檢測(cè)豬偽狂犬病抗體的3種ELISA試劑盒的比較分析_圖文

1、檢測(cè)豬偽狂犬病抗體的種試劑盒的比較分析陳偉杰，周彩琴，黃怡君趙靈燕。吳贊蛄，倪柏鋒徐輝（浙江省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。浙江杭州）摘要：為評(píng)價(jià)用于檢測(cè)豬偽狂犬病抗體的種商用的試劑盒。擇優(yōu)選取一種作為本中心的檢測(cè)試劑。用種試劑盒檢測(cè)份免疫背景清楚的臨床及試驗(yàn)血清，比較各試劑盒的檢測(cè)陽性率敏感性。結(jié)果份血清經(jīng)平試劑盒檢測(cè)。檢測(cè)陽性率分別為、和，且種試劑盒相同血清的檢測(cè)陽性率相互間差異均極顯著性（戶），但是對(duì)于高抗體水平的份母豬血清檢測(cè)陽性率相互間差異均不顯著（尸）。檢測(cè)數(shù)據(jù)表明與兩者相關(guān)系數(shù)為，檢測(cè)定性完全相符率達(dá)。結(jié)果種試劑盒檢測(cè)陽性率、敏感性均以為最高，次之，氐；與兩者呈現(xiàn)強(qiáng)相關(guān)，造成陽性檢測(cè)率差

2、異顯著的主要因素是方法的敏感性、試驗(yàn)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)鍵詞：豬偽狂犬??；抗體；：試劑盒偽狂犬病（，）是由偽狂犬病毒引起的多種家畜和野生動(dòng)物感染的一種急性傳染病。豬是的惟一自然宿主。能引起豬的亞缶床感染和潛伏感染，未獲得免疫保護(hù)的豬群第次感染常以暴發(fā)式發(fā)生，日齡越小其發(fā)病率和死亡率就越高，尤其是哺乳仔豬可高達(dá)，給豬場(chǎng)帶來災(zāi)難性的后果，并遭受巨大的經(jīng)濟(jì)損失。母豬對(duì)的免疫狀態(tài)不同，哺乳仔豬的臨床表現(xiàn)也不同。生產(chǎn)實(shí)踐證明市場(chǎng)上商用疫苗免疫豬能產(chǎn)生較好的保護(hù)力，尤其是成年的公母豬在高抗體的水平下能有效地控制該病的發(fā)生。如何客觀有效地評(píng)價(jià)疫苗的免疫效果成了科學(xué)有效地防治該病的關(guān)鍵措施之一?？贵w監(jiān)測(cè)方法較多

3、，其中酶聯(lián)免疫吸咐試驗(yàn)（，）為國(guó)際貿(mào)易中抗體檢測(cè)指定方法之一，且以其敏感、特異、簡(jiǎn)便等特點(diǎn)已被廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域，我們?cè)噷?duì)個(gè)不廠家生產(chǎn)的商用抗體檢測(cè)試劑盒作了比較分析，以篩選一種試劑盒作為本中心的檢測(cè)試劑?，F(xiàn)報(bào)告如下：材料與方法 材料根據(jù)比較試驗(yàn)方案要求選取了臨床背景情況清楚的份豬血清樣品。方法種商用的試劑盒分別為：西班牙公司一試劑盒（簡(jiǎn)稱），批號(hào)：，：，適用于豬血清法國(guó)公司一：，批號(hào)為一一（簡(jiǎn)稱），：，適用于豬血清（個(gè)體或者混樣）美國(guó)公司，批號(hào)：一（簡(jiǎn)稱），：。適用于豬血清、血漿和肌肉抽提液。每種試驗(yàn)的操作與結(jié)果的判定均嚴(yán)格按照其試劑盒說明書進(jìn)行，同步檢測(cè)所有血清樣品，且所用試劑均在有效期內(nèi)

4、檢測(cè)并試驗(yàn)成立。（注：為間接，、均為阻斷）為方便數(shù)據(jù)圖比較分析，將試劑盒檢測(cè)結(jié)果轉(zhuǎn)換成（）。結(jié)果與分析種試劑共同檢測(cè)的份樣品結(jié)果分類匯總數(shù)具體見表與表。由表、表可知：檢測(cè)陽性樣品份、陰性樣品份，其檢測(cè)陽性率為陰性率為檢測(cè)結(jié)果陽性份（檢測(cè)未出現(xiàn)陰性）、陰性份、可疑份（檢測(cè)均為陽性），其檢測(cè)陽性率為，陰性率為檢鋇結(jié)果陽性份、陰性份、可疑份，其表與、檢測(cè)分類情況表與檢測(cè)分類情況注：表中份定性不符的樣品中阻斷率范圍為（，）而阻斷串范圍為（。）。阻斷率）。豬業(yè)科學(xué)年第期檢測(cè)陽性率為，陰性率為。表頭豬份血清檢測(cè)數(shù)據(jù)分類統(tǒng)計(jì)情況 由表、表數(shù)據(jù)可見檢測(cè)陽性率以為最高，次之，最低。其中三者檢測(cè)陽性率、陰性率差異

5、性比較具體見表。豬偽狂犬抗體檢測(cè)數(shù)據(jù)比較情況具體見圖。對(duì)檢測(cè)原始數(shù)據(jù)分析表明：與相比兩者相關(guān)系數(shù)為檢測(cè)結(jié)果定性完全相符比率為，完全不相符比率為。從圖可見兩者在第號(hào)樣品之間有部分?jǐn)?shù)值偏差較大且相對(duì)較為集中，其余樣品偏差相對(duì)較小且定性相符；樣品阻斷百分率就整體而言比略小，也就是說數(shù)據(jù)點(diǎn)稍位于下方。從頭試驗(yàn)豬不同免疫階段采集的共份血清檢測(cè)數(shù)據(jù)來看、均符合抗體消長(zhǎng)規(guī)律頭豬份血清按免疫狀況分類統(tǒng)計(jì)情況見表。在份樣品中的份母豬血清檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)情況見表。蠐拇豬抗垂鼬蝴噼蝌嘞差異均不顯著（尸）。表份樣品檢測(cè)分類統(tǒng)計(jì)百分率比較 注：同行比較，無相同字母表示差異板顯著（）。 圖豬偽狂犬抗體檢測(cè)數(shù)據(jù)比較討論從表數(shù)據(jù)

6、顯示，與、相符性較差，尤其是陰性，這與該方法靈敏度有關(guān)，數(shù)據(jù)顯示敏感性不高。由表數(shù)據(jù)及圖可見，與檢測(cè)結(jié)果相符性較好，除可疑區(qū)范圍及附近有少量樣品偏差較大外其余樣品定性均相符，且兩者相關(guān)系數(shù)達(dá)，另外有的樣品定性不相符，這可能與方法的敏感性、判定標(biāo)準(zhǔn)及試驗(yàn)誤差有關(guān)，在份不相符的樣品中檢測(cè)結(jié)果阻斷率范圍為（，），而檢測(cè)結(jié)果阻斷率范圍為（，）。從表來看，豬偽狂犬病抗體及其抗體檢測(cè)陽性率相互差異均極顯著（），最低，次之，最高，由此可見種檢測(cè)方法敏感性差異明顯。而表中份母豬血清檢測(cè)陽性率、和分別為張、和，相互間差異均不顯著（），說明種方法相差不大，這似乎與前面相矛盾，其實(shí)不然，主要是檢測(cè)結(jié)果同樣品是否含有

7、高水平抗體有關(guān)，母豬高陽性率為其多次免疫苗所致。但為何一份母豬樣品結(jié)果不一致，這與方法的特異性有關(guān)或是個(gè)別豬的血清成份差異較大所致，結(jié)合臨注：同行比較，無相同字母且字母相鄰表示差異極顯著（），字母不相鄰表示差異極顯著（）。豬偽狂犬病免疫采用進(jìn)?；蛉笔醵疽呙纾正g滴鼻帖頭份（勃林格殷格翰動(dòng)物保健品有限公司），齡肌注頭份（梅里亞有限公司法國(guó)生產(chǎn)廠）。表份母豬血清檢測(cè)結(jié)果陽性情況注：檢測(cè)結(jié)果陰性的母豬其具體數(shù)值為，而璐和檢測(cè)結(jié)果各自阻斷率為：和。床綜合判定結(jié)果可靠性相對(duì)要小一些。由表數(shù)據(jù)可知隨著豬群日齡的增長(zhǎng)種方法陽性率均呈下降趨勢(shì)，在偽狂犬二免后只有陽性率有所升高，而其余。種方法均無明顯提高；種方法對(duì)于不同日齡段檢測(cè)陽性率有所不同，均以最高，次之，最低，且在日齡段差別顯著，這主要與豬高母源抗體水平及檢測(cè)方法敏感性不同有關(guān)，對(duì)于齡段豬樣品檢溺陽性率均較低，種方法總體上差異不明顯，同時(shí)結(jié)合抗體消長(zhǎng)規(guī)律在一定程度可以說明方法特異性的可靠