第十二章 喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析 課件ppt課件

1、喹啉與青蒿素類抗瘧疾藥物的分析喹啉與青蒿素類抗瘧疾藥物的分析瘧疾簡介以及抗瘧藥瘧疾簡介以及抗瘧藥瘧疾是經(jīng)按蚊叮咬或輸入帶瘧原蟲者的血液而感染瘧原蟲所引起的蟲媒傳染病。寄生于人體的瘧原蟲共有四種，即間日瘧原蟲，三日瘧原蟲，惡性瘧原蟲和卵形瘧原蟲。在我國主要是間日瘧原蟲和惡性瘧原蟲；其他二種少見，近年偶見國外輸入的一些病例。不同的瘧原蟲分別引起間日瘧、三日瘧、惡性瘧及卵圓瘧。本病主要表現(xiàn)為周期性規(guī)律發(fā)作，全身發(fā)冷、發(fā)熱、多汗，長期多次發(fā)作后，可引起貧血和脾腫大?？汞懰帲阂活愑糜诳刂瓢Y狀，一類用于控制復發(fā)和傳播，一類用于病因性預防。喹啉類藥物分子結構中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，環(huán)上雜原子的反應

2、性能基本與吡啶相同。現(xiàn)以常見的硫酸奎寧、二鹽酸奎寧、磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸氨伯喹為例，就鑒別和檢查的有關問題進行討論。（一典型的藥物結構與物理性質（一典型的藥物結構與物理性質 P315（二主要化學性質（二主要化學性質1.堿性 奎寧為二元生物堿，其中奎寧環(huán)上的氮原子 的堿性較強pKa8.8與強酸形成穩(wěn)定的鹽：而喹啉環(huán)上的氮原子的堿性較弱pKa4.2不能與硫酸成鹽2.旋光性 喹啉類抗瘧疾藥基本都具有手性，硫酸奎寧為左旋體，其比旋度為-237-224。；二鹽酸奎寧也為左旋體。而磷酸哌奎和磷酸咯萘啶不具有手性。3.熒光特性 硫酸奎寧和二鹽酸奎寧在稀硫酸中均顯藍色熒光。4.紫外吸收光譜特征

3、 由于喹啉類藥物分子結構中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，具有共軛體系，可以用紫外吸收光譜的特征鑒別該類藥物。產(chǎn)生熒光的條件剛性平面結構共軛體系取代基和溶劑熒光強度的影響一、喹啉類藥物的基本結構與主要性質一、喹啉類藥物的基本結構與主要性質二、鑒別實驗二、鑒別實驗（一綠奎寧反應（一綠奎寧反應NHONHOClCl2Cl2NOClClNH3NNNONH4O取其水溶液加溴試液0.2ml和氨試液1ml，即顯翠綠色； 加酸至中性顯藍色； 酸性則呈紫紅色； 翠綠色可轉溶于醇、氯仿中不溶于醚。（二光譜特征（二光譜特征1.紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征 由于喹啉類藥物分子結構中含有吡啶與苯由于喹啉類藥物分子結

4、構中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，具有共軛體系，可以用紫外吸收光譜的稠合而成的喹啉雜環(huán)，具有共軛體系，可以用紫外吸收光譜的特征鑒別該類藥物。特征鑒別該類藥物。ChP采用本法鑒定磷酸氯喹、磷酸哌喹、采用本法鑒定磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯胺喹。磷酸咯萘啶和磷酸伯胺喹。示例示例12-2 ChP磷酸氯喹的磷酸氯喹的UV鑒別：取本品，加鑒別：取本品，加0.01mol/L鹽酸鹽酸溶液制成每溶液制成每1ml中含有中含有10ug的的 溶液，照紫外溶液，照紫外-可見分光光度法測可見分光光度法測定，在定，在222nm、257nm、329nm、與、與343nm的波長處有最大吸的波長處有最大吸收。收。2

5、.熒光光譜特征熒光光譜特征 利用硫酸奎寧和二鹽奎寧在稀硫酸溶液中均顯利用硫酸奎寧和二鹽奎寧在稀硫酸溶液中均顯藍色熒光的性質進行鑒別。藍色熒光的性質進行鑒別。示例示例12-5 ChP硫酸奎寧的熒光鑒別：取本品約硫酸奎寧的熒光鑒別：取本品約20mg，加水，加水20ml溶解后，分取溶液溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即顯藍色熒，加稀硫酸使成酸性，即顯藍色熒光。光。3.紅外吸收光譜特征紅外吸收光譜特征 硫酸奎寧、二鹽奎寧、磷酸哌喹、磷酸咯硫酸奎寧、二鹽奎寧、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯胺喹在萘啶和磷酸伯胺喹在ChP中均采用紅外光譜的方法進行鑒別。中均采用紅外光譜的方法進行鑒別。示例示例12

6、-6（三無機酸鹽（三無機酸鹽1.硫酸鹽的鑒別實驗硫酸鹽的鑒別實驗加BaCl2生成白色沉淀，不溶于鹽酸和稀硝酸加HCl不產(chǎn)生沉淀，與硫代硫酸鹽區(qū)別加醋酸鉛生成白色沉淀，溶于醋酸銨或NaOH加二氧化錳，加硫酸潤濕，緩慢加熱，產(chǎn)生氯氣使KI試紙遇淀粉變藍加稀硝酸和硝酸銀生成白色凝乳狀沉淀加銨試液溶解,加硝酸再沉淀2.氯化物的鑒別反應氯化物的鑒別反應3.磷酸鹽反應磷酸鹽反應加硝酸銀生成淺黃色沉淀在銨試液或稀硝酸中均易溶解加氯化銨鎂生成白色結晶性沉淀加鉬酸銨試液與硝酸后,加熱生成黃色沉淀，分別，沉淀在氨試液中溶解三、純度檢查三、純度檢查（一硫酸奎寧（一硫酸奎寧1.酸度酸性雜質酸度酸性雜質 取本品取本品0

7、.2g，加水，加水20ml溶解后，測定溶解后，測定pH值應為值應為5.76.6 。 2.氯仿乙醇不溶物氯仿乙醇不溶物 取本品取本品2g，加氯仿無水乙醇，加氯仿無水乙醇 (2:1) 的混合液的混合液15ml，在，在50加熱加熱10min后，用后，用稱定重量的垂熔坩堝濾過，濾渣用上述混稱定重量的垂熔坩堝濾過，濾渣用上述混合液分合液分5 次洗滌，每次次洗滌，每次10ml ，在，在105 干燥至恒重，遺留殘渣不得過干燥至恒重，遺留殘渣不得過2mg。 3.其他金雞納堿其他金雞納堿 (TLC、HPLC)1.酸度 取本品1.0g，加水25ml溶解，測定pH值應大于2.4。 2.水中不溶物 取本品加水溶解后，

8、稍放置即有黃色不溶物產(chǎn)生,影響品質.3.氯化物 系生產(chǎn)工藝帶入.檢查時為了避免溶液顏色干擾堿使咯萘啶沉淀析出,過濾后進行檢查.4. 甲醛 合成過程中引入5.四氫吡啶 合成過程中引入（二磷酸咯萘啶的純度檢查（二磷酸咯萘啶的純度檢查（一硫酸喹啉含量測定（一硫酸喹啉含量測定非水溶液滴定法非水溶液滴定法溶劑種類 使用范圍常用溶劑酸性有機弱堿冰醋酸堿性有機弱酸二甲基甲酰胺兩性酸/堿甲醇惰性酸/堿甲苯、氯仿、丙酮（BH+BH+）2SO42-+HClO4 2SO42-+HClO4 BH+ClO4- BH+ClO4-+BH+HSO4-+BH+HSO4-游離堿類鹽游離堿類鹽被置換出的弱酸被置換出的弱酸當當HAH

9、A酸性較強時，反應不能定量完成，必須除去或降低酸性較強時，反應不能定量完成，必須除去或降低HAHA的酸性，使反的酸性，使反應順利地完成。應順利地完成。四、含量測定四、含量測定NNH3COHHHCH=CH2HONNH3COHHHCH=CH2HOSO42-+ HClO43H+H+NNH3COHHHCH=CH2HONNH3COHHHCH=CH2HO+H+H+HSO4-ClO4-ClO4-ClO4-（二磷酸氯喹制劑含量測定（二磷酸氯喹制劑含量測定磷酸氯喹用非水溶液滴定法測定含量，但制劑中由于含有輔料，所采用磷酸氯喹用非水溶液滴定法測定含量，但制劑中由于含有輔料，所采用的含量測定方法不同。的含量測定方法

10、不同。示例示例12-10：ChP中磷酸氯喹片含量的紫外中磷酸氯喹片含量的紫外可見分光光度測定法：取本可見分光光度測定法：取本品品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于磷酸氯喹約相當于磷酸氯喹0. 13g),置置200ml量瓶中，加量瓶中，加0. lmol/L 鹽酸溶液適量，充分振搖使磷酸氯喹溶解并鹽酸溶液適量，充分振搖使磷酸氯喹溶解并稀釋至刻度，搖勻稀釋至刻度，搖勻,濾過，精密量取續(xù)濾液濾過，精密量取續(xù)濾液2ml，置，置100ml量瓶中，用量瓶中，用0. lmol/L 鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，照紫外鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法附可見

11、分光光度法附 錄錄IVA)，在在343nm的波長處測定吸光度；另取磷酸氯喹對照的波長處測定吸光度；另取磷酸氯喹對照 品適量，精密稱定，品適量，精密稱定，加加O.lmol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制鹽酸溶液溶解并定量稀釋制 成每成每lml中約含中約含13ug的溶液，同的溶液，同法測定，計算，即得。法測定，計算，即得。五、高效液相法測定人體血液中的氯喹五、高效液相法測定人體血液中的氯喹P323P323青蒿素類藥物的分析青蒿素類藥物的分析青蒿素又名黃蒿素,是我國從菊花科植物黃花蒿中提取分離得到的一個含過氧基團的新型倍半萜內酯青蒿素抗瘧作用有迅速、高效、平安、低毒且與大多數(shù)抗瘧藥無交叉抗性,是一類全新

12、結構的抗瘧藥，為抗瘧藥的研發(fā)提供了新的先導化合物。易產(chǎn)生耐藥性，推薦使用復方青蒿素合成難度較大，藥物的生產(chǎn)仍依賴于天然藥材的提取。OCH3HHHOOCH3H3COO青蒿素一、青蒿素類藥物基本結構與主要性質一、青蒿素類藥物基本結構與主要性質（一典型藥物的結構與物理性質（一典型藥物的結構與物理性質見見P325（二主要化學性質（二主要化學性質氧化性氧化性過氧橋鍵具有氧化性過氧橋鍵具有氧化性旋光性旋光性手性原子手性原子,具有旋光性具有旋光性水解反應水解反應內酯結構，堿性條件下易水解內酯結構，堿性條件下易水解紫外吸收特性紫外吸收特性環(huán)狀結構雖然不具有共軛特性環(huán)狀結構雖然不具有共軛特性,但取但取代基具有一

13、定吸收特性代基具有一定吸收特性青蒿素類藥物的鑒別試驗青蒿素類藥物的鑒別試驗1.呈色反應過氧橋鍵具有氧化性酸性條件下能將碘離子氧化成碘與淀粉指示液顯藍紫色2.羥肟酸鐵反應含內酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件下與羥胺反應生成羥肟酸。在稀酸溶液中與高鐵離子呈色顯紫色2.羥肟酸鐵反應含內酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件下與羥胺反應生成羥肟酸。在稀酸溶液中與高鐵離子呈色顯紫色3.吸收光譜特征紅外，與標準譜圖對照紫外，取代基末端吸收以鑒別，ChP2019未采用使分子中的羧基脫水，增加雙鍵位移，分子縮合反應生成其軛系統(tǒng)，在酸作用下形成陽碳離子鹽而顯色4.香草醛-硫酸反應 5.

14、色譜法HPLC法保留時間定性青蒿素類藥物的含量測定青蒿素類藥物的含量測定含量測定含量測定 青蒿素原料采用高效液相色譜法測定，雙氫青蒿素原料采用高效液相色譜法測定，雙氫青蒿素片采用水解后青蒿素片采用水解后UV法測定。法測定。 示例示例12-24：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈腈-水水42:58 )為流動相；檢測波長為為流動相；檢測波長為 210nm 。取本。取本品和雙氫青蒿素對照品適量，加甲醇溶解并稀釋制成每品和雙氫青蒿素對照品適量，加甲醇溶解并稀釋制成每lml中各約含中各約含lmg的混合溶液，量取注入液相色譜儀，的混合溶液，量取注入液相色譜儀，雙氫青蒿素呈現(xiàn)兩個色譜峰，青蒿素峰與相鄰雙氫青蒿雙氫青蒿素呈現(xiàn)兩個色譜峰，青蒿素峰與相鄰雙氫青蒿素峰的分離度應大于素峰的分離度應大于2.0 ; 理論板按青蒿素峰計算不低理論板按青蒿素峰計算不低于于3000。測定法：取本品約測定法：取本品約25 mg , 精密稱定