甲砜霉素和氟甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和對(duì)藥酶影響

1、甲砜霉素和氟甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和對(duì)藥酶影響的研究英文題名 Studies on Pharmacokinetics and Impact to Drug Metabolic Enzyme of Thiamphenicol and Florfenicol in Litopenaeus Vannamei 關(guān)鍵詞 甲砜霉素; 氟甲砜霉素; 凡納濱對(duì)蝦; 藥代動(dòng)力學(xué); 藥酶; 英文關(guān)鍵詞 Thiamphenicol; florfenicol; Litopenaeus vannamei; Pharmacokinetics; drug metabolic enzyme; 中文摘要 本試驗(yàn)建

2、立了凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)體內(nèi)血漿、肌肉和肝胰腺組織中甲砜霉素(thiamphenicol,THA)和氟甲砜霉素(florfenicol,FLR)的反相高效液相色譜(RP-HLCP)檢測(cè)方法,比較研究了口灌給藥條件下甲砜霉素和氟甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué),并初步研究了這兩種藥物在體外對(duì)主要幾種藥物代謝酶的影響。試驗(yàn)結(jié)果如下: 25.01.0條件下,口灌給藥(10mg/kg)條件下,在不同時(shí)間點(diǎn)分別采取凡納濱對(duì)蝦的血漿、肌肉和肝胰腺樣品,用乙酸乙酯提取樣品中的藥物,60恒溫水浴蒸干,流動(dòng)相溶解,再用正己烷去脂,應(yīng)用反相高相液相色譜法測(cè)定其中藥物濃度。流動(dòng)

3、相為乙腈:水=16:84(V/V),紫外檢測(cè)器的波長(zhǎng)為225nm,流速為1mL/min,柱溫為40,進(jìn)樣量為10L,色譜柱為Zorbax SB-C18(5m,1504.6mm,I.D)。本試驗(yàn)方法樣品回收率在78.1392.83%之間,各樣品日內(nèi)變異系數(shù)(intra-day CV)小于4%,日間變異系數(shù)(inter-day CV)小于6.5%,最低檢測(cè)限為(limit of detecti. 英文摘要 This study establish a method to detect thiamphenicol and florfenicol in Litopenaeus vannamei pla

4、sma,muscle and hepatopancreas,using reverse phase high performance liquid chromatorgraphic method(RP-HPLC).Pharmacokinetics and residues of thiamphenicol(THA) and florfenicol(FLR) were investigated,following single oral administration at a dose of 10mg/kg in healthy Litopenaeus vannamei. The plasma,

5、muscle and hepatopancreas were collected at different intervals after administration of thiamphenicol 摘要 8-10 ABSTRACT 10-11 文獻(xiàn)綜述 12-28 1.藥代動(dòng)力學(xué) 12-23 1.1 藥物代謝動(dòng)力學(xué)原理及其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用 12-14 1.1.1 藥物代謝動(dòng)力學(xué)原理 12-13 1.1.2 藥代動(dòng)力學(xué)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用 13-14 1.2 抗生素類(lèi)藥物簡(jiǎn)介及其在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究概況 14-18 1.2.1 抗生素類(lèi)藥物簡(jiǎn)介 14-15 1.2.2 甲砜霉素 1

6、5-16 1.2.3 氟甲砜霉素 16-17 1.2.4 抗生素在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究概況 17-18 1.3 水產(chǎn)動(dòng)物藥物代謝動(dòng)力學(xué)的影響因素 18-23 1.3.1 給藥途徑對(duì)藥動(dòng)學(xué)的影響 18-20 1.3.2 給藥劑量對(duì)藥動(dòng)學(xué)的影響 20-21 1.3.3 環(huán)境因子對(duì)藥動(dòng)學(xué)的影響 21-22 1.3.4 試驗(yàn)動(dòng)物的生理因素對(duì)藥動(dòng)學(xué)的影響 22-23 2.藥物代謝酶 23-26 2.1 藥物代謝酶與藥物代謝 23-24 2.2 細(xì)胞色素P450的多樣性 24-26 2.2.1 細(xì)胞色素P450分布的多樣性 24 2.2.2 細(xì)胞色素P450結(jié)構(gòu)的多樣性 24-25 2.2.3 細(xì)胞

7、色素P450功能的多樣性 25 2.2.4 細(xì)胞色素P450與藥物代謝 25-26 3 本研究的目的和意義 26-28 試驗(yàn)研究 28-70 1 試驗(yàn)材料 28-29 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 28 1.2 藥品與試劑 28-29 1.3 儀器與設(shè)備 29 2.試驗(yàn)方法 29-36 2.1 甲砜霉素和氟甲砜霉素口灌給藥條件下藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)研究 29-33 2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物給藥 29 2.1.2 生物樣品采集 29-30 2.1.3 樣品前處理 30-31 2.1.4 方法學(xué)的建立 31-33 2.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶P450酶活影響的檢測(cè) 33-36 2.2.1 凡納濱對(duì)蝦主要組織中肝微

8、粒體的制備提取 33 2.2.2 微粒體蛋白含量的測(cè)定 33-34 2.2.3 微粒體中P450主要亞型藥酶活性的測(cè)定 34-36 3 結(jié)果 36-61 3.1 甲砜霉素和氟甲砜霉素RP-HPLC方法學(xué)的建立 36-46 3.1.1 不同提取液對(duì)回收率的影響 36 3.1.2 不同蒸干溫度對(duì)回收率的影響 36-38 3.1.3 色譜條件的優(yōu)化 38-40 3.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線及其檢測(cè)限 40-42 3.1.5 回收率 42-44 3.1.6 精密度 44-46 3.2 甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué) 46-48 3.2.1 凡納濱對(duì)蝦組織中甲砜霉素濃度-時(shí)間關(guān)系曲線 46-48 3.2.

9、2 凡納濱對(duì)蝦組織中甲砜霉素藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 48 3.3 氟甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué) 48-53 3.3.1 凡納濱對(duì)蝦組織中氟甲砜霉素濃度-時(shí)間關(guān)系曲線 48-51 3.3.2 凡納濱對(duì)蝦組織中氟甲砜霉素藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 51-53 3.4 凡納濱對(duì)蝦主要組織中藥酶的分布和酶活 53-61 3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 53-55 3.4.2 凡納濱對(duì)蝦主要組織微粒體中P450各亞型藥酶活性 55-57 3.4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶活性的影響 57-61 4 討論 61-68 4.1 樣品處理及分析方法評(píng)價(jià) 61-62 4.1.1 關(guān)于生物樣品前處理方法的選擇 61-62 4.1.2 關(guān)

10、于流動(dòng)相的選擇 62 4.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的藥動(dòng)學(xué)研究 62-65 4.2.1 藥動(dòng)學(xué)模型的選擇 62-63 4.2.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的藥動(dòng)學(xué)特征 63-64 4.2.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的殘留消除情況比較 64-65 4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素最適給藥方案和休藥期的確定 65-66 4.4 CYP450各亞型藥酶在凡納濱對(duì)蝦各組織分布特點(diǎn) 66 4.5 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶酶活的影響 66-68 5 結(jié)論 68-70 參考文獻(xiàn) 70-76 致謝 76-77 3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 53-55 3.4.2 凡納濱對(duì)蝦主要組織微粒體中P450各亞型藥酶活

11、性 55-57 3.4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶活性的影響 57-61 4 討論 61-68 4.1 樣品處理及分析方法評(píng)價(jià) 61-62 4.1.1 關(guān)于生物樣品前處理方法的選擇 61-62 4.1.2 關(guān)于流動(dòng)相的選擇 62 4.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的藥動(dòng)學(xué)研究 62-65 4.2.1 藥動(dòng)學(xué)模型的選擇 62-63 4.2.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的藥動(dòng)學(xué)特征 63-64 4.2.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的殘留消除情況比較 64-65 4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素最適給藥方案和休藥期的確定 65-66 4.4 CYP450各亞型藥酶在凡納濱對(duì)蝦各組織分布特點(diǎn) 66

12、4.5 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶酶活的影響 66-68 5 結(jié)論 68-70 參考文獻(xiàn) 70-76 致謝 76-77 3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 53-55 3.4.2 凡納濱對(duì)蝦主要組織微粒體中P450各亞型藥酶活性 55-57 3.4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶活性的影響 57-61 4 討論 61-68 4.1 樣品處理及分析方法評(píng)價(jià) 61-62 4.1.1 關(guān)于生物樣品前處理方法的選擇 61-62 4.1.2 關(guān)于流動(dòng)相的選擇 62 4.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的藥動(dòng)學(xué)研究 62-65 4.2.1 藥動(dòng)學(xué)模型的選擇 62-63 4.2.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的藥動(dòng)學(xué)特征 63-64

13、4.2.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的殘留消除情況比較 64-65 4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素最適給藥方案和休藥期的確定 65-66 4.4 CYP450各亞型藥酶在凡納濱對(duì)蝦各組織分布特點(diǎn) 66 4.5 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶酶活的影響 66-68 5 結(jié)論 68-70 參考文獻(xiàn) 70-76 致謝 76-77 3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 53-55 3.4.2 凡納濱對(duì)蝦主要組織微粒體中P450各亞型藥酶活性 55-57 3.4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶活性的影響 57-61 4 討論 61-68 4.1 樣品處理及分析方法評(píng)價(jià) 61-62 4.1.1 關(guān)于生物樣品前處理方

14、法的選擇 61-62 4.1.2 關(guān)于流動(dòng)相的選擇 62 4.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的藥動(dòng)學(xué)研究 62-65 4.2.1 藥動(dòng)學(xué)模型的選擇 62-63 4.2.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的藥動(dòng)學(xué)特征 63-64 4.2.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的殘留消除情況比較 64-65 4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素最適給藥方案和休藥期的確定 65-66 4.4 CYP450各亞型藥酶在凡納濱對(duì)蝦各組織分布特點(diǎn) 66 4.5 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶酶活的影響 66-68 5 結(jié)論 68-70 參考文獻(xiàn) 70-76 致謝 76-77 3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 53-55 3.4.2 凡納濱對(duì)蝦主要組織微粒體中P450各亞型藥酶活性 55-57 3.4.3 甲砜霉素和氟甲砜霉素對(duì)藥酶活性的影響 57-61 4 討論 61-68 4.1 樣品處理及分析方法評(píng)價(jià) 61-62 4.1.1 關(guān)于生物樣品前處理方法的選擇 61-62 4.1.2 關(guān)于流動(dòng)相的選擇 62 4.2 甲砜霉素和氟甲砜霉素的