超聲波提取龍眼殼總黃酮及鑒別(1)

1、超聲波提取龍眼殼總黃酮及鑒別(1)        作者：黃鎖義， 劉?；ǎ?黎海妮， 唐玉蓮， 張婧萱【關鍵詞】 超聲波提取；,龍眼殼；,總黃酮；,鑒別摘要：目的為充分利用龍眼殼植物資源，避免資源的浪費，探討龍眼殼中總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用超聲波乙醇浸提法從龍眼殼中提取黃酮類物質，對所提取的黃酮類物質進行驗證，并用紫外分光光度法測定含量。結果測得樣品中總黃酮的含量C=1.204 mg/ml，回收率為98.29%，其純度和產(chǎn)率均較高。結論該方法采用全物理過程，無污染，是提取龍眼殼中黃酮類物質的有效途徑。關鍵詞

2、：超聲波提??； 龍眼殼； 總黃酮； 鑒別Key words：Ultrasonic wave treatment; Longan shell; Total flavanone; Identification     龍眼(Dimocarpus longan Lour)為無患子科龍眼屬常綠果樹，喬木。龍眼的果實俗名桂圓，又名龍目、比目、荔枝奴、益智、亞荔枝、圓眼、川彈子、驪珠、燕卵、蜜脾、鮫淚、木彈、繡木團等1,為我國著名的亞熱帶水果。龍眼原產(chǎn)于我國南部和越南北部的南亞熱帶區(qū)域，在我國已有2000多年栽培歷史，是重要的南亞熱帶常綠長壽果樹，為四大嶺南佳果之一

3、。龍眼果品暢銷海內外，在國際市場上享有較高的聲譽，我國龍眼栽培面積和產(chǎn)量均居世界首位。我國福建、廣東、廣西及臺灣等省是主產(chǎn)區(qū)，海南、云南、四川和貴州等省也有栽培。李時珍在本草綱目中說：“食品以荔枝為貴，而資益以龍眼為良?！饼堁鄣臓I養(yǎng)價值很高，是南方著名佳果之一。龍眼還是重要的藥材。蘇頌撰寫的圖經(jīng)本草，說龍眼“甘平無毒，主治五臟邪氣，安志壓食，久服強魄聰明，輕身不老，通神明”。李時珍的本草綱目也說龍眼有“開胃健脾，補虛益智”的功效。龍眼肉可以治療虛勞羸弱，失眠鍵忘，驚悸怔忡，以及脾虛泄瀉，產(chǎn)后浮腫等癥。此外，龍眼殼、龍眼花和龍眼皮、根均可以作為配伍的中藥2。龍眼殼因為得不到合理的利用,每年都有大

4、量的龍眼殼白白地浪費。龍眼殼中含有大量的生物堿及其他中藥成分,對中藥事業(yè)的研究開發(fā)具有重要價值3。近年來，超聲技術應用于提取植物中的生物堿、苷類、生物活性物質、動物組織漿的毒質等研究已有報道4，5，表明其具有耗能低、效率高、不破壞有效成分的特點。很多研究表明，利用超聲波產(chǎn)生的強烈振動、高的加速度、強烈的空化效應、攪拌作用等，可加速植物材料中的有效成分進入溶劑，從而增加有效成分的提取率，縮短提取時間，并且還可避免高溫對提取成分的影響5。但超聲技術應用于提取龍眼殼中黃酮類物質的研究尚未見報道，本文用超聲波提取龍眼殼總黃酮及鑒別?，F(xiàn)報道如下。1 儀器與試劑1.1 儀器KQ5200DB型數(shù)控超聲波清洗

5、器（昆山市超聲儀器有限公司）；UV755B紫外可見分光光度計（上海分析儀器總廠）；ZFI型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠)；SHBIII循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）。1.2 試劑95%乙醇AR；亞硝酸鈉AR；硝酸鋁AR；氫氧化鈉AR；三氯化鋁AR；鹽酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；丁丁醇AR；鎂砂粉AR；乙酸鎂AR；蘆丁標準品（中國藥品生物制品檢定所）；新鮮龍眼殼采自廣西百色市。2 方法與結果2.1 總黃酮成分提取取新鮮龍眼殼，烘干，粉碎。稱取龍眼殼粉末約6 g，加80 ml 95%乙醇，超聲波提取2.5 h，抽濾。濾渣再加80 ml 95 %乙醇，超聲波提取2

6、.5 h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩57 ml為止，放置100 ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。2.2 測定方法依據(jù)以蘆丁為對照品測定龍眼殼中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡合物，在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰。2.3 定量實驗總黃酮的含量測定2.3.1 波長的選擇 取樣品液適量，在0.30 ml 5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經(jīng)硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420700 nm波長范圍測定絡合物的吸光度，絡合物于510 nm波長處有最大吸收，故測定時選用此波長。2.3.2 標準曲線的繪制 分別精密吸取蘆丁對照液

7、（0.10 mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml于10.00 ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30 ml，搖勻，靜置6 min；再加10%硝酸鋁溶液0.30ml，搖勻，靜置6 min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00 ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12 min，以試劑作空白參比液，于510nm處測吸光度。吸光度測定結果如下表：表1 紫外可見分光光度計測定蘆?。裕└鶕?jù)上表得回歸方程：A=6.967 1×103 8.418 1C，r=0.999 9。2.3.3 提取物含量的測定精密吸取樣品液0.50 ml，置10.00

8、ml容量瓶，按標準曲線的制備方法測定吸光度A=0.500，根據(jù)回歸方程：A=-6.9671×103 8.4181C，計算樣品中總黃酮的含量C=1.204 mg/ml。2.3.4 回收實驗 精密量取樣品液1.00 ml，加入標準蘆丁對照品2.00 ml（0.10 mg/ml），同前樣品測定的操作方法測定吸光度，求出回收率為98.29%。2.4 定性實驗-總黃酮的鑒別2.4.1 顏色反應紫外光下呈色反應：取該樣品溶液點在濾紙上，在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點。濃氨水反應：取該樣品溶液點在濾紙上，將濾紙在氨水上方熏0.5 min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點。三氯化鋁反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴