精品資料（2021-2022年收藏）培養(yǎng)基適用性檢查報告.

1、培養(yǎng)基適用性檢查報告1.試驗目的：對培養(yǎng)基性能的質(zhì)量控制，以保證微生物檢驗的質(zhì)量。2.適用范圍：適用于細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用培養(yǎng)基和控制菌檢查用的培養(yǎng)基的適用性檢查。需檢查的培養(yǎng)基包括成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基和按處方配制的培養(yǎng)基。3.試驗內(nèi)容：3.1.計數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查3.1.1.菌種：大腸埃希菌CMCC（B）44102 金黃色葡萄球菌 CMCC（B）26003 枯草芽孢菌CMCC（B）63501 白色念珠菌CMCC（F）98001 黑曲霉CMCC（F）980033.1.2.菌液制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或瓊脂斜面培養(yǎng)基中，33培養(yǎng)24小

2、時，接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，26培養(yǎng)48小時。上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)50100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，26培養(yǎng)7天，加入4ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%的無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，用管口帶有薄的無菌棉花吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)50100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應在2小時內(nèi)使用；若保存在28，可在24小時內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可保存在28，在驗證過的

3、貯存期內(nèi)使用。3.1.3.適應性檢查3.1.3.1.細菌計數(shù)用培養(yǎng)基適應性檢查取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各1ml（50100cfu），分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置33培養(yǎng)48小時，計數(shù)。用被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（若無對照培養(yǎng)基可用其他廠家生產(chǎn)的培養(yǎng)基）按上述方法進行試驗，并記錄。試驗結(jié)果報告見表1。檢測日期報告日期被檢培養(yǎng)基名稱 生產(chǎn)廠家批號對照培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號菌落數(shù)：單位（cfu）大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌12平均12平均12平均被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基平均菌落數(shù)比值菌落形態(tài)大小結(jié)果判定備注表1 細菌計數(shù)用

4、培養(yǎng)基適用性檢查檢驗人： 復核人：3.1.3.1.霉菌及酵母菌計數(shù)用培養(yǎng)基適應性檢查取白色念珠菌、黑曲霉各1ml（50100cfu），分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置26培養(yǎng)72小時，計數(shù)。用被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（若無對照培養(yǎng)基可用其他廠家生產(chǎn)的培養(yǎng)基）按上述方法進行試驗，并記錄。3.1.4.結(jié)果判定若被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基上菌落平均數(shù)相互比值不小于70%），且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）上的菌落一致，判該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。試驗結(jié)果報告見

5、表2。表2 霉菌及酵母菌計數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查檢測日期報告日期被檢培養(yǎng)基名稱 生產(chǎn)廠家批號對照培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號菌落數(shù)：單位（cfu）白色念珠菌黑曲霉12平均12平均被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基平均菌落數(shù)比值菌落形態(tài)大小結(jié)果判定備注檢驗人： 復核人：3.2.控制菌（大腸埃希菌）培養(yǎng)基的適用性檢查3.2.1.菌種：大腸埃希菌CMCC（B）44102 金黃色葡萄球菌 CMCC（B）26003 3.2.2.菌液制備接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，33培養(yǎng)24小時，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為10100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置

6、，應在2小時內(nèi)使用；若保存在28，可在24小時內(nèi)使用。3.2.3.適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項目包括促生長能力、抑制能力及指示能力的檢查。大腸埃希菌培養(yǎng)基的檢測項目及所用菌株見表3。表3 大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基的促生長能力、抑制能力及指示能力檢查培養(yǎng)基特性試驗菌株膽鹽乳糖培養(yǎng)基（BL）促生長能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌4-甲基傘形酮葡萄苷酸培養(yǎng)基（MUG）促生長能力+指示能力大腸埃希菌曙紅亞甲基藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（MacC）促生長能力+指示能力大腸埃希菌膽鹽乳糖培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接種1ml（不大于100cfu）的大腸埃希菌于100

7、ml膽鹽乳糖被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33培養(yǎng)18小時，與對照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管大腸埃希菌應生長良好。膽鹽乳糖培養(yǎng)基（培養(yǎng)基抑制能力檢查）接種3ml（不少于100cfu）的金黃色葡萄球菌于100ml膽鹽乳糖被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33培養(yǎng)24小時，金黃色葡萄球菌不得生長。4-甲基傘形酮葡萄苷酸培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）分別接種0.2ml（不大于100cfu）的大腸埃希菌至5mlMUG被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）的試管內(nèi)，33培養(yǎng)，于5小時、24小時在366nm紫外光下觀

8、察，被檢培養(yǎng)基應與對照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）大腸埃希菌生長情況一致，并呈現(xiàn)熒光。觀察后，分別沿被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）的管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液，液面均應呈玫瑰紅色。曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取大腸埃希菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于曙紅亞甲藍瓊脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上大腸埃希菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基上，大腸埃希菌的菌落特征：紫黑色、淺紫色、藍紫色或粉紅色，菌落

9、中心呈深紫色或無明顯暗色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，常有金屬光澤。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取大腸埃希菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于麥康凱瓊脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上大腸埃希菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，大腸埃希菌的菌落特征：鮮桃紅色或微紅色，菌落中心呈深桃紅色，圓形，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤。表4 大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查檢測日期報告日期培養(yǎng)基名稱膽鹽乳糖培養(yǎng)基特性促生長

10、能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號生長情況對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱膽鹽乳糖培養(yǎng)基特性抑制能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號生長情況對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱MUG特性促生長能力、指示能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況5小時觀察24小時觀察靛基質(zhì)指示被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基特性促生長能力、指示能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況菌落大小菌落形態(tài)被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱麥康凱瓊脂培養(yǎng)基

11、特性促生長能力、指示能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況菌落大小菌落形態(tài)被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注檢驗人： 復核人：3.3.控制菌（乙型副傷寒沙門菌）培養(yǎng)基的適用性檢查3.3.1.菌種：乙型副傷寒沙門菌CMCC（B）50094 金黃色葡萄球菌 CMCC（B）26003 3.3.2.菌液制備接種乙型副傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，33培養(yǎng)24小時，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為10100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應在2小時內(nèi)使用；若保存在28，可在24小時內(nèi)使用。3.3.

12、3.適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項目包括促生長能力、抑制能力及指示能力的檢查。沙門菌培養(yǎng)基的檢測項目及所用菌株見表5。表5 沙門菌檢查用培養(yǎng)基的促生長能力、抑制能力及指示能力檢查培養(yǎng)基特性試驗菌株營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基促生長能力乙型副傷寒沙門菌四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基促生長能力乙型副傷寒沙門菌抑制能力金黃色葡萄球菌膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基或沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示能力乙型副傷寒沙門菌曙紅亞甲基藍瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示能力乙型副傷寒沙門菌三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基指示能力乙型副傷寒沙門菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接種1ml（不大于100cfu）的乙型副傷

13、寒沙門菌于200ml營養(yǎng)肉湯被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33培養(yǎng)18小時，與對照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管沙門菌應生長良好。四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接種1ml（不大于100cfu）的乙型副傷寒沙門菌于10ml四硫磺酸鈉亮綠被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33培養(yǎng)18小時，與對照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管乙型副傷寒沙門菌應生長良好。四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（培養(yǎng)基抑制能力檢查）接種3ml（不少于100cfu）的金黃色葡萄球菌于100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與

14、其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33培養(yǎng)24小時，金黃色葡萄球菌不得生長。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于膽鹽硫乳瓊脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門菌的菌落特征：無色至淺橙色，半透明，菌落中心帶黑色或全部黑色或無黑色。沙門、志賀瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（含菌數(shù)501

15、00cfu）分別涂布于沙門、志賀瓊脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在沙門、志賀瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門菌的菌落特征：無色至淡紅色，半透明或不透明，菌落中心有時帶黑褐色。曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于曙紅亞甲藍瓊脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指

16、示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門的菌落特征：無色至淺橙色，透明或半透明，光滑濕潤的圓形菌落。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于麥康凱瓊脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門的菌落特征：無色至淺橙色，透明或半透明，菌落中心有時為暗色。三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基（固體培

17、養(yǎng)基指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（不大于100cfu）分別涂布于三糖鐵被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）高層斜面上進行斜面和高層穿刺接種，33培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基斜面見紅色、底層見黃色；或斜面黃色、底層黑色。表6 乙型副傷寒沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查檢測日期報告日期培養(yǎng)基名稱營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基特性促生長能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號生長情況對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基特性促生長能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號生長情況對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基特性抑制能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號生長情況對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基特性促生長能力、指示能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況菌落大小菌落形態(tài)被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基特性促生長能力、指示能力試驗菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況菌落大小菌落形態(tài)被檢培養(yǎng)基