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1、柑橘果皮中總黃酮提取工藝研究柑橘果皮中總黃酮提取工藝研究 指導(dǎo)老師:學(xué)院:專業(yè) :2019年05月 答辯人:目錄 一 立題背景和意義 二 試驗材料與方法 三 結(jié)果和討論 四 結(jié)論 五 自我評價 六 致謝一、立題背景及意義立題背景立題背景研究目的意義研究目的意義 目前黃酮類化合物提取方法有溶劑萃取法堿液提取法目前黃酮類化合物提取方法有溶劑萃取法堿液提取法和有機溶劑提取法微波萃取法、超聲波法、酶解法、超和有機溶劑提取法微波萃取法、超聲波法、酶解法、超臨界萃取法等方法。本實驗利用超聲波輔助提取柑橘果皮臨界萃取法等方法。本實驗利用超聲波輔助提取柑橘果皮中總黃酮,考察單因素試驗的影響,確定最佳的提取工藝
2、。中總黃酮,考察單因素試驗的影響,確定最佳的提取工藝。 柑橘黃酮類化合物在食品,醫(yī)藥,保健品、化妝品方面具有廣闊的應(yīng)用前景。而我國柑橘的栽培面積居世界第一,產(chǎn)量居世界第三。目前在柑橘鮮食和加工過程中,柑橘皮是主要的副產(chǎn)物,每年生產(chǎn)上約有150萬噸的果皮資源。這些柑橘果皮幾乎99%都被丟棄或填埋,浪費了資源,對環(huán)境造成巨大的危害。二、試驗材料與方法試驗所需主要試劑和儀器設(shè)備原料和主要試劑原料和主要試劑主要的儀器設(shè)備主要的儀器設(shè)備可見光分光光度計,電子天平,可見光分光光度計,電子天平,組織搗碎機,超聲波儀,臺式組織搗碎機,超聲波儀,臺式離心機。離心機。柑橘、蘆丁市售柑橘、蘆丁市售 ,無水醇、,無水
3、醇、 亞硝酸鈉亞硝酸鈉 、硝酸鋁、硝酸鋁 、氫氧、氫氧化鈉顆粒以上試劑均為分化鈉顆粒以上試劑均為分析純。析純。二、試驗材料與方法總技術(shù)路線二、試驗材料與方法 準確稱取柑橘果皮樣品準確稱取柑橘果皮樣品1.000g1.000g置于置于150mL150mL平底燒瓶中,按一定液平底燒瓶中,按一定液固比加入溶劑。設(shè)定超聲波的參數(shù),提取后取出冷卻,靜置,固比加入溶劑。設(shè)定超聲波的參數(shù),提取后取出冷卻,靜置,過濾,濾液定容至過濾,濾液定容至50mL50mL作為待測液。取待測液作為待測液。取待測液2mL2mL,置于,置于10mL10mL容容量瓶中,用溶劑補充至量瓶中,用溶劑補充至3mL3mL,加入,加入5%N
4、aNO25%NaNO2溶液溶液0.5mL0.5mL,搖勻,放,搖勻,放置置6min6min;加入;加入10%Al(NO3)310%Al(NO3)3溶液溶液0.5mL0.5mL,搖勻,放置,搖勻,放置6min6min;再加;再加入入1molL-1NaOH1molL-1NaOH溶液溶液4mL4mL,最后加蒸餾水定容至,最后加蒸餾水定容至10mL10mL,搖勻,搖勻,放置放置15min15min,于,于510nm510nm處測定吸光度處測定吸光度A A。三、結(jié)果與討論蘆丁標準曲線0.000 0.005 0.010 0.015 0.020 0.000 0.050 0.100 0.150 0.200 y
5、 = 0.1010 x-0.0002R2 = 0.9967蘆丁含量(mgmL-1)吸光度(A)圖3.1蘆丁標準曲線三、結(jié)果和討論提取功率對提取率的影響253035404535404550556065707580提取功率(W)提取率mgg-1圖3.2提取功率對提取率的影響由圖由圖3.2可知:隨超可知:隨超聲波功率不斷增加,聲波功率不斷增加,黃酮類化合物得率也黃酮類化合物得率也增大,當超聲波功率增大,當超聲波功率達達60W時,黃酮類化時,黃酮類化合物的得率達最大,合物的得率達最大,之后隨著超聲波的功之后隨著超聲波的功率的增大,黃酮類化率的增大,黃酮類化合物的得率反而降低。合物的得率反而降低。三、結(jié)
6、果和討論不同乙醇濃度對提取效果的影響不同乙醇濃度對提取效果的影響2025303540455020304050607080乙醇濃度(%)提取率(mgg-1)圖3.3乙醇濃度對提取率的影響由圖由圖3.3可知:隨著乙可知:隨著乙醇濃度不斷增加,黃醇濃度不斷增加,黃酮類化合物的得率也酮類化合物的得率也隨之增大,當乙醇濃隨之增大,當乙醇濃度達到度達到60%時,黃酮時,黃酮類化合物的得率達到類化合物的得率達到最大,之后隨著乙醇最大,之后隨著乙醇濃度的增加黃酮類化濃度的增加黃酮類化合物的得率反而降低。合物的得率反而降低。三、結(jié)果和討論料液比對提取率的影響010203040501:151:201:251:30
7、1:351:40料液比/(gmL-1)提取率(mgg-1)圖3.4料液比對提取率的影響由圖由圖3.4可知:隨著可知:隨著料液比比率增加,料液比比率增加,黃酮類化合物得率黃酮類化合物得率增多,而當料液比增多,而當料液比達到達到1:35以后,黃以后,黃酮類化合物得率最酮類化合物得率最高,再增大料液比高,再增大料液比黃酮類化合物的得黃酮類化合物的得率增加比較緩慢。率增加比較緩慢。三、結(jié)果和討論提取時間對提取率的影響010203040500102030405060提取時間(min)提取率(mg-1)圖3.5提取時間對提取率的影響由圖3.5可知:隨提取時間的增長,黃酮類化合物得率不斷增加,提取時間為20
8、min時,黃酮類化合物的得率最高。之后隨著提取時間的延長,黃酮類化合物得率則降低。三、結(jié)果和討論正交試驗因素表確定最佳工藝條件組合確定最佳工藝條件組合表表3.1正交試驗因素表正交試驗因素表三、結(jié)果與討論表表3.2 正交試驗結(jié)果正交試驗結(jié)果三、結(jié)果和討論數(shù)據(jù)分析 從表從表3.2的直觀分析結(jié)果表明,最佳工藝條件為的直觀分析結(jié)果表明,最佳工藝條件為A2B2C3D1,即超聲波功率為,即超聲波功率為60W、乙醇濃度、乙醇濃度60%、料、料液比為液比為1:35、超聲波作用時間、超聲波作用時間20min,用極差分析方法,用極差分析方法分析可知,分析可知,A的極差最大其后依次為的極差最大其后依次為B、D、C。
9、極差越。極差越大,說明該因素水平變動時總指標的變化越大,即該因大,說明該因素水平變動時總指標的變化越大,即該因素對綜合指標的影響越大。因此得出對黃酮類化合物提素對綜合指標的影響越大。因此得出對黃酮類化合物提取率的影響強弱順序依次為取率的影響強弱順序依次為ABDC,即超聲波功率即超聲波功率乙醇體積分數(shù)乙醇體積分數(shù)超聲波提取時間超聲波提取時間料液比料液比,其中超聲波功率其中超聲波功率和乙醇體積分數(shù)的影響比較大。和乙醇體積分數(shù)的影響比較大。三、結(jié)果和討論驗證試驗 為了考察上述優(yōu)選最佳工藝條件的穩(wěn)定性,在最佳工為了考察上述優(yōu)選最佳工藝條件的穩(wěn)定性,在最佳工藝條件下進行提取,重復(fù)三次測定柑橘果皮中黃酮類
10、化藝條件下進行提取,重復(fù)三次測定柑橘果皮中黃酮類化合物的提取率,提取率見表合物的提取率,提取率見表3.3,三次試驗結(jié)果均優(yōu)于正,三次試驗結(jié)果均優(yōu)于正交試驗結(jié)果交試驗結(jié)果,平均提取率為平均提取率為49.3mgg-1,不確定度為不確定度為0.015,說明該工藝穩(wěn)定可行。說明該工藝穩(wěn)定可行。表表3.3 驗證試驗結(jié)果驗證試驗結(jié)果四、結(jié)論超聲超聲功率功率乙醇乙醇濃度濃度料液料液比比提取提取時間時間超聲波選用低頻超聲波選用低頻60W提取最佳提取最佳最佳料液比為最佳料液比為:柑橘果皮粉:乙醇柑橘果皮粉:乙醇=1:35乙醇選用濃度乙醇選用濃度60%最好最好提取時間以提取時間以20min最佳最佳此時提此時提取率取率在最優(yōu)工藝組合條件下所測黃酮類化合物在最優(yōu)工藝組合條件下所測黃酮類化合物提取率為提取率為49.3mgg-1五、自我評價料比 通過本次論文試驗設(shè)計,我掌握了分光光度計,超聲通過本次論文試驗設(shè)計,我掌握了分光光度計,超聲波等儀器的使用方法,并熟練掌握了在波等儀器的使用方法,并熟練掌握了在excel中制作相中制作相關(guān)表格,這不僅鍛煉了我查閱相關(guān)文獻資料的能力,試關(guān)表格,這不僅鍛煉了我查閱相關(guān)文獻資料的能力,試驗操作能力,還培養(yǎng)了我仔細認真、全面看問題的思維驗操作能力,還培養(yǎng)了我仔細認真、全面看問題的思維習(xí)慣以及思路的嚴謹性、試驗設(shè)計的合理性和邏輯性。習(xí)慣以及思路的嚴謹性
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