肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其受體c

1、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其受體c    【關(guān)鍵詞】  肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子；受體；c【摘要】 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF)是一種多肽生長(zhǎng)因子，具有促進(jìn)包括肝細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、造血細(xì)胞等多種類(lèi)型細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移和形態(tài)發(fā)生的作用. 它還參與多種細(xì)胞的增殖、遷移,對(duì)各類(lèi)腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移有著重要的誘導(dǎo)作用. 本文通過(guò)對(duì)近年來(lái)國(guó)外有關(guān)文獻(xiàn)的回顧，希望能夠?yàn)檫M(jìn)一步探討HGF及其受體在卵巢癌治療中的具體意義提供新的思路.【關(guān)鍵詞】 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子；受體；cmet；卵巢腫瘤1HGF及其受體的結(jié)構(gòu)肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)1最早是1984年由日本的中村敏一教授從大鼠血漿中得到

2、的，其結(jié)構(gòu)實(shí)質(zhì)是含728個(gè)氨基酸的肝素結(jié)合糖蛋白. 它來(lái)自間質(zhì)細(xì)胞，以旁分泌方式作用于鄰近細(xì)胞，并與細(xì)胞表面的受體結(jié)合并激活酪氨酸激酶活性，具有較強(qiáng)的促有絲分裂、組織成形、誘導(dǎo)上皮細(xì)胞遷移、侵襲以及誘導(dǎo)血管生成等作用2. HGF的受體是原癌基因cmet編碼的一種跨膜蛋白，稱(chēng)為Met，是由Mr為190000的前體蛋白分裂而得來(lái)，由Mr為50000的a鏈和Mr為145000的3鏈經(jīng)二硫鍵相連而成的雜二聚體. Prat等發(fā)現(xiàn)某些癌細(xì)胞的Mr為190000 Met的前體，缺乏裂解過(guò)程，不需連接配體就已有活性，因此就失去了HGF的生長(zhǎng)控制. 各種瘤細(xì)胞和cmet轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞都過(guò)度表達(dá)Met，對(duì)HGF的反

3、應(yīng)比正常細(xì)胞更敏感強(qiáng)烈.2HGF及其受體的生物學(xué)作用(1)  啟動(dòng)肝再生實(shí)驗(yàn)證明，在眾多細(xì)胞因子中，HGF是肝再生的啟動(dòng)信號(hào)，并在肝細(xì)胞增殖過(guò)程中起重要作用. (2)  促進(jìn)細(xì)胞分裂作用 HGF在原代肝細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)中可刺激肝細(xì)胞DNA合成，1 g/L HGF即可觀察到生物活性，最大活性濃度510 g/L. 另有報(bào)道HGF對(duì)其他許多細(xì)胞也有刺激作用，例如能夠刺激腎小管細(xì)胞、角化細(xì)胞、黑色素瘤等細(xì)胞的DNA合成. (3)  細(xì)胞運(yùn)動(dòng)作用 HGF具有類(lèi)似散射因子的功能，在一些上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系中加入不同濃度，均可促進(jìn)細(xì)胞擴(kuò)散和遷移HGF具有促進(jìn)包括肝細(xì)胞、上

4、皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、造血細(xì)胞等多種類(lèi)型細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移和形態(tài)發(fā)生的作用，還參與多種細(xì)胞的增殖、遷移和形態(tài)發(fā)生. (4)  腫瘤壞死作用 高濃度的HGF對(duì)某些癌及肉瘤細(xì)胞系有抑制作用和腫瘤壞死用，該作用機(jī)制尚不完全清楚. （5）    cmet原癌基因的RNA表達(dá)存在于人類(lèi)的某些上皮組織: 如肝臟、腎臟、胎盤(pán)、消化道上皮等3. 共聚焦激光掃描顯微鏡下證實(shí)，cmet基因蛋白表達(dá)位于腺樣結(jié)構(gòu)細(xì)胞的邊緣. cmet編碼的蛋白屬于酪氨酸激酶生長(zhǎng)因子的受體家族，在體外細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的過(guò)程中可以出現(xiàn)基因擴(kuò)增、重排和過(guò)度表達(dá). 對(duì)于依賴(lài)外生的受體調(diào)節(jié)生長(zhǎng)刺激的，進(jìn)入細(xì)胞周期

5、和分裂進(jìn)程的正常細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這就意味著存在著一個(gè)調(diào)節(jié)細(xì)胞增生的平衡機(jī)制4. 相比較而言，腫瘤細(xì)胞通過(guò)產(chǎn)生生長(zhǎng)因子與受體獲得一定水平的自主生長(zhǎng)信號(hào)（自主分泌）.  近年來(lái)，已有相關(guān)研究表明，與癌形成和發(fā)展有關(guān)的不同細(xì)胞類(lèi)型之間出現(xiàn)異型信號(hào)(非自主分泌)，但目前的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)方法不足以說(shuō)明這種復(fù)雜的關(guān)系4. 在研究與cMet蛋白的相關(guān)信號(hào)通過(guò)非自分泌機(jī)制促進(jìn)轉(zhuǎn)移中報(bào)告，利用轉(zhuǎn)基因鼠移植模型將過(guò)度表達(dá)HGF及受體cmet的腫瘤細(xì)胞移植后，直接評(píng)估異型信號(hào)對(duì)轉(zhuǎn)移部位的作用5. 在體內(nèi)，非自主分泌信號(hào)與自主分泌進(jìn)行的是條件不均衡的競(jìng)爭(zhēng). 惡性腫瘤細(xì)胞的非內(nèi)部生長(zhǎng)因子對(duì)體內(nèi)轉(zhuǎn)移產(chǎn)生重大影響，提供了異型

6、信號(hào)對(duì)腫瘤進(jìn)展發(fā)揮作用的實(shí)驗(yàn)依據(jù).3HGF及其受體對(duì)癌細(xì)胞侵襲的影響機(jī)制腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是一個(gè)非常復(fù)雜的病理過(guò)程，也是患者死亡的主要原因. 大量的臨床和實(shí)驗(yàn)研究表明，HGF和cMet在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用. 正常細(xì)胞有能力通過(guò)減少cmet的表達(dá)控制其對(duì)HGF的反應(yīng)；而在大部分腫瘤細(xì)胞中cmet為過(guò)表達(dá)的狀態(tài)，并呈現(xiàn)高水平的自體磷酸化. 一般來(lái)說(shuō)，cmet的過(guò)表達(dá)是由于基因的擴(kuò)增所致. 在結(jié)，直腸癌、肝癌和腦膠質(zhì)瘤中，cmet的表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切聯(lián)系. Ivan和Webb等用激活的ras和ret基因共同轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞，可導(dǎo)致cmet的過(guò)度表達(dá)，從而促進(jìn)HGF所依賴(lài)的腫瘤細(xì)胞的侵襲

7、作用.有研究發(fā)現(xiàn),在HGF的誘導(dǎo)下，Met cDNA可使一些一開(kāi)始對(duì)受體轉(zhuǎn)染呈陰性的細(xì)胞出現(xiàn)活動(dòng)能力并更容易向基底膜侵襲. cmet基因轉(zhuǎn)染能增加癌細(xì)胞的腫瘤基因性，使cMet高表達(dá)的惡性細(xì)胞對(duì)HGF更加敏感和更具侵襲性，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展.4HGF及其受體對(duì)卵巢癌細(xì)胞發(fā)生侵襲的影響（1）女性生殖系統(tǒng)的惡性腫瘤中存在著HGF及其受體cMet的過(guò)表達(dá)，并且其過(guò)表達(dá)與腫瘤的發(fā)生，發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān). 文獻(xiàn)研究證實(shí),HGF與其受體表達(dá)水平的高低與腫瘤組織的分期分級(jí)直接相關(guān),良性腫瘤的表達(dá)水平介于正常組織與惡性腫瘤組織之間,惡性腫瘤分期越晚,HGF的表達(dá)水平越高,也間接印證了了HGF/cMet信號(hào)

8、轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中起重要作用的學(xué)說(shuō). Corps等人認(rèn)為，HGF通過(guò)刺激表達(dá)高水平cmet的卵巢癌細(xì)胞株SKOV3，8910等的能動(dòng)性、趨化性及促有絲分裂作用而促進(jìn)腫瘤的演進(jìn)和播散. Sowter等研究證實(shí)，卵巢良惡性腫瘤的囊液及腹水中均含有HGF，且HGF是卵巢癌細(xì)胞遷移的一個(gè)重要誘導(dǎo)因子,其表達(dá)水平還與術(shù)后5年生存率有一定影響.Baykal等也在2003年報(bào)道,用ELISA方法分別檢測(cè)HGF在卵巢上皮腫瘤囊內(nèi)液和卵巢良性腫瘤的囊內(nèi)液,發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤表達(dá)的HGF水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于良性的卵巢囊腫(P<0.001),證明HGF在卵巢上皮細(xì)胞的癌變,分化過(guò)程中通過(guò)旁分泌途徑扮演重要角色,機(jī)

9、制可能是在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中, HGF的分泌物能夠刺激臨近細(xì)胞增強(qiáng)對(duì)它的反應(yīng)5. （2）越來(lái)越多的研究證實(shí)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移有賴(lài)于血管生成，在新血管形成以后腫瘤會(huì)呈指數(shù)倍增長(zhǎng)，轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)隨之增高6. 微血管密度(MVD),即為用免疫組化法檢測(cè)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目，是血管生成評(píng)估的“金標(biāo)準(zhǔn)”. 在卵巢腫瘤組織中,MVD值與臨床病理特征之間有著密切的聯(lián)系，與卵巢癌患者年齡、組織分化程度、臨床分期及5年生存率也均有一定相關(guān)性6. 有文獻(xiàn)研究表明7,惡性卵巢腫瘤的MVD值明顯高于良性，病理分級(jí)I級(jí)卵巢癌微血管密度明顯低于級(jí)或級(jí)，且腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程也與腫瘤血管生成有關(guān):腫瘤內(nèi)血管生成增多，可增加瘤細(xì)胞向遠(yuǎn)處

10、轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì). 一方面是因?yàn)樾律?xì)血管基底膜不完整，腫瘤細(xì)胞更容易通過(guò)；另一方面,新生血管生成過(guò)程中，內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生多種降解酶，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的脫落和轉(zhuǎn)移. 我們還發(fā)現(xiàn)，微血管密度高的卵巢癌患者術(shù)后的生存期明顯縮短，提示進(jìn)行血管生成分析可能是判斷卵巢癌患者預(yù)后情況的一項(xiàng)有用指標(biāo).百事通 5拮抗劑近年來(lái),各國(guó)學(xué)者已經(jīng)陸續(xù)發(fā)現(xiàn)不少種能對(duì)HGF及其受體cMet蛋白起拮抗作用的化合物. 以下只列舉兩種：（1）Date等(1997)通過(guò)對(duì)重組的人HGF進(jìn)行裂解發(fā)現(xiàn)了一種新的HGF拮抗劑，它由HGFa鏈N末端的447個(gè)氨基酸和4個(gè)Kfingle區(qū)域所組成，故命名為NK4，分子量50 000， 4個(gè)Kfing

11、le區(qū)域的氨基酸序列與血管抑素具有47的同源性. NK4與cMet結(jié)合，可以競(jìng)爭(zhēng)性地完全抑制HGF和cMet的相互作用，影響HGFcMet系統(tǒng)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而抑制HGF所誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖、運(yùn)動(dòng)和形態(tài)生成，但其本身不能誘導(dǎo)cMet的酪氨酸磷酸化. 體外研究表明,NK4可抑制HGF誘導(dǎo)的包括人的膽囊癌、結(jié)腸癌、宮頸癌、乳腺癌、胰腺癌等細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和侵襲. Jiang等進(jìn)行的體外研究結(jié)果顯示，NK4可抑制HGF誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和小管結(jié)構(gòu)的形成. Kuba等8的研究進(jìn)一步證實(shí)，NK4在體外可抑制由堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和HGF所誘導(dǎo)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，從而認(rèn)為NK

12、4可通過(guò)抑制腫瘤血管的生成來(lái)控制腫瘤的進(jìn)展. Kuba等8還在2001年報(bào)道，在小鼠的卵巢癌模型中，NK4的表達(dá)可以使癌細(xì)胞移行速度減慢，從而降低它侵襲的可能性，抑制癌細(xì)胞向腹膜的傳播擴(kuò)散，從而小鼠的壽命延長(zhǎng). (2)國(guó)外Song等9所做的研究也報(bào)道，存在著某一些共同結(jié)構(gòu)的兩種化合PHA665752和SU11274可能是cMet蛋白的高特異性抑制劑，能夠抑制cMet下游激酶AKT，F(xiàn)KHR等的磷酸化，誘導(dǎo)細(xì)胞分裂周期停滯，最終使細(xì)胞死亡.6研究前景HGF是一種多功能細(xì)胞因子，天然分泌的HGF量極少，難以獲得，且HGF是大分子糖基化蛋白，在原核細(xì)胞中難以表達(dá). 盡管它的結(jié)構(gòu)、基因序列等已明確，但

13、其發(fā)揮作用的具體機(jī)制尚不完全清楚. 對(duì)HGF的作用機(jī)制在分子水平上須進(jìn)一步闡述，如何更好的發(fā)揮其在抗腫瘤機(jī)制中的作用仍存有爭(zhēng)議，是當(dāng)前研究的一個(gè)熱點(diǎn).近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其受體在惡性腫瘤中的影響已有相關(guān)研究，但對(duì)其信號(hào)傳導(dǎo)通路抑制劑，以及明確針對(duì)卵巢癌細(xì)胞侵襲作用的研究比較少，具體作用機(jī)制尚不明確. 測(cè)定HGF和cMet蛋白與卵巢腫瘤及MVD值的關(guān)系，探討MVD值、cMet蛋白作為判斷卵巢惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展及評(píng)估預(yù)后指標(biāo)的可能，研究HGFcMet信號(hào)傳導(dǎo)通路對(duì)卵巢腫瘤的發(fā)生、發(fā)展可能存在的影響. 等均為有待進(jìn)一步解決的問(wèn)題.希望本文能夠起到拋磚引玉的作用，為判斷患者的預(yù)后及發(fā)展引進(jìn)

14、新的指標(biāo)，也為卵巢惡性腫瘤的藥物治療提供新的靶點(diǎn)和新的思路.【參考文獻(xiàn)】1Jiang WG, Martin TA, Parr C, et al. Hepatocyte growth factor, its receptor, and their potential value in cancer therapiesJ. Hematology, 2005,53:35-61.2小池弘美. 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子J. 日本醫(yī)學(xué)介紹,  2002,23（5）:226-227.3董薇，蔡美英. 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其臨床應(yīng)用研究進(jìn)展J. 微生物免疫學(xué)進(jìn)展, 2001,29（3）:87-90.4李宏武，單吉

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