鞣酸鞣酸小檗堿口服結(jié)腸定位包衣片的制備及體外釋藥性

1、鞣酸鞣酸小檗堿口服結(jié)腸定位包衣片的制備及體外釋藥性本文由寫手聯(lián)盟-論文代寫代發(fā)表 收集整理發(fā)布，本站提供相關(guān)職稱論文發(fā)表服務。相關(guān)專業(yè)提示：鞣酸小檗堿膜 復方小檗堿鞣酸蛋白 鹽酸小檗堿片 鹽酸小檗堿 小檗堿 鹽酸小檗堿片說明書 小檗堿甲氧芐啶膠囊 小檗堿片 鹽酸小檗堿片作用 黃柏中提取小檗堿* j1 n# _ ( u; l/ H3 & X) e% X) 0 s 作者：李雪，金描真，葉放，王曉明，金鴿; i+ 6 s* F/ L, R1 Q3 J . G/ - x/ k$ k# |【摘要】目的 研究鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片的制備工藝，并考察體外釋放條件對包衣片結(jié)腸定位及結(jié)腸釋放行為的影響。方法

2、以殼聚糖和聚丙烯酸樹脂為包衣材料，采用噴霧包衣的方法制備pH依賴與酶降解相結(jié)合型結(jié)腸定位包衣片,并研究包衣片在模擬人體胃腸道環(huán)境中的釋放情況。結(jié)果 鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片在模擬胃液中2 h不釋藥、模擬小腸液(pH 6.8的磷酸鹽緩沖液)的介質(zhì)中5 h釋藥小于5%，在模擬結(jié)腸環(huán)境的介質(zhì)(pH 7.6磷酸鹽緩沖液，含30%大鼠結(jié)腸內(nèi)容物)中累積釋放度大于85%。結(jié)論 鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片可在結(jié)腸定位，且體外釋放度滿足結(jié)腸定位制劑的要求。 . q# E6 K1 Z. |0 J+ h【關(guān)鍵詞】鞣酸小檗堿 結(jié)腸定位包衣片 體外釋放度, S- W7 Q/ . N4 I: i3 W# j/ dAbst

3、ract:Objective To study the preparation of berberine tannate colon?specific coated tablets,and investigate the effects of in vitro release conditions on the colon?targeting effects of the coated tablets and colon?targeted release. Methods The pH?and enzyme degradation dependent colon?specific coated

4、 tablets were prepared by spraying coating method,coated with chitosan and polyacrylic resin,and the release profile of berberine tannate colon?specific coated tablets was determined in the simulated gastrointestinal tract environment. Results The tablets could not release in the simulated gastric f

5、luid and in the simulated small intestine fluid(pH=6.8 phosphate buffer),the drug release was under 5% in five hours,but the cumulative release rate exceeded 85% of labeled amount in the simulated colon fluid (pH=7.6,containing 30% colonic contents of rats). Conclusion Berberine tannate colon?specif

6、ic coated tablets was colon?targeted and satisfied the requirement for in vitro release of colon?specific delivery.I0 # V( X& B3 RKey words:berberine tannate;colon?specific coated tablets; release rate in vitro+ c2 O* T& K6 M X. 結(jié)腸定位釋藥系統(tǒng)可提高結(jié)腸部位藥物濃度，避免藥物的首過效應，提高藥效，有利于治療結(jié)腸局部病變，包括結(jié)腸潰瘍、克羅恩氏病(節(jié)段性結(jié)腸病)、結(jié)腸癌

7、和便秘等疾病。& ) d% . o* / U文獻報道小檗堿對潰瘍性結(jié)腸炎、腸易激綜合征、結(jié)腸癌細胞有抑制作用2-4。鞣酸小檗堿(berberine tannate)又叫無味黃連素，其在腸液中易分解產(chǎn)生游離的鞣酸和小檗堿。小檗堿系異喹啉生物堿，具有增強細胞吞噬功能、抑制細菌和收斂作用，可增強腸道對水的回吸收，高濃度時對某些菌株有殺菌作用，另外還有促進機體免疫功能，具有廣譜抗菌作用。鞣酸能在發(fā)炎的腸黏膜表面沉淀蛋白質(zhì)形成一層保護膜，腸黏膜被一層保護膜覆蓋后，降低了毛細血管的通透性，使炎性滲出減少，有利于炎癥的消除7。因此鞣酸小檗堿起到抗菌和收斂雙重作用。: I& * 2 H; R2 _根據(jù)鞣酸小檗

8、堿的作用特點和臨床需求，將其制備成結(jié)腸定位給藥系統(tǒng)能更好地發(fā)揮治療作用。本研究以殼聚糖、聚丙烯酸樹脂為包衣材料，采用噴霧包衣的方法制備鞣酸小檗堿pH依賴與酶降解相結(jié)合型結(jié)腸定位包衣片，并考察了包衣層的增重和體外釋放介質(zhì)對片劑釋放行為的影響，以評價殼聚糖?丙烯酸樹脂雙重包衣系統(tǒng)制備口服結(jié)腸定位釋藥系統(tǒng)的可行性。6 # U* O7 S2 w D廣東藥學院學報 第25卷 第3期 李雪,等.鞣酸小檗堿口服結(jié)腸定位包衣片的制備及體外釋藥性1 儀器與材料- S0 J5 u; m; O, s1.1 儀器: 4 E% f! u% x. q. C0 v# W+ kJZTY11?4型調(diào)速包衣機(江蘇泰興制藥機械廠

9、)，旋轉(zhuǎn)式多沖壓片機(上海第一制藥機械廠)，ZRS?8G智能藥物溶出儀(天大天發(fā)科技有限公司)，UV?1700紫外?可見分光光度儀，ZD?85數(shù)字氣浴恒溫振蕩器(江蘇省金壇市宏華儀器廠) 。6 % o, u. u1.2 材料3 N5 M/ o. m7 K& C鞣酸小檗堿對照品(純化后用HPLC法8測定質(zhì)量分數(shù)為99.2%)、鞣酸小檗堿原料藥(廣州市白云山制藥總廠藥物研究所提供);單硬脂酸甘油酯(化學純，汕頭市光華化學廠);鄰苯二甲酸二乙酯(DEP ，天津市大茂化學試劑廠);Tween?80(化學純，天津市大茂化學試劑廠);醋酸(分析純，天津市富宇精細化工有限公司);聚乙烯吡咯烷酮(PVPK30

10、，廣東新寧化工廠);1，2?丙二醇、丙三醇(化學純，天津市富宇精細化工有限公司);瓜爾膠(天津博迪化工有限公司);果膠(三門峽富達果膠工業(yè)有限公司);丙烯酸樹脂、丙烯酸樹脂(湖州展望藥業(yè)有限公司)。, M; * # i, m9 K0 Z# u2 方法與結(jié)果, m5 Z$ / L2 h. G2.1 鞣酸小檗堿片芯的制備9 q k6 P R5 # % R將聚維酮K30(PVPK30)溶解于適量乙醇中，然后加入過200目篩的鞣酸小檗堿，攪拌使其分散均勻，揮干乙醇后過100目篩，再與微晶纖維素、交聯(lián)聚維酮(PVPP)等混合均勻，壓片。制得片芯片徑為8 mm，壓片壓力約60 N，片質(zhì)量為250 mg。4

11、 z& F$ c) K r, C! g) P( e! F2.2 鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片的制備0 S* U4 w2 o- k4 w- N2.2.1 隔離層包衣 取適量的HPMC溶于體積分數(shù)80%乙醇中，制備成質(zhì)量濃度為2%的包衣液。將上述制得的片芯置包衣鍋內(nèi)，吹入約40 熱空氣，待片床溫度約為35 時，進行噴霧包衣，至包衣膜的厚度達到預定標準時，35 固化30 min。經(jīng)考察隔離層的增重對釋放度無影響，因此確定隔離層的增重為2%。) a1 k* w2 C% S3 a+ o/ w) y2.2.2 殼聚糖層包衣 稱取一定量的殼聚糖溶于質(zhì)量分數(shù)0.5%的醋酸溶液中，加入甘油(殼聚糖的量的20%)、吐

12、溫?80(包衣液總量的0.5%)，溶解，制備成質(zhì)量濃度為1.5%的殼聚糖包衣液。將已包隔離層的包衣片置包衣鍋內(nèi)，吹入熱風，待片床溫度約65 時，開始包衣，至衣膜厚度達到預定標準時，50 固化1 h。- e% I6 T# Y, Z2.2.3 腸溶層包衣 稱取一定量的聚丙烯酸樹脂和(質(zhì)量比119，溶于體積分數(shù)95%乙醇，加入增塑劑鄰苯二甲酸二丁酯(聚丙烯酸樹脂和的量的20%)、抗粘劑單硬脂酸甘油酯(聚丙烯酸樹脂和的量的5%)，制成聚丙烯酸樹脂和(質(zhì)量比11)質(zhì)量濃度為6%的包衣溶液。將包殼聚糖層后的包衣片置包衣鍋中，吹入熱空氣，待片床溫度約30 時開始噴霧包衣，至包衣膜的厚度達到預定標準時，30

13、固化30 min，即得pH依賴與酶降解相結(jié)合的鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片。& A( o$ 0 O# ?$ K0 N2.2.4 包衣增重計算公式如下：; W7 c& P* F4 N+ w: m5 y包衣增重=包衣后質(zhì)量?包衣前質(zhì)量包衣前重100%4 g$ P3 L2 M* D+ 2.3 包衣片釋放度測定的方法學考察1 Q$ w( j+ |2 g# M% |2.3.1 測定波長的確定 稱取鞣酸小檗堿對照品適量，分別溶解于pH 6.8及pH 7.6的磷酸鹽緩沖液中，并按處方比例加入輔料，按照中國藥典(2005年版二部附錄IVA)于200500 nm波長范圍內(nèi)進行紫外掃描，兩種pH值溶液在272 nm、

14、342 nm處均有吸收且輔料無干擾;在pH 7.6的鞣酸小檗堿溶液中加入大鼠結(jié)腸內(nèi)容物后進行紫外掃描，在272 nm處有干擾，而在342 nm處沒有干擾，因此本試驗選擇342 nm作為鞣酸小檗堿的測定波長。$ c& k( l O6 a; 2.3.2 標準曲線的制備 精密稱取鞣酸小檗堿對照品約25 mg，置500 mL量瓶中，分別用人工小腸液(pH 6.8磷酸鹽緩沖液)、人工結(jié)腸液1(pH 7.6磷酸鹽緩沖液)溶解，定容，得50 g/mL的貯備液。再分別精密吸取人工小腸液、人工結(jié)腸液1貯備液6、8、10、12、14、16、18 mL置50 mL量瓶中，定容，搖勻，于342 nm處分別測定吸光度。

15、以濃度對吸光度值進行線性回歸，回歸方程分別為：A小腸液=0.0248C+0.0101(r=0.999 6);A結(jié)腸液1=0.0226C+0.0145(r=1.000 0)。表明鞣酸小檗堿的質(zhì)量濃度在618 g/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。3 5 L! q) Q( EM* C精密稱取鞣酸小檗堿對照品約25 mg，置500 mL量瓶中，用人工結(jié)腸液2(pH 7.6磷酸鹽緩沖液，含30%大鼠結(jié)腸內(nèi)容物)溶解，定容，制成50 g/mL的貯備液。分別精密量取2、8、14、20、26、32 mL于50 mL量瓶中，用人工結(jié)腸液2定容，搖勻，4 000 r/min離心15 min，取上清液(除去結(jié)腸雜

16、質(zhì))，在342 nm處測定吸光度。以濃度對吸光度進行線性回歸，得回歸方程：A結(jié)腸液2=0.0242c+0.0023(r=0.999 4)。表明鞣酸小檗堿的質(zhì)量濃度在232 g/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。. u5 H; M+ s q l2 C 2.3.3 精密度試驗 精密稱取鞣酸小檗堿對照品約25 mg，置500 mL量瓶中，分別用人工小腸液、人工結(jié)腸液1、人工結(jié)腸液2溶解，定容，得50 g/mL的貯備液。分別精密量取貯備液3 mL置10 mL量瓶中，稀釋至刻度(質(zhì)量濃度為15 g/mL);重復測定6次，結(jié)果其RSD分別為0.56%、0.34%、0.68%，顯示該方法精密度良好。1 i:

17、 A. L/ N; B3 K1 n2.3.4 穩(wěn)定性試驗 取“2.3.3”項下質(zhì)量濃度為15 g/mL的鞣酸小檗堿溶液，在37 、自然光下放置，于0、6、12、24 h取樣測定吸光度并計算RSD值。結(jié)果表明鞣酸小檗堿在各釋放介質(zhì)中穩(wěn)定，其在人工小腸液、人工結(jié)腸液1、人工結(jié)腸液2中的RSD分別為0.21%、0.36%和0.27%，符合要求。8 + I/ U8 2 O) s) dN2.3.5 回收率試驗 精密稱取鞣酸小檗堿對照品約25 mg，分別置500 mL量瓶中，加入處方比例的各輔料，按“2.3.1”項操作，人工小腸液和人工結(jié)腸液1配制質(zhì)量濃度為18、12、6 g/mL，人工結(jié)腸液2配制質(zhì)量濃

18、度為32、20、8 g/mL，于342 nm處測定吸光度，計算回收率，見表1。結(jié)果表明鞣酸小檗堿在各介質(zhì)中的回收率良好,RSD均小于2%。表1 回收率試驗結(jié)果7 Y M# |Z/ M W* E2.4 鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片體外釋放度的測定) Z+ Y9 t+ c5 x5 v8 s0 A# E6 2.4.1 鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片的釋放度試驗10 按中國藥典2005年版二部附錄的第三法測定，取鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片6片，置250 mL的介質(zhì)中，溫度為37 ，轉(zhuǎn)速為100 r/min，定時取樣2 mL，同時補充等量同溫介質(zhì)，用0.8 m微孔濾膜過濾，精密吸取續(xù)濾液1 mL，用相應介質(zhì)稀釋至5

19、 mL后于342 nm處測定吸光度，通過標準曲線計算釋放度(Q)。釋放介質(zhì)依次為0.1 mol/L HCl(2 h)、pH 6.8磷酸鹽緩沖液(5 h)、人工結(jié)腸液2(7 h，在人工結(jié)腸液2試驗過程中不斷通入CO2)。% r5 E8 F+ V% n2 K% x2.4.2 酶降解材料的篩選 分別以果膠、瓜爾豆膠、殼聚糖為包衣膜材料，制備鞣酸小檗堿包衣片，根據(jù)釋放度情況，選擇適宜的酶降解包衣材料。果膠、瓜爾豆膠、殼聚糖在人工小腸液(5 h)、人工結(jié)腸液1(7 h)中釋放結(jié)果見圖1。: N# s. |3 D! 從圖1可見，果膠包衣膜的水溶性較高，在人工小腸液中5 h釋放度達到57%，在人工結(jié)腸液1中

20、7 h釋放度為36%;瓜爾豆膠包衣膜在人工小腸液中5 h釋放度達到21%，在人工結(jié)腸液1中7 h釋放度為21%;殼聚糖包衣膜在人工小腸液中5 h釋放度為5.2%，在人工結(jié)腸液1中7 h釋放度為9%。根據(jù)藥典規(guī)定結(jié)腸定位制劑在規(guī)定的酸性介質(zhì)與pH 6.8磷酸鹽緩沖液中不釋放或幾乎不釋放，而在要求的時間內(nèi)，于pH 7.58.0磷酸鹽緩沖液中大部分或全部釋放。以果膠包衣的片在人工小腸液(pH 6.8磷酸鹽緩沖液)中釋放度已達到57%，超過藥典關(guān)于結(jié)腸定位制劑在pH 6.8磷酸鹽緩沖液中的釋放度要求;以瓜爾膠包衣的片在人工小腸液(pH 6.8磷酸鹽緩沖液)中釋放度達到21%，也超出了藥典要求;以殼聚糖

21、包衣的片在人工小腸液(pH 6.8磷酸鹽緩沖液)中釋放度為5.2%，符合藥典規(guī)定，而在人工結(jié)腸液1釋放度為9%，未達到結(jié)腸定位釋放的要求。& SG4 h- t! M) U% l由于殼聚糖可被結(jié)腸中的特異酶降解，因此在人工結(jié)腸液1中加入30%大鼠結(jié)腸內(nèi)容物制成人工結(jié)腸液2，并考察以殼聚糖包衣的片的釋放度。結(jié)果見圖2。從圖2可見，以殼聚糖包衣的片在人工小腸液中5 h釋放度為5.3%，在人工結(jié)腸液2中7 h釋放度大于85%，其釋放度符合藥典要求。因此本試驗選擇殼聚糖為酶降解層的包衣材料。8 b9 . |5 q0 ( D+ u- v2.4.3 殼聚糖包衣膜增重的選擇 殼聚糖包衣膜的厚度對在人工結(jié)腸液2

22、中的釋放有影響，所以分別考察了殼聚糖包衣膜增重為4%、5%、6%的包衣片的釋放情況。結(jié)果見圖3。8 D5 S2 |9 c# k h從圖3可見，殼聚糖包衣膜增重為4%時，在人工小腸液中釋放度為24.4%，超出藥典規(guī)定的要求;殼聚糖包衣膜增重為6%時，在人工結(jié)腸液2中7 h釋放度為57.8%，未達到藥典規(guī)定的釋放度要求;殼聚糖包衣膜增重為5%時，在人工小腸液中釋放度為5.1%、在人工結(jié)腸液2中7 h釋放度大于85.0%，符合藥典規(guī)定。因此確定殼聚糖包衣膜的增重為5%- , d( N+ 0 R( 3 n2.4.4 腸溶層包衣增重的影響 由于殼聚糖在酸性條件下溶解，為了保證藥物在胃液中不釋放，需要在殼

23、聚糖包衣膜外包腸溶層，所以分別考察了腸溶層包衣增重為2%、3%、4%、5%時包衣片在人工胃液中的釋放情況。結(jié)果，腸溶層包衣增重為2%時，在人工胃液中2 h內(nèi)鞣酸小檗堿釋放為15.6%;當腸溶層增重為3%、4%、5%時，在人工胃液中2 h內(nèi)鞣酸小檗堿釋放為0%，因此確定腸溶層包衣增重為3%。2 S5 O# p& c; in& , C2.4.5 包衣片的批內(nèi)批間穩(wěn)定性試驗 以殼聚糖增重為5%，腸溶層增重3%制備包衣片，以在不同介質(zhì)中的釋放度作為指標，考察批內(nèi)批間穩(wěn)定性(每批500片)。結(jié)果見表2、表3。- ( x; L ) y( D- 由表2可見，包衣片在人工胃液、人工小腸液中的批內(nèi)和批間重現(xiàn)性良

24、好。其在人工胃液中無釋放;在pH 6.8的人工小腸液中釋放度為4.48%，RSD為1.27%(n=3)。由表3可見，鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片在人工結(jié)腸液2中的釋放度批內(nèi)和批間穩(wěn)定性良好，2 h的釋放度為20.62%，RSD為2.0%;4 h釋放度為67.95%，RSD為1.18%;6 h釋放度為86.09%，RSD為0.36%;7 h累積釋放度為86.89%，RSD為0.96%，在6 h時釋放度已大于85%。表2 不同批次包衣片在人工胃液、人工小腸液1中的累積釋放度表3 不同批次包衣片在人工結(jié)腸液2中的累積釋放度5 , a+ V7 C1 |: y2 S% ( 3 討 論$ I, k5 A ?-

25、 QU1 d本研究采用多層包衣使鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片達到結(jié)腸定位的目的，其中殼聚糖包衣層起主要的結(jié)腸定位作用。殼聚糖能在胃液中溶解，在小腸液中不溶解，而被結(jié)腸特異酶降解，為避免殼聚糖包衣膜在胃液中溶解，在殼聚糖包衣膜外層包腸溶性丙烯酸樹脂并且通過控制腸溶衣膜的厚度，既保證殼聚糖在胃液中不溶解，又使其不影響藥物在結(jié)腸液中的釋放。% s5 8 v, 1 S+ r根據(jù)中國藥典2005版附錄XIX要求，結(jié)腸定位給藥制劑在規(guī)定酸液和pH 6.8的磷酸鹽緩沖液中不釋放或少量釋放，在pH 7.47.8的磷酸鹽緩沖液中大部分釋放。本研究發(fā)現(xiàn)，當殼聚糖包衣膜太薄時，在pH 6.8的磷酸鹽緩沖液中釋放度超出藥典規(guī)定的要求;當殼聚糖包衣膜太厚時，在pH 7.47.8的磷酸鹽緩沖液中殼聚糖降解太慢，導致藥物釋放度達不到結(jié)腸釋放的要求，因此殼聚糖包衣膜的厚度是使鞣酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片定位到結(jié)腸并且釋放度達到要求的關(guān)鍵。, 8 _, : g( ?* r+ 【參考文獻】3 D9 CE7 k$ B9 R7 h 崔福德.藥劑學M.5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004.& l. n P: ( K2 B% Ql* n4 V5 5 d(