內(nèi)毒素型肺損傷與一氧化氮的關(guān)系及地塞米松對(duì)其影響

1、    內(nèi)毒素型肺損傷與一氧化氮的關(guān)系 及地塞米松對(duì)其影響        【摘要】目的：探討內(nèi)毒素型肺損傷與一氧化氮的關(guān)系及地塞米松對(duì)其影響。方法：30只SD大鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、ET組、ET地塞米松組，靜脈注射內(nèi)毒素(200gkg)造成急性肺損傷。結(jié)果：4h后血漿和肺組織勻漿中NO2NO3含量和丙二醛(MDA)含量、肺系數(shù)、肺含水量、肺干濕相對(duì)密度均顯著升高，與對(duì)照組相比差異有顯著性（P0.05或P0.01)。注射內(nèi)毒素前1h靜脈注射地塞米松(70mgkg)可明顯減

2、輕內(nèi)毒素引起的肺損傷，抑制內(nèi)毒素引起的NO2NO3含量和MDA含量及肺系數(shù)、肺含水量、肺干濕相對(duì)密度的升高，血漿、肺組織中NO2NO3含量與MDA含量呈正相關(guān)。結(jié)論：NO介導(dǎo)了內(nèi)毒素型肺損傷，大量釋放的NO參與肺損傷的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，地塞米松保護(hù)肺損傷作用可能與降低NO釋放、抗脂質(zhì)過氧化有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】?jī)?nèi)毒素肺損傷一氧化氮地塞米松丙二醛 Relationship between endotoxin-induced lung injury and nitric oxide and the benefical effect of dexamethasoneLi XiaominShen JieZen

3、g Yinming（The first People?s hospital of Lianyungang，Lianyungang 222002）【Abstract】Objective：Tostudytherelationshipbetween the production of nitric oxide，and endotoxin-induced lung injury and the benefical effect of dexamethasoneMethods：30 rats were divided randomly into three groups：control（n10），ET（

4、n10）and ETdexamethasone（n10）Acute lung injury was induced byasingle intravenous injection of endotoxin at the dosage of 200gkg body weightResults：Four hours after endotoxin injection，the malondialdehyde（MDA）content and NO2NO3 content in plasma and lung homogenate，the ratio of wet lung tissueto body

5、weight，lung index and water content were significantly increased compared with the control valuesTreatment with dexamethasone （70mgkg，1h before administration of endotoxin) markedly attenuated the endotoxin-induced lung injury as well as the increase in MDA content and NO2NO3 contentA close correlat

6、ion was shown between MDA content and NO2NO3 content in lung homogenateConclusion：These results suggested that lipoperoxidation and nitric oxide release may be involved in the pathogenesis of acute lung injury caused by endotoxinDexamethasone inhibits endotoxin induced NO release and lipoperoxidatio

7、n【Key words】EndotoxinLung injuryNitric oxideDexamethasoneMalondialdehyde近年來一氧化氮(NO)與肺損傷的關(guān)系越來越受到人們的重視1。糖皮質(zhì)激素在實(shí)驗(yàn)和臨床中已證實(shí)對(duì)肺損傷有保護(hù)作用，但與NO有何關(guān)系國(guó)內(nèi)報(bào)道尚少見。本研究通過觀察內(nèi)毒素型肺損傷中NO的水平變化和地塞米松對(duì)其的影響，探討造成內(nèi)毒素肺損傷和地塞米松抗損傷的可能機(jī)制。1材料與方法1.1主要試劑和儀器精制大腸桿菌內(nèi)毒素(escherichia coil O127 B8，Sigma公司)，地塞米松(連云港市正大天晴制藥有限公司)，二道生理記錄儀(成都儀器廠，LMS-2

8、B型)，日立V-2000型雙光束分光光計(jì)。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物模型大鼠(Sprague-Dowley，SD)30只，雄雌不拘，體重280±30g，隨機(jī)分成對(duì)照組、ET組、ET地塞米松組各10只；以20%烏拉坦(1.0gkg)腹腔內(nèi)注射麻醉，頸部氣管插管用于自動(dòng)呼吸；游離頸總動(dòng)脈，插管接2道生理儀；分離股靜脈插管用以連續(xù)恒速輸入生理鹽水及注藥，ET組靜脈注入ET（200gkg)，4h后采集標(biāo)本；ET地塞米松組先股靜脈注入地塞米松(70mgkg)，1h后注入ET（200gkg)，4h后采集標(biāo)本；對(duì)照組注入生理鹽水，4h后采集標(biāo)本。采血標(biāo)本離心制備血漿，置于20冰箱保存，以備檢測(cè)MDA的含

9、量，備測(cè)NO2NO3的血漿常溫保存。開胸活殺動(dòng)物，全肺取出稱重，并計(jì)算肺系數(shù)肺重(g）體重(g)×100，取右肺中葉1g稱濕重，置烤箱中干燥24h（90)至干重恒定，測(cè)定肺含水量(肺濕重肺干重)×100肺濕重)1.3測(cè)定指標(biāo)的辦法NO2NO3濃度測(cè)定用鎘還原柱層析和比色法。MDA測(cè)定以硫代巴比妥酸顯色法測(cè)血漿和肺組織勻漿脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物MDA含量。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示，用t檢驗(yàn)和方差分析進(jìn)行組間比較，并進(jìn)行線性相關(guān)分析。應(yīng)用Spss7.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。2結(jié)果(1)ET組肺系數(shù)、肺含水量、肺干濕相對(duì)密度均高于對(duì)照組(P0.01)，經(jīng)地塞米松

10、處理后，肺系數(shù)較ET組降低(P0.05)，肺含水量、肺干濕相對(duì)密度較ET組顯著降低(P0.01)，見表1。(2)ET組血漿及肺組織勻漿中MDA含量均高于對(duì)照組(P0.01)，地塞米松組與ET組比較顯著降低MDA含量(P0.01)，見表2。(3)ET組中血漿及肺組織勻漿中NO2NO3含量顯著升高(P0.01)，地塞米松組其含量明顯降低(P0.05)，見表3。(4)相關(guān)性分析，ET組血漿MDA、NO2NO3水平之間，肺組織MDA、NO2NO3水平之間顯著正相關(guān)(r0.86，P0.01；r0.92，P0.01)。肺含水量、肺干濕相對(duì)密度與肺組織NO2NO3水平呈顯著正相關(guān)(r0.89，P0.01；r

11、0.77，P0.05)。表1ET大鼠肺系數(shù)、肺含水量、肺干濕相對(duì)密度變化組別肺系數(shù)肺含水量肺干濕比對(duì)照組0.66±0.0377.34±0.804.07±0.27ET組1.13±0.05?81.70±1.10?5.48±0.23?ET組地米組0.87±0.4178.43±0.874.32±0.17     注：?與對(duì)照組相比P0.01，與地米組相比P0.05，與地米組相比P0.01 表2大鼠血漿及肺組織勻漿中MDA含量的變化組別血漿中MDA （mol*L1)肺組織勻漿

12、MDA（nmol*g1Proteint)對(duì)照組2.24±0.7157.50±23.90ET組6.93±3.67?118.47±27.43?ET組地米組2.81±0.7472.12±23.10     注：?與對(duì)照組相比P0.01，與ET組相比P0.01 表3大鼠血漿及肺組織勻漿中NO2NO3含量變化組別血漿中NO2NO3 （mol*L1)肺組織NO2NO3（mmol*g1Proteint）對(duì)照組27.56±7.130.73±0.34ET組113.60±25.30?4

13、.20±1.60?ET組地米組41.43±9.211.85±0.88     注：?與對(duì)照組相比P0.01，與地米組相比P0.05 3討論目前，諸多研究注意到NO的自由基活性對(duì)肺損傷的影響2，Haddad3等發(fā)現(xiàn)超氧陰離子O*2與NO可生成過氧化亞硝基陰離子(OONO)，后者不僅可以損傷肺泡上皮、肺泡表面活性物質(zhì)，還可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷。研究表明使用選擇性iNOS抑制劑氨基胍能大大減輕內(nèi)毒素型肺損傷4，從而證實(shí)NO在內(nèi)毒素型肺損傷起重要作用。在本實(shí)驗(yàn)觀察到：ET組血漿及肺組織勻漿中NO2NO3含量顯著高于對(duì)照組，并且NO2NO

14、3含量與血漿、肺組織勻漿中MDA含量及肺系數(shù)、肺含水量、肺干濕相對(duì)密度等肺損傷指標(biāo)呈正相關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)內(nèi)毒素肺損傷中NO含量增高，大量的NO在內(nèi)毒素型肺損傷中扮演著重要角色。ET不但可使NO大量生成，且可致氧自由基大量釋放，NO與氧自由基結(jié)合，生成毒性更強(qiáng)的OONO加速組織、細(xì)胞脂質(zhì)過氧化反應(yīng)5。這可能是造成肺損傷的重要因素。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，地塞米松能顯著抑制肺損傷的各項(xiàng)指標(biāo)，使肺損傷減輕，發(fā)現(xiàn)地塞米松可降低NO含量，而降低的NO含量、MDA含量與肺損傷指標(biāo)正相關(guān)，MDA是體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)物，其含量直接反映脂質(zhì)過氧化的速度，也間接說明氧自由基產(chǎn)生的多少，本實(shí)驗(yàn)觀察，在地塞米松組MDA含量顯

15、著減少，間接說明氧自由基生成減少。糖皮質(zhì)激素對(duì)ET誘導(dǎo)的致炎介質(zhì)釋放也有強(qiáng)大的抑制作用6，有人利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)證明地塞米松對(duì)iNOS基因mRNA表達(dá)量明顯減少，且具有劑量相關(guān)性，提示抑制基因轉(zhuǎn)錄是地塞米松抑制NO釋放的機(jī)制之一?？傊芯孔C明NO在內(nèi)毒素誘導(dǎo)的急性肺損傷的病理生理過程中起到較為關(guān)鍵的作用，地塞米松對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的急性肺損傷具有保護(hù)作用，其機(jī)理可能與降低NO釋放，抗脂質(zhì)過氧化有關(guān)。李小民（江蘇省連云港市第一人民醫(yī)院急診科連云港，222002）申捷（徐州市第一人民醫(yī)院ICU）曾因明（徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院）參考文獻(xiàn)1，Palmer RMJThe discover

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