實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀大型儀器設(shè)備購置論證報(bào)告

1、弋姬影ZHEJIANG NORMAL UNIVERSITY大型儀器設(shè)備購置論證報(bào)告儀器設(shè)備名稱實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀目名稱生態(tài)環(huán)境科技平臺目負(fù)責(zé)人陳建榮表日期2017年4月12日實(shí)驗(yàn)室管理處制填表說明1單價(jià) 10 萬元及以上儀器設(shè)備的申購均需填寫此表， 并與申購計(jì)劃一起上報(bào)有關(guān)部門。2所在學(xué)院（部門）組織 37 人單數(shù)技術(shù)專家進(jìn)行論證，并通知項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)管理、設(shè)備管理等部門參加論證。 申請單一來源采購的需 3 人以上單數(shù)非本校專家參加論證； 未列入全省統(tǒng)一論證進(jìn)口 產(chǎn)品范圍的進(jìn)口產(chǎn)品需 5 人以上單數(shù)非本校專家參加論證。3論證會由專家組組長主持，主要程序?yàn)椋荷曩徣藞?bào)告、現(xiàn)場考察、專家質(zhì)詢與討論、專

2、家組形成論證意見并簽名。4專家論證同意，經(jīng)學(xué)院（部門） 、項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)管理部門簽字并蓋章后，報(bào)本科教學(xué)部（實(shí)驗(yàn)室管理處）網(wǎng)上公示一周無異議 后實(shí)施。5此表一式 1 份（如設(shè)備為進(jìn)口設(shè)備，請?zhí)峤?2份）。設(shè)備名稱中文實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀英文Real-Time PCR System規(guī)格型號LightCycler96（ 96 通量）申購數(shù)量1套現(xiàn)行單價(jià)人民幣37萬美元萬購置經(jīng)費(fèi) 來源省重點(diǎn)高校建設(shè)運(yùn) 行經(jīng)費(fèi)運(yùn)行經(jīng)費(fèi)來源省重點(diǎn)高校建設(shè)運(yùn)行經(jīng)費(fèi)主要技術(shù)指 標(biāo)與功能，是通過或熒光標(biāo)記的特異性的探針，結(jié)合了核算擴(kuò)增、雜交、和 實(shí)時(shí)檢測技術(shù)，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過程， 結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對基

3、因表達(dá)進(jìn)行分析研究，對目的基因進(jìn)行定 量的分析，進(jìn)行SNP單核苷酸多態(tài)性和突變位點(diǎn)的分析檢測。熒光 定量PCR極大地簡化了定量檢測的過程，而且做到了真正的絕對定 量分析。并且具備咼效率、反應(yīng)迅速、重復(fù)性好、靈敏度咼、特異 性強(qiáng)、結(jié)果清晰的特點(diǎn)。隨著和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定 量PCR被廣泛用于環(huán)境監(jiān)測及環(huán)境健康評價(jià)。它還可以被應(yīng)用于分 子生物學(xué)、植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)和醫(yī)學(xué)等眾多學(xué)科。用房情況地點(diǎn)面積輔助設(shè)施配備是否 需改建落實(shí) 情況8 幢 30326 m2否已落實(shí)管理和使 用技術(shù)人 員配備姓名職稱專管 或兼管是否 使用過熟練 程度是否 需培訓(xùn)孫洪杰講師專管是熟練否洪華嫦副教授監(jiān)管是熟練否，是通

4、過或熒光標(biāo)記的特異性的探針，結(jié)合了核算擴(kuò)增、雜交、和 實(shí)時(shí)檢測技術(shù)，對PCF產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過程, 結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對基因表達(dá)進(jìn)行分析研究，對目的基因進(jìn)行定主要用途和適用學(xué)科范圍量的分析，進(jìn)行SNP單核苷酸多態(tài)性和突變位點(diǎn)的分析檢測。熒光 定量PCR極大地簡化了定量檢測的過程，而且做到了真正的絕對定 量分析。并且具備高效率、反應(yīng)迅速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異 性強(qiáng)、結(jié)果清晰的特點(diǎn)。隨著和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定 量PCR被廣泛用于環(huán)境監(jiān)測及環(huán)境健康評價(jià)。它還可以被應(yīng)用于分 子生物學(xué)、植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)和醫(yī)學(xué)等眾多學(xué)科。實(shí)時(shí)熒光定量PCR是分子生物學(xué)的常規(guī)檢測手段，對于環(huán)境

5、科 學(xué)與工程專業(yè)而言，通過熒光定量 PCR基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)教學(xué)能夠使學(xué)生了解如何檢測環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)，如何對環(huán)境工程治污效果 進(jìn)行健康風(fēng)險(xiǎn)安全評估，能夠讓學(xué)生更好的了解環(huán)境科學(xué)與工程專 業(yè)的重要性，而且通過此實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蚣ぐl(fā)學(xué)生對實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)興趣，讓 學(xué)生既體會到環(huán)境健康風(fēng)險(xiǎn)評估的重要性，又能使學(xué)生認(rèn)識到熒光購置必要性定量PCR基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)的重要性和實(shí)用性，使學(xué)生在獲得知識的同 時(shí)得到實(shí)驗(yàn)技能的全面訓(xùn)練，提升學(xué)生的專業(yè)知識技能?？傊?，熒光定量PCR作為一個(gè)新興檢測手段可以幫助我們從基 因水平上了解環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)，并準(zhǔn)確建立環(huán)境污染物與其 引起的毒性效應(yīng)之間的劑量效應(yīng)關(guān)系，闡明環(huán)境污染物的致毒機(jī)

6、制。此外實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)還可以廣泛應(yīng)用于環(huán)境中細(xì)菌、病毒、 環(huán)境激素等污染物的檢測。除此之外，本儀器設(shè)備可用于醫(yī)學(xué)、農(nóng) 牧、生物相關(guān)。本校是否有 同類設(shè)備、數(shù)量及不能 共享的理由安裝場地滿 足條件（水、 電、氣等是 否齊全）、安 全保護(hù)措施 落實(shí)情況、 是否涉及放 射源物品和 劇毒品等危 險(xiǎn)性材料經(jīng)前期調(diào)研，目前生化學(xué)院擁有 4臺該儀器，但該院的省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和省重中之重學(xué)科等眾多科研團(tuán)隊(duì)，對該儀器的依賴性強(qiáng), 使用率高，現(xiàn)有的4臺儀器并不能滿足現(xiàn)有的預(yù)約使用。而且熒光 定量PCR在環(huán)境監(jiān)測、環(huán)境評估中的使用頻率越來越高，因此熒光 定量PCR對于環(huán)境科學(xué)與工程專業(yè)非常重要，而且了解熒光定量

7、PCR在環(huán)境中的應(yīng)用對于環(huán)境科學(xué)與工程專業(yè)的本科生十分重要,為了更好的開展環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)科的教學(xué)與科研，因此申請本學(xué) 院采購該設(shè)備。安裝場地滿足用電的安全需求，不涉及用水和用氣。不涉及放射源 物品和劇毒品等危險(xiǎn)性材料。曰.量國內(nèi)外同類 設(shè)備、品牌、 規(guī)格、性能、 技術(shù)指標(biāo)、 特色、附件、 價(jià)格、售后 服務(wù)、應(yīng)用 支持等的比 較實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有準(zhǔn)確性高、靈敏度高、操作簡單、檢測速 度快等優(yōu)點(diǎn)。目前，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR在國內(nèi)已有生產(chǎn)，主要廠商 如的TL988型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀、杭州博日的FQD-48A等。但 是設(shè)備熒光讀取率低，靈敏度較差，測量過程和數(shù)據(jù)后處理過程相 對復(fù)雜。相比而言

8、，進(jìn)口的定量 PCR，具有靈敏度高、加熱速度快、 檢測過程無需Rox熒光染料校正，無需定期校正光路等優(yōu)點(diǎn)。由于目前國產(chǎn)設(shè)備的靈敏性差，測量過程和數(shù)據(jù)后處理過程相對 復(fù)雜，因此申請采購進(jìn)口設(shè)備?，F(xiàn)在主流的國外進(jìn)口熒光定量PCR儀主要有ABI公司的7500,美國伯樂公司Bio-Rad CFX96 touch，羅 氏公司的Roche LightCycler96等三種不同品牌。通過前期調(diào)研發(fā)現(xiàn)， ABI7500的加熱模塊具有邊緣效應(yīng)，只有中央的孔位效果溫度具有 一致性，96孔板中僅中間的48個(gè)孔位能夠保證溫度的一致性。此外， 此儀器在硬件設(shè)計(jì)上存在缺陷，需要額外的 ROX染料進(jìn)行校正，并 且占用了一個(gè)

9、檢測通道，國內(nèi)的試劑廠商都不加ROX染料，所以其檢測的準(zhǔn)確性和重復(fù)性還是很難保證的，尤其是在較低的模板進(jìn)行 檢測時(shí)效果不佳，偏差會更大。伯樂的CFX96 touch儀器在硬件設(shè)計(jì)上也存在問題，致使同樣的 反應(yīng)體系在該儀器進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，陽性樣本的擴(kuò)增曲線熒光增量比較 低，檢測效果不好。該儀器在國內(nèi)的使用率較低，而且伯樂的熒光 定量PCR在國際上仍屬于低端產(chǎn)品，返修率太高。而羅氏熒光定量PCR Roche-LightCycler 96基于其獨(dú)特的專利技術(shù)， 具有獨(dú)特的Therma-BasM技術(shù)提升導(dǎo)熱效率，能夠提高孔位溫度均 一性，而且其散熱塊為銀質(zhì)材料，能夠快速降溫。此外產(chǎn)品檢測靈 敏、反應(yīng)速度迅

10、速、檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠等特點(diǎn)，與其他國際品牌相 比，具有其他品牌無可比擬的優(yōu)勢，因此申請單一來源采購。國內(nèi)外同類 設(shè)備、品牌、 規(guī)格、性能、 技術(shù)指標(biāo)、 特色、附件、 價(jià)格、售后 服務(wù)、應(yīng)用 支持等的比 較儀器名稱Roche-LightCycler 96ABI 7500fastBio-Rad CFX96 touch反應(yīng)時(shí)間（40個(gè)循環(huán)）標(biāo)準(zhǔn)模式：40分鐘96孔常規(guī)檢測約120分鐘；使用Fast模塊的20卩1反應(yīng)體積約35分 鐘90分鐘，快速模式 30分 鐘激發(fā)光源高強(qiáng)度白色固態(tài)光源（白光 LED）鹵鎢燈6個(gè)單色LED光源壽命10000? 小時(shí)以上2000?小時(shí)10000?小時(shí)以上光源預(yù)熱無需半小

11、時(shí)無需光路設(shè)計(jì)？固定光路，192根獨(dú)立光 纖導(dǎo)光，所有樣本同時(shí)檢 測，避免邊緣效應(yīng)固定光路，但由于 鹵鎢燈為不穩(wěn)定光 源，需要定期校正 熒光背景移動(dòng)光路，逐孔移動(dòng)式采 光，正面開蓋設(shè)計(jì)，需時(shí)常 校正定期校正 光路無需需要，半年一次需要，一年一次ROX校正無需需要無需溫控模塊材質(zhì)銀質(zhì)模塊銅鋁合金銅鋁合金溫度均一性？士。C士°C, STD < C士。C熔解曲線溫度分辨率°C°C無此參數(shù)梯度PCR功能有不支持有HRM支持不支持宣稱支持（但發(fā)售4年文獻(xiàn) 不到30篇）使用效益預(yù) 測及風(fēng)險(xiǎn)分 析開放共享實(shí) 施方案和是 否同意納入 學(xué)校共享平 臺本熒光定量PCR可以實(shí)施開放共享，收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)為：元/孔/次。該熒光定量PCR除可供環(huán)境科學(xué)與工程系的老師、研究生及本 科生使用外，還可以給其他學(xué)院及其他單位的研究人員提供檢測服 務(wù)，創(chuàng)造部分經(jīng)濟(jì)效益。項(xiàng)目負(fù)責(zé)人簽字：陳建榮熒光定量PCR作為一個(gè)新興檢測手段可以幫助我們從基因水平上了 解環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)，并準(zhǔn)確建立環(huán)境污染物與其引起的毒性 效應(yīng)之間的劑量效應(yīng)關(guān)系，闡明環(huán)境污染物的致毒機(jī)制。此外實(shí)時(shí) 熒光定量PCR技術(shù)還可以廣泛應(yīng)用于環(huán)境中細(xì)菌、病毒、環(huán)境激素 等污染物的檢測。除此之外，本儀器設(shè)備可用于醫(yī)學(xué)、農(nóng)牧、生物 相關(guān)分子生物學(xué)定量研究。證.、八丿意、見組長簽字：鐘依均2017年7月2