雜環(huán)類藥物特殊雜質(zhì)的檢驗(yàn)

1、藥品檢驗(yàn)技術(shù)課程單元教學(xué)設(shè)計(jì)情境：雜環(huán)類藥物的分析（08） 任務(wù)：雜環(huán)類藥物特殊雜質(zhì)的檢驗(yàn)(03) 教學(xué)目標(biāo)設(shè)計(jì)序號(hào)5上課地點(diǎn)理實(shí)一體化教室授課形式講授、學(xué)生操作練習(xí)教 學(xué) 目 標(biāo)技能目標(biāo)知識(shí)目標(biāo)能夠依據(jù)藥典，對(duì)吩噻嗪類藥物中有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢查、對(duì)地西泮中的雜質(zhì)進(jìn)行檢查。掌握雜環(huán)類藥物特殊雜質(zhì)的檢驗(yàn)方法教 學(xué) 重 點(diǎn)異煙肼中游離肼的檢查方法、吩噻嗪類藥物中有關(guān)物質(zhì)的檢查、地西泮的雜質(zhì)檢查教 學(xué) 難 點(diǎn)異煙肼中游離肼的檢查方法、吩噻嗪類藥物中有關(guān)物質(zhì)的檢查、地西泮的雜質(zhì)檢查能力訓(xùn)練任務(wù)及案例通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作和理論知識(shí)的講解，同學(xué)們可以更好的掌握雜環(huán)類藥物的檢查方法和技能操作 教學(xué)進(jìn)程設(shè)計(jì)（下面各格均可

2、合并）步驟教學(xué)內(nèi)容教學(xué)方法教學(xué)手段學(xué)生活動(dòng)時(shí)間分配基礎(chǔ)知識(shí)講解基本方法和原理的講解教師舉例、點(diǎn)評(píng)、歸納概括引出知識(shí)點(diǎn)。任務(wù)引導(dǎo)同學(xué)們做好課堂筆記，掌握課堂重點(diǎn)20分鐘案例分析例如：地西泮雜質(zhì)的檢查同學(xué)們通過(guò)分組實(shí)驗(yàn)既掌握了理論知識(shí)又掌握了操作技能25分鐘異煙肼中游離肼的檢查異煙肼是一種不穩(wěn)定的藥物，其中的游離肼是由制備時(shí)原料引入，或在貯藏過(guò)程中降解而產(chǎn)生。而肼又是一種誘變劑和致癌物質(zhì)，故對(duì)肼應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的限量檢查。因此國(guó)內(nèi)外藥典多數(shù)規(guī)定了異煙肼原料藥及其制劑中游離肼的限量檢查。常用的方法有薄層色譜法和比濁法等。1薄層色譜法 中國(guó)藥典2010年版中，對(duì)異煙肼及注射用異煙肼中游離肼的檢查，均采用薄層

3、色譜法。其方法為：取本品，加丙酮-水（1:1）溶解并稀釋制成每1mL中約含100mg的溶液，作為供試品溶液；另取硫酸肼加丙酮-水（1:1）溶解并稀釋制成每1mL中約含0.080mg（相當(dāng)于游離肼20µg）的溶液，作為對(duì)照品溶液；取異煙肼和硫酸肼各適量，加丙酮-水（1:1）溶解并稀釋制成每1mL中分別含異煙肼100mg和硫酸肼0.080mg的混合溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。照薄層色譜法（附錄V B）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5µL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇-丙酮（3:2）為展開劑，展開，晾干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15分鐘后檢視。系統(tǒng)適用性溶液所顯游離肼

4、與異煙肼的斑點(diǎn)應(yīng)完全分離，游離肼的Rf值約為0.75，異煙肼的Rf值約為0.56。在供試品溶液主斑點(diǎn)前方與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)。2比濁法 JP（14）采用樣品中加水楊醛的乙醇溶液觀察渾濁的方法來(lái)檢查異煙肼中的游離肼。其方法為：取異煙肼0.1g，加水5mL使溶解，加水楊醛乙醇液（120）0.1mL，迅速振搖混合，放置5min內(nèi)溶液不混濁。此類方法的優(yōu)點(diǎn)是不用對(duì)照品、價(jià)廉、簡(jiǎn)單易行，而缺點(diǎn)是專屬性和準(zhǔn)確度差。放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，異煙肼的反應(yīng)產(chǎn)物也會(huì)產(chǎn)生混濁。吩噻嗪類藥物中有關(guān)物質(zhì)的檢查噻嗪類藥物在生產(chǎn)、貯存過(guò)程中，可引入多種其它烷基化吩噻嗪雜質(zhì)及分解產(chǎn)物。吩噻嗪類藥物的有關(guān)物質(zhì)主

5、要包括殘留的原料及中間產(chǎn)物、副產(chǎn)物和藥物的氧化產(chǎn)物等。中國(guó)藥典2010年版中的吩噻嗪類藥物除了鹽酸奮乃靜無(wú)此項(xiàng)檢查外，其余的原料藥物與部分制劑中均規(guī)定了該項(xiàng)檢測(cè)。1鹽酸異丙嗪有關(guān)物質(zhì)的檢查（1）雜質(zhì)的來(lái)源 在異丙嗪的合成過(guò)程中易發(fā)生副反應(yīng)，使得最終合成產(chǎn)物變?yōu)楫惐郎赤海撐镔|(zhì)在丙酮中溶解度大，精制也不易除去。同時(shí)異丙嗪不太穩(wěn)定，易氧化，貯藏過(guò)程中可能分解。（2）檢查方法 避光操作。取本品，加0.1 mol/L鹽酸溶液配制成每1mL約含0.2 mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1mL，置100mL量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法（附錄V D

6、）試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以水（用冰醋酸調(diào)pH值至2.3）-甲醇（55:45）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按鹽酸異丙嗪峰計(jì)算應(yīng)不低于3000，鹽酸異丙嗪峰與相對(duì)保留時(shí)間1.11.2的雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)不小于2.0。取對(duì)照溶液20L注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%，再精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各20L，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時(shí)間的3倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積（1.0%）。2鹽酸氯丙嗪有關(guān)物質(zhì)的檢查（1）雜質(zhì)的來(lái)源 在鹽酸氯丙嗪的合成過(guò)程中易殘留的中間產(chǎn)物包括：

7、中間體（3-氯二苯胺）、中間體（2-氯-10H-吩噻嗪）、中間體（3-（2-氯-10H-吩噻嗪-10-基）-N-甲基-1-丙胺）等。同時(shí)氯丙嗪不太穩(wěn)定，易氧化，貯藏不當(dāng)或存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能分解產(chǎn)生3-（2-氯-10H-吩噻嗪-10-基）-N,N-二甲基-1-丙胺S或N的氧化物等。（2）檢查方法 避光操作。取本品20mg，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取適量，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1mL中含2g的溶液，作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法（附錄V D）試驗(yàn)，用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.5%三氟乙酸（用四甲基乙二胺調(diào)節(jié)pH值至5.3）（50:50）為

8、流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。取對(duì)照溶液10L注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%。精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各10L，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時(shí)間的4倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積（0.5%）。各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍（1.0%）。3鹽酸硫利達(dá)嗪有關(guān)物質(zhì)的檢查鹽酸硫利達(dá)嗪遇光不穩(wěn)定，在生產(chǎn)、貯存過(guò)程中易引入有關(guān)物質(zhì)，因其結(jié)構(gòu)不清，因此中國(guó)藥典2010年版采用薄層色譜法，以高低濃度對(duì)照法控制其雜質(zhì)限量。其檢查方法為：避光操作。取本品，加三氯甲烷制成每1mL中約含10mg的

9、溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，加三氯甲烷稀釋成每1mL中約含50g的溶液，作為對(duì)照溶液。照薄層色譜法（附錄 B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5L，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-異丙醇-濃氨溶液（74:25:1）為展開劑，展開，晾干，先用碘化鉍鉀試液-冰醋酸-水（10:20:70）的混合液噴霧，然后噴以過(guò)氧化氫試液，立即覆蓋同樣大小的潔凈玻璃板，檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照溶液所顯的主斑點(diǎn)比較，不得更深。地西泮的雜質(zhì)檢查1乙醇溶液的澄清度與顏色 取本品0.1g，加乙醇20mL，振搖使溶解，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯色，與黃色1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液（附錄 A第一法）比較，不得更深。&

10、#160;2氯化物 取本品1.0g，加水50mL，振搖10分鐘，濾過(guò)，分取濾液25mL，依法檢查（附錄 A）與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液7.0mL制成的對(duì)照液比較，不得更濃（0.014%） 。 3有關(guān)物質(zhì) 取本品，加甲醇溶解并稀釋制成每1mL中含地西泮1mg的溶液作為供試品溶液；精密量取1mL，置200mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法（附錄 D）試驗(yàn)。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(70:30)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按地西泮峰計(jì)算不低于1500。取對(duì)照溶液10µL注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的25%；再精密量取供