免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用

1、免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用由于免疫組化具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、定位準(zhǔn)確等特點(diǎn)，且能將形 態(tài)研究與功能研究有機(jī)地結(jié)合在一起，所以，這門新技術(shù)已被廣泛地 應(yīng)用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的許多領(lǐng)域。在病理學(xué)研究中，免疫組化技 術(shù)的作用和意義更為重要。以腫瘤研究為例，在免疫組化技術(shù)出現(xiàn)以 前，對腫瘤的診斷和分類還局限于細(xì)胞水平，而引入免疫組化技術(shù)后， 則使研究的深度提高到了生物化學(xué)水平、分子水平。近年來，伴隨基 因探針研究而興起的核酸分子原位雜交技術(shù)也正在蓬勃發(fā)展，更使免 疫組化如虎添翼，兩者相得益彰，將研究推進(jìn)到了基因水平。1、確定細(xì)胞類型通過特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)抗原成分，以確定細(xì)胞類型。如角蛋白是

2、上皮性標(biāo)記，前列腺特異性抗原僅見于前列腺上皮，甲狀腺球蛋白抗體是甲狀腺濾泡型癌的敏感標(biāo)記，而降鈣素抗體是甲狀腺髓樣癌的特有標(biāo)記。有些細(xì)胞（如表皮內(nèi)朗格漢斯細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、淋巴結(jié)內(nèi)指突狀和樹突狀網(wǎng)織細(xì)胞）光鏡下不易辨認(rèn)，但免疫組化標(biāo)記（ s-100 蛋白等）能清楚顯示其形態(tài)。2、辨認(rèn)細(xì)胞產(chǎn)物利用某些細(xì)胞產(chǎn)物為抗原制備的抗體，可作為相應(yīng)產(chǎn)物的特殊標(biāo)記， 如內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生的各種激素，大多數(shù)可用免疫組化技術(shù)標(biāo)記出來， 據(jù)此可對內(nèi)分泌腫瘤作功能分類，檢測分泌異位激素的腫瘤等。3、了解分化程度大多數(shù)標(biāo)記物都有其特定的分布部位，如上皮細(xì)胞膜抗原（ema）著色部位在細(xì)胞膜上，但差分化乳癌胞漿內(nèi)也可出現(xiàn)陽性顆

3、粒；角蛋白的含量也與分化程度有關(guān)，低分化或未分化癌含量較低、染色較弱。4、鑒定病變性質(zhì)通過標(biāo)記 ig 輕鏈（、）可區(qū)分部分 b細(xì)胞性淋巴瘤與 b細(xì)胞反應(yīng)性增生，前者常表達(dá)單一的 ig 輕鏈（ +/ +），后者常為多克隆 ig 輕鏈（ +、 +）。而標(biāo)記 bcl-2 蛋白在區(qū)別濾泡型淋巴瘤和反應(yīng)性濾泡增生上有相當(dāng)?shù)囊饬x。在濾泡型淋巴瘤， 90%以上腫瘤性濾泡細(xì)胞有 bcl- 2的高表達(dá)；而在濾泡反應(yīng)性增生時(shí)，濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)bcl-2蛋白，而套細(xì)胞則表達(dá)。5、發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶某些癌的早期轉(zhuǎn)移有時(shí)與淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細(xì)胞增生不易區(qū)別。用常規(guī)病理組織學(xué)方法要在一個(gè)組織中認(rèn)出單個(gè)轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞或幾

4、個(gè)細(xì)胞是不可能的，而采用免疫組化方法（如用上皮性標(biāo)志）則十分有助于微?。ò┺D(zhuǎn)移灶的發(fā)現(xiàn)。對轉(zhuǎn)移性腫瘤也可借助免疫組化標(biāo)志尋找原發(fā)瘤，如骨組織內(nèi)有前列腺特異性抗原陽性細(xì)胞，提示前列腺癌轉(zhuǎn)移。6、探討腫瘤起源或分化表型一些來源不明的腫瘤長期爭論不休，最后通過免疫組化標(biāo)記取得共識。如顆粒性肌母細(xì)胞瘤，曾被認(rèn)為是肌源性的，但該腫瘤肌源性標(biāo)記陰性，而神經(jīng)性標(biāo)記陽性，證明為神經(jīng)來源（可能來自神經(jīng)鞘細(xì)胞）。分化很差的腫瘤病理上常按細(xì)胞形態(tài)分為梭形細(xì)胞腫瘤、小圓細(xì)胞腫瘤等，通過多種標(biāo)記的聯(lián)合應(yīng)用，也可能確定來源。7、確定腫瘤分期判斷腫瘤是原位還是浸潤及有無血管、淋巴管侵襲與腫瘤分期密切相關(guān)。用常規(guī)病理方法判

5、斷有時(shí)是十分困難的，但用免疫組化法可獲得明確結(jié)果。如采用層粘連蛋白和型膠原的單克隆抗體可清楚顯示基底膜的主要成分，一旦證實(shí)上皮性癌突破了基底膜，就不是原位癌， 而是浸潤癌了，其預(yù)后是不同的。用第八因子相關(guān)蛋白、荊豆凝集素等顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物則可清楚顯示腫瘤對血管或淋巴管的浸潤。對許多腫瘤的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤，這是主要的鑒別依據(jù)，同時(shí)也有治療及預(yù)后意義。8、指導(dǎo)治療和預(yù)后免疫組化標(biāo)記中與預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記大致可分為三類：類固醇激素受體：如雌激素受體、孕激素受體等，它們與乳腺癌的關(guān)系已獲公認(rèn)， 性激素受體陽性者內(nèi)分泌治療效果較好，預(yù)后也較好。相似的結(jié)果也見于子宮內(nèi)膜癌和卵巢

6、癌。腫瘤基因標(biāo)記：如癌基因c-erb-2 ， c- myc，p53蛋白等，在腫瘤中高度表達(dá)者，患者預(yù)后較差；而nm23蛋白高度表達(dá)者，腫瘤轉(zhuǎn)移率較低，預(yù)后較好。細(xì)胞增殖性標(biāo)記：如表皮生長因子受體（ egfr）、增殖細(xì)胞核抗原（ pcna）、ki-67 等，表達(dá)指數(shù)越高，表明其增殖越活躍，惡性度增高，預(yù)后不良，其中以惡性淋巴瘤、乳腺癌較為明顯。而且在乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)ki-67 、 pcna 、egfr陽性者，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高，并與激素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。 9、輔助疾病診斷和分類人體的免疫性疾病，主要是自身免疫性疾病，如腎小球腎炎、皮膚自 身免疫性疾病等，可用免疫組化方法對組織細(xì)胞內(nèi)的免疫球蛋白、補(bǔ) 體、免疫復(fù)合物等進(jìn)行檢測以輔助診斷。某些疾病的分類或分型也是 在免疫組化基礎(chǔ)上建立的。內(nèi)分泌腫瘤如垂體前葉腺瘤，根據(jù)其分泌 功能可分為生長激素腺瘤、泌乳激素腺瘤等10型；胰島細(xì)胞瘤的功能分類為胰島素瘤、高血糖素瘤等 6種；惡性淋巴瘤根據(jù)瘤細(xì)胞表面標(biāo)志不同可分為 t細(xì)胞性、 b細(xì)胞性。腎小球腎炎的免疫學(xué)分類亦需免疫組化或免疫熒光技術(shù)。10、尋找感染病因人體疾病的致病微生物中有的在常規(guī)病理檢查中不易發(fā)現(xiàn)，尤其是病毒性致病微生物，由于其分子水平的結(jié)構(gòu)，在細(xì)胞水平