肝癌癌旁組織DNA倍體檢測的預(yù)后意義

1、    肝癌癌旁組織DNA倍體檢測的預(yù)后意義        摘要：目的探討肝癌患者癌旁組織DNA倍體變化和預(yù)后的關(guān)系。方法對42例原發(fā)性肝癌患者的癌旁組織的DNA倍體和S期細(xì)胞比率(SPF)進(jìn)行了流式細(xì)胞術(shù)分析。結(jié)果肝癌患者癌旁組織DNA異倍體檢出率為59.5%。肝癌癌旁組織為DNA二倍體者的5年生存率和術(shù)后生存期均顯著高于癌旁組織為異倍體的患者(分別為82.4%、65.8月±21.7月和32.0%、32.1月±23.6月，P均<0.01)。二倍體癌

2、旁組織患者的生存率曲線明顯高于癌旁異倍體病例。結(jié)論癌旁組織出現(xiàn)DNA異倍體預(yù)示該肝癌患者的預(yù)后不良。關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞術(shù)；DNA倍體；原發(fā)性肝癌；預(yù)后分類號：R735.7文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1000-8578(2000)01-0011-02Prognosis Signification of Measurement of DNA Ploidy in Para-cancer tissue on Patients with Primary Liver CancerZHOU Zhen-ying,ZHU Yue-qing,WU Xiao-liu,et al（Jiangsu Institute of

3、Cancer Research,Nanjing 210009 China）Abstract：For studing the relationship of patient prognosis to DNA ploidy of para-cancer tissue in patients with primary liver cancer,DNA ploidy and SPF were measured on para-cancer tissue samples from 42 primary liver cancer by flow cytometry.The results showed t

4、hat DNA aneuploidy rate of para-cancer tissue was 59.5%.The 5 year survival rate and survival time of patients with diploidy in para-cancer tissue were higher than that of patients with aneuploidy (82.4%，65.8 moons ± 21.7 moons and 32.0%,32.1% moons ± 23.6 moons,P<0.01 respectively).The

5、 survival rate line of cases with diploidy was higher than that of cases with aneuploidy.The above results provided objective evidence for grading patients as regards prognosis in primary liver cancer.Key words：Primary liver cancer;Flow cytometry;DNA content;Prognosis癌旁組織是癌組織向正常組織過度并在手術(shù)治療時留在體內(nèi)的手術(shù)殘端組

6、織。其DNA含量變化與癌中心灶關(guān)系十分密切1，2。癌旁組織的DNA含量變化與患者預(yù)后關(guān)系如何，是人們普遍關(guān)心的問題。為此，我們對42例肝細(xì)胞癌患者的癌旁組織的DNA含量進(jìn)行了流式細(xì)胞術(shù)分析，并對患者術(shù)后進(jìn)行了89個月的隨訪觀察。從而探討癌旁組織DNA培體變化的預(yù)后意義。1材料和方法1.1臨床資料1989年7月1991年6月共收治經(jīng)病理證實的肝細(xì)胞癌患者42例。其中男34例，女8例；年齡11歲71歲，中位年齡46歲。臨床分期：期8例，期31例，期3例；病理分級：1級2例，2級16例，3級23例，4級1例。對患者術(shù)后隨訪66月89月。1.2取材及制樣取手術(shù)切緣外2cm肝組織1小塊，經(jīng)病理檢查未發(fā)現(xiàn)

7、癌細(xì)胞浸潤。另取癌中心灶及切緣外10cm正常肝組織作為對照標(biāo)本。取材后按本實驗室FCM-DNA檢測的制樣常規(guī)制成單細(xì)胞懸液并進(jìn)行熒光染色，然后進(jìn)行FCM-DNA含量的常規(guī)檢測3。1.3檢測指標(biāo)(1)DNA指數(shù)(DI)和DNA倍體分類：二倍體(D)、近二倍體(ND)、四倍體(T)、非整倍體(AN)和多異倍體(M)。樣品中出現(xiàn)后4種倍體類型之一者均為DNA異倍體細(xì)胞3。(2)S期細(xì)胞比率(SPF)，SPF(%)=S÷(G0/G1+S+G2M)×100%.1.4統(tǒng)計學(xué)分析計數(shù)和計量資料分別用2和“t”檢驗做相差顯著性檢測。2結(jié)果2.1癌灶和癌旁組織的DNA含量分析(見表1)表1不

8、同組織的DI、異倍體率和SPF的比較組別例數(shù)DI異倍體率SPF(%)+sP%P+sP癌中心灶421.52±0.47<0.0578.6<0.0529.1±9.7<0.01癌旁組織421.23±0.2959.524.1±10.7<0.01對照組織131.00±0另外，癌中心灶DNA異倍體患者的DI值顯著高于癌旁組織異倍體DI值(分別為1.66±0.44和1.38±0.28，P<0.01)。癌旁組織和癌中心灶DNA倍體一致率(二者DI值相差<10%者為同一個DNA干系)為45.2%。2.2癌旁組

9、織DNA倍體和患者的預(yù)后(表2) 表2不同倍體患者的五年生存率和術(shù)后生存期倍體例數(shù)5年生存率生存期(月)%P+sP二倍體1782.4<0.0165.8±21.7<0.01異倍體2532.032.1±23.6雖然DNA異倍體患者的5年生存率和術(shù)后生存期均顯著低于二倍體患者(P<0.01)，但不同類型異倍體患者之間都無顯著差異(P>0.05)。不同DNA倍體患者的生存率取線(見附)附不同倍體患者的生存率曲線2.3癌旁組織的SPF與患者的預(yù)后SPF增高者的5年生存率與術(shù)后生存期均顯著低于SPF不增高者(>均值者為升高，否則為不升高者)，其參數(shù)分別為3

10、5.0%、33.9月±25.9月和68.2%、56.6月±27.8月(P均<0.05)。3討論3.1肝細(xì)胞癌患者預(yù)后的估計對惡性腫瘤患者預(yù)后的估計，目前一般均采用患者臨床分期、病理分級、種瘤大小、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床生物學(xué)行為指標(biāo)對患者預(yù)后做出判斷4。而這些指標(biāo)的確定往往存在人為因素；同時這些指標(biāo)都是腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中不同階段的表現(xiàn)。因此，在臨床應(yīng)用中有一定的局限性。近年人們相繼提出，以癌細(xì)胞的某些生物學(xué)特性為指標(biāo)來估計患者的預(yù)后。例如，二倍體惡性腫瘤患者的預(yù)后明顯好于異倍體腫瘤5；癌組織增殖活性低的患者預(yù)后明顯好于增殖活性高的患者6；癌患者血清AFP(-)患者預(yù)后明

11、顯好于AFP(+)患者7。但癌旁組織的生物學(xué)特性變化的預(yù)后意義研究還沒引起人們的重視。3.2肝癌癌旁組織DNA倍體變化的預(yù)后意義盡管許多學(xué)者對肝細(xì)胞癌中心灶DNA倍體變化與患者預(yù)后關(guān)系的研究做了大量工作5，并且多數(shù)學(xué)者認(rèn)為二倍體肝細(xì)胞癌患者預(yù)后明顯好于異倍體患者，但肝癌旁組織倍體變化的預(yù)后意義研究還很少有人報道8。一般認(rèn)為癌灶出現(xiàn)DNA異倍體，明顯影響腫瘤惡性度，但手術(shù)后已從體內(nèi)清除，對術(shù)后患者沒有直接影響；而癌旁組織留在體內(nèi)，其生物學(xué)特性改變直接影響到患者的預(yù)后。本文對42例肝癌患者癌旁組織DNA倍體分析發(fā)現(xiàn)，其異倍體檢出率為59.5%。它的存在，可能是肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的根源之一8。本文對

12、患者隨訪證實了這種觀點。癌旁組織異倍體者5年生存率和術(shù)后生存期均顯著低于二倍體者，分別為32.0%、32.1月±23.6月和82.4%、65.8月±21.7月(P均<0.01)。而且二者的生存曲線也明顯分開(見附)。因此，癌旁組織DNA倍體變化也是判斷肝細(xì)胞癌患者預(yù)后的一項良好生物學(xué)指標(biāo)。作者單位：周振英（江蘇省腫瘤防治研究所南京210009）朱月清（江蘇省腫瘤防治研究所南京210009）吳曉柳（江蘇省腫瘤防治研究所南京210009）張軍妮（江蘇省腫瘤防治研究所南京210009）張仁希（江蘇省腫瘤防治研究所南京210009）參考文獻(xiàn)：1周振英，戴亮，馮平柏，等.肝癌癌

13、旁組織的流式細(xì)胞DNA含量分析J.河南腫瘤學(xué)雜志，1993，7(1)：4.2周振英，張軍妮，蔣明，等.惡性腫瘤癌旁組織DNA倍體的流式細(xì)胞測量術(shù)分析J.實用癌癥雜志，1995，10(2)：82.3沈關(guān)心，周汝麟.現(xiàn)代免疫學(xué)實驗技術(shù)M.第1版，武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，1998.195200.4劉振華.腫瘤預(yù)后學(xué)M.第1版.北京：科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，1995.478492.5Fajimoto J,Okamoto E,Yamanaka N,et al.Flow cytometric DNA analysis of he patocellular carcinomaJ.Cancer,1991,67:939.6Pekka JK,Joensuu H and Salmi T.Prognostic value of flow cyto cytometric DNA content ana