川芎嗪治療實(shí)驗(yàn)性腎損傷機(jī)理的研究

1、川芎嗪治療實(shí)驗(yàn)性腎損傷機(jī)理的研究                                    作者：譚洪華 李 霞 薄愛(ài)華 邢立強(qiáng) 薛貴平【摘要】  目的：觀察川芎嗪治療實(shí)驗(yàn)性免疫性腎損傷作用和機(jī)理，為中藥治療腎小球腎炎開(kāi)辟新途徑

2、。方法：豬血清腹腔注射8周，復(fù)制大鼠實(shí)驗(yàn)性腎損傷模型，川芎嗪治療4周后處死動(dòng)物，檢測(cè)尿蛋白、血清BUN和Scr含量，取腎組織制作光、電鏡標(biāo)本檢查。結(jié)果：川芎嗪大、小劑量組尿蛋白、血清BUN和Scr含量較模型組明顯降低（P<0.01），腎小球的病理形態(tài)學(xué)改變較模型組輕。結(jié)論：川芎嗪具有治療大鼠實(shí)驗(yàn)性免疫性腎損傷的作用。 【關(guān)鍵詞】  川芎嗪；腎損傷；藥理學(xué)；疾病模型；大鼠    【ABSTRACT】  Objective: To further investigate possible ways for treating immune re

3、nal injury by traditional Chinese medicine Tetramethylpyrazine(T). Methods: Rats were administrated intraabdominally fresh swine serum to induce immune renal ingury model and then were treated with Tetramethylpyrazine respectively. Urine protein (UP), serum BUN and Scr were measured and the kidney s

4、pecimens were taken from abdomen and prepared for light and electron microscopic examiniation.Results: The above UP and serum parameters in T group did have significant differences with that of model control group（P<0.01）. Light and electron microscopic examiniation showed that, compared with mod

5、el control group, no obvious pathological changes were found in the kidney of T group. Conclusion: Tetramethylprazine has the effect of anti immune renal injury in rats.    【KEY WORDS】  Tetramethylprazine; Renal injury; Pharmacology; Disease model; Rat    免疫性腎損傷是腎小

6、球腎炎常見(jiàn)的病理類型，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)本病尚缺乏滿意的治療方法。川芎嗪（Tetramethylpyrazine,TMP）是從傘形科植物川芎（Ligusticum chuanxiong Hort）中提取分離的一種生物堿單體。為了探討中藥在抗腎損傷中的作用及機(jī)制，特復(fù)制免疫性腎損傷動(dòng)物模型，用川芎嗪注射液進(jìn)行治療，旨在擴(kuò)大川芎嗪用途，為臨床有效治療腎小球腎炎提供理論依據(jù)。    1  材料與方法    1.1  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物    健康Wistar大鼠48只，雌雄并用，分籠飼養(yǎng)，體重150175g，

7、由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。    1.2  動(dòng)物模型制作    取新鮮豬血液，離心制備血清，紫外線消毒。參照豬血清注射法1及血清病腎炎模型2,3復(fù)制免疫性腎損傷模型：鮮豬血清0.7mL腹腔注射每周2次，連續(xù)8 周，尿蛋白定性為（+）以上者確定為腎損傷大鼠模型。    1.3  方法    1.3.1  分組    大鼠隨機(jī)分為四組：正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、川芎嗪大劑量治療組與川芎嗪小劑量治療組，每組各12只。&

8、#160;   1.3.2  給藥    正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給生理鹽水0.4mL/kg腹腔注射，1次/d；后兩組用川芎嗪注射液進(jìn)行治療，大劑量治療組0.4mL/kg；小劑量治療組0.2mL/kg，1次/d，共治療4 周。    1.3.3  指標(biāo)測(cè)定  各組大鼠分別在造模前、造模后、治療后測(cè)定24h尿蛋白含量（磺基水楊酸比濁法）。斷尾取血測(cè)定血清BUN和Scr，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明測(cè)定。治療結(jié)束后取腎組織常規(guī)制作石蠟及電鏡切片。    

9、0;                            1.3.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理    全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示，組內(nèi)前后比較用t檢驗(yàn)，組間比較用單因素方差分析，所用統(tǒng)計(jì)軟件為SPSS10.0。    2  結(jié)果   

10、; 2.1  川芎嗪對(duì)大鼠尿蛋白的影響（見(jiàn)表1）    模型組大鼠尿蛋白含量顯著高于正常組（P<0.01），川芎嗪大、小劑量組治療后尿蛋白含量顯著低于模型組（P<0.01）。    2.2  川芎嗪對(duì)大鼠血清BUN、Scr的影響（見(jiàn)表2、表3）表1  各組大鼠不同時(shí)期的尿蛋白定量變化注：*與正常組比較P<0.01; 與模型組比較P<0.01; 與治療前比較P<0.05，P<0.01 表2  各組大鼠不同時(shí)期的血清BUN含量變化注：*與正常組比較P<0.0

11、1; 與模型組比較P<0.01; 與治療前比較P<0.05，P<0.01表3  各組大鼠不同時(shí)期的血清Scr含量變化（注：*與正常組比較P<0.01; 與模型組比較P<0.01; 與治療前比較P<0.01    模型組的血清BUN含量較正常組明顯升高（P<0.01），川芎嗪大、小劑量組治療后BUN含量較模型組明顯降低（P<0.01）。模型組的血清Scr含量較正常組明顯升高（P<0.01），川芎嗪大、小劑量組治療后Scr含量較模型組明顯降低（P<0.01）。    2

12、.3  腎臟組織光、電鏡觀察    光鏡下模型組腎小球系膜細(xì)胞和基質(zhì)增生，系膜區(qū)增寬，其間常有數(shù)量不等的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，上皮細(xì)胞增生，形成新月體，腎小體毛細(xì)血管淤血；大劑量治療組腎小體水腫不明顯，各部分結(jié)構(gòu)清晰；小劑量治療組可見(jiàn)灶性腎小球毛細(xì)血管淤血。電鏡下模型組腎小球內(nèi)皮及上皮細(xì)胞顯著腫脹變性，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，形成大空泡，基底膜增厚或厚薄不一，在基底膜表面呈駝峰狀或小丘狀隆起，足突融合，局部裂孔消失，膜下可見(jiàn)電子密度高的沉積；大劑量治療組腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞及足細(xì)胞水腫消失，足突及裂孔較清晰，駝峰消失，但仍有基底膜厚薄不一的現(xiàn)象；小劑量治療組與模型組近似，未

13、見(jiàn)明顯改善。    3  討論    結(jié)果顯示，川芎嗪對(duì)免疫性腎損傷大鼠濾過(guò)膜有保護(hù)作用，可顯著減少尿蛋白；明顯改善腎功能，使血清BUN、SCr含量降低；腎小球的病理形態(tài)學(xué)改變亦較模型組輕，表明中藥川芎嗪具有抗免疫性腎損傷的作用，其作用機(jī)制具體表現(xiàn)在以下2個(gè)方面。    3.1  促進(jìn)腎小球?yàn)V過(guò)屏障的修復(fù)  腎小球的濾過(guò)膜由毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、基底膜和臟層上皮細(xì)胞共同構(gòu)成，是原尿形成必須通過(guò)的途徑，生理狀態(tài)下對(duì)濾過(guò)物質(zhì)的分子大小具有選擇性，蛋白質(zhì)幾乎不能通過(guò)。當(dāng)致病因素引起腎小

14、球病變時(shí)，會(huì)影響濾過(guò)膜的屏障作用，通透性增加，使大分子物質(zhì)得以通過(guò)，從而導(dǎo)致蛋白尿大量漏出。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，川芎嗪有助于大鼠腎小球?yàn)V過(guò)膜功能的恢復(fù)，對(duì)腎小球?yàn)V過(guò)膜損傷的修復(fù)有促進(jìn)作用，并能促進(jìn)上皮細(xì)胞的再生與修復(fù)。川芎嗪對(duì)濾過(guò)膜的修復(fù)作用是其治療免疫性腎損傷、消除蛋白尿的重要機(jī)理之一。    3.2  改善腎功能  腎小球炎癥時(shí)，腎內(nèi)血栓素A2 （TXA2）合成增多，而與其作用相反的前列環(huán)素I2 （PGI2）合成減少4。TXA2/PGI2是前列腺素代謝中一對(duì)互相制約、調(diào)節(jié)生理功能的重要因子。一旦平衡失調(diào)，必引起多種病理變化的產(chǎn)生?，F(xiàn)已證實(shí)TXA

15、2在腎炎中有著一定的作用，它可減少腎血流量及腎小球?yàn)V過(guò)率、促使腎微血栓形成。實(shí)質(zhì)上，TXA2的上升對(duì)腎小球?yàn)V過(guò)屏障的損壞起正反饋?zhàn)饔?。因此，設(shè)法阻止TXA2 的產(chǎn)生，糾正TXA2/PGI2 的比值失衡，則能達(dá)到減輕腎炎損傷的目的。川芎嗪能對(duì)抗TXA2的產(chǎn)生，促進(jìn)PGI2的生成，并能增加腎血流量，改善腎功能。本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒MBUN與Scr 含量進(jìn)行性增加，與正常組差異明顯；川芎嗪大劑量組治療后BUN、Scr明顯降低，與正常組無(wú)明顯差異；川芎嗪小劑量組治療后BUN明顯降低，與正常組比較仍較高，差異明顯，Scr明顯降低，與正常組無(wú)明顯差異，說(shuō)明川芎嗪能改善免疫性腎損傷大鼠的腎功能。【參考文獻(xiàn)】  1 于世瀛，賁長(zhǎng)恩，楊美娟,等.免疫性和化學(xué)性損傷肝纖維化動(dòng)物模型的比較J.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理，1995，（12）：5112 賈慧，鄒萬(wàn)忠.改良慢性血清病性大鼠系膜增生性腎炎模型的建立J.腎臟病與透析腎移植雜志，1996，5（3）：21253 Yamamoto T，Kihara I，Morita T，et al.Bovine serum albumin(BSA) nephritis in