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文檔簡(jiǎn)介
1、檢 驗(yàn) 技 術(shù) 操 作 規(guī) 范目錄第一節(jié) 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié)自動(dòng)凝血儀操作規(guī)程第四節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié)血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第六節(jié)尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第七節(jié)肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程第八節(jié)腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程第九節(jié)血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程第十節(jié)血液葡萄糖測(cè)定技術(shù)操作規(guī)程第十一節(jié)凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程第十二節(jié)ABO血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程第十三節(jié)交叉配血試驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程第一節(jié) 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準(zhǔn)備1.1開(kāi)機(jī)前的檢查、準(zhǔn)備在開(kāi)啟分析儀電源之前,操作者須按以下要求進(jìn)行檢查:檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足,有無(wú)過(guò)期;試劑管路是否彎折,連接
2、是否可靠。電源線是否正確連接。廢液桶是否清空。1.1.4 UPS電是否足夠,打印紙安裝是否正確,是否足夠。確保鍵盤(pán)正確連接到鍵盤(pán)接口上。1.2.開(kāi)機(jī)打開(kāi)分析儀后面的電源開(kāi)關(guān),電源指示燈亮,屏幕上顯示"Initializing”.分析儀進(jìn)行初始化,整個(gè)初始化過(guò)程持續(xù)約47分鐘。初始化過(guò)程結(jié)束后,系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。1.3動(dòng)物類型選擇按菜單鍵,移動(dòng)光標(biāo),選擇“動(dòng)物”,按確認(rèn)進(jìn)入“動(dòng)物”界面。操作者根據(jù)測(cè)量的動(dòng)物類型,選擇需要分析的動(dòng)物類型。2.1.1 按 菜單鍵,選擇“計(jì)數(shù)”,進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按模式鍵,將當(dāng)前模式設(shè)置為 “全血”模式。確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒”,工作模式
3、為“全血”。將準(zhǔn)備好的全血樣本放到采樣針下,使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持 一定距離。按計(jì)數(shù)鍵,啟動(dòng)樣本分析過(guò)程。此時(shí),狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。采樣針自動(dòng)吸取13ul的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開(kāi)樣本。分析完成后,按F4鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按 F9鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢 字狀態(tài)下,按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換,輸入樣本信息,輸入完成后,點(diǎn)擊“確認(rèn)”,保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。按打印鍵打印樣本分析報(bào)告。按照此操作過(guò)程進(jìn)行其余樣本的分析。2.2預(yù)稀釋樣本分析2.2.1 按 菜單鍵,選擇“計(jì)數(shù)”,進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按模式鍵,將當(dāng)前模式設(shè)置為 “預(yù)稀
4、釋”模式。按稀釋鍵,屏幕彈出“加稀釋液”對(duì)話框,取一個(gè)干凈的樣本杯放在采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動(dòng)排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中,避免產(chǎn)生氣泡或?yàn)R出。加完稀釋液后,按確認(rèn)鍵,“加稀釋液”對(duì)話框關(guān)閉,分析儀自動(dòng)清洗采樣針。采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒”,工作模式為“預(yù)稀釋”。將準(zhǔn)備好的預(yù)稀釋樣本放到采樣針下,使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。按計(jì)數(shù)鍵,啟動(dòng)樣本分析過(guò)程。此時(shí),狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。采樣針自動(dòng)吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開(kāi)樣本。分析完成后,按F4鍵進(jìn)
5、入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下,按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換,輸入樣本信息,輸入完成后,點(diǎn)擊“確認(rèn)”,保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。229按打印鍵打印樣本分析報(bào)告。2210按照此操作過(guò)程進(jìn)行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后3.1按菜單鍵,彈出系統(tǒng)菜單,選擇“關(guān)機(jī)”。3.2界面彈出“關(guān)機(jī)”對(duì)話框,點(diǎn)擊“確認(rèn)”進(jìn)入關(guān)機(jī)界面。3.3將E-Z清洗液放到采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,采樣針將自動(dòng)吸取E-Z清洗液,執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.4按照界面提示信息,將 E-Z清洗液放到采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,采樣針將再次自動(dòng)吸 取E-Z清洗液,執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.5執(zhí)行
6、完成后,界面提示“請(qǐng)關(guān)閉電源”是,關(guān)閉分析儀的電源開(kāi)關(guān)。3.6關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏,并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程本測(cè)試儀是一項(xiàng)精密儀器,為了更好的維護(hù)和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟1. 尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連,接通電源,先打開(kāi)電腦,再打 開(kāi)分析儀;儀器啟動(dòng),風(fēng)扇轉(zhuǎn)動(dòng),推進(jìn)器移動(dòng),屏幕顯示“系統(tǒng)正在測(cè)試”,此時(shí)系統(tǒng)正在自檢,顯示屏顯示主菜單,工作臺(tái)檢條區(qū)有紅色光交替閃爍,用戶可以開(kāi)始測(cè)試2點(diǎn)擊電腦桌面尿液分析軟件;3. 將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出,將試 紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁
7、刮去多余尿液;4. 將蘸有尿液的試紙平放在工作臺(tái)的檢條區(qū),確保試紙同工作臺(tái)前壁接觸;5. 儀器檢測(cè)到試紙存在后,推進(jìn)器將試紙推到測(cè)試區(qū)進(jìn)行測(cè)試;6. 當(dāng)推進(jìn)器退回原位,放下一條試紙,這樣實(shí)現(xiàn)連續(xù)測(cè)試;7. 當(dāng)工作臺(tái)上所有的試紙條測(cè)試完畢,打印結(jié)果輸出結(jié)束后,按菜單鍵進(jìn)入儀器設(shè)置,將電源開(kāi)關(guān)撥到“斷(O)”位置,關(guān)閉儀器電源。二、儀器維護(hù)1. 不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器;2. 不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機(jī)溶劑擦拭儀器;3. 不要用水清洗液晶屏,不要用任何會(huì)擦傷工作臺(tái)和白基準(zhǔn)的物質(zhì)擦拭工作臺(tái);4. 不要用任何溶劑清潔白基準(zhǔn),如果白基準(zhǔn)有明顯劃痕或損壞,請(qǐng)與供應(yīng)商聯(lián)系;5.
8、 用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器,保持儀器清潔;6. 用柔軟、無(wú)磨損的布擦拭液晶屏;7. 為使儀器正常運(yùn)行并提供準(zhǔn)確的測(cè)試結(jié)果,必須定期從儀器中取下推進(jìn)器、工作臺(tái)、 步進(jìn)板、用清水沖洗,用軟布依次擦干保持工作臺(tái)的清潔。三、注意事項(xiàng)1. 測(cè)試時(shí)不要將儀器放置在陽(yáng)光直射的地方,以免影響測(cè)試精度;2. 請(qǐng)?jiān)跍y(cè)試前核對(duì)尿液分析試紙型號(hào),避免因使用的尿液分析試紙型號(hào)不正確而導(dǎo)致 測(cè)試結(jié)果錯(cuò)誤;3請(qǐng)勿使用過(guò)有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙;4. 尿樣本中血的濃度高時(shí),可影響測(cè)試的準(zhǔn)確性,儀器能夠識(shí)別出高濃度血尿并打印 出“結(jié)果無(wú)效”的提示;5. 必須在推進(jìn)器動(dòng)作前,將待測(cè)試紙條放好;6. 在放置試紙條
9、時(shí)應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺(tái)前壁;7. 如果儀器測(cè)試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運(yùn)行受阻。關(guān)掉儀器,拉出工作臺(tái),取出受阻 試紙條后,重新安裝工作臺(tái)。開(kāi)機(jī)自檢后,對(duì)未得出結(jié)果的樣本重測(cè)。第三節(jié)自動(dòng)凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作1.1打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)前的檢查。檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過(guò)低,請(qǐng)用蒸餾水或去離子水將罐充滿。清空廢液瓶。管道連接檢查各種管線的連接。確保沒(méi)有管子脫落或扭結(jié),電源線被安全的插入交流 插座。確保打印機(jī)中有足夠的紙張以供打印當(dāng)天所需處理的所有樣本結(jié)果。補(bǔ)充反應(yīng)杯丟棄用過(guò)的反應(yīng)杯,加入適量的干凈的反應(yīng)杯。1.2打開(kāi)電源開(kāi)機(jī)順序:打印機(jī)t壓力單元t電源單元和主單元(右側(cè))。打
10、開(kāi)電源后,儀器自動(dòng)進(jìn)入自檢。將病人樣本,質(zhì)控與試劑分別按要求準(zhǔn)備就緒,進(jìn)入分析過(guò)程:試劑準(zhǔn)備 t Set Reage nt t 輸入確認(rèn)試劑體積 t補(bǔ)充反應(yīng)杯 t安放樣本架1.3樣本分析:Work List t id No.Entry t 輸入樣本號(hào) t ENTER t 選擇所需檢測(cè)的項(xiàng)目(變?yōu)?O),確認(rèn)所有的設(shè)置結(jié)束后t enter t按屏幕右上方“ start”鍵,執(zhí)行分析。分析完畢,儀器進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài)。1.4關(guān)機(jī)前的工作每日清潔所有樣本針和試劑針:在主菜單屏上按下【Ri nse probe】鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【 Excute】鍵。1.5關(guān)機(jī)關(guān)閉電源。2. 儀器保養(yǎng)2.1每日保養(yǎng)清洗
11、樣品針每次做完試驗(yàn)都必須清洗樣品針,主要是預(yù)防堵針,執(zhí)行Rinse Probe t Excute清空垃圾箱2.2清空廢液查看儀器后面防逆流瓶 Trap Chamber有無(wú)水,防止因?yàn)橛兴鴮?dǎo)致真空泵不能抽真空 在洗液瓶中注蒸餾水,最高不要超過(guò)上面的凹槽,防止因水過(guò)滿,工作時(shí)水回流到壓力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。2.3每周保養(yǎng)做一次管路清潔,執(zhí)行 Special Operate t Rinse&Prepare清潔儀器2.4每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶?jī)?nèi)部,清洗洗液瓶出水管上的過(guò)濾網(wǎng)一次。2.5每三或六個(gè)月保養(yǎng)清潔傳動(dòng)滑軌(X軸、Y軸)并上潤(rùn)滑油。防止因積塵而使樣品針運(yùn)行不到位,向下扎錯(cuò) 位置
12、造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1. 開(kāi)機(jī)之前檢查電源線是否連接無(wú)誤,電源要求接地良好;連接打印機(jī)電源線,接通打印機(jī)電源開(kāi)關(guān);將廢液管插入廢液容器內(nèi);接通顯示器開(kāi)關(guān)及主機(jī)背部電源開(kāi)關(guān)。2開(kāi)機(jī)t自檢后t鍵入 Enter,確定已設(shè)定測(cè)試參數(shù)宀鍵入Enter,進(jìn)入編制工作表宀在設(shè)置欄,開(kāi)啟聯(lián)機(jī)打印t儀器預(yù)熱20分鐘后,調(diào)用已設(shè)定測(cè)試項(xiàng)目進(jìn)行樣品測(cè)定t打印結(jié)果t清洗儀器t關(guān)機(jī)。3. 吸液口由不銹鋼保護(hù)管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成,應(yīng)注意保護(hù),不要碰彎。4. 切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?!緝x器的保養(yǎng)與維護(hù)】1. 日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動(dòng)比色皿,每天工作結(jié)束后,要用
13、蒸餾水清洗。具體方法 如下:將吸液管插入蒸餾水中,向上扳動(dòng)吸液開(kāi)關(guān),反復(fù)沖洗流動(dòng)比色皿,直到蒸餾水的吸 光度值正常為止。2. 每周要用專門的清洗劑清洗一次流動(dòng)比色皿,清洗時(shí),讓清洗劑停留在比色皿中約半 小時(shí),然后排掉,再用蒸餾水沖洗干凈,最后注入蒸餾水。3. 不使用儀器時(shí),流動(dòng)比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸餾水。4. 更換打印機(jī)色帶時(shí),嚴(yán)格遵照打印機(jī)操作手冊(cè),避免不規(guī)范操作。5. 光源燈更換時(shí)一定要先切斷儀器的電源,手不可觸摸光源燈的玻璃部分,萬(wàn)一光源燈 的玻璃部分弄臟了,可用無(wú)水乙醇將污物除去。6. 更換的蠕動(dòng)泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致,如不一致則要重新調(diào)整吸液量。第五節(jié)血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程【標(biāo)本】
14、抗凝靜脈血(有些儀器也可用末梢血)。【方法】血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀測(cè)定法。試齊U】血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀配套試劑?!静僮鳌吭斠?jiàn)血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀使用手冊(cè)。附注】1.血常規(guī)包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞比積、血小板 計(jì)數(shù)等項(xiàng)目。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法,詳見(jiàn)有關(guān)資料。2. 半自動(dòng)及全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀從設(shè)計(jì)上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點(diǎn)為:(1)靜脈血能正確地反映病人實(shí)際情況,重復(fù)性好;(2)利于延長(zhǎng)儀器的使用壽命;(3)解決了采血盤(pán)的交叉感染問(wèn)題等。3. 血細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用 EDTA Kz:為抗凝劑(EDTA Kz 2 H2O1.52.2mg可抗凝1ml血)。4. 貯血容器應(yīng)選用有
15、蓋塑料管??鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)不超過(guò)6h;如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)完成。5. 測(cè)定前必須將 EDTA K2抗凝血充分混勻。6. 血細(xì)胞分析儀測(cè)定最適溫度為1822C,低于15C或高于30C,均可使細(xì)胞體積發(fā)生改變,影響各參數(shù)的結(jié)果。7. 血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類只能當(dāng)作一種過(guò)篩手段,當(dāng)白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋 白和血小板的任何一項(xiàng)有明顯升高或降低;白細(xì)胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果(中間細(xì)胞群百分率8.0%);紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個(gè)直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況,須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié)尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程【標(biāo)本】新鮮尿液。【方法】化學(xué)試帶法?!驹噭扛餍吞?hào)尿液化學(xué)分析儀配套試帶?!静僮鳌吭斠?jiàn)
16、尿液化學(xué)分析儀使用手冊(cè)。附注】1. 尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀,目前能進(jìn)行810項(xiàng)檢測(cè)(PH蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細(xì)胞)。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法,詳見(jiàn)有關(guān)資料。2. 必須了解所用試帶各膜塊注意事項(xiàng)、藥物干擾。3. 要注意尿液化學(xué)分析儀測(cè)定結(jié)果與手工法的差異,必要時(shí)用手工法復(fù)查。4. 尿液化學(xué)分析儀檢測(cè)僅是一個(gè)過(guò)篩手段,當(dāng)?shù)鞍?、隱血、白細(xì)胞等出現(xiàn)異常結(jié)果(如尿蛋白“ + ”或以上)時(shí),應(yīng)進(jìn)行鏡檢。5. 尿液顏色、透明度等一般性狀異常時(shí)也應(yīng)報(bào)告。第七節(jié)肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程血清總膽紅素(TBIL)和結(jié)合膽紅素(DBIL)測(cè)定改良JG法【試劑】參照書(shū)刊文獻(xiàn)
17、(如全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第二版)自配,配制標(biāo)準(zhǔn)液的膽紅素應(yīng)符合如下標(biāo)準(zhǔn),純膽紅素的氯仿溶液在 25C當(dāng)光徑1.000 ± O.OOICm,波長(zhǎng)453nm條件下其摩爾 吸光系數(shù)應(yīng)在60700 ± 1600范圍內(nèi),偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380 ± 866范圍內(nèi),配制標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋劑須含白蛋白,可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存,在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高?!静僮鳌堪丛噭┖姓f(shuō)明書(shū)或相應(yīng)書(shū)刊文獻(xiàn)規(guī)程手工操作,比色測(cè)定,波長(zhǎng)600nm.制作準(zhǔn)曲線。血樣測(cè)定,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求TBIL及DBIL的含量以u(píng)mo1/L報(bào)告。
18、也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說(shuō)明書(shū)的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入,用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。【標(biāo)本】血清,空腹血為宜,脂血、脂溶性色素及嚴(yán)重溶血干擾此測(cè)定,暫不能測(cè)定的標(biāo)本應(yīng)避光保存,室溫可穩(wěn)定 8h, 28C可保存48h。含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測(cè)定膽紅素。膽紅素氧化酶(BOD法【試劑】市售成套試劑。BOD式劑復(fù)溶后28C可保存一周?!静僮鳌堪磸S家提供的試劑及儀器說(shuō)明書(shū)要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。波長(zhǎng)450 或 460nm?!緲?biāo)本】血清要求與改良J 一 G法相似。二甲亞楓(DMSO法【試劑】市售現(xiàn)成試劑。【操作】按試劑盒說(shuō)明書(shū)手工操作比色測(cè)定或用自動(dòng)生化儀測(cè)定。波長(zhǎng)5
19、60nmo【標(biāo)本】血清、輕度脂血,溶血標(biāo)本對(duì)結(jié)果無(wú)明顯影響、重度脂血、溶血標(biāo)本須作標(biāo)本空白進(jìn)行 較正。血氨測(cè)定【方法】酶兩點(diǎn)法。試齊U】市售成套試劑?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求,設(shè)入相應(yīng)的程序及各項(xiàng)參數(shù)、用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。波長(zhǎng)340nm。【標(biāo)本】EDTA.Na 2抗凝血漿。靜脈采血后與EDTA.Na混勻,立即置冰水中盡快分離出血漿,加塞置24C保存,在23h內(nèi)分析,-20 C可穩(wěn)定24h。溶血標(biāo)本忌用。第八節(jié)腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程尿素氮1. 檢測(cè)目的:檢測(cè)血清、血漿或尿液中尿素的含量,為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療 效果,以及對(duì)健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要的參考價(jià)值
20、。2. 標(biāo)本要求:2.1病人準(zhǔn)備:空腹12小時(shí)。2.2標(biāo)本類型:血清、肝素化的血漿或24小時(shí)尿。3. 設(shè)備和試劑:3.1儀器設(shè)備:邁瑞半自動(dòng)生化分析儀3.2試劑材料:試劑3.3試劑的貯存:3.3.1 28 C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。3.3.2 開(kāi)蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定 30天。變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值<1.000時(shí),不能繼續(xù)使用。3.4注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中 或沾染到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗,必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等 金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗排水管。3.5試劑準(zhǔn)備:即開(kāi)即
21、用的,無(wú)需特殊準(zhǔn)備。4. 操作步驟:見(jiàn)生化分析儀操作流程。5. 質(zhì)量控制:5.1質(zhì)控物:RANDO多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施:室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進(jìn)行。室間質(zhì)控:參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。6. 干擾因素:總膽紅素w 40mg/dL,血紅蛋白w 450mg/dL,抗壞血酸w 400mg/dL對(duì)本法無(wú)干擾。7. 參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間:7.1參考范圍:血清/血漿2.868.20mmol/L24小時(shí)尿1535g/24h7.2可報(bào)范圍:0.0035.00mmol/L。樣品Urea含量超過(guò)線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做, 結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。8. 異常結(jié)果處理:結(jié)果異常、與臨床診斷不符,應(yīng)復(fù)查
22、或與臨床聯(lián)絡(luò)。肌酐1.檢測(cè)目的:檢測(cè)血清、血漿或尿液中肌酐的含量,為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療 效果,以及對(duì)健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要的參考價(jià)值。3. 標(biāo)本要求:3.1病人準(zhǔn)備:空腹12小時(shí)。3.2標(biāo)本類型:血清、肝素化的血漿或尿液。4. 設(shè)備和試劑:4.1儀器設(shè)備:邁瑞半自動(dòng)生化分析儀4.2試劑材料:試劑4.3試劑的貯存:4.3.1 28 C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。4.3.2 開(kāi)蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定 30天。變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值>0.050時(shí),不能繼續(xù)使用。4.4注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中
23、或沾染到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗,必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等 金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準(zhǔn)備:即開(kāi)即用的,無(wú)需特殊準(zhǔn)備。5. 操作步驟:見(jiàn)半自動(dòng)生化分析儀操作流程。6. 質(zhì)量控制:6.1質(zhì)控物:RANDO多項(xiàng)人基質(zhì)血清6.2質(zhì)控措施:室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進(jìn)行。室間質(zhì)控:參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。7. 干擾因素:直接 膽紅素w 257卩mol/L ,血 紅蛋白w 0.5g/L ,抗 壞血酸w 3mmol/L,甘 油三酯 15.0mmol/L,肝素w 50KU/L,枸櫞酸鈉w 10g/L對(duì)本法無(wú)干擾。8. 參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間:8.1參考
24、范圍:血清/血漿53.0123.0卩mol/L (男性)44.0 106.0 卩 mol/L (女性)首次晨尿 153015320卩mol/L24 小時(shí)尿 6.6 15.0mmol/24h8.2可報(bào)范圍:0.08840.0卩mol/L。樣品Crea含量超過(guò)線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做, 結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。9. 異常結(jié)果處理:結(jié)果異常、與臨床診斷不符,應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。9. 危急值及處理方法:>177卩mol/L。及時(shí)與臨床聯(lián)絡(luò)。10. 實(shí)驗(yàn)室解釋:增高:嚴(yán)重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低:營(yíng)養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié)血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程標(biāo)本采集與處理1 受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的
25、飲食習(xí)慣,近期體重穩(wěn)定無(wú)外傷,手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥,3-受體阻滯劑,免疫抑制劑,激素藥物等,則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測(cè)。2 空腹抽血,TG脂蛋白,載脂蛋白測(cè)定應(yīng)至少禁食 12小時(shí)(僅作膽固醇測(cè)定不必強(qiáng)求空腹)24小時(shí)內(nèi)不作劇烈運(yùn)動(dòng)。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時(shí)止血帶使用不可超過(guò)1分鐘。3 .標(biāo)本用血清,也可用肝素或EDTA.Na抗凝之血漿。EDTA.Nq濃度不宜太高。4 .血標(biāo)本室溫放置不得超過(guò) 3h,放置3045分鐘后應(yīng)即時(shí)分離出血清 (漿)蓋封於4 C 冰箱中可穩(wěn)定至少 4天,如需長(zhǎng)期保存,應(yīng)於 -70 C中冰凍存放
26、,不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇(TC)測(cè)定酶法(CHODPA法)【試劑】市售現(xiàn)成試劑?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)定程序,輸入?yún)?shù)用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定(速率法)終點(diǎn)法可手工操作,用普通分光光度計(jì)比色測(cè)定。波長(zhǎng)500nm或520nm。【標(biāo)本】血清(漿)參看本節(jié)的標(biāo)本采集與處理?!靖阶ⅰ勘痉橹腥A醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)推薦的TC測(cè)定常規(guī)方法(中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1995、18:185 )。膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液以定值參考血清為宜,而不宜用Chol的水溶液作標(biāo)準(zhǔn)。Chol定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標(biāo)準(zhǔn)液。主要技術(shù)指標(biāo):終點(diǎn)法批內(nèi)CVk 1.5%、批間 CVC 2.5%。靈敏度:顯色劑用酚時(shí),TC5.2mmo1
27、/L(200mg/dl)時(shí)的吸光度(A 500nm)約 0.300.35,故 A 500nm=0.005 時(shí) TC 濃 度約為0.08mmo1/L(3mg/dL)。測(cè)定范圍:當(dāng)血清與試劑用量之比為1:100時(shí)其測(cè)定的上界為 13mmo1/L(500ng/dL)。血清甘油三酯(TG)測(cè)定酶法(GPOPA法)【試劑】市售現(xiàn)成試劑。有兩種。一步酶法單一試劑,二步酶法雙試劑。標(biāo)準(zhǔn)液(參考物)一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液,也可用甘油,但甘油不適用於二 步酶法?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)定程序和參數(shù),用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定,終點(diǎn)法可用普通分光光度計(jì)手工操作,比色測(cè)定。波長(zhǎng)500nm?!緲?biāo)
28、本】血清(漿)參看本節(jié)標(biāo)本采集與處理。附注】本法在操作程序上分為一步酶法與二步酶法,二步酶法為中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)的推薦方法(中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志 1995、18: 249)?,F(xiàn)階段允許二法并存,要求逐步過(guò)渡到統(tǒng)一采用二 步酶法,在方法尚未統(tǒng)一前,實(shí)驗(yàn)室報(bào)告TG測(cè)定結(jié)果時(shí)應(yīng)注明“除FG值”或“未除FG值”。主要枝術(shù)指標(biāo):酶試劑用緩沖液配制后,2025C應(yīng)穩(wěn)定1天,4C可穩(wěn)定37天,試劑空白為 A500nmc 0.05 ;顯色后穩(wěn)定30min :測(cè)定上界11.3mmo1/L(100mg/dL);精密度:批內(nèi) CVC 3% 批間CVC 5% 靈敏度:2mmo1/L TG A 500nm0.2。血清高密度脂
29、蛋白膽固醇(HDL-C)測(cè)定磷鎢酸鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑,沉淀劑,酶試劑(同 TG測(cè)定)。【操作】按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。1 .沉淀含apoB的脂蛋白。2 .測(cè)定上清液(只含 HDL的膽固醇含量(方法同酶法TC測(cè)定)?!緲?biāo)本】血清(漿)。硫酸葡聚糖一鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑:總 HDL試劑,HDL3試劑,酶試劑(同 TC試劑)。【操作】按試劑說(shuō)明書(shū)操作:1 .沉淀含apoB的脂蛋白,(總HDL試劑);2 .沉淀含apoB的脂蛋白及 HDL2(HDL3試劑);3 .測(cè)定總HDL HDL3C(同酶法TC測(cè)定),并計(jì)算出HDL2C量。【標(biāo)本】血清(漿)血樣在室溫中不宜久放,應(yīng)即時(shí)測(cè)定,原則應(yīng)低
30、溫保存。直接HDLC定法試齊U】市售專門的試劑,無(wú)沉淀劑。酶試劑同TC測(cè)定。(如日本第一化學(xué)藥品株式會(huì)社的產(chǎn)品)。操作】按試劑盒及儀器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)置程序,輸入?yún)?shù)直接用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定,無(wú)須沉淀離心分離出HDL步驟。標(biāo)本】血清(漿)。血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測(cè)定1 . Friedwald 工式計(jì)算法:(1) LDL-C=TC- HDL-CHTG/5 (以 mg/dl 為單位計(jì));(2) LDL-C=TC- HDL-C-TG/2.2 ( 以 mmo1/L為單位計(jì));(3) 只有當(dāng)血 TG< 4.52mmo/L結(jié)果才較準(zhǔn)確;(4) 只有TC TG HDL-C三項(xiàng)測(cè)定
31、都準(zhǔn)確且符合標(biāo)準(zhǔn)化要求時(shí),才可計(jì)算出LDL-C的 近似值。2 .聚乙烯硫酸沉淀法【試劑】沉淀劑市售,酶試劑同 TC測(cè)定?!静僮鳌? . TC測(cè)定。2 .選擇性沉淀血清中 LDL,測(cè)定上清液之 HDL- C與VLDL- C之和的量,(同TC測(cè)定)。3 .計(jì)算出LDL- C的含量?!緲?biāo)本】血清。血清載脂蛋白A1 (apoA1)測(cè)定免疫透射比濁法。波長(zhǎng) 340nm本法批間CV< 5%【試劑】市售試劑盒,試劑 28C保存,不同批號(hào)試劑不能混合使用,抗血清效價(jià)不應(yīng)低於16。【操作】按試劑及儀器使用說(shuō)明書(shū)要求,設(shè)定程序和參數(shù)用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定,也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測(cè)定,或用含340
32、nm的分光光度計(jì)手工操作測(cè)定?!緲?biāo)本】血清。血清載脂蛋白B (apoB)測(cè)定免疫透射比濁法。波長(zhǎng) 340nm本法批間CV< 5%【試劑】市售試劑,28C保存,不同批號(hào)試劑不能混合使用,抗血清效價(jià)不應(yīng)低於1: 12 8。【操作】參看apoA1測(cè)定。【標(biāo)本】血清。第十節(jié)血液葡萄糖測(cè)定技術(shù)操作規(guī)程1. 檢測(cè)目的:檢測(cè)血清或血漿中葡萄糖的含量,為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果,以及對(duì)健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要的參考價(jià)值。3. 標(biāo)本要求: 3.1病人準(zhǔn)備:空腹12小時(shí)。3.2標(biāo)本類型:血清或 NaF抗凝的血漿。采血后及時(shí)分離,以避免血清或血漿中葡萄糖被細(xì) 胞利用而降低。4.
33、 設(shè)備和試劑:4.1儀器設(shè)備:奧林巴斯 AU600生化分析儀4.2試劑材料:四川邁克公司試劑參與反應(yīng)成份:R1:酚(12.0mmol/L )R2: GOD(> 35KU/L)、POD(> 5KU/L)、4-AAP (1.20mmol/L )4.3試劑的貯存:4.3.1 28 C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。4.3.2 開(kāi)蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定 30天。變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值>0.150時(shí),不能繼續(xù)使用。4.4注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中 或沾染到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗,必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等 金
34、屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準(zhǔn)備:即開(kāi)即用的,無(wú)需特殊準(zhǔn)備。5質(zhì)量控制:5.1質(zhì)控物:RANDO多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施:室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進(jìn)行。室間質(zhì)控:參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。6.參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間:6.1參考范圍:空腹3.89 6.11mmol/L餐后1小時(shí) 7.788.89mmol/L餐后2小時(shí) 3.897.78mmol/L6.2可報(bào)范圍:0.0022.30mmol/L。樣品GLU含量超過(guò)線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7. 危急值及處理方法:<2.5mmol/L或>10mmol/L。及時(shí)與臨
35、床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié)凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程全血凝固時(shí)間檢驗(yàn)(CT)【標(biāo)本】靜脈取血3ml?!痉椒ㄅc操作】試管法、硅管法操作參見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第二版)?!靖阶ⅰ?. 靜脈取血要一針見(jiàn)血,盡量減少組織液和空氣混入。2. 水浴箱溫度要恒定,過(guò)高或過(guò)低,可影響結(jié)果。活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定(APTT【標(biāo)本】自靜脈取血,用109mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝?!驹噭渴惺鄢商自噭?。【方法與操作】按試劑及有關(guān)儀器說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行。【附注】1. 標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢測(cè),最遲不超過(guò)2h。2. 分離血漿應(yīng)在 3000r/min,離心10min。3. 本試驗(yàn)較試管法全血凝血時(shí)間敏感,能檢出因子忸:Cv 25%輕型血友病
36、。血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定(PT, 一期法)【標(biāo)本】靜脈血1.8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉 0.2ml抗凝?!驹噭?. 組織凝血活酶浸出液;2. 0.025mol/L CaCl 2 液;【方法與操作】 見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第二版)?!靖阶ⅰ?. 采血后宜在1h內(nèi)完成,置冰箱 4C保存,不應(yīng)超過(guò)4h, -20 C下可放置2周,-70 C 可放置6個(gè)月。2. 水溫箱控制在37 C± 1C,過(guò)高過(guò)低均影響結(jié)果。簡(jiǎn)易凝血活酶生成試驗(yàn)(STGT【標(biāo)本】取全血0.04ml加5ml蒸餾水,混勻,即成溶血液,備用?!痉椒ㄅc操作】見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第二版)第十二節(jié)ABO血型正、反血型鑒
37、定技術(shù)操作規(guī)程1. 檢測(cè)目的用于檢測(cè)患者血型,實(shí)施輸血治療和組織器官移植等。2. 檢測(cè)原理(正定型法)根據(jù)igM類特異性血型抗體與紅細(xì)胞上特異性抗原結(jié)合能夠出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原理,用已知IgM類特異性標(biāo)準(zhǔn)抗血清與被檢紅細(xì)胞在室溫條件下反應(yīng),若被檢紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集現(xiàn)象, 表明被檢紅細(xì)胞上有與血型抗體對(duì)應(yīng)的抗原。3. 標(biāo)本要求新鮮全血。4. 試劑標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B血清。5. 操作步驟(玻片法)5.1 標(biāo)記:取一載玻片,用蠟筆畫(huà)上直徑2cm左右的兩個(gè)圓圈,分別標(biāo)記抗A、抗B。5.2 抗血清:在玻片蠟筆圈內(nèi)按標(biāo)記所示分別滴加抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清各一滴。5.3 紅細(xì)胞:在抗 A、抗B圈內(nèi)加被檢者全血各一滴。用玻棒
38、將紅細(xì)胞與抗體充分混勻, 室溫下放置1830min (為防止天氣干燥造成玻片干涸,可把試驗(yàn)玻片放在有濕紗布的 蓋盤(pán)中)。5.4 血型判讀:搖動(dòng)玻片,肉眼觀察玻片蠟筆圈內(nèi)有無(wú)顆粒狀凝集及凝集程度,判定陰性、陽(yáng)性和陽(yáng)性程度。陰性指視野中紅細(xì)胞程均勻散布,無(wú)凝集顆粒,顯微鏡下紅細(xì)胞分散存在,無(wú)聚集靠攏現(xiàn)象。陽(yáng)性時(shí)紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集。6. 質(zhì)量控制6.1 分型血清質(zhì)量性能符合要求,用畢后應(yīng)放置冰箱保存,以免細(xì)菌污染。6.2 試管、滴管和玻片必須清潔干燥,防止溶血。6.3 按理IgM抗-A和抗-B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以6C為最強(qiáng),但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾,一般仍在室溫內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn),36C可反應(yīng)減弱。6.4
39、 觀察時(shí)應(yīng)注意紅細(xì)胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。7. 干擾因素7.1 分型血清效價(jià)太低、親和力不強(qiáng);7.2 受檢者紅細(xì)胞上抗原位點(diǎn)過(guò)少或抗原性減弱;7.3 受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗 -A/抗-B抗體;7.4 各種原因引起的紅細(xì)胞溶解,誤判為不凝集。部分溶血時(shí),可溶性血型物質(zhì)中和了相 應(yīng)的抗體;7.5 由細(xì)菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因;7.6 血清中有意外抗體,如自身抗 -I,常引起干擾;7.7 老年人血清中抗體水平大幅度下降;7.8 更換新批號(hào)抗血清或?qū)υ噭┙Y(jié)果有懷疑時(shí),可設(shè)定陽(yáng)性、陰性和自身對(duì)照;7.9 為避免交叉污染,尖吸管、玻棒只能一次性使
40、用;7.10 嬰幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱;7.11 有些疾病可能使紅細(xì)胞定性出現(xiàn)困難,如:嚴(yán)重的腸道細(xì)菌感染;嚴(yán)重的細(xì)菌感染; 血清中存在病理性冷凝集素與紅細(xì)胞上抗原結(jié)合;部分高球蛋白和異常高球蛋白血癥7.12 輸入異型血或做過(guò)與受者血型不同的異體骨髓器官移植的病人在血型堅(jiān)定時(shí)可能出現(xiàn)混合外觀。第十三節(jié)交叉配血操作規(guī)程交叉配血試驗(yàn) (凝聚胺法)原理凝聚胺試驗(yàn)是利用低離子溶液促進(jìn)紅細(xì)胞抗原與血清(漿)中的抗體反應(yīng),再利用凝聚胺引起紅細(xì)胞間非免疫性的凝集,讓已有抗體(igG)反應(yīng)的紅細(xì)胞間的距離縮短。距離縮短后更能引起已反應(yīng)的抗體和別的紅細(xì)胞產(chǎn)生反應(yīng)形成免疫性的凝集。而由凝聚
41、胺所引起的非免疫性紅細(xì)胞凝集反應(yīng)可被后來(lái)加入的復(fù)懸液所中和而散開(kāi),如有免疫反應(yīng),凝集就不會(huì)散開(kāi),為陽(yáng)性反應(yīng)。如沒(méi)有免疫反應(yīng),凝集就會(huì)散開(kāi),為陰性反應(yīng)。交叉配血試驗(yàn)是在鹽水 介質(zhì)的基礎(chǔ)上加入凝聚胺,檢測(cè)供患之間是否相合,患者血清(漿)中是否含有具臨床意義 的紅細(xì)胞異體抗體。試劑組成1潔凈試管,離心機(jī),顯微鏡。2 0.85% 氯化鈉溶液:準(zhǔn)確稱取氯化鈉( AR 8.5 g,用蒸餾水溶解并定容至 1000 ml。試劑啟用后,有效期為:二周。3聚胺試劑(1)質(zhì)溶液:含葡萄糖,乙二胺四醋酸 -2鈉及穩(wěn)定劑。(2)凝聚胺溶液:含凝聚胺,氯化鈉及穩(wěn)定劑。(3)復(fù)懸液:含檸檬酸鈉,葡萄糖及穩(wěn)定劑。(4)陽(yáng)性對(duì)
42、照血清:含抗 D血清,氯化鈉及穩(wěn)定劑。4 抗人IgG血清。試劑保存和穩(wěn)定性1 凝聚胺試劑須保存在 2-25 C。2. 有效期內(nèi)可使用。3. 抗人IgG血清低溫冰箱保存。復(fù)溶后放24C冰箱保存。標(biāo)本收集和準(zhǔn)備1. 抽取受血者靜脈血 3-4ml (操作中小心防止紅細(xì)胞破損),放入一已貼標(biāo)簽干燥潔凈的試 管中為血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液),并將注射器中余下的少量血液配成2%紅細(xì)胞生 理鹽水懸液,放入另一已貼標(biāo)簽干燥潔凈的試管中為紅細(xì)胞懸液管。以上標(biāo)本有效期為三天;若受血者抽取標(biāo)本后,輸用過(guò)血液或血液制品,且輸用時(shí)間超過(guò)12小時(shí)的,必須重新采集標(biāo)本。2. 2%紅細(xì)胞懸液:用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞
43、 3次。根據(jù)下表進(jìn)行紅細(xì)胞懸液的配制。懸液濃度(%壓積紅細(xì)胞(滴)鹽水(滴)2ml(40)50.8ml(16)操作步驟I. 取出3支試管分別標(biāo)記主,次及對(duì)照測(cè)試:主測(cè)管:加入病人血清(漿)2滴,再加入供血者 3-5%紅細(xì)胞懸液1滴,次測(cè)管:加入供血者血清(漿)2滴,再加入病人 3-5%紅細(xì)胞懸液1滴,對(duì)照管:加入2滴*4陽(yáng)性對(duì)照血清,再加入供血者3-5%紅細(xì)胞懸液1滴。2各加入*1低離子介質(zhì)溶液0.6ml,輕輕混勻,于室溫下靜置1分鐘。3. 再滴入2滴*2凝聚胺溶液,輕輕混勻,于室溫下靜置 15秒。4. 3400rpm離心1分鐘,然后把上清液倒掉,管底保留大約0.1ml的液體。5. 目測(cè)紅細(xì)胞有無(wú)變成凝塊,如果沒(méi)有凝塊,則必須重做,(請(qǐng)看注意事項(xiàng) 6)。重做后仍然沒(méi)有凝集現(xiàn)象出現(xiàn),可能試劑失效。6. 各滴入2滴*3復(fù)懸液,并輕輕混勻,觀察結(jié)果。若為凝聚胺引起的非免疫性凝集,應(yīng) 該在1分鐘內(nèi)散開(kāi);若是異體抗體所引起的免疫性凝集,則不會(huì)散開(kāi)。7. 倒在玻片上用顯微鏡觀察有無(wú)凝集。如有凝集反應(yīng),表示不合,此供血者的血液不適 合病
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