益心膠囊對急性心肌梗塞大鼠血清高敏C反應(yīng)蛋白和白細(xì)胞介素-6含

1、益心膠囊對急性心肌梗塞大鼠血清高敏C反應(yīng)蛋白和白細(xì)胞介素-6含                        【摘要】 目的觀察益心膠囊對急性心肌梗塞(Acute myocardial infarction，AMI)大鼠血清高敏C反應(yīng)蛋白(high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP)和白細(xì)胞介素-6(Interleu

2、kin-6，IL-6)的影響，明確其在預(yù)防心肌梗塞中的作用機(jī)理。方法大鼠70只，隨機(jī)分為正常對照組、AMI組、假手術(shù)組、消心痛組、益心膠囊大劑量組、益心膠囊小劑量組。大鼠灌胃給藥連續(xù)21d，末次給藥后1h，結(jié)扎左冠狀動脈前降支，體表心電圖示ST段弓背抬高或壞死性 Q 波為AMI模型形成，結(jié)扎24h后測定大鼠血清hs-CRP和IL-6含量。結(jié)果與正常對照組比較，AMI組血清hs-CRP和IL-6含量明顯升高(P<0.01)。與AMI組比較，益心膠囊組血清hs-CRP和IL-6含量顯著降低(P<0.01)，以大劑量組作用顯著。消心痛亦可降低AMI大鼠血清hs-CRP和IL-6含量(P&

3、lt;0.01)。結(jié)論益心膠囊給藥可以降低急性心肌梗塞大鼠血清炎癥因子含量，這可能是其預(yù)防心肌梗塞的作用機(jī)理之一。 【關(guān)鍵詞】 益心膠囊; 急性心肌梗塞; 高敏C反應(yīng)蛋白; 白細(xì)胞介素-6益心膠囊是由麝香、蘇合香、丹參、黃芪等多味藥物組成，對于心血管疾病有著良好的治療效果。大量的臨床實踐表明，長期使用益心膠囊可預(yù)防冠狀動脈疾病的發(fā)生，減少致死性和非致死性心血管病事件的發(fā)生率，局限心血管病事件的發(fā)病范圍及嚴(yán)重程度。因此，我們采用結(jié)扎大鼠冠狀動脈造成急性心肌梗塞模型，研究益心膠囊不同劑量預(yù)先給藥對急性心肌梗塞的保護(hù)作用及其作用機(jī)制，為其臨床合理用藥提供必要的實驗依據(jù)。1 材料與儀器1.1 動物健康

4、SD大鼠70只，雌雄各半，體重200220 g，購自河南省實驗動物中心，許可證號:SCXK(豫)2005-0011。1.2 藥物益心膠囊，0.3 g/粒，麝香、蘇合香、丹參、黃芪等12味藥物組成，鄭州大學(xué)藥學(xué)院藥劑教研室提供;消心痛，10 mg/片，珠海麗珠集團(tuán)，批號20080302;戊巴比妥鈉，上海試劑二廠產(chǎn)品，批號20060802;鹽酸利多卡因注射液，20 ml/支(0.4 g)，南京第四制藥廠產(chǎn)品，批號20080307。1.3 儀器ECJ1550P心電圖機(jī)，日本光電公司產(chǎn)品;DH150型動物呼吸機(jī)，浙江大學(xué)醫(yī)療儀器廠產(chǎn)品;Beckman-Coolter-cx9全自動生化分析儀，美國Bec

5、kman公司產(chǎn)品。EC-911放射免疫自動計數(shù)儀，中佳光電公司產(chǎn)品;CR3i多功能臺式離心機(jī)，法國Joudan公司產(chǎn)品。1.4 試劑hs-CRP試劑盒，上海長征醫(yī)學(xué)科技有限公司產(chǎn)品，批號080405;IL-6試劑盒，北京北免東雅生物技術(shù)研究所產(chǎn)品，批號080306。2 方法2.1 動物分組及給藥SD大鼠70只，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，隨機(jī)分為正常對照組(10只)，其余大鼠依據(jù)性別和體重隨機(jī)分為AMI組、陽性對照組、益心膠囊大劑量組、益心膠囊小劑量組、假手術(shù)組，每組12只。分組當(dāng)天，益心膠囊配成藥液，分別以(2 g·kg-1·d-1)和(1 g·kg-1·

6、;d-1)給大鼠灌胃，陽性藥物組以消心痛(10 mg·kg-1·d-1)，1次/d，連續(xù)21 d。正常組、模型組和假手術(shù)組給予等量的生理鹽水灌胃。2.2 急性心肌梗塞模型制備末次給藥后1 h，除正常對照組外，其余大鼠行冠脈結(jié)扎術(shù)1。腹腔注射3%戊巴比妥鈉(40 mg/kg)麻醉大鼠，靜脈注射1mg/kg利多卡因預(yù)防室顫，將大鼠仰位固定于手術(shù)臺上，除毛。消毒，沿胸骨中線自胸鎖關(guān)節(jié)至劍突上切開皮膚，連接呼吸機(jī)(頻率48 次/min)，暴露胸骨及軟骨部位，用手術(shù)刀在劍突下端上方1 cm處正中位劈開胸骨，沿胸骨正中向上用剪刀延長切口約3 cm，用小開胸器輕輕撐開胸腔切口，可見心包及

7、搏動之心臟。用眼科剪將心包前部剪開，用止血鉗將左心耳輕輕提起，用持針器持小圓變針在冠狀動脈前降支根部穿一線，5O號線結(jié)扎之，于結(jié)扎后大鼠四肢皮下連接心電圖機(jī)(紙速25 mm/s,電壓10 mm/mv)，以體表ECG 出現(xiàn) ST 段弓背向上抬高或呈壞死性 Q 波，直視下可見被結(jié)扎血管供血區(qū)心肌變?yōu)榘底仙⒊掷m(xù) 30 min為模型成功標(biāo)志，逐層關(guān)閉縫合胸腔。假手術(shù)組僅在左冠狀動脈前降支穿線不結(jié)扎。術(shù)后24 h，各組動物均有死亡。具體動物數(shù)見表1。             

8、60;               2.4 統(tǒng)計學(xué)處理采用統(tǒng)計軟件SPSS12.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，所有數(shù)據(jù)±s表示，多組間比較用單因素方差分析，P<0.05為差異有顯著性意義。3 結(jié)果3.1 益心膠囊對急性心肌梗塞大鼠血清hs-CRP含量的影響由表1可見，結(jié)扎冠狀動脈后，與正常對照組比較，AMI組血清hs-CRP含量顯著增高(P<0.01)。而預(yù)先給藥21 d的大鼠，與AMI組比較，存活率均增加，益心膠囊組血清hs-CRP含

9、量顯著降低(P<0.01)，以大劑量組作用顯著。陽性對照藥消心痛亦可降低血清hs-CRP含量(P<0.01)。4 討論急性心肌梗塞是冠心病的危急重癥，屬于中醫(yī)“真心痛”“心痹”等范疇，為本虛標(biāo)實之患，本虛以氣虛和陽虛為主，標(biāo)實以血淤、濁阻為要。益心膠囊為治療心血管疾病的有效藥物，由麝香、蘇合香、丹參等藥物組成。麝香開竅通絡(luò)止痛為君;蘇合香芳香開竅;丹參活血化瘀為臣;黃芪益氣養(yǎng)陰為佐。全方配伍，共奏芳香開竅、通經(jīng)止痛之效。隨著現(xiàn)代研究的深入，炎癥在急性心肌梗塞的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后過程中的作用越來越重要2。hs-CRP作為炎癥過程中最具有標(biāo)志性的因子，已被證實是急性心肌梗塞發(fā)生發(fā)展中具有

10、重要預(yù)后意義的指標(biāo)，通常它在心肌梗塞后6h開始升高，2448h達(dá)到高峰3,4。大量的研究已證實血清hs-CRP水平升高與AMI的發(fā)生密切相關(guān)5：它可調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞攝入LDL，有助于泡沫細(xì)胞的形成;刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生血栓前組織因子;激活粥樣斑塊內(nèi)的補體系統(tǒng)導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定;誘導(dǎo)黏附分子表達(dá)，如血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)、細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1);致敏內(nèi)皮細(xì)胞，產(chǎn)生CT細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用造成損壞。IL-6主要是由活化的單核-巨噬細(xì)胞分泌的一種促炎癥細(xì)胞因子，為預(yù)測急性心肌梗塞的早期基礎(chǔ)病變及嚴(yán)重并發(fā)癥的指標(biāo)，其血清濃度越高，其發(fā)生嚴(yán)重程度及再發(fā)心絞痛的風(fēng)險越高6。IL-6可促進(jìn)血管

11、內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子和其他炎癥遞質(zhì)，增強(qiáng)局部的炎癥反應(yīng);促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放第凝血因子，啟動凝血過程;可刺激基質(zhì)降解酶的合成，侵蝕斑塊內(nèi)的基質(zhì)，從而導(dǎo)致不穩(wěn)定斑塊破裂7。本實驗結(jié)果表明，當(dāng)結(jié)扎冠狀動脈造成AMI模型后，大鼠血清hs-CRP,IL-6含量大幅升高，而預(yù)先服用益心膠囊21 d的大鼠，其血清hs-CRP，IL-6含量均顯著降低，且其降低程度與給藥劑量呈相關(guān)，表明抗炎作用是益心膠囊預(yù)防心肌梗塞的作用機(jī)制之一，為AMI臨床治療早期使用本藥提供了依據(jù)。【參考文獻(xiàn)】 1 徐叔云,陳 修.藥理實驗方法學(xué)，第3版M.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:1023.2 Mul Vihillnt，F(xiàn)oly

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