喉癌組織上皮鈣黏蛋白和α連環(huán)素表達(dá)及意義

1、    喉癌組織上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素表達(dá)及意義作者：孫文海，司衛(wèi)鋒，劉華敏 作者單位：(1 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科,山東 青島 266003; 2 青島市第八人民醫(yī)院耳鼻咽喉科; 3 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤科)【摘要】 目的 探討上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素在喉癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)PicTureTM二步法，檢測(cè)上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素在喉癌組織和癌旁正常喉黏膜組織中的表達(dá)。 結(jié)果 喉癌組織上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素的異常表達(dá)率分別為55.00% 和56.67%，明顯低于癌旁組織(二者均呈明顯陽(yáng)性表達(dá))(2=8.32、8.87，P

2、<0.01)。上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素的表達(dá)與喉癌的臨床分期、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織學(xué)分級(jí)有關(guān) (2=3.8510.17，P<0.05)。同一標(biāo)本中上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素表達(dá)有顯著的相關(guān)性(r=0.61，P<0.01)。結(jié)論 上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素的異常表達(dá)與喉癌分化、分期、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】 喉腫瘤;連接素;E鈣黏素;免疫組織化學(xué)EXPRESSIONS OF ECADHERIN AND ALPHACATENIN IN LARYNGEAL CANCER SUN WENHAI, SI WEIFENG, LIU HUAMIN (Department of Otorhinolaryng

3、ology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China); ABSTRACT Objective To investigate the expressions of Ecadherin and catenin in the tissue of laryngeal cancer. Methods Immunohistochemistry staining (PicTureTM twostep method) was used to detect Ecadherin an

4、d catenin expression in cancer and paraneoplastic normal tissue. Results The expression rate of Ecadherin and catenin in the cancer was 55.00% and 56.67%, respectively, which was significantly lower than that in the paraneoplastic(both of the two items were obviously positive) (2=8.32, 8.87;P<0.0

5、1), and associated with the differentiation, clinical stage, and lymph node metastasis of the disease (2=3.85-10.17,P<0.05). There was a positive correlation between the expression of catenin and Ecadherin in the same sample(r=0.61,P<0.01). Conclusion The abnormal expressions of Ecadherin and

6、catenin are closely related with the differentiation, clinical stage, and metastasis in laryngeal carcinoma.KEY WORDS Laryngeal neoplasms; catenin; Ecadherins; Immunohistochemistry細(xì)胞間黏附的減少造成細(xì)胞接觸信號(hào)的減弱，使腫瘤細(xì)胞逃避生長(zhǎng)控制信號(hào)的抑制，呈現(xiàn)異常增殖。細(xì)胞間黏附的減弱有利于腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)灶，通過(guò)周?chē)M織進(jìn)入血液循環(huán)，然后到達(dá)靶器官形成轉(zhuǎn)移灶。因此，細(xì)胞間黏附的減弱或丟失對(duì)腫瘤的形成與發(fā)展起著重要作用

7、。上皮鈣黏蛋白連環(huán)素復(fù)合體是細(xì)胞間黏附分子(CAM)的重要成員，上皮鈣黏蛋白屬同種親和性黏附分子，具有促進(jìn)上皮細(xì)胞間相互黏附，維持組織結(jié)構(gòu)完整性和極性作用。上皮鈣黏蛋白的黏附功能的維持與連環(huán)素密切相關(guān)1。已有研究表明，上皮鈣黏蛋白連環(huán)素復(fù)合體對(duì)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移具有抑制作用，許多腫瘤的發(fā)生及侵襲過(guò)程中都發(fā)現(xiàn)上皮鈣黏蛋白的表達(dá)下調(diào)(缺失)或者功能障礙。本文旨在探討上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素在喉癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。1 材料與方法1.1 標(biāo)本來(lái)源2005年1月2006年12月，青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科手術(shù)切除的喉鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本60例。其中男55例，女5例，年齡3976歲，平均為59歲。按

8、2002年國(guó)際抗癌協(xié)會(huì)(UICC)TNM標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期，期14例，期12例，期15例，期19例，其中T1N0M0 14例，T2N0M0 12例，T2N1M0 1例，T3N0M0 11例，T3N1M0 3例，T3N2M0 1例，T4N0M0 6例，T4N1M0 7例，T4N2M0 5例。臨床分型：聲門(mén)型49例，聲門(mén)上型8例，聲門(mén)下型3例。60例中有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者17例，不伴頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者43例。組織病理學(xué)分級(jí)： 級(jí)31例， 級(jí)22例， 級(jí)7例。所有病例術(shù)前均未經(jīng)任何抗腫瘤治療，且臨床資料完整。60例病人中行喉全切除21例，喉部分切除39例，其中喉裂開(kāi)聲帶切除14例，喉水平部分切除5例，喉垂

9、直部分切除18例，喉水平垂直次全切除2例，行一側(cè)頸經(jīng)典清掃術(shù)8例，行對(duì)側(cè)改良性頸清掃術(shù)5例，行單側(cè)改良性頸清掃或擇區(qū)性頸清掃19例。以10例喉癌標(biāo)本中距離癌組織邊緣>0.5 cm的相應(yīng)癌旁組織作為對(duì)照。所有喉癌組織均經(jīng)病理學(xué)檢查確診為鱗狀細(xì)胞癌，對(duì)照組癌旁組織均經(jīng)病理學(xué)確診無(wú)癌細(xì)胞浸潤(rùn)。1.2 方法所有手術(shù)切除標(biāo)本經(jīng)中性甲醛液固定，石蠟包埋，4 m厚連續(xù)切片，切片由病理科醫(yī)生作出診斷。采用免疫組織化學(xué)PicTureTM二步法結(jié)合微波抗原修復(fù)法檢測(cè)上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素在喉癌及癌旁組織中的表達(dá)。應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行2檢驗(yàn)和配對(duì)四格表相關(guān)檢驗(yàn)。2 結(jié) 果在10例癌旁正常喉黏膜組織

10、中，上皮鈣黏蛋白、連環(huán)素均呈明顯陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性信號(hào)主要位于細(xì)胞膜。在喉癌組織中上皮鈣黏蛋白、連環(huán)素胞膜表達(dá)不同程度缺失。60例癌組織中，上皮鈣黏蛋白異常表達(dá)者33例，異常表達(dá)率為55.00%;連環(huán)素異常表達(dá)者共34例，異常表達(dá)率為56.67%。癌組織上皮鈣黏蛋白、連環(huán)素的異常表達(dá)率與癌旁組織相比差異有極顯著意義(2=8.32、8.87，P<0.01)。上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素的表達(dá)與喉癌的臨床分期、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織學(xué)分級(jí)有關(guān)(2=3.8510.17，P<0.05)。見(jiàn)表1。同一標(biāo)本中上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素表達(dá)有顯著的相關(guān)性(2=21.24，r=0.61，P<0.01)。見(jiàn)表2。

11、表1 上皮鈣黏蛋白、連環(huán)素在喉癌組織中的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系臨床病理參數(shù)n上皮鈣黏蛋白異常表達(dá)表2 上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素在喉癌中表達(dá)的相關(guān)性(例)上皮鈣黏蛋白連環(huán)素異常正常異常285正常6213 討 論上皮鈣黏蛋白是一類(lèi)細(xì)胞黏附分子，在細(xì)胞黏附及分化，尤其是早期分化中起重要作用。目前已知的鈣黏蛋白有40多種，其中上皮鈣黏蛋白與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切，研究最多。人類(lèi)上皮鈣黏蛋白基因定位于16q22.1區(qū)域，由CDH1基因編碼。上皮鈣黏蛋白包含720750個(gè)氨基酸，屬于型鈣黏素族的跨膜糖蛋白，其分子結(jié)構(gòu)主要包括細(xì)胞外肽段、跨膜區(qū)和相對(duì)較小的細(xì)胞內(nèi)肽段。上皮鈣黏蛋白的胞質(zhì)部分是通過(guò)、連環(huán)素連接到

12、actin的細(xì)胞骨架上，形成上皮鈣黏蛋白連環(huán)素復(fù)合體，在維持組織結(jié)構(gòu)完整性，參與細(xì)胞與細(xì)胞信息傳遞及在細(xì)胞黏附中起著至關(guān)重要的作用2。上皮鈣黏蛋白不僅介導(dǎo)細(xì)胞間的黏附，同時(shí)也是胞外細(xì)胞骨架信號(hào)傳導(dǎo)通路上的關(guān)鍵分子，其結(jié)構(gòu)改變或數(shù)量增減均會(huì)影響到細(xì)胞分化和組織形態(tài)，在腫瘤中則容易造成腫瘤細(xì)胞的脫落和擴(kuò)散。連環(huán)素有、等3種亞型。連環(huán)素與紐帶蛋白同源，是鈣黏蛋白連接細(xì)胞骨架所必需的成分。生化分析表明，上皮鈣黏蛋白并不是直接與連環(huán)素相連，而是借助于連環(huán)素連接在上皮鈣黏蛋白與連環(huán)素之間。上皮鈣黏蛋白連環(huán)蛋白形成的復(fù)合物通過(guò)連環(huán)素與細(xì)胞骨架連接。己知如果缺乏連環(huán)素，即便有正常連環(huán)素、上皮型鈣黏蛋白的表達(dá)，

13、也不能形成穩(wěn)定的細(xì)胞連接3。DAVIES等3研究發(fā)現(xiàn)，上皮鈣黏蛋白正常表達(dá)，但連環(huán)素不表達(dá)或異常表達(dá)，上皮鈣黏蛋白也無(wú)法發(fā)揮黏附功能，阻止腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)病灶向其他部位轉(zhuǎn)移。所以，將上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素作為一個(gè)整體研究與腫瘤的關(guān)系將會(huì)有更為積極的意義。本文結(jié)果顯示，上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素在喉癌組織異常表達(dá)率為55.00%、56.67%，明顯較癌旁組織高(P<0.01)。這與對(duì)乳癌、結(jié)直腸癌、鼻咽癌、胃癌等的研究結(jié)果一致4,5，提示上皮鈣黏蛋白和連環(huán)素在喉癌的發(fā)病過(guò)程中亦發(fā)揮重要作用。本文結(jié)果亦顯示，上皮鈣黏蛋白、連環(huán)素異常表達(dá)率隨著組織惡性程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移程度的增高而升高，差異

14、均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示上皮鈣黏蛋白、連環(huán)素的表達(dá)與喉癌的臨床及組織病理學(xué)分期密切相關(guān)，上皮鈣黏蛋白、連環(huán)素表達(dá)下調(diào)在喉癌細(xì)胞增殖分化中起到一定的作用，其表達(dá)程度可以在一定程度上提示喉腫瘤的惡性程度及預(yù)后，可作為判斷喉癌惡性程度的生物學(xué)標(biāo)志之一，對(duì)指導(dǎo)臨床工作有一定的參考價(jià)值。檢測(cè)喉癌組織中上皮鈣黏蛋白、連環(huán)素表達(dá)狀況，有助于從另一個(gè)側(cè)面判斷喉癌的惡性生物學(xué)行為，協(xié)助臨床選擇高危復(fù)發(fā)病例，指導(dǎo)喉癌的綜合診治。【參考文獻(xiàn)】1MARTIN T A, MANSEL R, JIANG W G. Hepatocyte growth factor modulates vascular endothelial

15、cadherin expression in human endothelial cellsJ. Clin Cancer Res, 2001,7(3):734737.2YAW OA, MASAO N, MIKOLASH P, et al. Expression of the Ecadherin/catenin(,)complex correlates with the macroscopic appearance of early nastric cancerJ. J Pathol, 2000,192(7):433439.3DAVIES G, JIANG W G, MASON M D. The interaction between betacatenin, GSK3beta and APC after motogen induced cellcell dissociation, and their involvement in signal transduction pathways in prostate cancerJ. Int J Oncol, 2001,18(4):843847.4BANKFALVI A, TERPE H J, BREUKELMANN D, et al. Immunophenotypic an