環(huán)氧乙烷殘留量檢測方法學(xué)驗證

1、朋 L L品生產(chǎn)質(zhì)量管理文件四、五、背景組織與職責(zé)附件目的用氣相色譜GC-2010A型氣相色譜儀（含頂空器）進行環(huán)氧乙烷殘留量的檢測方法學(xué)的 研究，證明其適用于塑料瓶環(huán)氧乙烷殘留量的檢測。二、背景環(huán)氧乙烷在醫(yī)療器械及衛(wèi)生用品的消毒方面應(yīng)用廣泛。在藥品包裝材料生產(chǎn)領(lǐng)域，口服 藥用塑料瓶在內(nèi)包裝后也進行環(huán)氧乙烷滅菌。環(huán)氧乙烷穿透性強，消毒后因被消毒材料對其 吸附能力不同，其完全消散時間也不同。殘留的環(huán)氧乙烷對人體有一定的毒性，因此需要對 滅菌后的塑料瓶進行環(huán)氧乙烷殘留的檢測。氣相色譜法是采用氣體為流動相流經(jīng)裝有填充劑的色譜柱進行分離測定的色譜方法。物 質(zhì)經(jīng)氣化后被載氣帶入色譜柱進行分離，各組分先后

2、進入檢測器，用數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜 信號?，F(xiàn)采用頂空法來檢測環(huán)氧乙烷殘留。樣品在頂空器內(nèi)先將環(huán)氧乙烷氣化，氣化后的環(huán) 氧乙烷再進入氣相色譜中。頂空法的另外一個優(yōu)點就是能提高檢測的靈敏度。根據(jù)醫(yī)療器械生物學(xué)評價 第7部分：環(huán)氧乙烷滅菌殘留量（ISO 10993-7:2008），環(huán)氧乙烷殘留量接受標準為V 10ug/cm2。塑料瓶約20cm2/個，重量約為2.8g/個，故環(huán)氧乙烷 殘留接受標準為小于72ug/g，為了提高使用安全性故將接受標準制定為小于10ug/g參考文獻頂空毛細管柱氣相色譜法測定口服藥用塑料瓶中環(huán)氧乙烷殘留量 浙江省食品藥品檢驗所）中方法: 檢測條件為：（1）頂空器條件：爐溫（O

3、VEN TEMP 70C閥溫（MANIF TEMP 80C管道溫度（TUBE TEMP 80C平衡時間（INCUB TIME:20min（2）氣相條件： 色譜柱HP-INNOWA柱長30m直徑0.320mm膜厚0.25卩m進樣口溫度：200 C柱溫：70 C檢測器溫度：250 C三、范圍本驗證方案適用于GC-2010A型氣相色譜儀（含頂空器）檢測藥用滴眼劑塑料瓶（免洗）環(huán)氧乙烷殘留量的方法學(xué)驗證。四、組織及職責(zé)（王丹丹,樣品檢測時間（SAMPL INTER）lOmin回收率（% %） = =X100%100%環(huán)氧乙烷標準品溶液的理論濃度五、內(nèi)容1系統(tǒng)適應(yīng)性試驗色譜系統(tǒng)的適應(yīng)性試驗包括理論板數(shù)（

4、n）和拖尾因子（T）。1）、色譜柱的理論板數(shù)（n）：用于評價色譜柱的分離效果。在檢測中的測定物質(zhì)為環(huán)氧乙烷,其理論板數(shù)不得小于4000。2）、拖尾系數(shù)（T）：用于評價色譜峰的對稱性。為保證分離效果和測量精度，環(huán)氧乙烷峰的拖尾系數(shù)應(yīng)不得大于1.5。對照品溶液的制備取100ml容量瓶，加入約20ml的純化水，后取環(huán)氧乙烷標準品1ml加入到20ml的純化 水中溶解，加純化水至100ml充分溶解并用純化水將標準品稀釋到10ug/ml、5ug/ml、2.5ug/ml、1.25ug/ml、0.62ug/ml、0.31ug/ml、0.16ug/ml、0.08ug/ml。2專屬性在上述的色譜條件下，分別進樣5

5、ml純化水、環(huán)氧乙烷標準品、環(huán)氧乙烷標準品+塑料瓶、純化水+塑料瓶。其圖譜在環(huán)氧乙烷峰附近不應(yīng)有雜峰的干擾影響。3檢測限取環(huán)氧乙烷標準品溶液10ug/ml連續(xù)對倍稀釋后取5ml置于頂空瓶中進行環(huán)氧乙烷殘留 量檢測，直到其峰型不可辨別，此時環(huán)氧乙烷濃度為該方法的檢測限。4線性將環(huán)氧乙烷標準品溶液對倍稀釋成的系列濃度的標準溶液5個，10ug/ml、5ug/ml、2.5ug/ml、1.25ug/ml、0.62ug/ml，分別取5ml置于頂空瓶中，按氣相色譜法測定。以峰面積為橫坐標， 對照品濃度為縱坐標，5準確度剪碎后置于頂空專用瓶中，共準備9個，其中3個分別加入5ml高濃度5ug/ml，3個分別加入

6、5ml中濃度環(huán)氧乙烷標準品溶液2.5ug/ml，3個分別加入5ml低濃度環(huán)氧乙烷標準品溶液1.25ug/ml，按上述方法測定環(huán)氧乙烷濃度，計算加 樣回收率?；厥章蕬?yīng)滿足80%120%之間。繪制標準曲線，并求曲線相關(guān)系數(shù)R，R應(yīng)大于0.99。取一整個塑料瓶,環(huán)氧乙烷標準品溶液通過峰面積計算環(huán)氧乙烷標準品溶液實際濃度（以 3 3 次的平均值計）6精密度1重復(fù)性取5ml環(huán)氧乙烷標準品溶液2.5ug/ml置于頂空瓶中，重復(fù)進樣6個，計算RSD，RSD應(yīng)小于3%。2）中間精密度取5ml環(huán)氧乙烷標準品溶液2.5ug/ml，置于頂空專用瓶中，按上述方法測定環(huán)氧乙烷濃度， 由不同人員，不同時間共計完成3次檢測

7、，每次檢測制備3個樣品作為平行，并計算RSD。7耐用性考察關(guān)鍵參數(shù)隨機變動因素對結(jié)果的影響，如，頂空條件中爐溫3C,氣相色譜條件中柱溫3C。取5ml環(huán)氧乙烷標準品溶液2.5ug/ml，置于頂空專用瓶中按上述各個條件測定環(huán)氧乙 烷濃度。六、附件1使用儀器:儀器名稱儀器型號設(shè)備編碼確認人及日期2、標準品信息:標準品名稱標準品生產(chǎn)廠家標準品含量標準品有效期標準品儲存條件3、系統(tǒng)適應(yīng)性試驗:對所有樣品的理論板數(shù)及拖尾因子統(tǒng)計計入下表。名稱理論板數(shù)拖尾系數(shù)名稱理論板數(shù)拖尾系數(shù)4、專屬性溶液配制:日期:名稱保留時間環(huán)氧乙烷標準品濃度卩 g/mlg/ml峰面積操作人:復(fù)核人:操作人:復(fù)核人:日期:日 期:日

8、期:5、檢測限溶液配制:以峰面積為橫坐標，濃度為縱坐標曲線，并求曲線相關(guān)系數(shù)R樣品名稱環(huán)氧乙烷標準品濃度卩 g/mlg/ml保留時間min峰面積操作人:日 期:6、線性溶液配制:樣品名稱環(huán)氧乙烷標準品濃度卩 g/mig/mi保留時間min峰面積復(fù)核人:日期:以峰面積為橫坐標，濃度為縱坐標曲線，并求曲線相關(guān)系數(shù)R操作人: 日期:7、準確度溶液配制:標準曲線:樣品名稱環(huán)氧乙烷標準品濃度卩 g/mlg/ml保留時間min峰面積方程為:相關(guān)系數(shù)R為:復(fù)核人:日期:日 期:準確度（回收率）：樣品名稱理論加量口g峰面積實際檢測量口g均值口gRSD%）回收率計算過程:標準曲線為:相關(guān)系數(shù)R:操作人:復(fù)核人:日期:操作人:復(fù)核人:8精密度8.1重復(fù)性樣品名稱環(huán)氧乙烷標準品濃度口g/ml保留時間峰面積平均值RSD%操作人:復(fù)核人:日 期:8.2中間精密度樣品名稱標準品濃度口g/ml保留時間峰面積時間及檢驗人RSD%總RSD%日期:日 期:日