抗生素效價計算過程強烈推薦

1、USP Cylinder-plate assay美國藥典管碟法一（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）1、美國藥典規(guī)定的管碟法抗生素效價方法簡述：首先制備5個標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（U/ml），分別為SI、S2、S3、S4和S5,其中S3為中間 濃度。除S3外的每個濃度準(zhǔn)備3個碟子，每個碟子放置6個牛津杯，其中不相連的三 個分別加入Si心為1、2、4或5），另外三個不相連的加入S3 o待檢樣品（Unknown）加樣方式如Si,具體放置方法如下圖1：圖仁標(biāo)準(zhǔn)及樣品管碟放置方式圖例Replicate!Replicate?Replicate3SetS1Set S2Set S4Set S5Sample U12、在以上方法的基礎(chǔ)上以具體

2、數(shù)據(jù)進行計算舉例：下表2為按以上方法進行抗生素效價檢測的一組測量結(jié)果:表2：抗生素效價檢測測量結(jié)果表精品.6.25115.816,015.7890-1691.116.616.816.3163780.2331.416.511215315.6曲愀16.51623UJ157曲16916.：V*ZM2511%15.615515.6670.1410.917311017.017.1670.2241317.222215.715.51731A17J315.815.8173U.31&715.72?Unknown11571S.815.7H8G.179M1S.31S.81SJ15.47603072.0153

3、22213515.715,715.fi13.81SJ315515.815315J15.115.11 This is the value of the overa! ref ere nee mear refetred to as the Aorre<ti on pein 匕備注：ZoneK 3、5表示每個平皿中不相連的三個S3的直徑值；Zonc2、4、6表示每個平皿中不相連的三個Si的直徑值;U2表示待測樣品1。2.1進行初始訃算：對于每種濃度的三個平板，分別求出得到的9個中間濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均值以及9個Si 和U1直徑的平均值。例如：15.867= (16.1,15.6,15.8,16.0

4、15.8) 9 個數(shù)據(jù)的平均值14.167= (14.6,14.1,13.5,14.514.1) 9 個數(shù)據(jù)的平均值2.2變異性的適用性檢查：然后求出每三個平板得到的9個數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差(包括標(biāo)準(zhǔn)對照和樣品的)，進而 計算出其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差值(RSD,該值應(yīng)不超過10%)。例如：標(biāo)準(zhǔn)偏差0.200 = s( 16.115.8)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 1.3% = (0.200/15.867) *1002.3進行平板間的差異校正: 計算公式如下。XC = XS-(XR-P)Xc二標(biāo)準(zhǔn)品平均值的校正值Xs二原始的標(biāo)準(zhǔn)品的平均值XR二對照值的平均值P二校正值例如：14.022= 14.167- （15.867-

5、15.722） = 14.167-0.14524建立標(biāo)準(zhǔn)曲線：標(biāo)準(zhǔn)曲線1112.3計算的標(biāo)準(zhǔn)品平均值的校正值Xc和標(biāo)準(zhǔn)品濃度值的對數(shù)值構(gòu) 成。（使用適宜的計算軟件或手動訃算）（注意一一可以使用自然對數(shù)或底數(shù)為10的 對數(shù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線中以確定回歸方程，這樣可以得到同樣的結(jié)果）例如：下表3是針對 下列計算中會用到的數(shù)據(jù)從表2中截出的部分。表3：標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)表Standard SetCorrected zoneMeasurements(mm)Concentration (U/mL)Si14.0223.2s214.9894.0Reference (SO15.7225s416.5116.25Ss17.2

6、227-8125圖4：線形回歸結(jié)果21614抗生素效價標(biāo)準(zhǔn)曲線2.512ln(C)精品.標(biāo)準(zhǔn)曲線:z = 3.5502* ln(C) + 9.9794乙校正抑菌大小C 二濃度 R二 0. 99682.5待測樣品效價:估算一個待測樣品的效價，計算對照抑菌和樣品抑菌圈的平均值（三個平板的）。用上面介紹的標(biāo)準(zhǔn)品平均值的校正值Xc以計算待測樣品的濃度平均值。注 意一另一個可以接受的用校正值的方式為，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品中間濃度$的對數(shù)值在估計 效價的回歸線中進行校正。在標(biāo)準(zhǔn)曲線中使用公式用校正平均值計算樣品的含量 對數(shù)值Lu。Lu = （Z 一 a）/ba二回歸線的截距b二回歸線的斜率要得知待測樣品的效價，取Lu的反對數(shù)值乘以適當(dāng)?shù)南♂屢蜃?，該值也可描述?參考值濃度的百分比。例如：待測樣品校正值（表2中）二15. 522待測樣品效價的 In 值：Lu 二（1