基因工程基本工具練習

1、絕密啟用前2013-2014學年度?學校2月月考卷試卷副標題考試范圍：xxx；考試時間：100分鐘；命題人：xxx題號一二總分得分注意事項：1答題前填寫好自己的姓名、班級、考號等信息2請將答案正確填寫在答題卡上第I卷（選擇題）請點擊修改第I卷的文字說明評卷人得分一、選擇題（題型注釋）1澳大利亞墨爾本大學的安德魯·帕斯克教授領導的科研小組成功地提取了已經(jīng)于20年前正式宣布滅絕的塔斯馬尼亞虎的DNA片段，將它注入到老鼠的胚胎中，并在這個胚胎形成軟骨和其他骨骼的過程中發(fā)揮了重要作用。下列對該項技術(shù)及應用前景的分析，你認為合理的是（ ）要將塔斯馬尼亞虎的基因?qū)氲嚼鲜篌w內(nèi)，必須用質(zhì)粒作為載體

2、用顯微注射法可以將塔斯馬尼亞虎的DNA片段注入受體細胞利用絕種動物的脫氧核糖核酸，有望研發(fā)出新型的基因藥物若用塔斯馬尼亞虎的基因完全替換某種動物細胞內(nèi)的基因，通過克隆技術(shù)，則有可能將已滅絕的塔斯馬尼亞虎重新復活A. B. C. D. 2下列所示的粘性末端是由幾種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的（ ）A1種B2種 C3種 D4種3下列有關(guān)基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶的描述，錯誤的是（ ）A一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列 B限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度的影響C限制性核酸內(nèi)切酶能識別和切割RNA D限制性核酸內(nèi)切酶可從原核生物中提取4作為載體的質(zhì)粒不可能具有（ ）A一個或多個限制酶的切

3、割位點 B特殊的遺傳標記基因 C經(jīng)人工改造的特點 D復雜的結(jié)構(gòu)5限制酶的作用實際上就是使DNA上某些化學鍵斷開，一種能對GAATTC專一識別的限制酶，斷開的化學鍵是 （ ）AG與A之間的鍵 BG與C之間的鍵CA與T之間的鍵 D磷酸與脫氧核糖之間的鍵6DNA連接酶的主要功能是（ ）ADNA復制時母鏈與子鏈之間形成氫鍵B黏性末端堿基之間形成氫鍵C將兩條DNA末端之間的縫隙連接起來D將堿基、磷酸之間的鍵連接起來7下列關(guān)于基因工程的說法中，正確的是（ ）A基因工程的設計和施工都是在細胞水平上進行的。B目前基因工程所有的目的基因都是從供體細胞中直接分離得到的C只要檢測出受體細胞中含有目的基因，那么目的基

4、因一定能成功進行表達D基因工程能使科學家打破物種界限，定向改造生物性狀8下面是3種限制性核酸內(nèi)切酶對DNA分子的識別序列和剪切位點圖(箭頭表示切點,切出的斷面為粘性末端)。下列敘述不正確的是（ ）限制酶1：GATC； 限制酶2：CCGCGG； 限制酶3：GGATCCA.不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點B.擴增目的基因時，PCR儀中要加入DNA連接酶C.限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同D.限制酶2和3識別的序列都包含6個堿基對9在基因工程中，作為基因運輸工具的運載體，下列特征除哪項外，都是運載體必須具備的條件（ ）A能夠在宿主細胞中復制，并穩(wěn)定地保存B具有1多個限制酶切點C必須是細菌的質(zhì)

5、?；蚴删wD具有某些標記基因10利用細菌大量生產(chǎn)人類胰島素，下列敘述錯誤的是 （ ）A.用適當?shù)拿笇\載體與人類胰島素基因進行切割與黏合 B.用適當?shù)幕瘜W物質(zhì)處理受體細菌表面，將重組 DNA 導入受體細菌 C.通常通過檢測目的基因產(chǎn)物來檢驗重組 DNA 是否已導入受體細菌 D.重組 DNA 必須能在受體細菌內(nèi)進行復制與轉(zhuǎn)錄，并合成人類胰島素1120世紀70年代創(chuàng)立了一種新興的生物技術(shù)-基因工程，實施該工程的最終目的是（ ）A、定向提取生物的DNA分子B、定向地對DNA分子進行人工剪切C、在生物體外對DNA分子進行改造D、定向地改造生物的遺傳性狀12下列有關(guān)基因工程中限制性內(nèi)切酶的描述，錯誤的是

6、（ ）A、一種限制性內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列B、限制性內(nèi)切酶的活性受溫度影響C、限制性內(nèi)切酶能識別和切割RNAD、限制性內(nèi)切酶可從原核生物中提取13天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B，而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰，下列操作正確的是（ ）A提取矮牽牛藍色花mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的DNA，再擴增基因BB利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導入玫瑰細胞C將基因B直接導入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細胞D將基因B導入玫瑰細胞后即可通過植物組織培養(yǎng)培育出藍玫瑰14關(guān)于磷酸二酯鍵的說法正確的是()A只有目的基因中存在 B只有

7、質(zhì)粒分子中存在CDNA單鏈或雙鏈分子都存在 D只存在于雙鏈DNA分子中15基因工程技術(shù)引起的生物變異屬于（）A.染色體變異 B.基因突變C.基因重組 D.不可遺傳的變異16下列關(guān)于基因表達載體的構(gòu)建描述錯誤的是()A基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心B基因表達載體的構(gòu)建包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因等部分C目的基因就是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因D構(gòu)建的基因表達載體都是相同的17下列有關(guān)限制酶的敘述中正確的是（ ）A用限制酶切割一個DNA分子中部，獲得一個目的基因時，被水解的磷酸二酯鍵有2個B限制酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大CCATG和GGATCC序列被限制酶切出的黏性

8、末端堿基數(shù)不同D只有用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒18限制酶a和b的識別序列和切割位點如圖所示。下列有關(guān)說法錯誤的是（ ）A.在相同的DNA分子中a酶的識別位點一般明顯要比b酶多B.能被a酶識別并切割的序列也能被b切割C.a酶與b酶切斷的化學鍵相同D將大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新連接后的DNA片段不一定全都能被b切割19下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是：（ ）A基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為目的基因B細菌質(zhì)粒是基因工程常用的運載體C通常用一種限制性內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA，用另一種處理運載體DNAD為育成抗除草劑的作物新品種，導入抗除草劑基因時

9、只能以受精卵為受體20用DNA連接酶把被限制酶（識別序列和切點是GATC）切割過的運載體和被限制酶（識別序列和切點是GGATCC）切割過的目的基因連接起來后，該重組DNA分子能夠再被限制酶切割開的概率是（ ）A1/2             B7/16          C1/16       &#

10、160;   D1/4 21用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草，下列有關(guān)說法錯誤的是（ ）A. 用限制性核酸內(nèi)切酶切割含目的基因的DNA分子.B.用DNA聚合酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C. 轉(zhuǎn)入的抗除草劑基因可通過花粉傳入環(huán)境中.D.用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細胞22下列有關(guān)遺傳與基因工程的敘述中，正確的是（ ）A同一生物體不同體細胞的核基因和質(zhì)基因的數(shù)量都相同B測定人類單倍體基因組和二倍體水稻（2n=24）單倍體基因組時，各需測定24條和13條染色體上DNA分子的脫氧核苷酸序列C目的基因?qū)胧荏w植物細胞并整合到葉綠體基因中，不會通過花粉

11、傳遞至近緣作物D重組質(zhì)粒的形成在細胞內(nèi)完成23關(guān)于下列黏性末端的描述，正確的是（ ）A與的黏性末端相同，必定是由相同的限制性核酸內(nèi)切酶切出B和是不同種限制性核酸內(nèi)切酶處理后得到的兩個DNA片段CDNA連接酶與DNA聚合酶均能作用于上述黏性末端D形成需要脫去2個水分子24下列有關(guān)將目的基因?qū)胧荏w細胞的相關(guān)敘述，正確的是（ ）A將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法B植物的受體細胞只能是受精卵細胞C基因槍法是將目的基因?qū)雱游锛毎凶顬橛行У姆椒―將某種藥用蛋白基因?qū)雱游锶橄偌毎屑纯色@得乳腺生物反應器25與“限制性內(nèi)切酶”作用部位完全相同的酶是 ( )A反轉(zhuǎn)錄酶 BRNA聚合酶

12、CDNA連接酶 D解旋酶26基因工程中，常用細菌、酵母菌等微生物作為受體細胞，原因是（   ）A結(jié)構(gòu)簡單，操作方便 B繁殖速度快C遺傳物質(zhì)含量少 D性狀穩(wěn)定，變異少27下列關(guān)于限制酶的說法不正確的是（   ）A限制酶廣泛存在于各種生物中，微生物中很少分布B一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列C不同的限制酶切割DNA的切點不同D限制酶的作用是用來提取目的基因28在PCR擴增儀中，把選出的目的基因（共1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是460個）放入DNA擴增儀中擴增4代，那么，在擴增儀中應放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)是（）A540個 B8100個

13、 C17280個 D7560個29下圖為一項重要生物技術(shù)的關(guān)鍵步驟，字母X可能代表 （ ）A能合成胰島素的細菌細胞B能合成抗體的人類細胞C不能合成胰島素的細菌細胞 D不能合成抗生素的人類細胞30下列選項中，不屬于基因表達載體組成部分的是（ ）A.起始密碼子 B.標記基因C.復制原點 D.終止子31作為基因工程常用的一種載體，質(zhì)粒的特點不包括（ ）A.具有自我復制能力 B.具有標記基因C.屬于細胞質(zhì)遺傳物質(zhì) D.含游離的磷酸基32下列關(guān)于限制酶的敘述，不正確的是（ ）A.主要從原核生物中分離B.能夠識別特定的核苷酸序列C.能夠催化斷開兩個核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵D.可以用于判斷基因是否發(fā)生突變

14、33小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應，為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再重組表達。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）設計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列 PCR體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞A B C D34下列一般不作為基因工程中的標記基因的是（ ）A四環(huán)素抗性基因B綠色熒光蛋白基因C產(chǎn)物具有顏色反應的基因D貯藏蛋白的基因35下列關(guān)于基因工程中有關(guān)酶的敘述不正確的是（ ）A限制酶水解相鄰核苷酸間的化學鍵打斷DNABDNA連接

15、酶可將末端堿基互補的兩個DNA片段連接CDNA聚合酶能夠從引物末端延伸DNA或RNAD逆轉(zhuǎn)錄酶以一條RNA為模板合成互補的DNA36基因工程利用某目的基因（圖甲）和Pl噬菌體載體（圖乙）構(gòu)建重組DNA。限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點分別是Bgl、EcoR I和Sau3A I。下列分析錯誤的是（ ）A構(gòu)建重組DNA時，可用Bgl和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌體載體B構(gòu)建重組DNA時，可用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌體載體C圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoR I切割后，含有2個游離的磷酸基團D用EcoR I切割目的基因和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產(chǎn)生一種重

16、組DNA37如果用兩種不同方法分別切斷同一堿基序列的脫氧核苷酸鏈，得到的兩組片段是（ ）則比較兩組片段的堿基序列，推斷原脫氧核苷酸的全部堿基序列應該是 ( )A. B. C. D.38下圖為DNA分子的切割和連接過程。下列說法錯誤的是 ( )A.EcoR是一種限制酶，其識別序列為GAATTCB.只有E·coliDNA連接酶能將此圖中的不同來源的DNA片段“縫合”起來C.切割產(chǎn)生的DNA片段末端形式為黏性末端D. EcoR的切割位點是鳥嘌呤脫氧核苷酸與腺嘌呤脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵39下 列有關(guān)基因工程操作的敘述，正確的是（）A用同種限制性內(nèi)切酶切割運載體與目的基因 可獲得相同的黏性

17、末端B以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列相同C檢測到受體細胞含有目的基因就標志著基因工程操作成功D用含抗生素抗性基因的質(zhì)粒作為載體是因為其抗性基因便于與外源基因連接40下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（）ADNA連接酶能將堿基互補的兩個黏性末端的堿基對連接起來B獲得目的基因一定要使用限制性核酸內(nèi)切酶C目的基因和受體細胞均可來自動植物或微生物D利用質(zhì)粒上的標記基因可用來篩選含重組DNA的細胞和轉(zhuǎn)基因植物41假設有以下一項實驗：用限制酶 Hind，BamH和二者的混合物分別降解一個 4kb（1kb即1千個堿基對）大小的線性DNA 分子，降解產(chǎn)物分別進行凝膠電泳，在電場的作用

18、下，降解產(chǎn)物分開，如下圖所示。據(jù)此分析，這兩種限制性內(nèi)切酶在該DNA 分子上的限制位點數(shù)目是以下哪一組（ ）AHind1個，BamH2個 BHind2個，BamH3個CHind2個，BamH1個 DHind和BamH各有2個42若用兩種識別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因（1.2kb，1kb=1000對堿基），并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb)上相應的EF區(qū)域 (0.2kb)，那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2 （ ）A大小為4.7kb     B大小為4.9kb C能被E但不能被F切開 D能被F但

19、不能被E切開43研究發(fā)現(xiàn)，正常細胞的線粒體中，存在線粒體促凋亡蛋白Smac（細胞中促進細胞凋亡的關(guān)鍵蛋白）。當線粒體接受到釋放這種蛋白的信號時，就將它釋放到線粒體外，然后Smac與IAPs（凋亡抑制蛋白）反應，促進細胞凋亡。下列有關(guān)敘述正確的是A若將控制Smac合成的基因?qū)氚┘毎委煱┌Y，需用解旋酶和DNA連接酶處理Smac合成基因和運載體（ ）B細胞凋亡時具有水分減少、代謝減慢、所有酶的活性下降等特征CSmac從線粒體釋放時需消耗能量，Smac與IAPs在細胞凋亡中的作用相同D癌細胞的無限增殖，可能與IAPs基因過度表達和Smac從線粒體中釋放受阻有關(guān)44一環(huán)狀DNA分子，設其長度為1。限

20、制性核酸內(nèi)切酶A在其上的切點位于0.0處；限制性核酸內(nèi)切酶B在其上的切點位于0.3處；限制性核酸內(nèi)切酶C的切點未知。但C單獨切或與A或B同時切的結(jié)果如下表，請確定C在該環(huán)狀DNA分子的切點應位于圖中的哪處（ ）A0.2和0.4處B0.4和0.6處C0.5和0.7處D0.6和0.9處第II卷（非選擇題）請點擊修改第II卷的文字說明評卷人得分二、綜合題（題型注釋）45根據(jù)模擬制作重組DNA分子的活動，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后，即可獲得所需的目的基因和質(zhì)粒，回答以下問題：（1）綠色硬紙板（甲DNA分子）的堿基序列為：ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATACTAT

21、CGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG紅色硬紙板（乙DNA分子）的堿基序列為：TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATACAGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG其中， DNA分子含有“目的基因”， DNA分子是“質(zhì)?！?。（2）用剪刀代表進行切割。酶切位點在 （a處還是b處），此化學鍵稱 。（3）你模擬插入的DNA片斷能稱得上一個基因嗎？ ，EcoRI屬于 酶。（4）從基因文庫中獲取目的基因是常用方法，基因文庫實際上就是指導入了某種生物不同基因的許多DNA片斷的 的群體。按照其中所含基因的量又可分為 文庫和 文庫。46家蠅幼蟲體內(nèi)有一種抗腫瘤蛋白，

22、科學家發(fā)現(xiàn)此蛋白質(zhì)具有抗癌的奇特療效，它能對腫瘤產(chǎn)生特異性的抑制，并能增強機體的細胞免疫和非特異性免疫。英國皇家醫(yī)學會已經(jīng)將此蛋白質(zhì)列為21世紀首選抗癌藥物。下圖所示為通過基因工程技術(shù)生產(chǎn)這種蛋白質(zhì)的方法，請回答下列問題：(1)結(jié)構(gòu)A的名稱為_ ，其作用是將目的基因?qū)胧荏w細胞，使其在受體細胞中_ 并_ 。(2)在進行導入過程時，通常用_ 處理大腸桿菌細胞，使其處于 ，然后再將B溶于緩沖液中與受體細胞混合。(3)經(jīng)檢測抗腫瘤基因已經(jīng)成功導入受體細胞，但并未檢測出抗腫瘤蛋白mRNA，其原因最可能是基因表達載體上目的基因首端未加入 。經(jīng)修改后，為檢測是否翻譯出抗腫瘤蛋白，需從大腸桿菌中提取蛋白質(zhì)，

23、用 進行分子雜交，若有_ 出現(xiàn)，表明目的基因已經(jīng)成功表達。(4)也可以通過構(gòu)建乳腺生物反應器的方法來生產(chǎn)抗腫瘤蛋白，其大致過程為將目的基因與含有_ 等調(diào)控組件的載體重組在一起，通過 導入哺乳動物的_ 中，體外培養(yǎng)至早期胚胎，經(jīng)過_ 的方法，技術(shù)送入母體內(nèi)，使其生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物，最后從該動物的_ 中提取抗腫瘤蛋白.47下圖表示兩種限制性核酸內(nèi)切酶識別DNA分子的特定序列，并在特定位點對DNA進行切割的示意圖，請回答以下問題：(1)圖中甲和乙代表_。(2)EcoR、Hpa代表_。(3)圖中甲和乙經(jīng)過相應操作均形成兩個片段，切口的類型分別為_、_。甲中限制酶的切點是_之間，乙中限制酶的切點是_之

24、間。(4)由圖解可以看出，限制酶的作用特點是：_。（2分）48肺細胞中的let一7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let一7基因?qū)敕伟┘毎麑崿F(xiàn)表達增強后，發(fā)現(xiàn)肺癌細胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。(1)進行過程時，需用 酶切開載體以插入let一7基因。進行過程時，需用 酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細胞，以利于 細胞培養(yǎng)。采用PCR技術(shù)擴增let一7基因時，在PCR反應體系的主要成分應包含：擴增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高溫的DNA聚合酶和引物l和引物等，若在該反應體系中，目的基因擴增了5代，則具有引物I的

25、DNA所占的比例理論上為 。 (2)研究發(fā)現(xiàn)，let一7基因能影響癌基因RAS的表達，其影響機理如圖2。據(jù)圖分析，可從細胞中提取 進行分子雜交，以直接檢測1et一7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細胞增殖受到抑制，可能是由于細胞中 (RASmRNARAS蛋白質(zhì))含量減少引起的。(3)現(xiàn)有一長度為1000堿基對(bp)的DNA分子，用限制酶切開后得到仍是長度為1000 bp的DNA分子，說明此DNA分子的形態(tài)為 。(4)某線性DNA分子分別用限制酶Hind 和Sma I處理，然后用這兩種酶同時處理，得到如下片段(kb為千個堿基對)：限制酶 片段及長度Hind 2.5 kb，5.0 kbSma I 2.0 kb

26、，5.5 kbHind 和Sma I 2.5 kb，3.0 kb，2.0 kb可以推知限制酶Hind 和Sma I在此DNA分子中分別有 個識別序列。兩酶同時處理后得到的片段，再用限制酶EcoR I處理，結(jié)果導致凝膠上30 kb的片段消失，產(chǎn)生一種1.5 kb的新片段；那么如果用限制酶Hind和EcoR I將該線性DNA分子進行切割，則可得到長度分別為 的片段。試卷第9頁，總10頁本卷由【在線組卷網(wǎng)】自動生成，請仔細校對后使用，答案僅供參考。參考答案1A【解析】試題分析：基因工程的載體可以是質(zhì)粒、病毒等；錯誤。受體細胞為動物細胞，常用的目的基因?qū)敕轱@微注射；正確。依據(jù)題干信息可推出：利用絕

27、種動物的脫氧核糖核酸，有望研發(fā)出新型的基因藥物若用塔斯馬尼亞虎的基因完全替換某種動物細胞內(nèi)的基因，通過克隆技術(shù)，則有可能將已滅絕的塔斯馬尼亞虎重新復活；正確?？键c：本題考查基因工程及應用，意在考查從課外材料中獲取相關(guān)的生物學信息，并能運用這些信息，結(jié)合所學知識解決相關(guān)的生物學問題。2D【解析】試題分析：把每個黏性末端的另一個部分補回，如 AATTC 補回后，變成： G GAATTC 從而知道這種限制酶識別的序列為：GAATTC。 CTTAAG 如此類推，4個黏性末端的原識別序列為：GAATTC、CAATTG、GTTAAC、CTTAAG（順序忘了，反正是這4個，你自己核對順序）。序列不同，說明只

28、能由4種不同的限制酶來切割。每種限制酶只能識別一種序列。所以D選項正確?？键c：考查限制酶的作用。意在考查考生的識圖能力和理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。3C【解析】試題分析：一種限制酶只能識別特定的堿基序列和切割一定的位點，酶活性通常受溫度和PH值的影響，通常從原核生物細胞內(nèi)提取出來，所以C選項符合題意?？键c：考查有關(guān)限制酶的相關(guān)知識。意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。4D【解析】試題分析：作為載體的條件是有多個限制酶切點，具有標記基因，能在宿主細胞中表達，不能影響宿主細胞正常生命活動。不是所有質(zhì)粒都滿足這些條件的，經(jīng)人工改造后才可以使用。故A、B、C

29、正確。質(zhì)粒是原核細胞中環(huán)狀DNA分子。故D錯誤?？键c：本題考查了質(zhì)粒的相關(guān)內(nèi)容，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。5D【解析】試題分析：限制性內(nèi)切酶（分子手術(shù)刀）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。故A、B、C錯誤。磷酸二酯鍵是脫氧核糖和磷酸之間的化學鍵。故D正確。 考點：本題考查了限制酶的功能的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。6C【解析】試題分析：DNA連接酶分T4 DNA連接酶和E·coli DNA連接酶。DNA連接酶具體功能是在形成重組質(zhì)粒時，連

30、接目的基因和運載體之間的磷酸二酯鍵，故A錯誤。連接磷酸二酯鍵，故B、D錯誤。T4 DNA連接酶既能“縫合”雙鏈DNA片段互補的黏性末端，也能“縫合”雙鏈DNA的平末端。E·coli DNA連接酶只能將雙鏈片段互補的黏性末端連接。故C正確?？键c：本題考查DNA連接酶的功能的相關(guān)內(nèi)容，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。7D【解析】試題分析：基因工程是在DNA分子水平上進行設計和施工的，因此又叫DNA重組技術(shù)，故A錯誤。目的基因可以從供體細胞中直接分離、人工合成或、基因文庫中獲取或PCR技術(shù)擴增目的基因，故B錯誤。如果檢測出受體細胞中含有目的基因，由于操作失誤和不

31、可預測的干擾等，并不是所有受體細胞克隆都能按照預先設計的方案進行重組和表達。故目的基因不一定能成功進行表達，故C錯誤?；蚬こ淌侵赴凑杖藗兊脑竿?，進行嚴格的設計，通過體外DNA重組技術(shù)和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。故D正確?？键c：本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。8B【解析】試題分析：酶具有專一性，不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點，故A正確；擴增目的基因時，PCR儀中不需要加入DNA連接酶，但要加入熱穩(wěn)定DNA聚合酶，故B錯誤；限制酶1和3剪出的粘性末端相同，均為GATC，故C正

32、確；限制酶2和3識別的序列分別是CCGCGG和GGATCC，均為6個堿基對，故D正確?？键c：本題考查限制性核酸內(nèi)切酶的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學知識要點的能力和運用所學知識，對生物學問題做出準確判斷的能力。9C【解析】試題分析：作為運載體必須具有四個條件：在宿主細胞中能保存下來并能大量復制；有多個限制酶切點，而且每種酶的切點最好只有一個，有一定的標記基因，便于進行篩選。對受體細胞無害。一般來說，天然運載體往往不能滿足上述要求，因此需要根據(jù)不同的目的和需要，對運載體進行人工改建?，F(xiàn)今實際所使用的質(zhì)粒載體幾乎都是經(jīng)過改建的。一類是細菌細胞質(zhì)的質(zhì)粒另一類運載體是噬菌體或某些病毒等?？键c:本題考查

33、了作為支載體的必要條件。意在意在考查學生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。10C【解析】試題分析：用同種限制酶對運載體與人類胰島素基因進行切割，用DNA連接酶進行黏合，A正確。用適當?shù)幕瘜W物質(zhì)Ca+處理受體細菌表面，可增大細胞壁的通透性，容易使重組 DNA 導入受體細菌，B正確?？梢酝ㄟ^DNA分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否已導入受體細菌，而檢測目的基因產(chǎn)物可以檢測目的基因是否可以翻譯成蛋白質(zhì)，C錯誤。重組 DNA 必須能在受體細菌內(nèi)進行復制與轉(zhuǎn)錄，并合成人類胰島素，才意味著利用細菌大量生產(chǎn)出了人類胰島素，D正確?？键c：本題考查基因工程的原理及技術(shù)，意在考查考生理解所學知識的要點，

34、把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。11D【解析】試題分析：基因工程可以通過限制酶定向地提取生物的DNA分子，但不是基因工程的最終目的，A錯誤?；蚬こ炭梢酝ㄟ^限制酶定向地對DNA分子進行人工剪切，但也不是基因工程的最終目的，B錯誤?；蚬こ炭梢酝ㄟ^限制酶和DNA連接酶在生物體外對DNA分子進行剪切和連接，也就是改造，C錯誤?；蚬こ痰淖罱K目的是通過對DNA分子進行剪切和連接之后達到對生物現(xiàn)在的改造，D正確?？键c：本題考查基因工程的原理及技術(shù)，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。12C【解析】試題分析：限制酶具有專一性，且只能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，A正確。限制

35、酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)，作為一種生物催化劑，其活性受溫度的影響，B正確。限制酶只能識別和切割雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，C錯誤。限制酶主要是從原核生物中分離純化出來的，D正確?？键c：本題考查基因工程的原理及技術(shù)，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。13 A【解析】試題分析： 獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲取利用PCR技術(shù)擴增人工合成，本題可以采用逆轉(zhuǎn)錄獲取目的基因并采用PCR技術(shù)擴增；A正確。利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒后導入玫瑰細胞，B錯誤。受體細胞是植物細胞時，常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，即將基因B直接導入農(nóng)桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細胞，CD錯誤

36、?？键c： 本題考查基因工程相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解能力。14C【解析】試題分析：磷酸二酯鍵是脫氧核苷酸之間脫水縮合形成的，既存在于雙鏈DNA中（包括基因、質(zhì)粒），也存在于單鏈DNA中。故選C考點：本題考查磷酸二酯鍵，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。15C【解析】試題分析：基因工程又叫DNA重組技術(shù)，是指按照人們的意愿，進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由基因工程的概念可知，基因工程技術(shù)引起的生物變異屬于基因重組。故選C考點：本題考查基因工程的原理，意在考查考生理

37、解所學知識要點的能力。16D【解析】試題分析：意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力和識圖能力。17B【解析】試題分析：用限制酶切割一個DNA分子中部，獲得一個目的基因時，被水解的磷酸二酯鍵有4個，A錯；限制酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大，B正確；CATG和GGATCC序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同，都是4個，C錯；一般用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接得到重組質(zhì)粒，有時也可以用不同的限制酶切割，因為有時不同的限制酶切割也能形成相同的黏性末端，經(jīng)DNA連接酶連接也能形成重組質(zhì)粒，D錯?？键c：本題考查基因工程限制

38、酶相關(guān)知識，意在考查考生意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。18B【解析】試題分析：特定核苷酸序列越長，在DNA分子中重現(xiàn)的幾率越低，所以A正確。a酶識別的核苷酸序列與b酶不同，所以能被a酶識別并切割的序列不一定能被b切割，所以B不正確。a酶與b酶切斷的化學鍵相同，都是磷酸二酯鍵，所以C正確。將大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新連接后的DNA片段不一定全都能被b切割，因為產(chǎn)生的新核苷酸序列不都是GGATCC，所以D正確?？键c：本題考查基因工程的工具：限制酶的相關(guān)知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理

39、的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。19B【解析】試題分析：基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為標記基因而不是目的基因，所以A不正確。常使用的運載體有大腸桿菌的質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒等，所以B正確。通常用一種限制性內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA，用同一種限制酶處理運載體DNA，使目的基因和運載體有互補的黏性末端，便于連接所以C不正確。為育成抗除草劑的作物新品種，導入抗除草劑基因時也可以以植物體細胞為受體，所以D不正確?？键c：本題考查基因工程相關(guān)知識，意在考查考生意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。20B【解析】試題分析：重組DNA分子要能夠再被限制酶切割開，就也應該具有識別序列和

40、切點：GGATCC，而題中所述切割后重組有兩種情況：情況一重組DNA分子片段左側(cè)堿基不是G的概率為3/4，情況二重組DNA分子片段右側(cè)堿基不是C的概率為3/4，兩種情況都不能再被限制酶切割開的概率是3/4×3/4，因此該重組DNA分子能夠再被限制酶切割開的概率是1-3/4×3/4=7/16。故選B?？键c：本題考查限制酶的功能特性相關(guān)知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。21B【解析】試題分析：獲得目的基因必須用限制酶切割目的基因的DNA分子，獲得目的基因片斷，A正確；用DNA連

41、接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體，不是DNA聚合酶，B錯；轉(zhuǎn)入的抗除草劑基因存在花粉細胞染色體的DNA上，可通過花粉傳入環(huán)境中.，C正確；用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細胞，除草劑基因如果成功導入和表達，可篩選出含抗除草劑基因的細胞，D正確?？键c：本題考查基因工程有關(guān)知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。22C【解析】試題分析：同一生物體不同體細胞的核基因的數(shù)量都相同，質(zhì)基因數(shù)量不一定相同，A錯；測定人類單倍體基因組，需測定22條常染色體和2條性染色體（X和Y）上DNA的脫氧核苷酸序列，而水稻是雌雄同體，無性染色體，只需測定12條常染色體上DNA的脫氧核苷酸序

42、列，B錯；目的基因?qū)胧荏w植物細胞并整合到葉綠體基因中，而花粉細胞不帶細胞質(zhì)葉綠體基因，當然不會通過花粉傳遞至近緣作物，C正確；重組質(zhì)粒的形成在細胞外完成，再導入受體細胞，D錯?？键c：本題考查遺傳和基因工程有關(guān)知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。23B【解析】試題分析：不同限制酶切割生成的粘性末端也會相同，A錯；同一種限制酶切割的粘性末端一定相同，B對；DNA聚合酶無法作用于粘性末端，它是在DNA復制時連接游離的脫氧核苷酸，C錯；形成需要脫去4個水分子，因為一條鏈上有5個脫氧核苷酸，D錯。考點：本題考查基因工程的工具酶相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，

43、把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力和識圖能力。24A【解析】試題分析：將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；植物的受體細胞可以是受精卵細胞或體細胞，動物的受體細胞最好是受精卵；將目的基因?qū)雱游锛毎凶顬橛行У姆椒ㄊ秋@微注射法；乳腺生物反應器是將某種藥用蛋白基因?qū)雱游锸芫?，然后該受精卵發(fā)育形成的個體?？键c：本題考查基因工程中目的基因?qū)胧荏w細胞的相關(guān)知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力。25C【解析】試題分析：限制性核酸內(nèi)切酶作用的磷酸二酯鍵，反轉(zhuǎn)錄酶是催化RNA合成DNA的，故A錯誤。RNA聚合酶是將單個的核糖核苷酸聚合到RNA鏈上，故B錯誤。DN

44、A連接酶是連接DNA片段的作用的是磷酸二酯鍵，故C正確。解旋酶作用的是氫鍵，故D錯誤?？键c：本題考查酶作用部位，意在考察考生對知識點的掌握程度。26B【解析】試題分析：通常用微生物作為受體細胞，因為這些微生物易培養(yǎng)，繁殖快，所以C選項正確?？键c：考查作為基因工程受體細胞的原因。意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。27A【解析】試題分析：限制酶主要存在于微生物中，而不是在微生物中很少分布，B、C都是限制酶的特點，D選項是限制酶的作用，均正確。考點：考查限制酶的存在場所和作用。意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。28B【解析】試題分析：1000個脫氧

45、核苷酸對，即2000個核苷酸。由于A=T=460個，所以，C=G=（2000-460-460）/2=540個。所以，一個目的基因有胞嘧啶脫氧核苷酸540個。 擴增4代可產(chǎn)生16個DNA分子，根據(jù)DNA半保留復制原則，其中有一個DNA分子“相當”于親代的DNA。所以，在擴增儀中應放入胞嘧啶脫氧核苷酸數(shù)為（16-1）*540=8100個?？键c：考查DNA復制中堿基互補配對規(guī)律的計算。意在通過PCR技術(shù)考查學生對DNA半保留復制特點和計算能力29A【解析】試題分析：此題中目的基因是人胰島素基因，受體細胞是細菌，通過載體將目的基因?qū)胧荏w細胞后，帶有胰島素基因的細菌在分裂繁殖過程中就可能合成胰島素。所

46、以X表示篩選也能表達的細胞并增殖產(chǎn)生更多的合成胰島素的轉(zhuǎn)基因細胞?？键c：考查基因工程相關(guān)知識。通過圖形將基因工程過程顯示出來，重點考查將目的基因與運載體結(jié)合交導入受體細胞和表達過程及考查識圖能力。30A【解析】試題分析：起始密碼子存在于mRNA上，不存在于載體上，所以不屬于基因表達載體組成部分，A正確。考點：本題考查載體質(zhì)粒的相關(guān)知識，意在考查考生對相關(guān)知識的識記能力。31D【解析】試題分析：基因工程常用的一種載體是一小型環(huán)狀DNA分子，沒有游離的磷酸基，存在于細胞質(zhì)中，具有自我復制能力，具有標記基因便于篩選，屬于細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)，沒有游離的磷酸基，所以ABC正確，D錯?？键c：本題考查載體質(zhì)粒的

47、相關(guān)知識，意在考查考生對相關(guān)知識的識記能力。32C【解析】試題分析：限制酶主要存在于微生物中，A正確；一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定位點切割，故不同的限制酶的切點不同，B正確；能夠催化斷開脫氧核糖核苷酸與磷酸之間的磷酸二酯鍵，C錯；限制酶切割出正常的基因與待檢測的基因進行DNA分子雜交，判斷基因是否發(fā)生突變，D正確?？键c：本題考查考查限制性內(nèi)切酶的作用的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。33 C【解析】試題分析： 要考慮表達載體相關(guān)序列，從而保證目的的基因能與表達載體相連接及正常表達；只要設計出目的基因的引物，接下來即可自動進行；需要特殊的

48、而高溫的DNA聚合酶，從細胞內(nèi)提取的DNA聚合酶不耐高溫；選擇特定的受體細胞，從而保證目的基因能表達出所需產(chǎn)物。C正確。考點： 本題考查基因工程知識，考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。34 D【解析】試題分析：通常用作標記基因可以是抗性基因，也可以是有特殊顏色的基因，所以D不能作為標記基因?？键c： 本題考查標基因工程相關(guān)知識，意在考查考生識記標記基因知識的作用。35C【解析】試題分析：限制酶破壞的是磷酸二脂鍵，A正確。DNA連接酶可將具有相同的黏性末端的DNA連接起來,B正確。延伸RNA用RNA聚合酶，C錯誤。逆轉(zhuǎn)錄是同mRNA為模板合成互補的DNA，D正確?？键c： 本題

49、考查基因工程相關(guān)知識，意在考查考生識記知識和分析判斷能力。36D【解析】試題分析：P1噬菌體載體是雙鏈環(huán)狀DNA分子，所有磷酸基團參與形成磷酸二酯鍵，故不含游離的磷酸基團，從圖2可以看出，質(zhì)粒上只含有一個Sma的切點，因此被改酶切割后，質(zhì)粒變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團，因此切割后含有兩個游離的磷酸基團；C正確。從圖甲看出，用EcoR I切割目的基因后兩端各有一切口，與圖乙中EcoR I切口對接時，可有兩種可能，即可產(chǎn)生兩種重組DNA；D錯誤?？键c：本題考查基因工程的相關(guān)知識，是學生提升獲取圖示信息、審題、分析能力的較好選擇。37B【解析】試題分析：首先可根據(jù)圖中b組

50、片段中的第二段可判斷，a組片段中在的前面；接著可根據(jù)的TAAG可判斷b組片段中第一段在第二段的前面，由此得出a組片段中在的前面；最后可根據(jù)中的ACTTCCGTA序列可推斷b組片段中原脫氧核苷酸的全部堿基序列應該是第三段、第一段、第二段，故a組片段中原脫氧核苷酸的全部堿基序列應該是?？键c：本題考查了基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生運用所學知識進行識圖、分析、推斷的能力。38B【解析】試題分析：限制性內(nèi)切酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且切割形成特定的粘性末端，由圖可以看出EcoR識別序列為GAATTC，A正確；根據(jù)酶的來源不同分為兩類：E.coliDNA連接酶、T4DNA連接酶，

51、這二者都能連接黏性末端，此外T4DNA連接酶還可以連接平口末端，B錯誤；DNA片段末端形式有黏性末端和平口末端，圖中EcoR切割形成的是黏性末端，C正確；圖中可以看出EcoR的識別位點在G和A之間，并且作用部位為磷酸二酯鍵，D正確?？键c：本題考查基因工程的操作工具的相關(guān)知識，意在考查考生的識圖能力和運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。39A【解析】試題分析：限制性內(nèi)切酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且切割形成特定的粘性末端，A正確；真核生物基因有編碼區(qū)和非編碼區(qū)之分，并且編碼區(qū)包括外顯子和內(nèi)含子，而以蛋白質(zhì)的氨基酸

52、序列為依據(jù)合成的目的基因只包含外顯子，沒有內(nèi)含子和非編碼序列，因此與原基因的堿基序列不同，B錯誤；目的基因在受體細胞中成功表達才表示基因工程操作成功，僅僅檢測到受體細胞含有目的基因，并不代表該基因可以正常的轉(zhuǎn)錄和翻譯，C錯誤；質(zhì)粒中抗生素抗性基因一般用于檢測目的基因是否成功導入受體細胞中，D錯誤?？键c：本題考查了基因工程的相關(guān)知識，意在考查了考生識記和理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。40C【解析】試題分析：堿基對之間以氫鍵連接，而DNA連接酶連接的是兩個DNA片段相鄰脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，A錯誤；目的基因獲取的方法有三種：從基因文庫中獲取利用PCR技術(shù)擴增人工合成，后兩種

53、方法都不需要限制酶，B錯誤；基因工程能夠打破遠緣雜交不親合的障礙，因此目的基因和受體細胞可以來自不同的生物，C正確；利用標記基因可以篩選含有重組DNA的細胞，而不能篩選轉(zhuǎn)基因植物，轉(zhuǎn)基因植物可以通過分子雜交檢驗目的基因是否插入和表達，或者可以通過觀察目的基因控制的性狀是否出現(xiàn)來鑒定，D錯誤?？键c：本題著重考查了基因工程的操作工具等方面的知識，意在考查考生識記和理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。41A【解析】試題分析：由最左邊圖可以看出，限制酶 Hind可將DNA 分子切為2.8和1.2兩段，因此它有1個切割位點；由最右邊圖可以看出，限制酶BamH可將DNA 分子切為1.8、1.3和0.9三段，因此它有2個切割位點，故A正確?？键c：本題主要考查限制酶的作用特點相關(guān)知識，意在考查考生識圖析圖的能力，以及理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。42A【解析】試題分析：用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質(zhì)粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000對堿基）上相應的EF區(qū)域（0.2kb），用DNA連接酶連接后形成重組質(zhì)粒，則在重組質(zhì)粒中仍然含有限