殼聚糖和尿囊素預(yù)防外科術(shù)后腹腔粘連效果的觀察(1)

1、    殼聚糖和尿囊素預(yù)防外科術(shù)后腹腔粘連效果的觀察(1)    】 目的： 對(duì)比觀察殼聚糖及尿囊素對(duì)術(shù)后腹腔粘連的預(yù)防作用，并探討兩者合用的協(xié)同作用及機(jī)理. 方法： 成年純種家兔96只制成粘連動(dòng)物模型，隨機(jī)分為對(duì)照組（A）、殼聚糖組（B），尿囊素組（C）和殼聚糖 尿囊素聯(lián)合用藥組（D），每組24只. 觀察家兔術(shù)后一般情況， 并于術(shù)后1 wk和2 wk剖腹觀察其腹腔粘連情況，按程度分級(jí)，切取標(biāo)本行HE染色，顯微鏡下觀察. 結(jié)果： 粘連動(dòng)物模型建立切實(shí)可靠，B，C組和D組粘連等級(jí)與A組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0

2、.05），且D組效果明顯優(yōu)于B，C組（P<0.05）. 病理觀察聯(lián)合用藥組炎性反應(yīng)及纖維化程度均輕于對(duì)照組. 結(jié)論： 術(shù)中應(yīng)用殼聚糖和尿囊素均有預(yù)防術(shù)后腹腔粘連的作用，兩者合用可產(chǎn)生協(xié)同作用.     【關(guān)鍵詞】 粘連；殼聚糖；尿囊素；兔     0引言    術(shù)后腹腔粘連是外科腹部手術(shù)后的一種常見并發(fā)癥，發(fā)生率高達(dá)90%以上1，是引起腸梗阻最常見的原因，有的甚至可引起腸絞窄而致命. 盡管廣大醫(yī)務(wù)工作者已認(rèn)識(shí)到手術(shù)操作輕柔、減少出血和異物存留、避免粗糙創(chuàng)面出現(xiàn)、術(shù)后加強(qiáng)

3、活動(dòng)等可以減輕腹腔粘連，但已有的研究報(bào)道表明：采用上述辦法并不能很有效地預(yù)防粘連2，因而探索能有效預(yù)防術(shù)后腸粘連的新方法具有重的臨床意義. 殼聚糖是一種純天然的高分子多糖體，可被人體降解吸收，是新型的高分子抗粘連劑. 尿囊素為2,5二氧代4咪唑烷基脲. 它是尿酸的衍生物，具有促進(jìn)組織細(xì)胞增生、促進(jìn)潰瘍及傷口愈合的作用. 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)比觀察殼聚糖及尿囊素對(duì)家兔術(shù)后腹腔站粘連的預(yù)防作用，以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)預(yù)防術(shù)后粘連的效果，探討殼聚糖及尿囊素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)預(yù)防術(shù)后腸粘連的協(xié)同作用，為預(yù)防和減輕術(shù)后腹腔粘連提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).    1材料和方法  

4、  1.1材料成年純種家兔96只，雌雄不限，體質(zhì)量22. 5 kg，二級(jí)清潔動(dòng)物，由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；殼聚糖凝膠，為石家莊億生堂醫(yī)用品有限公司產(chǎn)品；尿囊素，為江蘇華邦生化科技有限責(zé)任公司產(chǎn)品，用生理鹽水配制成0.1 mol/L濃度的溶液備用；速眠新注射液，1.5 mL/支，長(zhǎng)春軍需大學(xué)獸醫(yī)研究所生產(chǎn).    1.2.1動(dòng)物準(zhǔn)備全部動(dòng)物術(shù)前均禁食(不禁水)12 h，速眠新注射液（2 mL/kg）肌肉注射麻醉. 麻醉后仰臥位固定，剪毛消毒鋪單，無(wú)菌操作下取腹正中切口，長(zhǎng)約4 cm. 打開腹腔后找出盲腸，用組織鉗取出盲腸，用顯微

5、尖鑷于腸系膜對(duì)側(cè)沿縱軸方向剝離約5 cm×2 cm大小漿膜3.    1.2.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組家兔按雙盲法隨機(jī)分為4組，每組24只： 對(duì)照組(A組)，關(guān)腹前用生理鹽水30 mL沖洗腹腔，吸棄部分液體，將盲腸放回腹腔，關(guān)腹；殼聚糖組(B組)，關(guān)腹前用殼聚糖凝膠均勻涂布于距盲端3 cm范圍內(nèi)的盲腸漿膜面(用量： 1 mL/只)；尿囊素組(C組) 關(guān)腹前注入尿囊素溶液30 mL；殼聚糖 尿囊素聯(lián)合用藥組(D組)，關(guān)腹前均勻涂布?xì)ぞ厶悄z(1 mL/只)并注入尿囊素溶液30 mL.    1.2.3目視判斷評(píng)分術(shù)后

6、動(dòng)物禁食12 h，分籠飼養(yǎng)，飼料為全價(jià)營(yíng)養(yǎng)家兔顆粒飼料. 每組再隨機(jī)分為2組，每組12只，分別于術(shù)后1 wk 和2 wk在麻醉下再次打開腹腔，肉眼觀察并評(píng)定盲腸盲端經(jīng)處理過(guò)的部位同周圍腸管、系膜及腹壁的粘連情況. 在實(shí)驗(yàn)期間死亡的家兔也做剖腹檢查. 按文獻(xiàn)4的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)腹腔粘連進(jìn)行評(píng)估，同時(shí)拍照并記錄結(jié)果： 0級(jí)：無(wú)粘連；級(jí)：輕度粘連，易分離；級(jí)：中度粘連，不易分離，但分離時(shí)不致撕裂腸管；級(jí)：高度粘連，不能分離，施行分離時(shí)可撕裂腸管.    1.2.4病理切片評(píng)價(jià)切取粘連處的盲腸組織，生理鹽水洗凈內(nèi)容物后立即用40 g/L甲醛固定，常規(guī)石蠟切片，蘇木精伊

7、紅染色，光鏡下觀察局部腸壁的病理改變. 根據(jù)炎性細(xì)胞的多少、成纖維細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞的增生、纖維蛋白的存在、間皮細(xì)胞與膠原纖維的排列、毛細(xì)血管的增生等情況，判斷粘連程度.    統(tǒng)計(jì)學(xué)處理： 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，各組粘連程度分級(jí)程度的差異采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的多組等級(jí)資料比較的秩和檢驗(yàn)KruskalWallis H檢驗(yàn)，多重比較采用Nemenyi檢驗(yàn).2結(jié)果    2.1一般情況各組家兔麻醉清醒后即可活動(dòng)，精神、進(jìn)食良好，傷口愈合好. 術(shù)后4 d ，A組動(dòng)物死亡1只，剖腹探查死因?yàn)閺V泛腸粘連致絞窄性腸梗

8、阻. 術(shù)后1 wk左右A，B，C組部分動(dòng)物出現(xiàn)精神萎糜、食欲下降、活動(dòng)減少等癥狀，A組最重，D組動(dòng)物情況明顯優(yōu)于其他各組.    2.2肉眼觀察所有存活家兔皮膚切口均為甲級(jí)愈合，術(shù)后1 wk和2 wk均未見腹腔內(nèi)有明顯的感染存在，盲腸未見穿孔，A組粘連最重，其次為B，C組，D組最輕( 圖1).            作者：沈新，李孟彬，王為忠，施海 【關(guān)鍵詞】粘連；殼聚糖；尿囊素；兔【Abstract】AIM: To investiga

9、te the preventi         本篇論文是由3COME文檔頻道的網(wǎng)友為您在網(wǎng)絡(luò)上收集整理餅投稿至本站的，論文版權(quán)屬原作者，請(qǐng)不用于商業(yè)用途或者抄襲，僅供參考學(xué)習(xí)之用，否者后果自負(fù)，如果此文侵犯您的合法權(quán)益，請(qǐng)聯(lián)系我們。    2.3腹腔粘連程度比較術(shù)后1 wk和2 wk，家兔腹腔粘連程度A組與B，C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；B組和C組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；D組與B, C

10、組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,表1). A： 無(wú)粘連（0級(jí)）； B： 輕度粘連（級(jí)）； C： 中度粘連（級(jí)）； D： 高度粘連（級(jí)）.圖1家兔術(shù)后腸管間和腹腔粘連情況表1各組間家兔術(shù)后腹腔粘連程度的比較        2.4形態(tài)學(xué)變化光鏡下觀察家兔腹腔粘連部位的病理改變，術(shù)后1 wk，A組： 有大量的成纖維細(xì)胞和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，組織水腫明顯；B組： 有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，成纖維細(xì)胞較少，組織水腫，漿膜面有內(nèi)皮及上皮細(xì)胞增生；C組： 僅有少量成纖維細(xì)胞浸潤(rùn)和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，組織輕度水腫，漿膜面有單層間皮細(xì)胞增生；

11、D組： 無(wú)或僅有少許成纖維細(xì)胞浸潤(rùn)和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，水腫程度輕微(圖2). 術(shù)后2 wk，A組： 處理側(cè)漿膜面纖維組織增生明顯，纖維粘連嚴(yán)重，漿膜層有淋巴細(xì)胞散在浸潤(rùn)；B組： 纖維粘連較輕；C組： 纖維蛋白少，纖維粘連輕微；D組： 漿膜面光滑平整，無(wú)纖維粘連(圖3).A： 對(duì)照組；B： 殼聚糖組；C： 尿囊素組；D： 殼聚糖 尿囊素聯(lián)合用藥組.    3討論    腹部手術(shù)后粘連發(fā)生機(jī)理以損傷炎癥學(xué)說(shuō)較流行5，正常情況下，漿膜間皮及間皮下血管中存在纖溶酶原激活因子，能使纖維蛋白的形成和水解處于動(dòng)態(tài)平衡，以維持漿膜的光

12、滑6. 當(dāng)腹部手術(shù)或炎癥刺激時(shí)，炎性細(xì)胞和受傷的間皮細(xì)胞產(chǎn)生纖溶酶原激活抑制物，導(dǎo)致纖維蛋白溶解作用降低7. 另外，成纖維細(xì)胞增生，分泌膠原纖維，多種因素造成永久性纖維粘連.    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，殼聚糖與尿囊素均具有防粘連的作用， HE染色光鏡下觀察也證實(shí)，用藥組炎癥反應(yīng)輕，漿膜面有單層間皮細(xì)胞，光滑平整，達(dá)到生理性修復(fù). 殼聚糖具有良好的生物相容性8，不易引發(fā)炎癥反應(yīng)，不被排斥，隨著器官的蠕動(dòng)而漫布于整個(gè)腹腔，起到潤(rùn)滑作用，將腸管和腹膜隔開，并最終可降解為對(duì)人體有益的氨基葡萄糖單體被吸收. 它可選擇性促進(jìn)上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞增長(zhǎng)而抑制成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)9，

13、從而改善內(nèi)源性修復(fù)過(guò)程，促使組織生理性修復(fù)，減少膠原纖維合成. 可抑制出血及纖維蛋白束的形成，減少了因血腫機(jī)化而造成的組織粘連10. 關(guān)腹前注入尿囊素溶液，可以減少和消退膠原蛋白滲出，防止成纖維母細(xì)胞大量增殖，減輕腸管水腫，使腹膜上皮迅速修復(fù). 病理組織學(xué)檢查可以看出，尿囊素可很好地恢復(fù)間皮的連續(xù)性和完整性，防止術(shù)后腸粘連，抗炎抗?jié)B出作用可以減少炎性滲出，從而減少纖維蛋白原和纖維蛋白析出，纖維蛋白性粘連較輕，這有利于間皮細(xì)胞的覆蓋，達(dá)到生理性修復(fù). 減少炎癥滲出及炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)，也是其減輕粘連的一個(gè)因素.    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，殼聚糖與尿囊素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)預(yù)

14、防術(shù)后腹腔粘連有協(xié)同作用，這可能與兩者同時(shí)以不同的作用機(jī)理對(duì)抗粘連有關(guān). 兩者均無(wú)毒副作用11，聯(lián)合用藥預(yù)防術(shù)后粘連的發(fā)生率及粘連程度均明顯降低，為術(shù)后腹腔粘連的預(yù)防提供了臨床依據(jù).【參考文獻(xiàn)】    1 Liakakos T, Thomakos N, Fine P M, et al. Peritoneal adhesions: etiology, pathophysiology and clinical significance: Recent advances in prevention and management J. Dig Surg, 200

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