楊梅素分散片對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)作用及對(duì)血栓形成的影響

1、楊梅素分散片對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)作用及對(duì)血栓形成的影響         作者：覃潔萍，王乃平，鐘正賢, 陳學(xué)芬, 李燕婧，張煒 【摘要】 目的研究楊梅素分散片對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)機(jī)制及對(duì)血栓形成的影響。方法采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法制備大鼠實(shí)驗(yàn)性全腦缺血再灌注損傷模型，通過(guò)測(cè)定大鼠腦含水量，超氧化物歧化酶（SOD）、單胺氧化酶(M               &#

2、160;        作者：覃潔萍，王乃平，鐘正賢, 陳學(xué)芬, 李燕婧，張煒【摘要】  目的研究楊梅素分散片對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)機(jī)制及對(duì)血栓形成的影響。方法采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法制備大鼠實(shí)驗(yàn)性全腦缺血再灌注損傷模型，通過(guò)測(cè)定大鼠腦含水量，超氧化物歧化酶（SOD）、單胺氧化酶(MAO)的活性和丙二醛(MDA)、乳酸(LA)的含量，觀察楊梅素分散片對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血的影響；采用體內(nèi)靜脈血栓形成法,觀察楊梅素分散片對(duì)體內(nèi)靜脈血栓形成的影響；并研究其對(duì)血小板聚集的影響。結(jié)果與模型組相比，楊梅素分散片各劑量組 (140，70，3

3、5 mg/kg)均可顯著改善腦水腫、減少過(guò)氧化脂質(zhì)的形成，減少乳酸的聚積，并對(duì)單胺氧化酶有抑制作用；顯著減輕大鼠靜脈血栓重量；顯著抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集。結(jié)論 楊梅素分散片對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血具有明顯保護(hù)作用，并有明顯抗血栓形成作用，機(jī)制可能與其抑制脂質(zhì)過(guò)氧化物損害及提高抗氧化酶活性、改善凝血狀態(tài)、抑制血小板依賴性血栓的形成有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】  楊梅素分散片； 實(shí)驗(yàn)性腦缺血； 血栓形成； 血小板聚集Abstract：ObjectiveTo investigate the effect of Myricetin Dispersible Tablets on experimental

4、cerebral ischemia-reperfusion injury in rats and thrombosis formation.MethodsExperimental cerebral ischemia-reperfusion injury model was induced by ligation bilateral common carotid arteries. The protective effect of myricetin dispersible tablets was observed by detecting the content of cerebral wat

5、er, SOD and MAO activities，MDA and LA contents. ResultsIn contrast with model group, Myricetin Dispersible Tablets(140 mg/kg，70 mg/kg and 35 mg/kg) could significantly decrease the cerebral water content, MDA and LA contents, as well as the weight of venous thrombus , suppress MAO activity, and sign

6、ificantly increase SOD activity. ConclusionMyricetin Dispersible Tablets may protect cerebrum from ischemic injury by suppressing lipid peroxidation , increasing antioxidase activity, suppressing platelet aggregation and thrombus formation.Key words：Myricetin Dispersible Tablets;  Experimental

7、cerebral ischemia;  Thrombosis formation;  Platelet aggregation     楊梅素(myricetin)，又稱楊梅樹皮素，是一種天然黃酮醇類化合物，為楊梅樹皮的主要化學(xué)成分，也是廣西藤茶中的主要有效成分之一，并廣泛存在于許多天然植物、水果和茶葉中。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，楊梅素可抑制血小板活化因子（PAF）介導(dǎo)的兔血小板聚集、5-羥色氨（5HT）釋放及血小板內(nèi)鈣離子濃度升高, 從而起到保護(hù)心血管的作用，且實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明其抗PAF作用比傳統(tǒng)活血化淤中藥紅花的有效成分羥基紅花黃色素作用強(qiáng)，其作用機(jī)理

8、與PAF受體拮抗劑銀杏總內(nèi)酯相似，可作為一種新的PAF受體拮抗劑1。目前,美國(guó)International Food Information Council Foundation （IFIC）已將楊梅素列為功能性食品，并應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、保健品和化妝品中。楊梅素分散片是我們課題組正在研究的新藥制劑，它是用從廣西藤茶中提取得到的楊梅素為主要原料研制而成的。本實(shí)驗(yàn)旨在研究楊梅素分散片對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)作用及對(duì)體內(nèi)血栓形成的影響，為其新藥開(kāi)發(fā)和臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。1  器材1.1  藥物楊梅素分散片，于廣西中醫(yī)學(xué)院制劑教研室制備，批號(hào)060820，實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水研磨配制成不同濃

9、度藥液備用；復(fù)方丹參片，安徽華陀國(guó)藥廠產(chǎn)品，批號(hào)20060512；阿司匹林，湖南新匯制藥有限公司產(chǎn)品，批號(hào)060602；鹽酸腎上腺素注射液，天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)070401。1.2  試劑超氧化物歧化酶（SOD）測(cè)試盒，批號(hào)20070315；丙二醛（MDA）測(cè)試盒，批號(hào)20070316；單胺氧化酶（MAO）測(cè)試盒，批號(hào)：20070320；乳酸（LA）測(cè)試盒，批號(hào)20070317；總蛋白（TP）測(cè)試盒，批號(hào)20070319。均為南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。二磷酸腺苷（ADP），上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品，批號(hào)20060624。1.3  動(dòng)物KM種小鼠，

10、1822 g；Wistar種大鼠，體重200250 g。清潔級(jí)，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)SCXK桂20030003。動(dòng)物按性別分籠飼養(yǎng)于有空調(diào)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室內(nèi)，室溫(22±1),相對(duì)濕度(60±5)%。自由飲水和喂標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料。1.4  儀器電熱水浴恒溫箱，上海醫(yī)療器械三廠生產(chǎn)；722型光柵分光光度計(jì)，上海第三分析儀器廠生產(chǎn)；MDK-3200型全自動(dòng)血流變測(cè)試分析儀, 重慶麥迪克科技開(kāi)發(fā)有限公司產(chǎn)品；BS631型血小板聚集儀，北京生化儀器廠生產(chǎn)；美國(guó)PE Lambda 12 型紫外分光光度計(jì)。2  方法2.1  楊梅素分散片對(duì)大鼠

11、急性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用2.2  楊梅素分散片大鼠體內(nèi)靜脈血栓形成的影響3取Wistar大鼠50只，雌雄各半，體重200250 g，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，復(fù)方丹參片組（1.2 g/kg）,楊梅素分散片高、中、低劑量（140，70，35 mg/kg）組，每組10只。各組均灌胃相應(yīng)藥液，1次/d，連續(xù)7 d，末次給藥后1 h，大鼠以10水合氯醛腹腔注射麻醉，于腹中線切開(kāi)皮膚約3 cm，分離下腔靜脈，于左腎靜脈下方用粗線結(jié)扎下腔靜脈，縫合腹壁。4 h后，重新打開(kāi)腹腔，在結(jié)扎下方2 cm處夾閉管腔，將該段管腔內(nèi)血液吸盡，剖開(kāi)管腔，取出血栓，放在濾紙上，吸干血液，用微量電子天秤稱取血栓濕重

12、(mg)。以血栓重量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，測(cè)定各給藥組對(duì)靜脈血栓形成的影響。2.3  對(duì)體外ADP誘導(dǎo)大鼠血小板聚集的影響4取體重200250gWistar大鼠，用10水合氯醛3 mlkg體重腹腔注射麻醉后，剖開(kāi)腹腔，從腹主動(dòng)脈取血，注入盛有3.8%枸椽酸鈉溶液試管中，輕輕搖勻，以1 000 r/min離心5 min，吸取上清液為富血小板血漿（PRP），剩余血繼續(xù)以3 000 r/min離心10 min ，吸取上清液為貧血小板血漿（PPP）。將BS631型血小板聚集儀打開(kāi)，預(yù)熱30 min后，用PRP調(diào)零（0%），用PPP調(diào)幅度（100%）。測(cè)定時(shí)對(duì)照管取PRP 0.4 ml及生理鹽水20 l，給藥管取0.4 ml