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文檔簡介
1、群體中的基因型頻率群體中的基因型頻率與基因頻率的分析與基因頻率的分析實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 目目 的的l掌握掌握ABO血型的鑒定方法,分析其決定基血型的鑒定方法,分析其決定基因在人群中的分布。因在人群中的分布。l通過對人群中通過對人群中PTC嘗味能力的檢測及相關(guān)基嘗味能力的檢測及相關(guān)基因頻率的分析,了解基因在群體水平上傳遞因頻率的分析,了解基因在群體水平上傳遞的規(guī)律。的規(guī)律。l掌握遺傳平衡定律,了解改變平衡的因素及掌握遺傳平衡定律,了解改變平衡的因素及作用。作用。l人群中人群中ABO血型分布的分析血型分布的分析l人群中人群中PTC味盲基因頻率分析味盲基因頻率分析實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 內(nèi)內(nèi) 容容(一)(一)ABO血型
2、遺傳原理血型遺傳原理l1900年年Karl Landsteiner博士報(bào)道人類博士報(bào)道人類ABO血型系血型系統(tǒng)。統(tǒng)。ABO血型的劃分基礎(chǔ)為紅血球細(xì)胞膜上抗原存血型的劃分基礎(chǔ)為紅血球細(xì)胞膜上抗原存在的性質(zhì)。在的性質(zhì)。l從遺傳上來看,紅血球抗原類型的差別在其糖基上。從遺傳上來看,紅血球抗原類型的差別在其糖基上。這是由相應(yīng)的基因決定的,即位于人類第九染色體這是由相應(yīng)的基因決定的,即位于人類第九染色體上的上的3個(gè)復(fù)等位基因個(gè)復(fù)等位基因IA、IB 和和 i 決定的。決定的。 IA、IB基因基因間為并顯性,而間為并顯性,而i對對IA、IB為隱性。為隱性。 一、人群中一、人群中ABO血型分布的分析血型分布的
3、分析 ABO血型抗原、抗體特性血型抗原、抗體特性血型血型基因型基因型細(xì)胞抗原細(xì)胞抗原血清抗體血清抗體AIAIA、IAiA抗抗BBIBIB 、IBiB抗抗AABIAIBA B_Oii_抗抗A 抗抗B(二)實(shí)驗(yàn)材料(二)實(shí)驗(yàn)材料l 凹面載玻片凹面載玻片l 一次性刺血針一次性刺血針l 紅血球吸管紅血球吸管l 酒精棉球酒精棉球l 生理鹽水生理鹽水l 標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)血清l 牙簽牙簽(三)實(shí)驗(yàn)步驟(三)實(shí)驗(yàn)步驟1. 用酒精棉球消毒采血手指、采血針、血球吸管。用酒精棉球消毒采血手指、采血針、血球吸管。2. 用刺血針刺破手指,然后用紅血球吸管吸取用刺血針刺破手指,然后用紅血球吸管吸取0.02ml血液,移入血液,
4、移入指管后,取指管后,取0.5ml生理鹽水注入小指管并混勻。生理鹽水注入小指管并混勻。3. 分置于分置于2個(gè)凹面載玻片的凹面內(nèi)。個(gè)凹面載玻片的凹面內(nèi)。 注意:請立即清洗紅血球吸管和小指管,以防血凝結(jié)堵塞。注意:請立即清洗紅血球吸管和小指管,以防血凝結(jié)堵塞。4. 在載玻片的左、右上角標(biāo)好在載玻片的左、右上角標(biāo)好“A”、“B”字樣,分別滴入抗字樣,分別滴入抗A()、抗抗B()標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)血清1滴,用牙簽攪拌,靜置,觀察。滴,用牙簽攪拌,靜置,觀察。5. 觀察判定:如果紅細(xì)胞聚集成團(tuán),雖經(jīng)振蕩或輕輕攪動(dòng)亦不散開,觀察判定:如果紅細(xì)胞聚集成團(tuán),雖經(jīng)振蕩或輕輕攪動(dòng)亦不散開,為為“凝集凝集”現(xiàn)象;紅細(xì)胞散
5、在均勻分布或雖似成團(tuán),一經(jīng)振蕩即現(xiàn)象;紅細(xì)胞散在均勻分布或雖似成團(tuán),一經(jīng)振蕩即散開,則為未凝集或散開,則為未凝集或“假凝集假凝集”。判定標(biāo)準(zhǔn)判定標(biāo)準(zhǔn) A B AB O抗抗A血清血清() + - + -抗抗B血清血清() - + + -+ 反應(yīng);反應(yīng);- 不反應(yīng)不反應(yīng) (四)實(shí)(四)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 結(jié)結(jié) 果果 統(tǒng)計(jì)全組各血型統(tǒng)計(jì)全組各血型人數(shù)所占比例,人數(shù)所占比例,和其他組數(shù)據(jù)相和其他組數(shù)據(jù)相加,計(jì)算加,計(jì)算 IA、IB 和和i的基因頻率的基因頻率人數(shù)人數(shù)A AB BABABO O1 1組組2 2組組3 3組組4 4組組5 5組組7 78 83 310106 6組組7 7組組總數(shù)總數(shù)(一)(一)PTC
6、味盲實(shí)驗(yàn)原理味盲實(shí)驗(yàn)原理 l苯硫脲(苯硫脲(PTC),又稱苯基硫代碳酰二胺,是一種白色結(jié)晶狀有機(jī)化,又稱苯基硫代碳酰二胺,是一種白色結(jié)晶狀有機(jī)化合物。因具有硫胺基團(tuán)合物。因具有硫胺基團(tuán) N-C=S 而具有苦味,不同的人對其溶液苦而具有苦味,不同的人對其溶液苦味有不同的嘗味能力。該嘗味能力是由一對等位基(味有不同的嘗味能力。該嘗味能力是由一對等位基(Tt)所決定,)所決定,其中其中T對對t為不完全顯性。此性狀按照孟德爾方式遺傳。為不完全顯性。此性狀按照孟德爾方式遺傳。l正常嘗味者的基因型為正常嘗味者的基因型為TT,能嘗出,能嘗出 1/7500001/6000000的的 PTC 溶液的苦味;具有溶
7、液的苦味;具有Tt基因型的人嘗味能力較低,只能嘗出基因型的人嘗味能力較低,只能嘗出1/480000 1/380000 的的PTC溶液的苦味;而基因型為溶液的苦味;而基因型為 tt 的人的人只能嘗出只能嘗出 1/24000 以上以上PTC濃度的苦味。有些個(gè)體甚至濃度的苦味。有些個(gè)體甚至 PTC 結(jié)結(jié)晶也嘗不出苦味,這一類個(gè)體在遺傳學(xué)上稱為晶也嘗不出苦味,這一類個(gè)體在遺傳學(xué)上稱為PTC味盲味盲。二、人群中二、人群中 PTC味盲基因頻率分析味盲基因頻率分析 編號(hào)編號(hào)濃濃 度度基因型基因型1號(hào)號(hào)1 / 750tt2號(hào)號(hào)1 /1500tt3號(hào)號(hào)1 / 3000tt4號(hào)號(hào)1 / 6000tt5號(hào)號(hào)1 /
8、12000tt6號(hào)號(hào)1 / 24000tt7號(hào)號(hào)1 / 48000Tt8號(hào)號(hào)1 / 96000Tt 編號(hào)編號(hào)濃濃 度度基因型基因型9號(hào)號(hào)1 / 192 000Tt10號(hào)號(hào)1 / 380 000Tt11號(hào)號(hào)1 / 750 000TT12號(hào)號(hào)1 / 1 500 000TT13號(hào)號(hào)1 / 3 000 000TT14號(hào)號(hào)1 / 6 000 000TT15號(hào)號(hào)蒸餾水蒸餾水 (二)實(shí)驗(yàn)步驟(二)實(shí)驗(yàn)步驟 1、受試者坐于椅子上,仰頭張口。測試者用滴管滴、受試者坐于椅子上,仰頭張口。測試者用滴管滴23滴滴14號(hào)液號(hào)液于受試者舌根部,令其徐徐咽下品味,然后再用蒸餾水做同樣的于受試者舌根部,令其徐徐咽下品味,然后
9、再用蒸餾水做同樣的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)。 注意:為避免心理因素的干擾,測試時(shí)受試者需背對試劑架,測注意:為避免心理因素的干擾,測試時(shí)受試者需背對試劑架,測試者必須將試劑瓶標(biāo)簽掩蓋與手掌中。試者必須將試劑瓶標(biāo)簽掩蓋與手掌中。2、詢問受試者能否鑒別此兩種溶液的味道。若不能鑒別或鑒別不、詢問受試者能否鑒別此兩種溶液的味道。若不能鑒別或鑒別不準(zhǔn),則依次用準(zhǔn),則依次用13號(hào)、號(hào)、12號(hào)溶液重復(fù)實(shí)驗(yàn),直至能鑒別出號(hào)溶液重復(fù)實(shí)驗(yàn),直至能鑒別出PTC的的苦味為止??辔稙橹?。3、當(dāng)受試者鑒別出某號(hào)溶液時(shí),應(yīng)當(dāng)用此號(hào)溶液與蒸餾水交替測、當(dāng)受試者鑒別出某號(hào)溶液時(shí),應(yīng)當(dāng)用此號(hào)溶液與蒸餾水交替測試,重復(fù)三次,三次結(jié)果相同時(shí),才可
10、采信。試,重復(fù)三次,三次結(jié)果相同時(shí),才可采信。 (三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 根據(jù)受試者最初覺根據(jù)受試者最初覺察苦味溶液的編號(hào),察苦味溶液的編號(hào),而查出相應(yīng)的基因型。而查出相應(yīng)的基因型。詳細(xì)記錄試驗(yàn)結(jié)果,詳細(xì)記錄試驗(yàn)結(jié)果,填入表中。各組數(shù)據(jù)填入表中。各組數(shù)據(jù)相加計(jì)算各基因型頻相加計(jì)算各基因型頻率與基因的頻率。率與基因的頻率。人數(shù)人數(shù)TTTttt1組組2組組3組組4組組5組組42136組組7組組總數(shù)總數(shù) 實(shí)驗(yàn)作業(yè)實(shí)驗(yàn)作業(yè)1、統(tǒng)計(jì)全年級(jí)的、統(tǒng)計(jì)全年級(jí)的ABO血型頻率,求出血型頻率,求出IA、IB 和和 i 的基的基因頻率,并判定該群體的因頻率,并判定該群體的ABO血型血型各基因型頻率是否各基因型頻率是否符合符
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