【創(chuàng)新方案】2014年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第二講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用訓(xùn)練 新人教版選修1

1、【創(chuàng)新方案】2014年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第二講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用訓(xùn)練 新人教版選修1一、微生物的分離與培養(yǎng)1培養(yǎng)基判斷正誤(1)培養(yǎng)基只有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基兩種類型。 (×)(2)培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽四種成分。 ()(3)在配制培養(yǎng)基時(shí)，除滿足營(yíng)養(yǎng)需求外，還應(yīng)考慮pH、氧氣及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求。 ()2無(wú)菌技術(shù)連線 3純化大腸桿菌(1)制備固體培養(yǎng)基的流程：計(jì)算稱量溶化滅菌倒平板。(2) 微生物的接種方法：平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋

2、度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面。二、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)判斷正誤(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。 ()(2)篩選分解尿素的細(xì)菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源。 ()(3)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用平板劃線法。 (×)(4)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍(lán)，則說(shuō)明篩選到分解尿素的細(xì)菌。 (×)三、分解纖維素的微生物的分離1纖維素酶(1)組成：一種復(fù)合酶，它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)作用：纖維素纖維二糖葡萄糖2篩選方法(1)方法：剛果紅染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(2)培養(yǎng)基：以纖

3、維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。3實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣：富含纖維素的環(huán)境 選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量 梯度稀釋 涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍出現(xiàn)透明圈知識(shí)體系構(gòu)建碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子 PH、氧氣等平板劃線法稀釋涂布平板法分解尿素的細(xì)菌,選擇培養(yǎng)基 酒精等化學(xué)藥物 高壓蒸汽滅菌,顯微鏡直接計(jì)數(shù)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)(1)(2011·重慶卷·T2A) 在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌。(×)(2)(2011·重慶卷·T2BC) 在培養(yǎng)基中加入青霉

4、素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)，向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)。(×)(3)(2010·山東卷·T34(2)對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是高壓蒸汽滅菌鍋。實(shí)驗(yàn)前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒處理。() (4)(2009·安徽卷·T6A) 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板()(5)(2009·寧夏卷·T40(2) 在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒。()1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基：概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出

5、供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。分類和應(yīng)用：劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類、鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏種化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類、鑒定用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽)鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種

6、類的微生物，如可用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)要素：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽。此外還要滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源功能碳源無(wú)機(jī)碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無(wú)機(jī)物構(gòu)成細(xì)胞中的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；既是碳源又是能源有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉餅等氮源無(wú)機(jī)氮源NH3、銨鹽、硝酸鹽、N2等將無(wú)機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長(zhǎng)因子維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成分；參與代謝過(guò)

7、程中的酶促反應(yīng)制備：計(jì)算稱量溶化滅菌倒平板。關(guān)鍵一點(diǎn)(1)微生物最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。(2)對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的有機(jī)化合物既是碳源，又是氮源、能源。(3)有些培養(yǎng)基不需要添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，生物自己能合成，如大腸桿菌能合成某些維生素，作為特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(2)微生物培養(yǎng)的無(wú)菌技術(shù)：消毒和滅菌的區(qū)別：使用方法結(jié) 果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法等滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅菌

8、、高壓蒸汽滅菌三種常用滅菌方法的比較：滅菌方法適用材料或用具滅菌條件滅菌時(shí)間灼燒滅菌接種環(huán)、接種針或其他金屬工具酒精燈火焰的充分燃燒層直至燒紅干熱滅菌玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等干熱滅菌箱內(nèi)，160 170 1 h2 h高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基等高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)100 kPa,121 15 min30 min2微生物的純化培養(yǎng)及菌種的保藏(1)原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，即一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。(2)方法：平板劃線法、稀釋涂布平板法。方法平板劃線法稀釋涂布平板法注意事項(xiàng)(1)接種環(huán)的灼燒：第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物每次劃線前：殺死殘留

9、菌種，保證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線末端劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者(2)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進(jìn)行操作，以免溫度太高殺死菌種(1)稀釋操作時(shí)：每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1 cm2 cm處(2)涂布平板時(shí)：涂布器用體積分?jǐn)?shù)為70%酒精消毒，取出時(shí)，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃(3)劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連(4)劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體目的在培

10、養(yǎng)基上形成由單個(gè)菌種繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體菌落培養(yǎng)平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染高考地位微生物的分離、純化和培養(yǎng)是微生物工程應(yīng)用的基礎(chǔ)，是近幾年高考的重點(diǎn)和熱點(diǎn)命題角度(1)以非選擇題的形式呈現(xiàn)，以環(huán)境污染為背景考查培養(yǎng)基及微生物的培養(yǎng)條件等，如典例1；(2)以選擇題的形式考查微生物的培養(yǎng)基的種類及消毒滅菌等基礎(chǔ)知識(shí)，如典例2。典例1某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種、培養(yǎng)及菌落觀察與計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須

11、含有的基本成分是_和_。(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種_作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說(shuō)明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說(shuō)來(lái)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐_細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為_。解析培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。從營(yíng)養(yǎng)角度分析，培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽以及水分等。另外，培養(yǎng)基還應(yīng)具有

12、適宜的pH、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓等。培養(yǎng)基在使用前要進(jìn)行徹底的滅菌，多采用高壓蒸汽滅菌。通過(guò)觀察培養(yǎng)基上菌落的多少，可確定湖水細(xì)菌污染的程度，含高濃度NaCl的培養(yǎng)基可篩選出耐鹽的細(xì)菌，這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。答案(1)氮源(碳源不作要求)碳源無(wú)機(jī)鹽水 (2)高壓蒸汽滅菌 (3)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)菌水 (4)多高 (5)鹽(或NaCl)選擇培養(yǎng)基典例2用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí) ()可以用相同的培養(yǎng)基都需要使用接種針進(jìn)行接種都需要在火焰旁進(jìn)行接種都可以用來(lái)計(jì)數(shù)活菌A B C D解析選C平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，故正確；平板劃線法采用接種

13、針進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作，故錯(cuò)誤；純化時(shí)，要進(jìn)行無(wú)菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，故正確；平板劃線法一般用于分離而不是計(jì)數(shù)，故錯(cuò)誤。微生物的分離與計(jì)數(shù)(1)2010·山東卷·T34(3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。()(2)(2013·太原五中月考(1)要從土壤中分離獲取纖維素分解菌，應(yīng)選用纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。()(3)(2013·許昌二次調(diào)研)在纖維素分解菌培養(yǎng)過(guò)程中，對(duì)培養(yǎng)基和接種環(huán)常采用的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌()(4)2011·山東T34(4)改編

14、透明圈是剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物，可根據(jù)是否出現(xiàn)透明圈來(lái)判斷有無(wú)纖維素分解菌。()(5)(2009·安徽卷·T6D)在“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”的實(shí)驗(yàn)中，確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(×)(6)2009·寧夏卷·T40(3) 若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的比例合適。()1篩選菌株的原理 微生物的選擇培養(yǎng)：在選擇培養(yǎng)基的配方中，把尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源，只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長(zhǎng)；把纖維素作為培養(yǎng)基中的唯一碳源，只

15、有能夠利用纖維素的微生物才能夠生長(zhǎng)；在無(wú)氮源的培養(yǎng)基上，只有自生固氮菌才能夠生長(zhǎng)。2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法： 原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量。 缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。(2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)： 原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。 通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約 含有多少活菌。 操作： a設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)(C÷V)×M，

16、其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。注意：統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。3實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)(1)設(shè)立重復(fù)組：統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時(shí)，要至少涂布3個(gè)平板作重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。(2)對(duì)照原則： 判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染，需將未接種的培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。 判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用，需設(shè)立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目，進(jìn)行對(duì)比得出結(jié)論。(3)在微生物數(shù)量測(cè)定時(shí)，應(yīng)選取具有合適的菌落數(shù)的培養(yǎng)基，如細(xì)菌、

17、放線菌、酵母菌以每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)有30 300個(gè)菌落數(shù)為宜；霉菌以每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)有10100個(gè)菌落數(shù)為宜。小結(jié)選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實(shí)例培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí)，可以分離出固氮微生物，因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存。當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有分離效果。如石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，而使能夠利用石油的微生物生存，得到能消除石油污染的微生物。改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。高考地位近幾年本考點(diǎn)考查頻率不高，但在

18、一些一些省市的非選擇題中有所涉及命題角度考題多以非選擇題的形式出現(xiàn)，微生物的生存及培養(yǎng)結(jié)合在一起考查，通過(guò)生產(chǎn)生活中有關(guān)微生物計(jì)數(shù)、微生物分離與培養(yǎng)等實(shí)際問(wèn)題進(jìn)行考查，如典例3。典例3富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是指利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，制定環(huán)境條件使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長(zhǎng)，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點(diǎn)，從物理、化學(xué)、生物及綜合多個(gè)方面進(jìn)行選擇，如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營(yíng)養(yǎng)等許多方面。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)

19、過(guò)程。 (1)本實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基為_，碳源為_。(2)實(shí)驗(yàn)原理是_。(3)重復(fù)培養(yǎng)的目的是_。(4)的菌落中大部分是降解_的微生物。(5)為_組，為_組，設(shè)置的目的是_。(6) 采用_法，接種到的培養(yǎng)基中，在操作過(guò)程中為防止污染應(yīng)注意的事項(xiàng)是_。解析富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基，可用于具有某種代謝特點(diǎn)的微生物，本題就是為了選擇出能分解對(duì)羥基苯甲酸的微生物。該實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基的碳源為對(duì)羥基苯甲酸；全過(guò)程包括篩選擴(kuò)大培養(yǎng)純化鑒定。答案(1)選擇培養(yǎng)基對(duì)羥基苯甲酸(2)利用以對(duì)羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物(3)增大分解對(duì)羥基苯甲酸微生物的比例(4)對(duì)羥

20、基苯甲酸(5)對(duì)照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明通過(guò)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物(6)單細(xì)胞挑取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻，同時(shí)打開皿蓋挑取菌種接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物 高考隨堂體驗(yàn)1(2012·北京高考)高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是()A. 將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中 B. 將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C. 將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上D. 將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上解析：選C將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上，是植物組織培養(yǎng)的步驟之一，必須進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作，否則會(huì)導(dǎo)致實(shí)

21、驗(yàn)失敗。2(2011·新課標(biāo)全國(guó)卷)有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答問(wèn)題：(1)在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。 (2)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。 (3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說(shuō)明該菌株的降解能力_。 (4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。 解析：(1)篩選目的菌株應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基，可以在這類培養(yǎng)基中加入某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，這就是微生物學(xué)家常用的“投其所好”的策略。(2)平板劃線法和稀釋涂布平板法都可以將聚集在一起的細(xì)菌分散或稀釋成單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)而得到單菌落。(3)目的菌株可分解原油，從而在培養(yǎng)基上形成以目的菌株為中心的分解圈，分解圈越大表明菌株的降解能力越強(qiáng)。(4)常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，酒精燈火焰附近是一個(gè)無(wú)菌區(qū)，故實(shí)驗(yàn)操作在此處進(jìn)行可防止周圍環(huán)境中微生物的污染。答案：(1)原