短、方法、材料、質(zhì)量控制方法、 統(tǒng)計數(shù)據(jù)處理和結(jié)果解釋。在編寫這一方案的全過程中，工作組必須決定在示范實驗中介紹哪種程序及 統(tǒng)計方法。為了滿足實驗室工作人員及產(chǎn)品制造商的需要，工作組綜合了分析 方法的用戶、這些方法的生產(chǎn)商及管理機構(gòu)代表的意見。工作組還包括了為達 到學(xué)術(shù)上有效比較所需要的各種建議

9、。必須在操作方案的簡便易行和設(shè)計的復(fù) 雜性及保證有效結(jié)論必須的統(tǒng)計計算之間進行兼顧。本文件可適用于廣范圍的 被測物及復(fù)雜的設(shè)備。本文的重點是獨立地建立偏倚的應(yīng)用特性。 如果合適，使用者可以直接地將 求出的估計值與廠家標(biāo)注的能達到的要求或與使用者自己建立的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)進行 比較。工作組相信在方法比對中標(biāo)準(zhǔn)化的實驗和統(tǒng)計方法會促使評估更能重復(fù)并 反應(yīng)真正的性能，以及評價結(jié)果的報告更為可靠。同樣，在一些體外診斷儀器 的評價中，錯誤地使用和錯誤地解釋統(tǒng)計方法，如回歸與相關(guān)，都嚴重影響了 這些評價的實用性。因此，本文件意圖促進有效地使用統(tǒng)計分析和報告的數(shù)據(jù)。我們鼓勵制造商應(yīng)用這一文件去建立并標(biāo)準(zhǔn)化自己的偏倚

10、性能聲明。此類聲明曾經(jīng)有多種形式，但他們常沒有足夠的特異性來讓用戶驗證。關(guān)鍵詞：偏倚，評價方案，實驗設(shè)計，線性回歸，方法比對，質(zhì)量控制，殘差質(zhì)量體系方法NCCLS苗述有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和指南的質(zhì)量控制方法， 可方便項目管理、為定義一個文件結(jié)構(gòu) 提供模板、通過個性化分析為建立必須的文件提供一個過程。該方法是建立在當(dāng)前 最流行的版本NCCLSHS針對健康保健單位的質(zhì)量體系模型的基礎(chǔ)上，應(yīng)用一套 關(guān)鍵技術(shù)-質(zhì)量體系要素（QSES, QSEs適用于任何組織、任何健康保健服務(wù)工作流 程的全部操作。QSEs為任何類型的產(chǎn)品或服務(wù)文件提供一個框架。QSEs文件要素見 下表：QSEs文件和記錄信息管理組織突發(fā)事件管理人

11、員評定設(shè)備持續(xù)改進采購與庫存服務(wù)和滿意度過程控制設(shè)施和安全EP9-A2引用了 QSEs全部文件用患者標(biāo)本進行方法比對及偏倚評估；批準(zhǔn)指南 -第二版1介紹和范圍此文件為臨床實驗室用戶和制造商提供了設(shè)計一個評價實驗的指南，用于評價測定 同一被測物的兩種方法之間的偏倚。理想情況下，方法（或候選方法）應(yīng)該與參考 方法相比較。但對于用戶，參比方法通常是目前使用的常規(guī)方法，這樣，評價的目 的在于確定兩種方法得到的相應(yīng)結(jié)果是否在實驗統(tǒng)計學(xué)的范圍內(nèi)。此時，我們首先 關(guān)注的是新方法是否是現(xiàn)行方法的合適替代者。本指南便于估計兩種方法在不同樣本濃度下的偏倚（預(yù)期的差異）。如果參較方法同廠家使用的方法相同，那么就可以

12、把實驗結(jié)果與廠家的聲明進行統(tǒng)計學(xué)比較， 以確定性能是否可以接受。比對試驗概述評價一個分析方法需要以下條件：操作者有足夠的時間熟悉儀器操作及保養(yǎng)程序；操作者有足夠的時間熟悉評價方案；在評價實驗過程中，待評方法及參比方法必須保證有適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制；待評方法及參比方法必須有足夠的數(shù)據(jù)以保證結(jié)果具有代表性（需要多少數(shù)據(jù)取 決于兩種方法的精密度和干擾作用，兩方法間的偏倚大小，樣本分析物數(shù)據(jù)的范 圍及檢測的醫(yī)學(xué)要求）。在熟悉儀器操作過程中，待評和參評方法的操作者必須掌握儀器安裝、操作、 維護、故障排除及兩個方法的質(zhì)量控制的所有方面。此過程可以在其他評價工作之 前或與儀器廠商培訓(xùn)階段同時進行。兩種方法都要進行

13、實驗室的常規(guī)質(zhì)量控制。在熟悉過程后，方法比對實驗即可開始。工作組建議在至少5個工作日內(nèi)最少要分析完40個患者樣本。在遵循廠家的推薦進行校準(zhǔn)的條件下，增加測定樣本數(shù)及 測定天數(shù)，可以提高實驗的可靠性及有效性。用待評方法和參比方法對每一患者樣本各作兩份測定。分析每一方法在同一批 內(nèi)的雙份測定結(jié)果。應(yīng)盡可能使至少 50 %樣本的測定結(jié)果處于實驗室的參考區(qū)間之 外。實驗結(jié)束后，合理記錄數(shù)據(jù)（如附錄所建議的）。數(shù)據(jù)作圖并目測或統(tǒng)計學(xué)方法 評價圖的相對線性、足夠范圍和離散的均勻性。根據(jù)數(shù)據(jù)的檢查結(jié)果，使用簡單的 線性回歸或用其他方法估計在醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚的可信區(qū)間。然后把此評 價結(jié)果與廠家聲明或內(nèi)

14、部標(biāo)準(zhǔn)進行比較以判斷方法是否可以接受。文本中使用的符號下類符號用于此文件：X:參比方法Y：待評方法DXi或DYi:方法X或方法Y中雙份測定值的絕對差值i: 樣本數(shù)N:樣本總數(shù)1,2 或 j ：雙份或重復(fù)測定數(shù)（在腳注中）DX或DY方法平均絕對差值DX'i或DY'i :方法標(biāo)準(zhǔn)化（相對）的絕對差值Eij ：方法間的絕對差值E:方法間平均絕對差值E'ij :方法間相對絕對差值E'方法間相對的平均絕對差值TLe：檢測限r(nóng) :相關(guān)系數(shù)x :參比方法的觀察值y :待評方法的觀察值Xj或yj :第i次測定中，第j個重復(fù)觀察值（x或y）x或y: x或y的平均值b:斜率a: Y

15、 軸截距Y：待評方法的預(yù)期值：估計值的標(biāo)準(zhǔn)誤Bc：在濃度c時預(yù)期偏倚的估計值Xc：醫(yī)學(xué)決定水平Be：在濃度Xc的真正偏倚k組中數(shù)據(jù)的數(shù)目（K= 1, 2, 3）Bk：k組中平均偏差（K= 1, 2, 3）SDk： k 組中偏倚的標(biāo)準(zhǔn)差定義分析測定范圍（AMR: 種方法能直接測量無稀釋樣本的分析值范圍，預(yù)處理不是 主要的測定過程。偏倚：測定值和真值的差值。臨床可報告范圍（CCR： 一種方法能定量報告的分析值范圍，允許標(biāo)本稀釋，通過 預(yù)處理延伸直接測定范圍。相關(guān)系數(shù)（ r ） : 兩個隨機變量協(xié)方差的比率。Deming 回歸：根據(jù)方法比較實驗中兩方法的允許測定誤差評估斜率和截距參數(shù)的一 種方法,每

16、種方法的測定誤差均用于評估程序。待測物：一種待測量的物質(zhì)。Passing-Bablok ：根據(jù)方法比較實驗中使用非參數(shù)程序評估斜率和截距參數(shù)的一種 方法。真值：多次重復(fù)測量結(jié)果的均值與可接受參考值間的符合程度。 （注：真值的測量通 常用偏倚表示。）2 儀器熟悉階段 待評方法和參比方法的操作者必須熟悉以下工作：操作保養(yǎng)程序樣本準(zhǔn)備方法校準(zhǔn)和監(jiān)控功能 生產(chǎn)廠商提供的培訓(xùn)可以作為儀器熟悉階段的一部分。實驗室中需有足夠的時間開 啟和運行儀器以確保操作者理解儀器的全部步驟并能正確操作。工作組建議花 5 天 時間熟悉儀器，對于非常簡單的儀器時間可以短一點，對于多通道儀器時間可能長 一點。操作者應(yīng)該用實際樣

17、本進行分析， 以注意到常規(guī)工作中發(fā)生的所有可能的偶然事 故（如錯誤信號、錯誤糾正、校準(zhǔn)等） ，在此過程中不應(yīng)該收集數(shù)據(jù)。當(dāng)操作者能夠 自信的操作儀器，熟悉儀器的階段才可結(jié)束。 （用戶評價不需進行此步驟）在方法比 對評估之前，確保有適當(dāng)控制限的常規(guī)質(zhì)量控制程序。3 方法比對實驗31 檢測樣本 按照實驗室操作規(guī)范和制造商的推薦收集和處理患者標(biāo)本。311 儲存 儲存時間和條件取決于待測成份的穩(wěn)定性，如果可能，避免儲存標(biāo)本。312 拒收標(biāo)本 如果一個標(biāo)本被拒收，要記錄拒收原因。32 參比方法實驗室當(dāng)前使用的方法， 生產(chǎn)廠家聲明的方法和公認的參考方法都可作為參比方 法。如果參比方法是參考方法， 新方法和

18、參考方法間的測定差值作為偏倚； 如果參比 方法不是參考方法，新方法測定的真值不能被確定，兩方法間測定差值不能作為偏 倚而僅僅是差值而已，指定的方法作為參比方法的參考方法， “偏倚”也被使用在這 個文件中。本實驗提供了兩方法間在特定濃度的偏倚估計值和偏倚的可信區(qū)間，所 以兩方法間的差值可歸因于待評方法的誤差，參比方法應(yīng)該做到如下幾點： 具有比待評方法更好的精密度； 可能的情況下，不受已知干擾物質(zhì)的干擾；使用與待評方法相同的單位； 可能的情況下，與標(biāo)準(zhǔn)品或參考方法有已知的相對偏倚（可溯源） 。本實驗并不能將不同來源的誤差歸咎于被比較的每一方法。干擾可能與精密度 一樣影響兩方法間測定結(jié)果的差值。33

19、 測定范圍 應(yīng)在有臨床意義的范圍內(nèi)，即醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)評價待評方法。通常應(yīng)從低值參 考范圍到高值參考范圍。分析物濃度應(yīng)盡可能分布在測定范圍內(nèi)均勻分布。分析測 定范圍是分析物測定濃度區(qū)間。表 1a 和表 1b 提供了推薦范圍，考慮了待測物的異 常情況。331 分析測定范圍實驗的范圍受兩種方法分析測量范圍的限制。 參比方法的范圍應(yīng)至少與待評方法 的范圍相同，以便在分析測定范圍內(nèi)可以比較。34 樣本數(shù) 為了滿足上述標(biāo)準(zhǔn)要求，至少需分析 40 個樣本。增加樣本數(shù)將提高統(tǒng)計估計值 的可信度，并且增加了把未預(yù)計的干擾物發(fā)生的影響包括在內(nèi)的機會。341 雙份測定為了以下原因，每份樣品必須有足夠量： （1）

20、能夠用待評方法 作雙份測定；（2）能夠用參比方法作雙份測定； （ 3）如果需要應(yīng)能繼續(xù)進行追蹤實 驗。3.4.2 混合樣本如果從一個患者得不到所需的樣本量， 可以將兩個（但不能多于兩個）病史相同， 被測物濃度也大致相近的患者標(biāo)本混合使用，成為“微混合樣本”。用“微混合樣本”進行雙份測定。如果樣本是全血，需要進行血清學(xué)配型。注意：這種混合過程由于 平均化可能掩蓋了特殊性或者樣本特定的偏倚而導(dǎo)致兩種方法比較的樂觀假象。樣本測定序列在樣本的雙份測定中，指定第一次測定順序。按反向順序檢測第二次（雙份）。順序中的濃度應(yīng)盡可能隨機排列。第二次標(biāo)本的反向順序可以減少交叉污染及漂移 對重復(fù)測定標(biāo)本平均值的影響

21、。例如：樣品可以按下述順序進行，1、2、3、4、5、6、7、8和& 7、6、5、4、3、2、1。參比方法和待評方法均應(yīng)按上述步驟進行， 但每種方法可以有不同的開始順序。時間和期限對于一個給定的標(biāo)本，參比方法和待評方法均應(yīng)在分析物穩(wěn)定的時間段內(nèi)測定。 對于全部標(biāo)本，均應(yīng)在兩小時內(nèi)測定完畢。如果可能，最好使用測定當(dāng)天的標(biāo)本。 如果使用儲存標(biāo)本，儲存方式必須能確保樣本的穩(wěn)定性，以滿足參比方法和待評方 法的要求。對兩種方法用同樣的方式儲存樣本，以避免儲存條件的不同引入一個新 的變量。如果在精密度實驗之后進行方法比對實驗， 一天最多能選擇并測定8個標(biāo)本。如 果精密度實驗和方法比對實驗同時進行，在

22、熟悉儀器后，每天只能檢測4個標(biāo)本，在1015天內(nèi)完成。將患者標(biāo)本分布在不同天內(nèi)和不同批內(nèi)更好。數(shù)據(jù)收集過程中的檢查3.7.1分析系統(tǒng)誤差儀器顯示存在誤差時收集的數(shù)據(jù)需成文，但在最后的數(shù)據(jù)分析中不要包括在內(nèi)。3.7.2人為誤差記錄任何操作者造成的有文件的誤差，但在最后的數(shù)據(jù)分析中不要包括在內(nèi)。3.7.3其他不一致數(shù)據(jù)的處理沒有查出錯誤的不一致雙份數(shù)據(jù)時， 也應(yīng)記錄而不是剪輯。不能確定不一致的原因時，則應(yīng)在數(shù)據(jù)表上保留原始數(shù)據(jù)，必須按照節(jié)和節(jié)進行離群值的檢驗。質(zhì)量控制實驗中應(yīng)遵循實驗室和/或制造商的常規(guī)質(zhì)量控制程序。保留質(zhì)控圖，任一方法 出現(xiàn)失控時應(yīng)重新測定，直到達到要求的樣本數(shù)為止。刪除數(shù)據(jù)的文

23、件化 任何需要刪除的數(shù)據(jù)均應(yīng)仔細形成文件并保留，記錄所發(fā)現(xiàn)的原因和問題。4初步數(shù)據(jù)檢查圖1概述了本節(jié)中所要描述的數(shù)據(jù)檢查程序， 圖2本方法中每一步驟的邏輯流程 圖。閱讀以下章節(jié)時可參考這些圖。圖1流程圖概述熟悉儀器調(diào)查數(shù)據(jù)收集組內(nèi)離群值檢查繪Yv!圖攵尙詳細流程圖散點圖A.開始取得數(shù)據(jù)目測線性檢查不好如果可能，刪除非線性點更換樣本是否問題只限于某一有問 題標(biāo)本是超過1對離群值目測組間離群值I 一對離群值或無r2<取消有問題的標(biāo)調(diào)查是問題是否發(fā)現(xiàn)并糾正B.數(shù)據(jù)有足夠的分布范是增加數(shù)據(jù)，延伸分布范 計算回歸相否合適圍檢查否不多于接1受使用分區(qū)偏倚程X7數(shù)據(jù)是否保留足夠分布范圍否接上頁檢查組間

24、離群值方法內(nèi)雙份測定的離群值檢查 該方法要用到所有數(shù)據(jù)點及已刪除的離群值， 用以下公式計算測量值（Y）和比較值（X）的雙份測定結(jié)果。分析時要用到兩種方法：1）所有數(shù)據(jù)， 2）刪除離群值后的數(shù)據(jù)。計算每個樣品雙份測定差值的 絕對值：DXi= | Xii- Xi2DYi二 | yii -y i2其中i=樣品號（由1到N, N= 羊品總數(shù)）。計算每個方法雙份測定的差值絕對值的均值：取各方法的平均絕對差值的四倍作為每個方法的 “可接受”限（取 舍到報告值的前一位）。如果任一絕對差值超過此限（X或Y）,用標(biāo) 準(zhǔn)化（相對）絕對差值進行另外的計算,即：以相對差值均值的 4 倍作為標(biāo)準(zhǔn)化的檢測界限。 如果有一

25、個值超過上述“可接受”限或相對范圍的檢測界限,檢 查原因，并從數(shù)據(jù)組中刪除此值。將該標(biāo)本的所有數(shù)據(jù)（X和Y）刪除后再繼續(xù)分析。如果刪除的數(shù)據(jù)超出一個, 則需擴大調(diào)查范圍, 查找出現(xiàn)偏差的 原因。如果能夠找到問題所在并能追蹤到引起偏差的樣品, 則應(yīng)替換 這些樣品, 且將問題記錄在案。 如果能糾正問題但不能追蹤到特定樣 品,則所有數(shù)據(jù)組必須重新收集。如果既找不到問題也不能糾正,則 可將兩次重復(fù)測定差值的最大值與此方法在接近的醫(yī)學(xué)決定水平處 允許的不精密度進行比較, 如未超過允許范圍, 則可繼續(xù)進行隨后步驟。如超出允許范圍，則應(yīng)停止實驗并通知廠家（參見節(jié)關(guān)于刪除數(shù) 據(jù)的文件）。數(shù)據(jù)作圖將數(shù)據(jù)作四張圖

26、：第一張圖是 P （雙份測定的均值）對X】（雙份測定的均值）的散點圖，以待評方法的結(jié)果為 Y,參比方法的結(jié)果為X（見圖B1）。使XY軸的原點和刻度一致，作一條通過原點，斜率為1的直線。第二張圖是以每個 Yij的結(jié)果對X】的均值按上述相同 方式作圖（見圖B2）。第三張圖是偏倚圖，這種方法要求 X軸變量的 比較方法為參考方法。每個樣品測定的丫與X的均值之差（一；） 相對于萬作圖（見圖B3）,此圖的水平中心線為零值。第四張圖同 上，是單次測定的丫值與X】的差值（代一X】）相對于兀作圖（見 圖 B4）。如果比較方法不是參考方法或不能確定，那么第三張圖就是個樣品測定的丫與X的均值之差芷一芮）相對于（帆+

27、越）/2作圖（見圖B3）,此圖的水平中心線為零值。同樣第四張圖是單次測定的丫丄+元）/2作圖（見圖Y 丫值的差值與（ + "）/2的差值相對于B4)這四張圖是非常有用的，因為差值的大小可用來判定非線性關(guān)系,離群值，待測和參比方法比較的非齊性方差 線性關(guān)系的目測檢查在整個測量范圍內(nèi)，檢查 X （參比方法）和丫（待評方法）的數(shù) 據(jù)圖是否呈直線關(guān)系。如果線性關(guān)系看來滿意，則按節(jié)給出的方法檢查數(shù)據(jù)（如需了解其它相關(guān)信息，請參考最新版本的NCCLS的文件EP-6:定量測量方法的線性評估）。如果存在明顯的非線性關(guān)系，目測數(shù)據(jù)是否存在直線部分。通常, 非直線部分出現(xiàn)在濃度范圍的兩端，如果是這樣，則

28、將開始出現(xiàn)非線 性部分的數(shù)據(jù)點去掉，檢查剩下部分的線性關(guān)系，同時判斷此部分是 否包含了醫(yī)學(xué)上有意義的濃度范圍。 如果是，可在這部分范圍內(nèi)另選 樣品進行測定，以代替被刪除的樣本。可按節(jié)重新檢查新數(shù)據(jù)。如果非線性部分明顯或直線部分太短， 停止評價并通知廠家。如 果非線性的原因可檢查出來并能糾正，則重新開始實驗收集新的數(shù)據(jù) 進行評價。方法間離群值的目測檢查檢查數(shù)據(jù)圖A和圖C,目測有無離群值。如果沒有，按節(jié)繼續(xù)進 行評價。如果有離群值，則可進行類似節(jié)用于雙份測定的下述計算方 法。計算兩種方法的絕對差值及其平均值，即：Eij= I yij-xij Ii=樣本號140和=雙份測定中的1和2。計算檢測限（T

29、Le）,即4 匚，用四舍五入到報告值的前一位。把每一個Eij與TLe值比較，并標(biāo)記超出TLe值的點。計算兩種方法的相對差值及其平均值，即：計算相對檢測限值為4 丘，把每一個珀與此檢測限值比較（不 用四舍五入），并標(biāo)記超出檢測限值的點任何一點(Xij , Yij )如未通過上述兩種檢測方法，則判斷為離 群點。每組數(shù)據(jù)中被刪除的離群值不能超過 %如果發(fā)現(xiàn)有超過的離群點，則應(yīng)調(diào)查是否存在干擾、人為錯誤 或儀器故障。如果有幾個分析物同時在同一儀器設(shè)備上評價，檢查出現(xiàn)明顯偏差的樣本的其它分析物的結(jié)果， 同時也應(yīng)檢查同一分析批的 質(zhì)量控制結(jié)果。如未能查到明顯原因，而測定值之間的差值已超出有 醫(yī)學(xué)上有臨床意

30、義的界限，則應(yīng)停止實驗，或另做 40個新樣品。如果出現(xiàn)一個以上的離群點，但它們并未超出醫(yī)學(xué)上有臨床意義 的界限，則可保留并使用這些數(shù)據(jù)。如果進一步擴大調(diào)查范圍查到離 群值原因，則分析更多樣品，以增加數(shù)據(jù)量滿足實驗要求。4.5 X值合適范圍的檢驗對數(shù)據(jù)有必要作出一些假設(shè)，才能保證回歸分析的結(jié)果有效。假 設(shè)之一是X值沒有誤差。在臨床實驗室，這是不可能的，因為每一個 檢測都存在內(nèi)在誤差。但是如果數(shù)據(jù)的取值范圍足夠?qū)?，則此種誤差 對回歸結(jié)果的影響可以忽略不計。X值的取值范圍是否夠?qū)挘捎孟?關(guān)系數(shù)r做粗略的估計。r的計算公式如下：其中：一般情況下，如果r(或r2>),則可認為X值取值范圍合適。

31、如果根據(jù)測定數(shù)據(jù)算出的r能滿足上述要求，則可認為X的誤差已被 數(shù)據(jù)范圍所抵消。這時就可用簡單的直線回歸來估計斜率和截距。如果r2<,則必須分析更多的樣品以擴大數(shù)據(jù)濃度分布范圍，然后再重新分析全部數(shù)據(jù)。如果X的取值范圍無法擴大，則可采用節(jié)中 描述的分部偏倚法代替回歸方法來評價平均偏倚。5 線性回歸計算對于成對的數(shù)據(jù)（Xij-Yji ），斜率b和截距a的計算公式如下：云】為每個樣品兩次測定X值的平均值，單個Y對X的均值：平均Y對平均X值：此處：可用以下方程表示：對于任何給定的X值，用此方程可以計算待評方法的 丫的估計值（丫）。保留此回歸結(jié)果，以備后用。另外一些回歸方法，女口Demi ng法或

32、正交回歸，僅僅能用于估計斜率和截距。按直線模型擬合，即可 按以下步驟進行。千萬不可用正交回歸或 Demi ng法計算估計值的標(biāo) 準(zhǔn)差，因為此值被人為的降低（除非按垂直軸來計算標(biāo)準(zhǔn)誤）。 5.2目測檢查離散度目測離散圖和偏倚圖（圖 B1到圖B4）,檢查離散的均勻性。盡 管在整個分析測量范圍內(nèi)具有恒定的不精密度（均勻的離散度）的方法很少，但目測檢查可以看出在數(shù)據(jù)范圍上限和下限的標(biāo)準(zhǔn)差之間是 否有顯著性差異（3： 1或更大）。如果數(shù)據(jù)具有可接受的均勻離散度， 則可用節(jié)中描述的線性回歸方程計算平均偏倚， 此時可用普通的最小 二乘法回歸即可估計X和丫之間的斜率和截距。即使離散度不恒定， 斜率和截距的估計

33、也將是無偏倚的（在統(tǒng)計學(xué)意義上）。此時標(biāo)準(zhǔn)估 計誤差（Sy,x）不能用于評價圍繞回歸線的變異。此時可用節(jié)中描述 的分部殘差方法作變異評估和平均偏倚的說明。僅用40個樣品（80個數(shù)據(jù)對）很難評價離散度的均勻性，工作 組建議，當(dāng)懷疑存在非均勻離散度時，應(yīng)收集更多的樣品。也可以用標(biāo)準(zhǔn)的統(tǒng)計學(xué)方法來糾正有不均勻離散度的回歸，包括使用數(shù)據(jù)變換（如取對數(shù)或加權(quán)回歸）。6 計算預(yù)期偏倚及其可信區(qū)間線性回歸法（當(dāng)數(shù)據(jù)通過適合范圍和均勻離散度的檢查）在Y軸方向上數(shù)據(jù)點與回歸線之差稱為此點的殘差， 估計標(biāo)準(zhǔn)誤（Sy,x）是這些殘差的標(biāo)準(zhǔn)差，是測量圍繞回歸線的數(shù)據(jù)點的“離散 度”用下列公式計算某一點（龍）的殘差：

34、殘差ij=打HP七+ b和對于平均值（殘差）=區(qū)-丫廠刃5-1%）對于單個Yij來說，估計值的標(biāo)準(zhǔn)誤的計算公式如下：對于平均Yj :在給定的醫(yī)學(xué)決定水平 Xc處的預(yù)期偏倚（Be）的估計值，按以 下公式計算：§e的95祠信區(qū)間（在Xe處的真正偏倚）按以下公式計算： 參考第7節(jié)的方法解釋這些統(tǒng)計量。當(dāng)數(shù)據(jù)未通過適合范圍檢查時，使用分部個別差異法計算平均偏倚（分部偏倚法）按X遞增的順序制表，將數(shù)據(jù)分成三組（低、中、高），每組應(yīng)含 大約相同的數(shù)據(jù)。每對數(shù)據(jù)中的X值按此分組?？蓮钠顖D的兩端計 算點數(shù)到2N/3處作為三組的分界點（以每組保持大致相同數(shù)目的數(shù) 據(jù)來部署分界點）。在記錄紙上標(biāo)記這些

35、數(shù)據(jù)屬于哪個組，然后分別 用下列方程式計算每組的平均偏倚。Nk=K組的數(shù)據(jù)數(shù)（K=1, 2，3）（m為“虛設(shè)的”下標(biāo)，說明K組中成對x'和成對y'的和）按此計算順序可以計算組中每個點的偏倚及這些偏倚的標(biāo)準(zhǔn)差。色區(qū)是適當(dāng)濃度范圍內(nèi)估計的預(yù)期（平均）偏倚，且三個 色監(jiān)代替節(jié)中 的衣。如果三個官監(jiān)大致相等，則用B代表它們的均值。根據(jù)臨床需要而完全不能依靠數(shù)據(jù)的分段來選擇醫(yī)學(xué)決定水平。如果一個非常重要的醫(yī)學(xué)決定水平與兩個組的分界值非常接近，可改變分組以避免在偏倚估計中的不連續(xù)性（或選擇較大的一個）。在醫(yī)學(xué)決定水平濃度Xc處，通過選擇對于Xc的適當(dāng)K值并作如 下計算以得出預(yù)期偏倚氏的95

36、痢信區(qū)間： 當(dāng)數(shù)據(jù)有非恒定精密度時，用分部殘差計算預(yù)期偏倚（分部殘差法）如節(jié)，把數(shù)據(jù)分成三組，每組中數(shù)據(jù)的數(shù)目應(yīng)大致相等。然后對 每組數(shù)據(jù)分別進行計算，此處 Nk=數(shù)據(jù)的個數(shù)（K=1, 2, 3）。（m為“虛設(shè)的”下標(biāo)，說明K組中成對x'和成對y'的和）在給定醫(yī)學(xué)決定水平Xc處，預(yù)期偏倚丄的估計值為：按Xc的值選擇適當(dāng)?shù)腒組，按下列方式計算出Be的95痢信區(qū) 間:7 結(jié)果的解釋以及與內(nèi)部性能標(biāo)準(zhǔn)的比較在多數(shù)情況下，我們關(guān)心現(xiàn)行方法與候選方法之間的差別， 此時 將預(yù)期偏倚的可信區(qū)間與醫(yī)學(xué)決定水平點 Xc處的允許誤差的限值相 比較。每個實驗室應(yīng)建立自己的限值標(biāo)準(zhǔn) （可咨詢專家或技術(shù)

37、文獻）。 如果預(yù)期偏倚的可信區(qū)間包含了規(guī)定的可接受偏倚， 則數(shù)據(jù)并不能表 明候選方法的偏倚與可接受偏倚不同。但是如預(yù)期偏倚的可信區(qū)間不 包含規(guī)定的可接受偏倚時，則可作出以下兩種判斷：如可接受偏倚小于預(yù)期偏倚可信區(qū)間的下限，則可得到如下結(jié)論：預(yù)期偏倚大于可接受偏倚的概率很高（%，因此候選方法性能 與現(xiàn)行方法不相當(dāng)，不能被接受。如可接受偏倚大于預(yù)期偏倚可信區(qū)間的上限，則可得出如下結(jié)論：預(yù)期偏倚小于可接受偏倚的機率很高（%，因此候選方法性能 與現(xiàn)行方法相當(dāng)，可以接受。如果兩種方法不相當(dāng)，但仍相信候選方法更特異，則不要拒絕新 方法，在常規(guī)應(yīng)用前收集新的臨床數(shù)據(jù)（如建立新的參考范圍）。應(yīng)注意實驗室要建立

38、兩種方法之間的允許差異的標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)比較兩種方法的允許誤差時不一定單獨應(yīng)用醫(yī)學(xué)允許誤差的標(biāo)準(zhǔn)來判斷精密度是 否可接受。誤差限的標(biāo)準(zhǔn)可在所研究項目的個體內(nèi)生物變異的文獻中 查到。當(dāng)廠家提供了待評方法的對比數(shù)據(jù)時，則應(yīng)另做一些性能評價但是，應(yīng)記住參比方法及操作步驟應(yīng)與廠家所用的完全一致，以便得到可靠的對比。如果廠家聲稱的平均偏倚包括在95%勺可信區(qū)間內(nèi)，則可認為候選方法與參比方法可提供相應(yīng)的結(jié)果。8 生產(chǎn)廠家的修改實驗設(shè)計廠家應(yīng)使用最少100份患者樣品，標(biāo)本應(yīng)遍布在儀器或方法所能 報告的濃度范圍內(nèi)。特別是在多個不同地方收集標(biāo)本時， 或有其他因 素影響時，則廠家應(yīng)使用超過100個病人樣品。病人樣本可用于

39、評價 多個分析物。8.2數(shù)據(jù)分析根據(jù)此文件敘述的基本程序?qū)κ占臄?shù)據(jù)作初步的考查，廠家可以選用任何一種有效的統(tǒng)計方法分析數(shù)據(jù)， 但其最終點必須在有關(guān)的 醫(yī)學(xué)決定水平上確定待評方法與參考方法之間的偏倚。為了評價參數(shù) 有無錯誤，生產(chǎn)廠家應(yīng)計算回歸斜率和截距的標(biāo)準(zhǔn)誤， 以及在偏倚聲 明中的預(yù)期值的標(biāo)準(zhǔn)誤。如果標(biāo)準(zhǔn)誤過大不能被接受，則需另加數(shù)據(jù)。 避免使用無效的計算，例如在垂直（正交）方向上估計值的標(biāo)準(zhǔn)誤（Deming法）。偏倚性能的聲明在廠家方法比較偏倚的聲明中應(yīng)包括以下項目。除非參比方法是 公認的參考方法，否則不得使用“準(zhǔn)確度”術(shù)語。下列中的任選項目 可包括在廠家的聲明中。擬合的線性回歸線（任何方

40、法）的斜率和截距;用于回歸分析的全部數(shù)據(jù)； 在規(guī)定的醫(yī)學(xué)決定水平處，根據(jù)回歸線計算的偏倚（在普遍認同 的醫(yī)學(xué)決定水平或在參考范圍的兩端） ；數(shù)據(jù)范圍（在回歸分析的 X 最高值和最低值）； 回歸分析中所使用的參比方法； 采用的是一個測定值，還是重復(fù)測定的均值，如果是均值，每一 均值是多少次測定（對X和Y均適用）；如果在聲稱的可報告范圍內(nèi)估計值的標(biāo)準(zhǔn)誤是恒定的，則可在垂 直方向（丫軸）上計算出估計值的標(biāo)準(zhǔn)誤；如果總的估計值不合適， 則應(yīng)分別在多個濃度范圍內(nèi)各自求出標(biāo)準(zhǔn)誤。斜率和截距的可信區(qū)間；在每個水平上偏倚的可信區(qū)間；相關(guān)系數(shù)；在X軸和丫軸上，用相同的標(biāo)度及相同的范圍將所有的數(shù)據(jù)畫出 散點圖，包

41、括以不同的圖符標(biāo)出失控數(shù)據(jù)點。 散點圖應(yīng)包括擬合回歸 線，理想狀態(tài)下，應(yīng)當(dāng)為過原點的直線（ X=Y）；擬合回歸線的方法（普通最小二乘法、加權(quán)回歸法、 Demi ng法、 正交回歸法），以及說明最佳的擬合線的散點圖。待評方法（Y）數(shù)據(jù)的收集天數(shù)和校準(zhǔn)周期。表1a方法學(xué)比較試驗中數(shù)據(jù)分布建議表(質(zhì)量濃度)A組B組C組D組E組Test范圍%范圍%范圍%范圍%范圍%葡萄糖<501051-11040111-15030151-25010251-SL1尿素(mg/dL)<151015-254026-502051-10020100-SL1N6(mmol/L) 120-130 20131-14040

42、141-15030151-1601K+(mmol/L)<2035尿酸(mg/dL)<203-5205-8208-1020>10-SL2Ca(mg/dL)<108-9209-114011-1320>13-SL1無機磷<10堿性磷酸酶<NL/230NL-2NL20NL-2NL202NL-4NL204NL-SL1總蛋白(g/dL)<5105 7407 g40>g10白蛋白(g/L)<310D T3-440TD4-540k 7>510總膽紅素301-2302-5205-101010-SL1膽固醇120-18020181-22030221

43、-26030261-40020甘油三脂<751075-12530125-20030200-30020300-SI1AST(U/L)NL/220NL/2-NL30NL/2-NL302NL-4NL104NL-SL1Y -GT(U/I)0-NI/240NI/2-NI402NI-4NI104NI-SI1AIT(U/I)NI/220NI/2-NI20NI/2-NI402NI-4NI104NI-SI1ID(U/I)NI/215NI/2-NI25NI/2-NI302NI-5NI205NI-SI1CK(U/I)NI/215NI/2-NI25NI/2-NI302NI-5NI205NI-SI1肌酐(mg/d

44、l)20淀粉酶(U/L)0-NL40NL/2-NL402NL-4NL404NL-SLJ血紅蛋白<15表1b方法學(xué)比較試驗中數(shù)據(jù)分布建議表（物質(zhì)濃度）A組B組C組D組E組Test范圍%范圍%范圍%范圍%范圍%葡萄糖<10尿素(mmol/L)<10尿酸(mmol/L)<17820178-29720297-47620476-5920>595-20Ca(mmol/L)<10無機磷<10堿性磷酸酶vNL/230NL-2NL20NL-2NL202NL-4N204NL-SL10總蛋白（g/dL）<501050-704070-9040>9010白蛋白（g/

45、L）<43510435-58040580-72540>72510總膽紅素30膽固占醇<10甘油三脂<10肌酐（m2030221-44220442-8820884-SI10Fe(卩 mol/L)<20-淀粉酶（U/l）0-NI40NI/2-NI402NI-4N104NI-SI10血紅蛋白<15NL,實驗室正常范圍的上限upperlimitoflaboratory's normalra nge參考文獻：1.附錄A.標(biāo)本數(shù)據(jù)記錄表A1.例子：空白工作表日期：分析物:試驗方法：比較方法:試驗方法比較方法試驗方法（丫）比較方法（X）標(biāo)本號結(jié)果1結(jié)果2結(jié)果1結(jié)果2均值均值附錄A （續(xù)）A2.例子：已完成的標(biāo)本數(shù)據(jù)記錄表 第1頁共2頁日期：1/29/93分析物：計算舉例 試驗方法：Kipli ng比較方法：XYX試驗方法比較方法試驗比較方法方法（丫（X）標(biāo)結(jié)果1結(jié)果2結(jié)果1結(jié)果2本（丫1）（丫2）（X1）（X2）號附錄 B. 從例子中導(dǎo)出的散點圖B1 :重復(fù)檢測均值的散點圖試驗方法均值對比較方法均值附錄 B. （續(xù)）B2:所有結(jié)果的散點圖觀察到的單個試驗方法結(jié)果對比較方法均值附錄 B. （續(xù)）B3:均值差異與二種方法的均值的偏倚圖差異圖:（試驗方法均值比較方法均值）對（試驗方法均值 +比較方法均值） /2附錄 B.（ 續(xù)）B4:偏倚圖-單個結(jié)果