(完整word版)高中生物教材選修一必背

1、高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一果酒和果醋的制作1、果酒菌種：附在葡萄皮上的野生型酵母菌（真菌，兼性厭氧，主要出芽生殖還有 胞子生殖）2、在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。CfrHnC6+6O2 +61fcO-> fiCO2+12H2O+a&®13在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。翡C 祖1 二Oe-2c=斗2 CO：斗徽里3、制酒條件：溫度（1825C）,發(fā)酵液缺氧 呈酸性（酵母菌可以生長繁殖，而 其他微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境）。4、葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因：紅葡萄皮的色素進入發(fā)酵液。5、果醋菌種：醋酸菌（原核生物），代謝類型

2、異養(yǎng)需氧型。6、有兩條途徑生成醋酸：當(dāng) 氧氣、糖源 都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷HCOOH H2O7、制醋條件：深層發(fā)酵時，短時間不通氧，醋酸菌死亡。8、流程：挑選葡萄一沖洗一榨汁一酒精發(fā)酵一醋酸發(fā)酵溫度:果酒果醋C2H5O出 O2 一30 35 C。9、裝置：充氣口制酒時關(guān)閉；制醋時，連續(xù)輸入氧氣。排氣口長而彎曲的膠管目的是防止空氣中微生物的污染；開口 向下的目的是排出酒精發(fā)酵時產(chǎn)生的二氧化碳。出料口是用來 取樣檢測。葡萄汁只裝2/3,留1/3空間的目的是讓酵母菌先有氧呼 吸進行繁殖。10、若用瓶子做裝置：制酒時，要每天擰

3、松瓶蓋24時，將瓶口打開，蓋上紗布。11、所有用具清洗后晾干或清洗后用70%的酒精消毒。先沖洗葡萄再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。12、酒精檢驗：酸性（3mol/L的佳SQ）重銘酸鉀-灰綠色。醋酸檢驗：嗅味和品嘗（比較pH）13、從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？榨汁機要清洗干凈，并晾干。發(fā)酵瓶要清洗干凈，用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精消毒，或用洗潔精洗滌。裝入葡萄汁后，封閉充氣口。課題二 腐乳的制作1 、菌種：多種微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等， 主要是毛霉 （真菌，代謝類型是異養(yǎng)需氧型。孢子生殖。）傳統(tǒng)制作毛霉來自空氣；現(xiàn)代生產(chǎn)將優(yōu)質(zhì)毛霉菌種直接接種在豆腐上。2、原理：

4、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、實驗流程：讓豆腐上長出毛霉-加鹽腌制-加鹵湯裝瓶-密封腌制（加鹽之前為前期發(fā)酵，目的是創(chuàng)造條件讓毛霉生長，使毛霉形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同作用，生成腐乳的香氣。）4 、所用豆腐的含水量為70 左右，水分過多則腐乳不易成形。豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。5、溫度:1518C。6、加鹽：逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。控制鹽的用量（豆腐：鹽=5:1 ）：鹽的濃度過低，不足以抑制微生物的生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會影響

5、腐乳的口味。食鹽的作用： 1. 抑制微生物生長，避免腐敗變質(zhì)2. 析出水分，是豆腐變硬3. 調(diào)味7、鹵湯：由酒及各種香辛料配制而成的。8、鹵湯中酒的含量：12%左右。作用：1. 防止雜菌污染2. 賦予腐乳風(fēng)味3. 酒精含量過高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，不足以抑制微生物生長，導(dǎo)致豆腐腐敗。9、香辛料的作用：1. 調(diào)味 2. 殺菌10、防止雜菌污染的措施：玻璃瓶，洗凈后用沸水消毒。加鹵湯后，用膠條將 瓶口密封。封瓶時，將瓶口通過酒精燈的火焰。11、影響腐乳風(fēng)味的因素：鹽、酒、香辛料、豆腐含水量。12、腐乳外部致密的“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的毛霉菌絲，它能

6、形成腐乳的“體”，使腐乳成形。課題三制作泡菜1、菌種：乳酸菌（代謝類型異養(yǎng)厭氧，包括乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用 于生產(chǎn)酸奶。2、流程3、配制鹽水：水：鹽 =4:1 ;煮沸冷卻（殺菌和去除溶解氧）4、用水封閉壇口起什么作用？（保證發(fā)酵的無氧環(huán)境）不封閉有什么結(jié)果？（有氧會抑制無氧呼吸，雜菌污染）5、泡菜腌制過程中，要注意控制腌制時間、溫度和食鹽用量。溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短，易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后亞硝酸鹽含量開始降低，故在 10天之后食用最好。6、亞硝酸鹽：白色粉末，易溶于水，用作食品添加劑。膳食中的絕大部分亞硝酸鹽隨尿排出，只有在特定的條件

7、（適宜的pH、溫度和一定的微生物作用），才會轉(zhuǎn)變成致癌物一一亞硝胺，它對動物還具有致畸和致突變作 用。7、測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重 氮化反應(yīng)后，與 N-1-泰基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色 液目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。提取劑：氯化鎘、氯化銀。氫氧化鋁乳液：吸附泡菜汁中雜質(zhì)，使泡菜汁透明澄清。氫氧化鈉：中和過多的酸，制造弱堿性環(huán)境8、含抗生素牛奶不能生產(chǎn)酸奶的原因是抗生素殺死乳酸菌。9、醋瓶或啤酒瓶內(nèi)形成的白膜是醋酸菌；泡菜壇內(nèi)的白膜是酵母菌。專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題一 微生物的實驗室培養(yǎng)1 、培養(yǎng)基：人們按照微

8、生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基 質(zhì)。培養(yǎng)基按照 物理性質(zhì) 可分為 液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基和 固體培養(yǎng)基 （加入凝固劑 瓊脂， 在其表面可形成菌落）。按照用途，可分為 選擇培養(yǎng)基 和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，用以鑒別不同類別的微生物。2、培養(yǎng)基的化學(xué)成分：水、無機鹽、碳源、氮源。還要滿足微生物生長對PHH特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。碳源：提供碳元素。如CO2 （自養(yǎng)生物用）、糖類（異養(yǎng)微生物用）。氮源：提供氮元素。如N2 （固氮菌）、NH3

9、（硝化細菌）、NO-、NH4+ （自養(yǎng)微生物）、牛肉膏、蛋白胨（異養(yǎng)微生物）等。特例：培養(yǎng)乳酸桿菌加維生素，培養(yǎng)霉菌須將pH 調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌將pH 調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物需提供無氧條件。3、無菌技術(shù)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，有效避免操作者自身被微生物感染。4、 消毒 指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。分為煮沸消毒法，巴氏消毒法（不耐高溫的液體）、化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。5、 滅菌 是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。分為灼燒滅菌（接種環(huán)、接種針等金屬工具、試管

10、口）、干熱滅菌（吸管、培養(yǎng)皿等玻璃器皿、金屬用具，所用器械是干熱滅菌箱）、高壓蒸汽滅菌（培養(yǎng)基、無菌水等，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋）。滅菌時物品不能擺得太擠，目的是避免妨礙熱氣流通。6、制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基方法步驟：計算、稱量、溶化（包括定容和調(diào)pH）、滅菌、倒平板?！九囵B(yǎng)基在錐形瓶中則是先分裝再滅菌】7、倒平板操作的步驟：拔棉塞f瓶口迅速通過火焰-將培養(yǎng)皿打開一條縫，倒培養(yǎng)基（培養(yǎng)皿的皿蓋始終在手中）-冷卻凝固-倒置平板（從此以后一直倒置）8、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng) 基，造成污染。9、平板劃線法只能得到單個

11、的菌落，不能計數(shù)。劃線時不要將最后一區(qū)的與第一區(qū) 相連。操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少；劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上 殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來 的菌落。10、稀釋涂布平板法不僅能得到單個的菌落，還能計

12、數(shù)。稀釋涂布的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。涂布器浸在酒精中，然后灼燒。11、菌種保存頻繁使用：臨時保藏（接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，4c冰箱，每 36個月，要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。）長期保存：甘油管藏（20 的冷凍箱中）。課題二 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1、尿素：只有當(dāng)土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的細 菌之所以能分解尿素，是因為他們能合成脲酶。2、微生物的篩選應(yīng)用的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫 度、 pH 等），同時抑制或阻止其他微生物生長。3、測定微生物數(shù)量的常用方法：稀釋涂布平板法（一般設(shè)置35個平板，選擇

13、菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)，并取平均值。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目 低，）和顯微鏡直接計數(shù)、濾膜法。4、流程：土壤取樣（在距地表約38cm的土壤層取樣，取樣用具需滅菌）-樣品的稀釋（稀釋程度細菌放線菌 真菌）-微生物的培養(yǎng)與觀察（細菌 3037 C 12天；放線菌 2528 57 天；霉菌 2528 34 天）5、菌落特征：形狀、大小、隆起程度、顏色。6、計算公式：每克樣品中的菌落數(shù)= （ C/V ） *M 其中， C 代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)， V 代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（ ml ）， M 代表稀釋倍數(shù)7、鑒別方法：加酚紅指示劑，變紅（細菌合成的脲酶將尿素

14、分解成氨，pH 升高）課題三 分解纖維素的微生物的分離1、棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，商品纖維素：水溶性的羧甲基纖維素鈉（CMC- Na）、不溶于水的彳晶纖維素（ Avicel ）。2、纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1 酶、CX 酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。3、篩選方法一一剛果紅（CR）染色法。剛果紅與纖維素等多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。一種是先

15、培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應(yīng)（先加CR倒去 CR后再加Nacl,目的是洗去結(jié)合不牢的CR ;另一種是在倒平板時就加入剛果紅（在培養(yǎng)基中加入CR混勻后倒平板）。方法一缺點是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點是顯示出的顏色反應(yīng)的就是纖維素分解菌。方法二的優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點是顯示出的顏色反應(yīng)的可能是纖維素分解菌或淀粉分解菌；另一缺點是：有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯的透明圈，使纖維素分解菌不易區(qū)分。4、分離分解纖維素的微生物的實驗流程土壤取樣（可將濾紙埋在土壤）-選擇培養(yǎng)（此步可省略）-梯度稀釋-將樣品涂布到鑒

16、別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上-挑選產(chǎn)生透明圈的菌落5、對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選后，只是分離純化的第一步，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定。專題三 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題一 菊花的組織培養(yǎng)1、愈傷組織：細胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細 胞。2、脫分化：由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，也叫去分化。3、再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官的過程。4、植物組織培養(yǎng)的基

17、本過程人為使用植物激素控制移植試管苗完整的植物體5、影響植物組織培養(yǎng)的因素材料：植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響實驗結(jié)果。菊花組 織培養(yǎng)一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝。培育無病毒作物，選莖尖分生區(qū)細 胞。營養(yǎng)：MS培養(yǎng)基（含有大量元素、微量元素、有機物）激素：使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先生長素，后細胞分裂素有利于分裂 但不分化先細胞分裂素， 后生長素細胞既分裂 也分化同時使用分化頻率提 高生長素/細胞分裂素比值與結(jié)果比值高時促根分化， 抑芽形成比值低時促芽分化，抑根形成比值適中促進愈傷組織生長環(huán)境條件：PHH溫度、光等。菊花的組織培養(yǎng)，pH5.8,溫度1822C,并且每日用日光燈

18、照射12h。.6、菊花組織培養(yǎng)的操作流程配制MS固體培養(yǎng)基（配制各種母液4c保存，大量元素濃縮 10倍，微量元素濃縮100倍，使用時根據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計算用量；配制培養(yǎng)基，可以不添加植物激 素；高壓蒸汽滅菌）一外植體的消毒（流水沖洗一洗衣粉+軟刷刷洗一流水沖洗20min一無菌吸水紙吸干外植體表面一體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中搖動23次，持續(xù)67s一無菌水清洗一無菌吸水紙吸干外植體表面一質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1 %的氯化汞溶液中12min 一無菌水中至少清洗 3次；既要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力）一接種（無菌操作，形態(tài)學(xué)上端朝上）一 培養(yǎng)（無菌箱，1822C,光照12h） 一移栽（先 打開

19、培養(yǎng)瓶的封口膜，生長幾日；然后用流水清洗根部培養(yǎng)基，移植到消過毒的蛭石或 珍珠巖中進行壯苗。最后露天栽培）一栽培7、微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)。專題二 月季的花藥培養(yǎng)1、花粉發(fā)育過程:2、產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物，另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再將其誘導(dǎo)分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕 對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根；胚狀體又稱為細胞胚。3、影響花藥培養(yǎng)的因素：材料的選擇與培養(yǎng)基的組成是主要的影響因素。親本植株 的生長條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對誘導(dǎo)成功率都有一

20、定影響選初花期、完全未開放的花蕾、單核 （靠邊）期花粉。4、月季的花藥培養(yǎng)過程：材料的選取一材料的消毒一接種和培養(yǎng)選擇花藥用鏡檢法。最常用醋酸洋紅法（紫紅色）、焙花青 -銘磯法（藍黑色）。材料的消毒：花 蕾70%酒精30s-k-尤的水. 清洗T無菌吸水紙 吸干水分,0.1%氯化汞2 4min無菌水 沖洗每瓶接種花藥 710個，溫度25C,pH5.8 ,不需要光照.幼小植株形成后才需要光照。在剝離花藥時，要盡量不損傷花藥（否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織）， 同時還要徹底去除花絲，因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。花藥開裂，若是長出愈傷組織，要將愈傷組織及時轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上

21、，以便進一步 分化出再生植株。若是胚狀體，則一個花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大量幼小植株，須盡快將其分 開，分別移植到新的培養(yǎng)基上，否則這些植株將很難分開。專題四酶的研究與應(yīng)用課題一 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用1 、果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一。不溶于水，化學(xué)本質(zhì)是半乳糖醛酸聚合而成的高分子化合物。2、果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶。果膠酶的作用是能夠?qū)⒐z分解成半乳糖醛酸。3 、植物、霉菌、酵母菌、細菌均能產(chǎn)生果膠酶。霉菌發(fā)酵產(chǎn)生的果膠酶是食品工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一。課題 2 探討加酶洗衣粉的洗滌效果1 、加酶洗衣粉是指含酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有蛋白酶、脂肪

22、酶、淀粉酶和纖維素酶四類。應(yīng)用最廣泛的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。2、脂肪酶可以將脂肪分解成甘油和脂肪酸；蛋白酶可以將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸。課題 3 酵母細胞的固定化1 、酶：對環(huán)境條件敏感，易失活；溶液中的酶很難回收，不能再次利用，提高了生產(chǎn)成本；反應(yīng)后的酶會混合在產(chǎn)物中，影響產(chǎn)品質(zhì)量。2、固定化酶優(yōu)點：使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離；固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。3、固定化細胞優(yōu)點：成本低，操作更容易，對酶影響小，能同時進行一系列反應(yīng)。4、固定化酶的應(yīng)用實例高果糖漿是指果糖含量為42%左右的糖漿。能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是葡萄糖異構(gòu)酶。固定化酶技術(shù)：將酶固定在一種載體上，再

23、將這些酶顆粒裝到一個反應(yīng)柱內(nèi)，柱 子底端裝上分布著許多小孔的篩板。酶顆粒無法通小孔，而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過程中，將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入，使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱，與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成果糖，從反應(yīng)柱的下端流出。5、固定化酶及固定化細胞技術(shù)固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學(xué)方法，將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法（對固定酶的作用影響?。?。酶更適合采用后兩種方法固定，而細胞多采用包埋法固定化。這是因為細胞個大，而酶分子很小；個大的細胞難以被吸附或結(jié)合，而個小的酶容易從包埋材料中漏出。包埋法固定化細胞即將微生物細胞均勻包埋在不溶于水的多孔

24、性載體中。常用的 載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。6、固定化酵母細胞的流程：制備固定化酵母細胞一用固定化酵母細胞發(fā)酵制備固定化酵母細胞的實驗步驟酵母菌的活化一配制 CaCl2溶液一配制海藻酸鈉溶液（小火間斷加熱并不斷攪拌，防 止焦糊，是制作成功的關(guān)鍵步驟）一海藻酸鈉溶液與酵母菌細胞混合（冷卻后）一固定 化酵母細胞（凝膠珠應(yīng)黃色，若白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細胞數(shù)目 較少；若凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高。）用固定化酵母細胞發(fā)酵固定好的凝膠珠用蒸儲水沖洗2-3次一凝膠珠加入葡萄糖溶液，溫度 25 C,時間24h。專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題

25、2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNAt段1、PCR （多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）。PCR儀實質(zhì)上是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器（可用 3個恒溫水浴鍋替代）。2、原理：DNA的熱變性、DNAM制。3、PCR與體內(nèi)復(fù)制的區(qū)別無解旋酶；需耐高溫（Taq） DNAm合酶；用加熱代替 ATR4、PCR勺反應(yīng)過程：變性（90C） 一復(fù)性（50C） 一延伸（72C）5、引物：DNA的羥基（一OH末端稱為 3',而磷酸集團的末端稱為 5'。引物總是以自己的 5'端與模板的3'端配對，DNA的合成方向是從子鏈的 5'端向3'端延伸（即脫氧核昔 酸從引物的3'端連接）。6、為避免

26、污染，使用的儀器和試劑必須進行高壓滅菌。7、PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分成小份，在一20c儲存。在冰塊上緩慢融化。8、DNAft 260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰。計算公式：DN哈量（WL/mL） = 50 x （ 260nm的讀數(shù)）X稀釋倍數(shù)課題3血紅蛋白的提取和分離1 、凝膠色譜法（分配色譜法）：相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢，而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外內(nèi)部移動，路程較短，移動速度較快，從而使相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以分離。2、凝膠：多糖類化合物構(gòu)成的微小的多孔球體，如葡聚糖、瓊脂糖。3 、緩沖液：在一定范

27、圍內(nèi)，抵制外界的酸和堿對溶液pH 的影響，維持 pH 基本不變。H2CO3NaHCO3、NaH2PO4 Na2HPO4、醋酸一醋酸鈉。4、電泳：利用各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身的的大小、形狀的不同，使帶電分子遷移速度不同，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。5、常用的電泳方法有瓊脂糖凝膠電泳法和聚丙烯酰胺凝膠電泳。測定蛋白質(zhì)分子量時通常使用SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDS所帶負電荷量大，掩蓋了蛋白質(zhì)的電荷差別，使電泳遷移率只取決分子大?。?、蛋白質(zhì)的提取和分離流程：樣品處理-粗分離-純化-純度鑒定。7、樣品處理：紅細胞的洗滌（目的：去除雜蛋白；方法：血液+生理鹽水低速 短時離心）血紅蛋白的

28、釋放（加蒸儲水和40%體積的甲苯，攪拌）分離血紅蛋白溶液（離心后，試管分4 層：從上向下第1 層無色透明甲苯層，第2 層為白色薄層固體脂溶性物質(zhì)的沉淀層，第3 層是紅色透明液體血紅蛋白，第 4 層為其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。濾紙過濾，濾液于分液漏斗中靜置，分出下層的紅色透明液體）8、粗分離：即透析，目的除去小分子雜質(zhì)9、純化：即凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)10、純度鑒定：常用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法。11、交聯(lián)葡聚糖凝膠（SephadexG 75）。 G 表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍， 75 表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水7.5g 。12、商品凝膠使用前需直接放在洗脫液中膨脹，并可用沸

29、水浴加熱；裝填凝膠柱時不能有氣泡存在；操作過程中不能發(fā)生洗脫液流干露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。13、加樣前，打開流出口，使緩沖液下降到與凝膠面平齊，關(guān)閉出口。用吸管環(huán)繞管壁加樣，不要破壞凝膠面。專題六 植物有效成分的提取課題一 植物芳香油的提取天然香料的來源：植物、動物（麝、靈貓、海貍、抹香鯨）、真菌。植物芳香油的組成：萜類化合物及其衍生物。芳香油的提取方法：蒸餾、壓榨、萃取等。水蒸氣蒸餾法： （玫瑰精油）原理：水蒸汽可將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來形成油水混合物，冷卻后水油分層。方法：水中蒸餾：原料放在沸水中加熱蒸餾。（最簡便易行）水上蒸餾：原料隔放在沸水上加熱蒸餾。水汽蒸餾：利用外來高溫水蒸氣加熱蒸餾。實驗流程：采集玫瑰花（盛花期），清水清洗瀝干一水蒸氣蒸儲（花：水=1:4 ） 一油水混合,、一， 無水Na2SO4過濾 j ,物NaCl I分離油層> 除水 一j玫瑰油 蒸儲裝置：安裝按照從左向右、自下到上次序；蒸儲完畢，先撤熱源，然后停止通水, 最后拆卸蒸儲裝置，拆卸的順序與安裝時相反。安裝