遠(yuǎn)距離調(diào)控元件與遺傳性疾病

1、遠(yuǎn)距離調(diào)控元件與遺傳性疾病                     作者：李亞王丹何浪王玉明 【摘要】  組織和發(fā)育表達(dá)特異性基因通常具有高度復(fù)雜的表達(dá)調(diào)控模式。除啟動(dòng)子外，該類(lèi)基因的正常表達(dá)尚需要其它調(diào)控元件參與。這些調(diào)控元件主要包括增強(qiáng)子和沉默子等，它們可位于距離轉(zhuǎn)錄基因很遠(yuǎn)的DNA序列中，甚至存在于與轉(zhuǎn)錄基因功能上不相關(guān)的鄰近基因內(nèi)。含有組織特異性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的調(diào)控元件，通過(guò)參

2、與調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)組織器官的分化與發(fā)育。這種精確的調(diào)控機(jī)制一旦破壞，將導(dǎo)致疾病的發(fā)生。而且，某些調(diào)控元件的異常能導(dǎo)致臨床表型與相應(yīng)基因編碼區(qū)突變截然不同的疾病。 【關(guān)鍵詞】  增強(qiáng)子；啟動(dòng)子；沉默子    Abstract：Tissue-specific or developmental regulator genes often have highly complex expression patterns.In addition to the promoter,many other regulatory elements mainly inc

3、luding enhancer and repressor are required for such gene expression.These elements may extend long distances outside the transcriptional gene or even locate in unrelated neighboring genes.Such elements harboring sites for tissue-specific transcription factors can facilitate the differentiation and d

4、evelopment of many tissues and organs by participating in the gene expression.Disruption of this precise mechanism can lead to disorder.Moreover,Mutations in some regulatory elements will be associated with clinical phenotypes distinct from any identified in coding-region mutations.   

5、; Key words:enhancer；promoter；silencer    迄今為止，已知超過(guò)1500種基因與遺傳性疾病的發(fā)生存在密切的關(guān)系1。除基因編碼區(qū)突變外，轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列的異常，也可擾亂基因的正常表達(dá)，破壞基因正常功能，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生2。遠(yuǎn)距離調(diào)控元件主要包括增強(qiáng)子、沉默子、隔離子等順式作用元件，這些轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列在調(diào)控組織和發(fā)育特異性基因表達(dá)中扮演著至關(guān)重要的角色3。深入探討遠(yuǎn)距離調(diào)控元件的作用機(jī)制及其異常相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理，對(duì)于該類(lèi)疾病的預(yù)防、診斷和治療具有十分重要的意義。    1  遠(yuǎn)距離調(diào)控元件&#

6、160;   1.1  遠(yuǎn)距離調(diào)控元件的概念    組織和發(fā)育特異性基因的表達(dá)，除啟動(dòng)子、啟動(dòng)子上游元件和終止子等基本調(diào)控元件外，通常還需其它類(lèi)型的順式作用元件參與，這些元件主要包括加強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄的增強(qiáng)子；抑制轉(zhuǎn)錄的沉默子；能防止鄰近阻遏狀態(tài)的異染色質(zhì)或活化狀態(tài)的常染色質(zhì)向側(cè)翼擴(kuò)散的隔離子4；結(jié)構(gòu)更復(fù)雜且跨度更大，能克服異染色質(zhì)沉默效應(yīng)，促進(jìn)同一位點(diǎn)內(nèi)多個(gè)基因協(xié)調(diào)表達(dá)的位點(diǎn)控制區(qū)（LCR）等。和啟動(dòng)子不同，上述組織和發(fā)育特異性表達(dá)基因特有的轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列通常無(wú)距離和方向限制，可位于轉(zhuǎn)錄基因的上、下游；甚至存在于遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄基因的DNA序列中5

7、；許多還分布于與轉(zhuǎn)錄基因功能上不相關(guān)的鄰近基因內(nèi)含子中6；由此稱(chēng)之為遠(yuǎn)距離調(diào)控元件（以下簡(jiǎn)稱(chēng)元件）。    1.2  遠(yuǎn)距離調(diào)控元件的產(chǎn)生    元件所調(diào)控的基因主要編碼一些組織特異性轉(zhuǎn)錄因子和發(fā)育信號(hào)分子，在發(fā)育的不同階段，這些基因視機(jī)體的需要而表達(dá)，從而在細(xì)胞、組織器官的分化、形成中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。必須指出，元件的獲得是物種在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中，通過(guò)自然選擇而非人工方式實(shí)現(xiàn)的6。元件的獲得主要有兩種途徑，隨機(jī)的序列突變和基因組DNA片段插入7，基因重復(fù)后的分化3。而且，與此相關(guān)的染色體運(yùn)動(dòng)和重排常造成元件嵌入到鄰近的其它基因

8、內(nèi)含子中，這些鄰近基因通常是一些組成性表達(dá)或者是與被調(diào)控基因功能上不相關(guān)的基因8、9。一般來(lái)講，進(jìn)化過(guò)程中產(chǎn)生的新元件，只要能與啟動(dòng)子相互作用而不干擾基因原有的表達(dá)調(diào)控體系，并能使物種保持進(jìn)化上的優(yōu)勢(shì)，即可在物種基因組中固定下來(lái)。另外，通過(guò)與原有的元件協(xié)同作用，新元件還可優(yōu)化基因的表達(dá)，賦予物種選擇優(yōu)勢(shì)。因此，元件的分布通常具有這樣的規(guī)律：距離轉(zhuǎn)錄基因相對(duì)較近的元件與基因原有的功能相關(guān)；而決定基因在新組織中表達(dá)的元件往往與其調(diào)控的基因相距較遠(yuǎn)10。    1.3  遠(yuǎn)距離調(diào)控元件的查找與鑒定    轉(zhuǎn)基因技術(shù)和表達(dá)組織染色質(zhì)

9、DNase I高敏感位點(diǎn)作圖11，是發(fā)現(xiàn)和鑒定元件的兩種基本方法。前者通過(guò)構(gòu)建增強(qiáng)子缺失的轉(zhuǎn)基因小鼠12、13來(lái)實(shí)現(xiàn)；后者則基于這樣一種認(rèn)識(shí)，即轉(zhuǎn)錄活躍基因的順式作用元件對(duì)DNase 敏感，此外，若在作圖過(guò)程中發(fā)現(xiàn)元件靠近啟動(dòng)子區(qū)域，還可進(jìn)一步運(yùn)用足跡法確定元件內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。    近年來(lái)，隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃和各種模式生物測(cè)序工作的相繼完成，出現(xiàn)了另一種大規(guī)模簡(jiǎn)便快速查找元件的方法序列比較法14，其依據(jù)的原理是，人類(lèi)基因組中大多數(shù)已知元件在脊椎動(dòng)物中具有高度的保守性。通過(guò)物種間DNA序列比較，已在不同物種基因組的非編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)大量的高度保守序列，這些序列可能具

10、有基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)的潛在功能。因此，可將物種間序列保守性比較作為尋找未知元件的第一步，之后，再結(jié)合轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型等技術(shù)，對(duì)候選序列進(jìn)行功能分析與鑒定。Loots等第一次將序列比較成功地運(yùn)用于未知元件的查找，通過(guò)物種間序列比較，在細(xì)胞因子基因IL4和IL3之間發(fā)現(xiàn)一段保守序列，后經(jīng)轉(zhuǎn)基因小鼠基因缺失研究證實(shí)，該序列為調(diào)控IL4、IL3以及與之相距更遠(yuǎn)的IL5基因表達(dá)的增強(qiáng)子。目前，該方法已相對(duì)成熟，正廣泛地應(yīng)用于篩查組織特異性表達(dá)基因兩側(cè)大范圍區(qū)域的調(diào)控元件。    2  遠(yuǎn)距離調(diào)控元件的異常    目前，已知主要有三種元件異

11、常的方式，元件DNA序列突變。染色體結(jié)構(gòu)畸變導(dǎo)致的轉(zhuǎn)錄基因與元件分離。元件所在區(qū)域染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變15、16。三種方式均通過(guò)干擾啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄基因與元件的相互作用破壞正常的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控。    3  遠(yuǎn)距離調(diào)控元件異常與遺傳病的關(guān)系    長(zhǎng)期以來(lái)，由于元件與轉(zhuǎn)錄基因間位置的不確定性，給元件及其異常所致的遺傳病的鑒定帶來(lái)極大的困難。近年來(lái)，隨著以轉(zhuǎn)基因技術(shù)為代表的一批分子生物學(xué)技術(shù)的廣泛運(yùn)用，迄今為止，已發(fā)現(xiàn)20余種元件異常相關(guān)的人類(lèi)遺傳?。ū?）。其中，絕大多數(shù)為調(diào)控特異性轉(zhuǎn)錄因子和發(fā)育信號(hào)分子基因的元件異常導(dǎo)致的先天性發(fā)育

12、畸形。按照發(fā)病分子機(jī)理的不同，可將相關(guān)疾病劃分為如下3類(lèi)：    3.1  位置效應(yīng)與遺傳病    自1995年首次在果蠅中發(fā)現(xiàn)染色體結(jié)構(gòu)畸變導(dǎo)致的基因轉(zhuǎn)錄異常以來(lái)，陸續(xù)在許多人類(lèi)遺傳病中發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄基因外染色體結(jié)構(gòu)重排現(xiàn)象17。Wallrath等把這類(lèi)由轉(zhuǎn)錄基因外的染色體結(jié)構(gòu)畸變引起的遺傳病形象地描述為位置效應(yīng)遺傳病17。這些疾病的共同特征是致病基因雖已明確，但在患者中檢測(cè)不到致病基因的突變，而與疾病表型相關(guān)的染色體結(jié)構(gòu)畸變則發(fā)生在致病基因之外。隨后，國(guó)外學(xué)者利用轉(zhuǎn)基因小鼠模型對(duì)位置效應(yīng)疾病的發(fā)病機(jī)理進(jìn)行了深入地研究，結(jié)果表明

13、染色體結(jié)構(gòu)畸變（如缺失、易位、倒位）導(dǎo)致元件破壞或與轉(zhuǎn)錄基因分離，從而使其調(diào)控的組織和發(fā)育特異性基因表達(dá)異常，是該類(lèi)遺傳病發(fā)生的根本原因18。由于染色體結(jié)構(gòu)畸變很容易借助細(xì)胞學(xué)方法觀察到，而且許多相關(guān)的遺傳病，其臨床表型又與相應(yīng)致病基因編碼區(qū)突變導(dǎo)致的臨床癥狀相似，故位置效應(yīng)遺傳病是發(fā)現(xiàn)最早、最多，也是最容易發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)遠(yuǎn)距離調(diào)控元件異常相關(guān)的遺傳病。必須指出，盡管目前已知的大多數(shù)位置效應(yīng)遺傳病的臨床癥狀與相應(yīng)基因編碼區(qū)突變相似，但仍有部分位置效應(yīng)遺傳病的臨床表型完全不同于編碼區(qū)突變。下面以無(wú)鞏膜（MIM106210）和肢體內(nèi)側(cè)多趾癥（MIM 174500）為例分別加以說(shuō)明。 

14、0;  無(wú)鞏膜是由PAX6基因表達(dá)量缺乏引起的遺傳性眼病。致病基因定位于11p13，編碼一種特異性轉(zhuǎn)錄因子。然而，在一些患者基因組中檢測(cè)不到PAX6基因突變；卻發(fā)現(xiàn)PAX6基因下游存在染色體結(jié)構(gòu)重排；其中，最遠(yuǎn)的染色體斷裂點(diǎn)與PAX6基因相距達(dá)125kb。進(jìn)一步的研究顯示，這些斷裂點(diǎn)全部位于組成型表達(dá)的ELP4基因最后3個(gè)內(nèi)含子中，但ELP4基因缺陷卻不足以引起該病的發(fā)生9。用低濃度DNA酶處理PAX6基因表達(dá)組織染色質(zhì)，發(fā)現(xiàn)距斷裂點(diǎn)下游不遠(yuǎn)的ELP4基因其它內(nèi)含子中存在DNase 高敏感位點(diǎn)。用人工酵母染色體（YAC）構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠模型，結(jié)果顯示，覆蓋了上述DNase 高敏感位點(diǎn)的

15、YAC，使無(wú)編碼區(qū)突變的患病雜合子小鼠的子代表型恢復(fù)正常；相反，未涵蓋DNase I高敏感位點(diǎn)的YAC則無(wú)此作用，提示這些DNase 高敏感位點(diǎn)位于組織特異性增強(qiáng)子中11。若用人、鼠的體細(xì)胞進(jìn)行雜交，則PAX6基因表達(dá)于保留有完整人類(lèi)11號(hào)染色體的雜種細(xì)胞中；而在有患者11號(hào)染色體的雜種細(xì)胞中卻不表達(dá)；因?yàn)榛颊呒?xì)胞11號(hào)染色體雖有完整的PAX6基因，但缺失了下游增強(qiáng)子18，以上結(jié)果充分表明，在ELP4基因內(nèi)含子中存在調(diào)控PAX6基因表達(dá)的增強(qiáng)子，正是由于這些增強(qiáng)子在染色體重排過(guò)程中丟失或易位，引起PAX6基因在患者病灶組織中表達(dá)不足，從而導(dǎo)致與PAX6基因編碼區(qū)突變相同的臨床表型。 

16、   前面提及，有些元件異常相關(guān)疾病的表型明顯不同于相應(yīng)基因編碼區(qū)的突變，這是由于遠(yuǎn)距離調(diào)控元件的破壞引起基因表達(dá)異常僅影響到部分表達(dá)組織的緣故。肢體內(nèi)側(cè)多趾癥（PPD）是人類(lèi)較常見(jiàn)的遺傳性畸形，其致病基因SHH編碼一種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白，在肢體前后樞軸形成中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。轉(zhuǎn)基因突變小鼠-Ssq為PPD提供了很好的研究材料。Ssq小鼠SHH基因上游1Mb的LMBR1基因第5個(gè)內(nèi)含子中有一段插入的DNA片段，純合子Ssq小鼠的癥狀較雜合子嚴(yán)重的多，也未發(fā)現(xiàn)其它轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)出PPD癥狀。提示該片段的插入是導(dǎo)致PPD的原因。正常情況下，SHH基因僅在小鼠新生肢體后部表達(dá)，但Ssq小

17、鼠新生肢體前端和后部均發(fā)現(xiàn)有SHH基因表達(dá)8，SHH基因在Ssq小鼠的異位表達(dá)不僅可以解釋PPD產(chǎn)生的原因，并且提示插入片段破壞了SHH基因在新生肢體中正確表達(dá)。通過(guò)序列比較，在Ssq小鼠插入位點(diǎn)周?chē)l(fā)現(xiàn)保守序列，轉(zhuǎn)基因研究證實(shí)，該保守序列為調(diào)控SHH基因在小鼠新生肢體后部表達(dá)的組織特異性增強(qiáng)子12。此外，保守序列破壞引起SHH基因在Ssq小鼠新生肢體前端的表達(dá)，可以推測(cè)，該保守序列可能還含有抑制SHH基因在新生肢體前端表達(dá)的沉默子。    3.2  染色質(zhì)構(gòu)象改變與遺傳病    元件所在的染色質(zhì)空間結(jié)構(gòu)改變，也可引起相關(guān)基

18、因的異常表達(dá)，導(dǎo)致遺傳病的發(fā)生。目前，已知的該類(lèi)遺傳病不多，一種常染色體顯性遺傳的神經(jīng)肌肉性疾病-FSHD（MIM158900）是其典型。FSHD發(fā)生與4q35末端的一段串聯(lián)重復(fù)序列完全或部分缺失有關(guān)。該序列的重復(fù)單元稱(chēng)為D4Z4，正常人有11150個(gè)D4Z4拷貝，而受累個(gè)體其中一條染色體的拷貝數(shù)小于或等于10。一般來(lái)講，患者D4Z4拷貝數(shù)越少，病情越嚴(yán)重，發(fā)病年齡也越早。研究表明，D4Z4重復(fù)區(qū)無(wú)結(jié)構(gòu)基因存在，因此，普遍認(rèn)為FSHD是由D4Z4重復(fù)序列缺失導(dǎo)致元件破壞引起。最新的研究表明，低拷貝的D4Z4重復(fù)序列可形成一個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)直接與4q35區(qū)域的基因相互作用，導(dǎo)致這些基因在不恰當(dāng)?shù)?/p>

19、時(shí)間和組織表達(dá)19，因此，可以認(rèn)為FSHD是由4號(hào)染色體長(zhǎng)臂末端染色質(zhì)上，轉(zhuǎn)錄因子間或調(diào)控染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的蛋白間不作用所致。    地中海貧血主要由一個(gè)或幾個(gè)-和-珠蛋白基因突變、缺失或-珠蛋白基因LCR缺失引起。人類(lèi)-珠蛋白基因簇位于16q13，每條染色體上均有兩個(gè)-珠蛋白基因（HBA1和HBA2）。-珠蛋白基因表達(dá)受其上游的HS-40區(qū)的控制。正常情況下，以4個(gè)-珠蛋白基因?yàn)槟０暹M(jìn)行轉(zhuǎn)錄。Tufarelli等16發(fā)現(xiàn)一患病家系，受累成員的一條4號(hào)染色體均有一包括HBA1基因在內(nèi)的片段缺失，但缺失染色體保留了完整的HBA2基因和HS-40區(qū)。病情程度提示，缺失染色體

20、上HBA2基因表達(dá)同樣受到影響。隨后發(fā)現(xiàn)，患者體內(nèi)所有組織都有一個(gè)涵蓋HBA2 CpG島的2kb區(qū)域被甲基化。正常情況下，即使非表達(dá)組織中的HBA2 CpG島也總保持非甲基化狀態(tài)。進(jìn)一步研究表明，這種HBA2啟動(dòng)子的沉默，和甲基化與鄰近的LUC7L基因轉(zhuǎn)錄的反義RNA有密切的關(guān)系。除HBA1基因外，上述缺失片段還涵蓋了LUC7L基因最后3個(gè)外顯子及其加尾信號(hào)區(qū)，致使LUC7L基因轉(zhuǎn)錄延伸至HBA2基因及其啟動(dòng)子中。LUC7L基因轉(zhuǎn)錄異常，導(dǎo)致HBA2啟動(dòng)子的沉默和甲基化僅存在于缺失染色體中，提示這種沉默和甲基化是通過(guò)順式作用機(jī)制實(shí)現(xiàn)的。上述病例為人們展示了一種完全不同的突變機(jī)制，這種基因突變導(dǎo)

21、致鄰近基因表達(dá)關(guān)閉，雖未涉及元件的破壞，但對(duì)基因分布密集的染色質(zhì)區(qū)域而言，它代表了一種疾病發(fā)生的機(jī)制。    3.3  元件突變與遺傳病    事實(shí)上，元件的點(diǎn)突變或微缺失，也可引起基因表達(dá)組織特異性的獲得或丟失而導(dǎo)致疾病的發(fā)生，甚至出現(xiàn)臨床表型與基因編碼區(qū)突變完全不同的疾病。與位置效應(yīng)疾病不同，這類(lèi)調(diào)控序列改變引起的遺傳病沒(méi)有明顯的染色體結(jié)構(gòu)的變化，對(duì)其發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識(shí)主要通過(guò)轉(zhuǎn)基因小鼠模型12，或?qū)蜻x基因側(cè)翼區(qū)精細(xì)作圖和序列分析13獲得。由于元件鑒定及其異常的檢出難度很大，因此，盡管潛在的相關(guān)疾病甚多，但當(dāng)前實(shí)際得到闡明

22、的病種并不多。例如，人類(lèi)SHH基因上游1Mb的位置存在一種稱(chēng)為ZRS的元件，該元件具有促進(jìn)SHH基因在肢體前端表達(dá)，限制在肢體后部表達(dá)的雙重調(diào)控功能。通過(guò)對(duì)部分肢體內(nèi)側(cè)多趾癥（PPD）患者的ZRS進(jìn)行測(cè)序，在患者中已發(fā)現(xiàn)ZRS多種類(lèi)型的點(diǎn)突變。    表1  轉(zhuǎn)錄調(diào)控異常相關(guān)的人類(lèi)疾病    Table 1  Human Disease caused by aberrant transcriptional controlGeneGene FunctionDiseaseFurthest Distance &

23、#160;  of Breakpoint(kb)3'or 5'of TFPAX6TFAniridia1253'TWISTTFSaethre-Chotzen Saethre-Chotzen syndrome2603'POU3F4TFX-linked deafness9005'PITX2TFRieger syndrome905'GLI3TFGreig syndrome103'MAFTFgenetic Cataract10005'FOXC1TFGlaucoma/autosomal dominant iridogoniodysg

24、enesis25/12005'FOXC2TFLymphedema distichiasis1203'SRYTFSex reversal35'/3'SIX3TFHoloprosencephaly(HPE2)2005'SHHSignalingHoloprosencephaly(HPE3)2655'SHHSignalingPreaxial polydactyly10005'SHFM1TFSplit-hand/split-foot malformation4505'/3'FSHDunknownFacioscapulohumeral

25、 dystrophy1003'HBBOxygen carrier-Thalassemia505'HBAOxygen carrier-Thalassemia183'HoxdTFMesomelic dysplasia and vertebral defects603'    TF：transcription factor    4  小結(jié)與展望    多數(shù)情況下，遺傳病由基因編碼區(qū)突變所致，但調(diào)控區(qū)突變也可干擾正常的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，導(dǎo)致疾病發(fā)生。雖然染色體結(jié)構(gòu)重排引起的位置

26、效應(yīng)遺傳病，是最容易發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)遠(yuǎn)距離調(diào)控元件異常疾病，然而，有時(shí)要弄清元件的破壞究竟影響到何種基因的表達(dá)也是十分困難的，因?yàn)楸黄茐牡脑赡芡耆挥谀硞€(gè)基因內(nèi)，但卻影響另一個(gè)基因的表達(dá)。此外，元件異常導(dǎo)致的疾病表型，可能與相應(yīng)致病基因編碼區(qū)突變產(chǎn)生的臨床癥狀完全不同。更為艱巨的是檢出元件內(nèi)小缺失和點(diǎn)突變，有時(shí)，在距轉(zhuǎn)錄基因很遠(yuǎn)位置上僅僅一個(gè)堿基置換突變，都有可能導(dǎo)致嚴(yán)重的疾病發(fā)生12。目前，科學(xué)家們正嘗試采用基因芯片技術(shù)對(duì)可能的元件實(shí)施大規(guī)模的突變篩查。篩查時(shí)，先進(jìn)行物種間DNA序列比對(duì)，再將候選序列制備成探針并固定在硅片上14。另外，調(diào)控元件變異的研究是目前涉足得最少的領(lǐng)域，這種變異僅涉及元

27、件微小的改變，盡管有時(shí)甚至不產(chǎn)生明顯的可察覺(jué)的表型效應(yīng)，但仍可能改變相關(guān)基因的表達(dá)模式或水平。研究表明20，與結(jié)構(gòu)基因一樣，在調(diào)控元件中也存在許多可遺傳的多態(tài)位點(diǎn)，這些多態(tài)位點(diǎn)可能是人類(lèi)疾病相關(guān)的數(shù)量性狀位點(diǎn)（QTLs）的組成部分。相信隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和研究的不斷深入，相信越來(lái)越多的遠(yuǎn)距離調(diào)控元件異常相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)理將被闡明?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1Value D. Genetics,Individuality,and Medicine in the 21st CenturyAm J Hum Genet,2004,74:374-3812Levine M,Tjian R. Transcri

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