吩噻嗪類藥物分析

1、藥物分析指導(dǎo)教師：姜艷麗所屬院系：理學(xué)院年 級(jí)：09級(jí) 班 級(jí)：化學(xué)一班姓 名：劉鑫澤學(xué) 號(hào)：090521112012.04.24吩噻嗪類藥物一、基本結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與典型藥物吩噻嗪類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有共同的硫氮雜蒽母核，結(jié)構(gòu)差異：母核2位上的R取代基，通常為H、Cl、CF3、COCH3、SCH2CH3等；10位上的R取代基，則為具有2-3個(gè)碳鏈的二甲或二乙胺基，或?yàn)楹s環(huán)如哌嗪和哌啶的衍生物等。臨床上使用的本類藥物多為其鹽酸鹽。 （二）主要化學(xué)性質(zhì)1.具有紫外和紅外吸收光譜特征本類藥物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)的系統(tǒng)所產(chǎn)生。一般具有三個(gè)峰值，即在204nm209nm（205

2、nm附近）、250nm265nm（254nm附近）、和300nm325nm（300nm附近）。最強(qiáng)峰多在250nm265nm（為2.5×1043×104）；兩個(gè)最小吸收峰則在220nm及280nm附近。2位上的取代基（R）不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移。例如2位上鹵素的取代（Cl及CF3）可使吸收峰向紅移2nm4nm，同時(shí)會(huì)使250nm265nm區(qū)段的峰強(qiáng)度增大。R引起吸收峰位移，可能是通過對(duì)位效應(yīng)影響三環(huán)系統(tǒng)的S，而間位效應(yīng)又影響三環(huán)系統(tǒng)的N所發(fā)生的。因此，利用其紫外特征吸收可進(jìn)行本類藥物的鑒別。本類藥物母核的硫?yàn)槎r(jià)，易氧化，其氧化產(chǎn)物為亞砜及砜，與未取代的吩噻嗪母核的吸收

3、光譜有明顯不同，它們具有四個(gè)峰值。因此，可以利用紫外吸收光譜的這些特征測定藥物中雜質(zhì)氧化物存在的量；同時(shí)也可在藥物含量測定時(shí)對(duì)氧化產(chǎn)物的干擾進(jìn)行校正。吩噻嗪類藥物取代基R和R的不同，產(chǎn)生不同的紅外吸收光譜，國內(nèi)外藥典已用于本類藥物較多品種的鑒別。2.易氧化呈色吩噻嗪類藥物遇不同氧化劑例如硫酸、硝酸、三氯化鐵試液及過氧化氫等，其母核易被氧化成自由基型產(chǎn)物和非離子型產(chǎn)物（砜、亞砜、3羥基吩噻嗪）等不同產(chǎn)物，隨著取代基的不同，而呈不同的顏色。（可用于鑒別）3.與金屬離子絡(luò)合呈色母核中未被氧化的S原子，可與金屬離子（如Pd2+）形成有色絡(luò)合物，其氧化產(chǎn)物砜和亞砜則無此反應(yīng)。利用此性質(zhì)可進(jìn)行鑒別和含量測

4、定，并具有專屬性，可排除氧化產(chǎn)物的干擾。二、鑒別試驗(yàn)（一）紫外特征吸收和紅外吸收光譜國內(nèi)外藥典中常利用本類藥物紫外吸收光譜中的max、min進(jìn)行鑒別；以及同時(shí)利用最大吸收的吸收度或百分吸收系數(shù)進(jìn)行鑒別。中國藥典用IR鑒別的有：奮乃靜、癸奮乃靜、鹽酸三氟拉嗪和鹽酸二氧丙嗪等藥物。（二）顯色反應(yīng)1.氧化劑氧化顯色吩噻嗪類藥物可被不同氧化劑如硫酸、硝酸、過氧化氫等氧化而呈色，反應(yīng)情況列于表。2.與鈀離子絡(luò)合顯色吩噻嗪類藥物分子結(jié)構(gòu)中的未被氧化的二價(jià)能與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物，如與癸氟奮氖靜形成紅色的絡(luò)合物。（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)三、有關(guān)物質(zhì)檢查（一）鹽酸異丙嗪合成工藝與雜質(zhì)的來源 1.合成工藝2

5、.雜質(zhì)的來源異丙嗪合成過程中易產(chǎn)生以下副反應(yīng)：中間體（1-二甲氨基-2-氯丙烷）在強(qiáng)堿性條件下，能形成中間體季銨離子，由于親核性進(jìn)攻，轉(zhuǎn)位成2-二甲氨基碳正離子，水解為2-二甲基-1-丙醇。異構(gòu)體鹽酸鹽在丙酮中溶解度大，多留存在母液中，雖經(jīng)丙酮精制步驟的處理，但也難以除掉，加上吩噻嗪母體，均可帶入成品藥物中。此外，異丙嗪不太穩(wěn)定、易氧化，因其貯存不當(dāng)或存放時(shí)間過長，可能會(huì)產(chǎn)生分解產(chǎn)物。因此，采用薄層色譜法高低濃度對(duì)比法檢查，上述異構(gòu)體、吩噻嗪母體及分解產(chǎn)物等雜質(zhì)均能檢出，檢出靈敏度為0.5g. （二）檢查方法取本品，加二氯甲烷制成每1ml中含10mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，加二氯

6、考，試大收集整理甲烷制成每1ml中含0.15mg和0.05mg的溶液，作為對(duì)照溶液（1）和（2）。吸取上述三種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以己烷-丙酮-二乙胺（8.5：1：0.5）為展開劑，展開后，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于3個(gè)；其雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照溶液（2）的主斑點(diǎn)比較，不得更深；如有一點(diǎn)超過，應(yīng)不得深于對(duì)照溶液（1）的主斑點(diǎn)。注意點(diǎn)：異丙嗪遇光不穩(wěn)定，上述檢查應(yīng)在避光條件下操作；溶液應(yīng)臨用時(shí)配制，否則雜質(zhì)斑點(diǎn)增多。四、含量測定（一）非水溶液滴定法吩噻嗪類藥物母核上10位取代基的烴胺-NR2、哌嗪基及哌啶基具有堿性，可在非水介質(zhì)中

7、以高氯酸-冰醋酸液滴定。吩噻嗪類原料藥物國內(nèi)外藥典多采用非水堿量法測定，所用溶劑除酸性溶劑如醋酸、醋酐外，也有采用中性或近中性溶劑的，如丙酮、二氧六環(huán)、乙腈等。.注意點(diǎn)：當(dāng)某些吩噻嗪類藥物在冰醋酸和醋酸汞介質(zhì)中用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定時(shí)，往往會(huì)產(chǎn)生紅色的氧化物，干擾結(jié)晶紫指示劑終點(diǎn)顏色變化的觀察?？杉尤肟箟难嵯蓴_，而且不影響終點(diǎn)顏色變化的敏銳度。因抗壞血酸及其氧化后的產(chǎn)物去氫抗壞血酸，對(duì)高氯酸是中性的，不干擾測定；當(dāng)用電位法指示終點(diǎn)時(shí)，加抗壞血酸可使滴定終點(diǎn)的電位突躍更為敏銳。片劑與注射液，因其賦形劑與穩(wěn)定劑或助溶劑的干擾，不能直接測定，需堿化提取后再用本法測定。（二）紫外分光光度法吩噻嗪類藥

8、物基于母核三環(huán)系統(tǒng)產(chǎn)生紫外特征吸收光譜，在其最大吸收波長處測定吸收度，利用百分吸收系數(shù)計(jì)算；或與對(duì)照品溶液同時(shí)測定，計(jì)算含 量。此法多用于本類藥物制劑的含量測定。 1.直接分光光度法（1）鹽酸異丙嗪片的測定方法：取本品10片，除去糖衣后，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸異丙嗪12.5mg），置200ml量瓶中，加鹽酸溶液（91000）適量，振搖15分鐘使鹽酸異丙嗪溶解，再加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，在249nm的波長處測定吸收度，按C17H20N2S×HCl的吸收數(shù)（）為910計(jì)

9、算，即得。（2）鹽酸異丙嗪注射液的含量測定1）測定波長的選擇：鹽酸異丙嗪注射液處方中加有維生素C作抗氧劑，可還原異丙嗪紅色自由基氧化產(chǎn)物，從而防止異丙嗪氧化變色，采用本法測定時(shí)，因維生素C在鹽酸異丙嗪max249nm處有吸收，干擾注射液的測定。故選用299nm波長測定鹽酸異丙嗪注射液的含量，此波長處測定時(shí)，維生素C則不干擾。2）測定方法：精密量取本品2ml，置100ml量瓶中，用鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，于1cm吸收池中，在299nm的波長處測定吸收度，按C17H20N2S×HCl的吸收數(shù)（）為108計(jì)算，即得。 2.萃取后分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液的測定方法為：精密量

10、取本品適量（約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪100mg），以鹽酸液（0.1mol/L）稀釋至500ml.分取上述溶液5ml，置分液漏斗中，加水20ml，加氨水呈堿性，用乙醚振搖提取4次，每次25ml.合并乙醚液，用水洗滌2次，每次10ml，合并洗液，用乙醚20ml提取，棄去洗液。合并前后兩次得到的乙醚液，分4次用鹽酸液（0.1mol/L）萃取，每次25ml.合并酸液，并稀釋制成0.0005%濃度的溶液。以鹽酸液（0.1mol/L）作空白，用分光光度計(jì)，在254±1nm處測定，以鹽酸氯丙嗪為915，計(jì)算供試品中鹽酸氯丙嗪的量，即得。3.二階導(dǎo)數(shù)分光光度法 4.萃取-雙波長分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液的

11、測定采用此法，為USP（23）收載的方法，主要用來考試，大收集整理校正樣品中氧化產(chǎn)物對(duì)測定的干擾。氯丙嗪：max254nm，onlyA254nm氧化產(chǎn)物：A254nm=A277nm因此，DA=（A254nm+A254nm）-A277nm=A254nmaC測定方法精密量取鹽酸氯丙嗪注射液適量（約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪100mg），置500ml量瓶中，加鹽酸液（0.1mol/L）至刻度，搖勻；精密量取10ml，置250ml分液漏斗中，加水20ml，用濃氨溶液堿化。用乙醚提取4次，每次25ml.合并乙醚液，用鹽酸液（0.1mol/L）提取4次，每次25ml.合并酸提取液于250ml量瓶中，通入空氣驅(qū)盡殘留

12、乙醚，加鹽酸液（0.1mol/L）至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取鹽酸氯丙嗪對(duì)照品適量，精密稱定，用鹽酸液（0.1mol/L）溶解并稀釋制成8g/ml的對(duì)照品溶液，以鹽酸液（0.1mol/L）為空白，分別于254nm及277nm波長處同時(shí)測定上述供試品溶液與對(duì)照溶液的吸收度，按下式計(jì)算：鹽酸氯丙嗪含量（mg/ml）12.5C（A254A277）uV（A254A277）s式中，12.5為稀釋體積及濃度單位換算因數(shù)；C為對(duì)照品溶液濃度（g/ml）；V為取樣量（ml）；U表示供試品溶液；S表示對(duì)照溶液。（3） 鈰量法 基于吩噻嗪類藥物具有較強(qiáng)的還原性，在適當(dāng)酸度下，可用硫酸鈰標(biāo)準(zhǔn)液定量氧化。 滴定

13、開始時(shí)，吩噻嗪類藥物首先去一個(gè)電子形成一種紅色的自由基離子，到達(dá)終點(diǎn)時(shí)，被測吩噻嗪均失去兩個(gè)電子，現(xiàn)時(shí)紅色消褪，借以指示終點(diǎn)。此法也可采用電位法或永停法指示終點(diǎn)。反應(yīng)如下： 采用本法時(shí)，最佳滴定酸度：鹽酸氯丙嗪為0.05-0.5mol/l，鹽酸異同仁嗪為0.6-0.7mol/l，在此酸度下，片劑輔料無干擾。本法既可用于原料，變可用于片劑的含量測定。 鹽酸氯丙嗪及其片劑的測定： 取本品約0.2g(或相當(dāng)于0.2g鹽酸氯丙嗪的片粉,精密稱定,加水20ml與稀硫酸(約1mol/l)10ml，溶解，立即用硫酸鈰液（0.1mol/l）滴定,至形成的紅色消失,即得。每1ml的硫酸鈰滴定液（0.1mol/l

14、）相當(dāng)于17.77mg的C17H19ClN2S·HCl(分子量355.33)。（四）比色法鈀離子比色法，鐵鹽比色法.吩噻嗪類藥物可與一些金屬離子（如Pd2+）在適當(dāng)PH值的溶液中形成有色配位化合物，借以進(jìn)行比色測定。如丙嗪、氯丙嗪 和異丙嗪在PH2的緩沖液中，可與Pd2+形成紅色配位化合物，在500nm波長附近有最大吸收10min后呈色完全，呈色可穩(wěn)定2h左右。在反應(yīng)過和中，溶液的液性變化對(duì)呈色強(qiáng)度有景響，故反應(yīng)多采用在PH2+0.1的緩沖液中進(jìn)行。當(dāng)用對(duì)照品同時(shí)進(jìn)行測定時(shí)，則無需嚴(yán)格控制溶液的PH值。鈀離子比色法的優(yōu)點(diǎn)在于：可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪類藥物的測定，因Pd2+僅與未氧化的硫共價(jià)，故專屬性較強(qiáng)。 使用氯化鈀作為顯色試劑時(shí)，其缺點(diǎn)是：所行成的配位化合物的溶解度較小，當(dāng)供試品量較大時(shí)，易出現(xiàn)混濁，影響測定。若采用使二烷基硫酸酯鈀鹽，則可增大有色配位化合物的溶解度，且靈敏度亦有所提高。 本法已為usp(23)所收載，用于奮乃靜 鹽酸奮乃靜的片劑 口服劑等的含量測定。參考文獻(xiàn)：1、血樣中吩噻嗪