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1、生物制藥工藝學(xué)重點(diǎn)知識(shí)1、 名詞解釋1、物理吸附:吸附劑和吸附物之間的作用力是通過(guò)分子間引力產(chǎn)生的吸附。2、鹽析 :向溶液中加入一定量的中性鹽,使目的物或雜蛋白以沉淀的形式析出。3、雙水相 :由兩個(gè)水相組成的分層體系。4、濃差極化:外源壓力迫使分子量較小的溶質(zhì)通過(guò)薄膜,而使大分子被截留在薄膜表面,并逐漸形成濃度 梯度。5、超臨界流體:指處于超臨界溫度和超臨界壓力以上的特殊液體。6、萃取 :利用化合物在兩種互不相容的溶劑中溶解度的不同,使化合物從一種溶劑中轉(zhuǎn)移到另一溶劑。7、臨界膠束濃度:膠束形成時(shí)所需表面活性劑的最低濃度。8、親和層析:利用生物體中多數(shù)大分子物質(zhì)具有與某些相應(yīng)的分子專一性可逆結(jié)
2、合的特性而建立的分離純 化技術(shù)。9、過(guò)飽和溶液:溶質(zhì)濃度超過(guò)溶解度時(shí),該溶液稱為過(guò)飽和溶液。2、 填空題1、 發(fā)酵液常用的固液分離方法 -過(guò)濾 -和-離心分離。2、 離心分離的類型可分為-萃取分離法-、固相析出分離法-和-吸附分離法-。3、 影響鹽析的因素-無(wú)機(jī)鹽種類-、-溶質(zhì)種類-、-蛋白質(zhì)濃度-、-溫度-、PH-。4、 離子交換層析中,洗脫方法是-靜態(tài)洗脫-、-動(dòng)態(tài)洗脫-。5、 在分子篩凝膠層析中,當(dāng)Kd=0 時(shí),為-全排阻-,Kd=1時(shí),為-全滲透-,當(dāng)Kd=(01)時(shí),為 部分滲透。6、 離子交換劑的組成分為:-骨架部分-、活性基團(tuán)-、-可交換例子-。7、 鹽析操作的常用方法-分層鹽析
3、法-、-重復(fù)鹽析法-、反抽提法-。8、 采用離心沉降進(jìn)行分離時(shí),離心機(jī)轉(zhuǎn)速為1800r/min,則距轉(zhuǎn)軸20cm處的離心強(qiáng)度為-2012.4g-。9、 超臨界流體的特點(diǎn)是:與氣體有相同的-黏度-,和液體有相同的-密度-。10、 常見(jiàn)的膜分離方法:-透析-、超濾技術(shù)-、-微孔膜過(guò)濾技術(shù)-。3、 不定項(xiàng)選擇1、 當(dāng)兩種不同聚合物的溶液相混合時(shí),有可能存在哪些情況( AC )【答案不確定】 A.完全混溶 B.相分離 C.凝聚 D.不確定 E.與兩者比例有關(guān) 2、 離心沉降設(shè)備有( BDE )【答案不確定】 A.瓶式離心機(jī) B.管式離心機(jī) C.多室式離心機(jī) D.碟片式離心機(jī) E螺旋離心機(jī)3、 在膜分離
4、過(guò)程中,采用非對(duì)稱膜,其優(yōu)點(diǎn)是( ABE )【答案不確定】 A.提高通量 B.增加機(jī)械強(qiáng)度 C.容量賭塞 D.提高分離精度 E.提高收率4、 乙醇作為有機(jī)溶劑沉淀蛋白過(guò)程中,哪些因素影響沉淀效果( ABCDE ) A.溫度 B.乙醇濃度 C.PH D.蛋白質(zhì)種類 E.蛋白質(zhì)濃度5、 影響高速晶體大小的因素有( ACD )【答案不確定】 A.過(guò)飽和度 B.溫度 C.攪拌速度 D.晶種 E.壓力6、 濃度為0.3 mol/L 的(NH4)2SO4溶液的離心強(qiáng)度為( A )【答案不確定】 A. 0.9 mol/L B. 0.6 mol/L C. 0.3 mol/L D. 1.8 mol/L E.不確
5、定7、 Cohn 公式中,與K有關(guān)的因素為( DE ) A.溫度 B.PH C.離子強(qiáng)度 D.蛋白種類 E.鹽的種類9、 反膠束萃取過(guò)程中,影響效率的因素有( ABCDE )【答案不確定】 A.PH B.溫度 C.表面活性劑種類 D.離子強(qiáng)度 E.親和反膠束萃取10、 以靜壓力差為推動(dòng)的膜分離過(guò)程有( ABD )【答案不確定】 A.微濾 B.超濾 C.納濾 D.反滲透 E.膜蒸餾12、影響粒子在離心力場(chǎng)中沉降速度的因素有( )【答案不確定】 A.粒子大小 B.粒子形狀 C.料液黏度 D.轉(zhuǎn)速 E.轉(zhuǎn)軸半徑13、 在有機(jī)萃取過(guò)程中,為消除乳化現(xiàn)象可采用的措施有( ABDE )【答案不確定】 A.
6、稀釋 B.加熱 C.攪拌 D.改變PH E.加熱電解質(zhì) 16、鹽析公式中,與K有關(guān)的因素為( DE ) A.溫度 B.PH C.離子強(qiáng)度 D.蛋白種類 E.鹽的種類20、采用密度梯度離心的作用是( ABCD ) A.提供良好的分離環(huán)境 B.增加分離層次 C.提高分辨率 D.減弱對(duì)流影響 E.增加密度4、 問(wèn)答題1、說(shuō)明發(fā)酵液預(yù)處理的目的,并說(shuō)明其主要方法。2、常見(jiàn)的細(xì)胞破碎方法有哪些? 目的:1、改變發(fā)酵液的物理性質(zhì)和降低溶液的粘度,增加固體粒子機(jī)械法:高速勻漿法、高速珠磨法、超聲波震蕩法的粒度等,促進(jìn)從懸浮液中分離固形物的速度,實(shí)現(xiàn)工業(yè)規(guī)模的過(guò)濾;生物法:酶解法、組織自溶法 2、盡可能使產(chǎn)物
7、轉(zhuǎn)入便于以后處理的相中;物理法:干燥法、反復(fù)凍融法、滲透壓沖擊法 3、去除發(fā)酵液中部分雜質(zhì),以利于后續(xù)各步操作?;瘜W(xué)法:加入化學(xué)試劑破壞細(xì)胞壁、制成丙酮粉方法:1、加熱法;2、調(diào)節(jié)懸浮液的pH值;3、去除雜蛋白;4、凝聚和絮凝技術(shù); 3、結(jié)合圖示,簡(jiǎn)述分子篩層析的分離原理。4、簡(jiǎn)述離子交換層析的操作步驟。(使用平衡排除)一個(gè)高聚物分子的流出體積是由在宏觀的流動(dòng)相 1、了解樣品的理化性質(zhì);和微觀的孔體積中的平衡分配系數(shù)所決定的,即擴(kuò)散平衡。即溶2、選擇填料;質(zhì)分子擴(kuò)散進(jìn)入一個(gè)填料顆粒的孔中且再出來(lái)所需要的時(shí)間遠(yuǎn)小 3、樹(shù)脂的選擇;(根據(jù)被分離物質(zhì)和分離目的)于溶質(zhì)區(qū)段在此停留的時(shí)間。即當(dāng)溶質(zhì)流過(guò)
8、一個(gè)填料顆粒這段距 4、樹(shù)脂預(yù)處理;(去雜過(guò)篩,酸堿酸或堿酸堿處理)離時(shí),溶質(zhì)分子已多沉進(jìn)出于填料的孔,達(dá)到平衡。 5、裝柱、上樣、洗脫、分離5、寫(xiě)出三級(jí)逆流萃取工業(yè)流程圖。 6、繪制結(jié)晶過(guò)程中的飽和曲線和過(guò)飽和曲線圖,并簡(jiǎn)述其意義。結(jié)晶過(guò)程中的飽和溫度曲線和不飽和溫度曲線的簡(jiǎn)圖 如右圖所示S-S曲線為飽和溫度曲線,在其下方為穩(wěn)定區(qū),在該區(qū)域溶液為不飽和溶液,不會(huì)自發(fā)結(jié)晶;T-T曲線為過(guò)飽和溫度曲線,在其上方為不穩(wěn)定區(qū),能夠自發(fā)形成結(jié)晶;S-S曲線和T-T曲線之間為亞穩(wěn)定區(qū),在該區(qū)域,溶液為過(guò)飽和溶液,但若無(wú)晶種存在,也不能自發(fā)形成晶體。7、簡(jiǎn)述分子篩層析操作步驟。1、樣品濃度控制;2、凝膠選擇(粒度);3預(yù)處理(溶脹);4、層析柱選擇;5、凝膠柱裝填6、 上柱;7洗脫;8、收集。5、 計(jì)算題1、 青霉素在0和PH=2.5 時(shí)的分配系數(shù)(醋酸丁酯/水)為35,若用1/4體積
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