分子生物學(xué)緒論作業(yè)

1、第一章 緒論復(fù)習(xí)題1. 從廣義和狹義上給出分子生物學(xué)的定義。廣義：研究核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能，并從分子水平上闡述這些大分子之間相互作用的關(guān)系及其基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制的科學(xué)。狹義：偏重于核酸的分子生物學(xué)范疇，主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)節(jié)控制等的分子過程，其中也涉及與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)和功能的研究。2. 分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有哪幾個(gè)方面?1、基因與基因組的結(jié)構(gòu)與功能 2、DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯 3、基因表達(dá)調(diào)控的研究4、DNA重組技術(shù) 5、結(jié)構(gòu)分子生物學(xué) 3. 簡述什么是反向生物學(xué)？什么是后基因組時(shí)代？反向生物學(xué)：直接從克隆目的基因出發(fā)，研究基

2、因的功能及其與表型的關(guān)系的科學(xué)。后基因組時(shí)代：主要任務(wù)是研究細(xì)胞內(nèi)全部基因的表達(dá)圖式和全部蛋白質(zhì)圖式，或者說是“從基因組到蛋白質(zhì)組”。4. 分子生物學(xué)、基因工程、DNA重組技術(shù)有什么區(qū)別？分子生物學(xué)是研究核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能，并從分子水平上闡述這些大分子之間相互作用的關(guān)系及其基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制的科學(xué)?；蚬こ滩⒉坏韧贒NA重組技術(shù)，基因工程還包括其他能使生物細(xì)胞基因組結(jié)構(gòu)發(fā)生改變的體系。而DNA重組技術(shù)是分子生物學(xué)的研究內(nèi)容之一。5. 寫出 3個(gè)分子生物學(xué)發(fā)展史中的大事件 (發(fā)明年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容)。21世紀(jì)分子生物學(xué)的發(fā)展趨勢將是怎樣的？1928年，Griffith做的肺

3、炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)：以R型和S型菌株作為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)，他將活的、無毒的R型（無莢膜，菌落粗糙型）肺炎雙球菌或加熱殺死的有毒的S型肺炎雙球菌注入小白鼠體內(nèi)，結(jié)果小白鼠安然無恙；將活的、有毒的S型（有莢膜，菌落光滑型）肺炎雙球菌或?qū)⒋罅拷?jīng)加熱殺死的有毒的S型肺炎雙球菌和少量無毒、活的R型肺炎雙球菌混合后分別注射到小白鼠體 內(nèi)，結(jié)果小白鼠患病死亡，并從小白鼠體內(nèi)分離出活的S型菌。1952年，Hershey和Chase先用32P標(biāo)記噬菌體的DNA，用35S標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)，使噬菌體吸附在大腸桿菌上，然后用組織搗碎器將二者分開，這時(shí)發(fā)現(xiàn)幾乎全部35S的放射性都可以從細(xì)胞上拉下來，而大部分

4、32P則被注入到細(xì)胞內(nèi)，噬菌體在細(xì)胞內(nèi)照樣正常地進(jìn)行增殖。至于進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的少量35S，在后代噬菌體中幾乎沒有出現(xiàn)，相反一半以上的32P出現(xiàn)在后代噬菌體的DNA中。明確了噬菌體的DNA將新的信息帶進(jìn)細(xì)胞，這些信息規(guī)定了噬菌體在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行增殖所必需的一切條件，從而產(chǎn)生與親代噬菌體遺傳性完全一樣的子代噬菌體。1953年，沃森和克里克發(fā)現(xiàn)了DNA雙螺旋的結(jié)構(gòu)，開啟了分子生物學(xué)時(shí)代，使遺傳的研究深入到分子層次，“生命之謎”被打開，人們清楚地了解遺傳信息的構(gòu)成和傳遞的途徑。21世紀(jì)分子生物學(xué)的發(fā)展趨勢：研究細(xì)胞內(nèi)全部基因的表達(dá)圖式和全部蛋白質(zhì)圖式，即后基因組。6. 解釋下列名詞：結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)、生物信息學(xué)

5、、DNA重組技術(shù)、功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、功能蛋白質(zhì)組學(xué)、反向生物學(xué)、后基因組時(shí)代、基因表達(dá)調(diào)控結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)：研究生物學(xué)大分子特定的空間結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)的運(yùn)動(dòng)變化與其生物學(xué)功能關(guān)系的科學(xué)。生物信息學(xué):對浩如煙海的DNA和蛋白質(zhì)分子中各種類型的信息進(jìn)行識別、存儲(chǔ)、分析、比對、注釋、模擬和傳播是生物學(xué)的主要內(nèi)容，它由各類數(shù)據(jù)庫、計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)和應(yīng)用軟件三大部分組成。DNA重組技術(shù)：將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。功能基因組學(xué)：對成千上萬的基因表達(dá)進(jìn)行分析比較，從基因組整體水平上闡述其活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。蛋白質(zhì)組學(xué)：

6、是以蛋白質(zhì)組為研究對象，研究細(xì)胞內(nèi)所有蛋白質(zhì)及其動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的科學(xué)。功能蛋白質(zhì)組學(xué)：研究定位在細(xì)胞內(nèi)與某種功能有關(guān)或在某種環(huán)境條件下的一群或一套蛋白質(zhì)的科學(xué)。反向生物學(xué)：直接從克隆目的基因出發(fā)，研究基因的功能及其與表型的關(guān)系的科學(xué)。后基因組時(shí)代：主要任務(wù)是研究細(xì)胞內(nèi)全部基因的表達(dá)圖式和全部蛋白質(zhì)圖式，或者說是“從基因組到蛋白質(zhì)組”?；虮磉_(dá)調(diào)控：基因表達(dá)的實(shí)質(zhì)是遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯，基因表達(dá)的調(diào)控主要在轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平上發(fā)生。原核生物主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平，真核生物主要發(fā)生在各種不同的水平，主要表現(xiàn)在對上游調(diào)控序列、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄因子及RNA剪接等多個(gè)方面。第二章 核酸的結(jié)構(gòu)與功能復(fù)習(xí)題1. 研

7、究DNA的一級結(jié)構(gòu)有什么重要生物學(xué)意義? DNA的一級結(jié)構(gòu)即使指DNA分子中的核苷酸排列順序。DNA的堿基順序本身就是遺傳信息存儲(chǔ)的分子形式。生物界物種的多樣性即寓于DNA分子中四種核苷酸千變?nèi)f化的不同排列組合之中。2. 檢測核酸變性的定性和定量方法是什么？具體參數(shù)如何？紫外吸收光譜的變化是檢測變性最簡單的定性和定量方法。核酸在260 nm具有特征的吸收峰，表示為A260nm,吸收紫外光的量取決于核酸分子的結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)越有序，吸收的光越少。因此，可用紫外吸收值的大小來測定DNA的含量；3. 影響DNA復(fù)性速度的因素包括哪些？ DNA分子組成。簡單分子，如多聚dC-多聚dG變性后，彼此容易發(fā)現(xiàn)互補(bǔ)

8、鏈，因此很快就會(huì)復(fù)性。 同一種DNA分子，濃度越高，互補(bǔ)鏈碰撞機(jī)會(huì)越多，復(fù)性速度越快。 DNA片段大小。較大的線狀單鏈分子，由于分子擴(kuò)散受到妨礙，減少了發(fā)現(xiàn)互補(bǔ)鏈的機(jī)會(huì)。因此，在復(fù)性研究時(shí)，一般要將其剪切成400bp大小的片段，以增加復(fù)性速度。 溫度的影響，復(fù)性速度與溫度直接有關(guān)。 陽離子濃度，小于0.5mol/L濃度時(shí)增加鹽濃度有利于復(fù)性。4. DNA復(fù)性實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)條件是什么？復(fù)性程度怎樣檢測？標(biāo)準(zhǔn)條件：一定的離子強(qiáng)度。 DNA復(fù)性以后，雙螺旋結(jié)構(gòu)的各種性質(zhì)可以得到恢復(fù)。DNA的復(fù)性需一定的離子強(qiáng)度，用以削弱兩條鏈中磷酸基團(tuán)之間的排斥力，通常使用0.150.50mol/L NaCl。較高的溫

9、度。用以避免隨機(jī)形成的無效氫鍵。一般認(rèn)為比Tm低25左右的溫度是復(fù)性的最佳條件（55-60度）。復(fù)性程度的檢測 : 減色效應(yīng)，在復(fù)性過程中可跟蹤測定A260nm的光吸收值；S1核酸酶只催化單鏈DNA的水解，不能作用于雙鏈DNA，因此將樣品限定水解后測定抗S1核酸酶水解的雙鏈DNA量。羥基磷灰石層析，羥基磷灰石是一種磷酸鈣鹽，經(jīng)過一定的處理后，具有吸附雙鏈DNA的能力，洗脫時(shí)，只允許單鏈通過，從而可以計(jì)算出剩余雙鏈DNA的量。5. 核酸的分子雜交一般有幾種類型？它們分別用于檢測那些物質(zhì)？溶液雜交：將不同來源的DNA變性后，在溶液里進(jìn)行雜交。濾膜雜交：用硝酸纖維素制成的濾膜, 可以吸附單鏈DNA或

10、RNA,將變性DNA或RNA吸附到濾膜上，再進(jìn)行雜交。可分Northern印跡法、Southern印跡法和Western印跡法。6. 解釋下列名詞：核小體、Southern、Northern 、Western、Cot曲線、分子雜交、microRNA、snoRNA、非編碼mRNA、ORF、nRNA、hnRNA、snRNA、scRNA、tmRNA、nRNA、B-DNA、Z-DNA。核小體：構(gòu)成真核生物染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位。Southern：Southern 印跡法，DNA片段經(jīng)電泳分離后，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜或尼龍膜上，然后與探針雜交，被檢對象為DNA，探針為DNA或RNA。Norther

11、n：Northern印跡法，RNA片段經(jīng)電泳分離后，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜或尼龍膜上，然后與探針雜交，被檢對象為RNA ，探針為DNA或RNA，是用于鑒定RNA的雜交技術(shù)。Western：Western印跡法，是一種專門針對蛋白質(zhì)的一種特異性鑒定技術(shù)，以一級抗體和與酶偶聯(lián)的二級抗體為探針。Cot曲線：DNA的復(fù)性曲線，以Cot值為橫坐標(biāo)，雙鏈DNA的百分?jǐn)?shù)為縱坐標(biāo)所繪制的曲線，Cot1/2=1/K2X,K2可以反應(yīng)DNA序列的復(fù)雜性，DNA序列越復(fù)雜，K2越小，復(fù)性速度越慢。分子雜交：雙螺旋結(jié)構(gòu)的各種性質(zhì)在DNA復(fù)性后可得到恢復(fù)，利用這一特性科將兩個(gè)來源不同的互補(bǔ)序列退火形成雙鏈，這個(gè)過

12、程成為分子雜交。microRNA：是植物和動(dòng)物細(xì)胞中自然產(chǎn)生的一類長度為18-25bp的小分子RNA。snoRNA：是一種能與蛋白質(zhì)結(jié)合成核仁小核糖核蛋白，作為rRNA前體加工復(fù)合體的重要成分，參與rRNA前提的加工的RNA。非編碼mRNA：是能夠進(jìn)行剪接和3端加尾修飾，但是不具有開放閱讀框的RNA。ORF：指一條核苷酸能以3種可能的形式之一讀出，每個(gè)可讀框序列分成一系列的三聯(lián)體，依照序列的不同，任何序列都有3種可能的可讀框?？勺x框一般是不含轉(zhuǎn)錄終止子的讀碼框。nRNA：細(xì)胞核內(nèi)RNA的統(tǒng)稱，包括核內(nèi)mRNA、tRNA和rRNA初始轉(zhuǎn)錄混合物核內(nèi)小分子RNAhnRNA：mRNA的前體是蛋白質(zhì)編

13、碼基因的初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，統(tǒng)稱核不均一RNA，即hnRNA。snRNA：獨(dú)立的RNA小分子，一般70-300nt，主要參與mRNA 前體（hnRNA）和rRNA前體的加工。scRNA：約有100到300個(gè)堿基，每個(gè)細(xì)胞中可含有105-106個(gè)這種RNA分子。它們是由RNA聚合酶或所合成的，其中某些像mRNA一樣可被加帽。是細(xì)胞質(zhì)中的一類RNA。tmRNA：存在于各種細(xì)菌及細(xì)胞器（線粒體、葉綠體等）中，長度在260-430bp的穩(wěn)定小分子RNA，是mRNA和tRNA的雜合體。nRNA：細(xì)胞核內(nèi)RNA的統(tǒng)稱，包括核內(nèi)mRNA、tRNA和rRNA初始轉(zhuǎn)錄混合物核內(nèi)小分子RNAB-DNA：DNA由兩條反向

14、平行的脫氧多核苷酸（兩條鏈的走向?yàn)?3和35），圍繞一中心軸（假想軸）構(gòu)成右手雙螺旋結(jié)構(gòu)。Z-DNA: 是左手雙螺旋，又叫Z-DNA。 Z-DNA中大溝消失，小溝狹而深，使調(diào)控蛋白識別方式也發(fā)生變化。做人最好狀態(tài)是懂得尊重，不管他人閑事，不曬自己優(yōu)越，也不秀恩愛。你越成長越懂得內(nèi)斂自持，這世界并非你一人存在。做人靜默，不說人壞話，做好自己即可。不求深刻，只求簡單。你活著不是只為討他人喜歡，也不是為了炫耀你擁有的，沒人在乎，更多人在看笑話。你變得優(yōu)秀，你身邊的環(huán)境也會(huì)優(yōu)化。3. 從今天開始，幫自己一個(gè)忙，不再承受身外的目光，不必在意他人的評價(jià)，為自己活著。從今天開始，幫自己一個(gè)忙，做喜歡的事情，

15、愛最親近的人，想笑就大笑，想哭就痛哭，不再束縛情感的空間，讓自己活得輕松些。4. 很多你覺得天大的事情，當(dāng)你急切地向別人傾訴時(shí)，在別人眼中也是個(gè)小事，他最多不痛不癢呵呵地應(yīng)和著。因?yàn)樗皇悄?，他無法感知你那種激烈的情緒。直到有一天，你覺得無需再向別人提起，你就已經(jīng)挽救了你自己。這世界上除了你自己，沒誰可以真正幫到你。5, 我們總是帶著面具走進(jìn)愛情的，總想展示自己最優(yōu)越的一面，你要接受一個(gè)人，不只是接受他的優(yōu)越，而是看清了他的平凡普通卻仍然去深愛。事實(shí)經(jīng)常是：我們走著走著，就感覺對方變了，其實(shí)我們并沒有變，我們只是走進(jìn)對方最真實(shí)的地方，然后迷失了自己。6. 我捧你，你就是杯子，我放手，你就是玻璃

16、渣子。無論是戀人還是朋友，珍惜在你每一次難過、傷心時(shí)都陪伴在你身邊的人。珍惜經(jīng)常和你開玩笑的人，說明你在這個(gè)人的心中肯定有一定的分量。 珍惜在你心情不好時(shí)第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的人。7. 今天再大的事，到了明天就是小事；今年再大的事，到了明年就是故事；今生再大的事，到了來世就是傳說。人生如行路，一路艱辛，一路風(fēng)景。你目光所及，就是你的人生境界。總是看到比自己優(yōu)秀的人，說明你正在走上坡路；總是看到不如自己的人，說明你正在走下坡路。與其埋怨，不如思變。8. 歸零是一種積極的心態(tài)。所有的成敗相對于前一秒都是一種過去。過去能支撐未來，卻代替不了明天。學(xué)會(huì)歸零，是一種積極面向未來的意識。把每一天的醒來都看作是一種新

17、生，以嬰兒學(xué)步的態(tài)度，認(rèn)真用好睡眠以前的時(shí)刻。歸零，讓壞的不影響未來，讓好的不迷惑現(xiàn)在。9. 總有一天，你會(huì)與那個(gè)對的人不期而遇：所謂的幸福，從來都是水到渠成的。它無法預(yù)估，更沒有辦法計(jì)算，唯一能做得是：在遇見之前保持相信，在相遇之后寂靜享用。寧可懷著有所期待的心等待下去，也不愿去對歲月妥協(xié)，因?yàn)橄嘈判腋Ｒ苍S會(huì)遲到，但不會(huì)缺席。做人最好狀態(tài)是懂得尊重，不管他人閑事，不曬自己優(yōu)越，也不秀恩愛。你越成長越懂得內(nèi)斂自持，這世界并非你一人存在。做人靜默，不說人壞話，做好自己即可。不求深刻，只求簡單。你活著不是只為討他人喜歡，也不是為了炫耀你擁有的，沒人在乎，更多人在看笑話。你變得優(yōu)秀，你身邊的環(huán)境也會(huì)

18、優(yōu)化。3. 從今天開始，幫自己一個(gè)忙，不再承受身外的目光，不必在意他人的評價(jià)，為自己活著。從今天開始，幫自己一個(gè)忙，做喜歡的事情，愛最親近的人，想笑就大笑，想哭就痛哭，不再束縛情感的空間，讓自己活得輕松些。4. 很多你覺得天大的事情，當(dāng)你急切地向別人傾訴時(shí)，在別人眼中也是個(gè)小事，他最多不痛不癢呵呵地應(yīng)和著。因?yàn)樗皇悄?，他無法感知你那種激烈的情緒。直到有一天，你覺得無需再向別人提起，你就已經(jīng)挽救了你自己。這世界上除了你自己，沒誰可以真正幫到你。5, 我們總是帶著面具走進(jìn)愛情的，總想展示自己最優(yōu)越的一面，你要接受一個(gè)人，不只是接受他的優(yōu)越，而是看清了他的平凡普通卻仍然去深愛。事實(shí)經(jīng)常是：我們走著走著，就感覺對方變了，其實(shí)我們并沒有變，我們只是走進(jìn)對方最真實(shí)的地方，然后迷失了自己。6. 我捧你，你就是杯子，我放手，你就是玻璃渣子。無論是戀人還是朋友，珍惜在你每一次難過、傷心時(shí)都陪伴在你身邊的人。珍惜經(jīng)常和你開玩笑的人，說明你在這個(gè)人的心中肯定有一定的分量。 珍惜在你心情不好時(shí)第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的人。7. 今天再大的事，到了明天就是小事；今年再大的事，到了明年就是故事；今生再大的事，到了來世就是傳說。人生如行路，一路艱辛，一路風(fēng)景。你目光所及，就是你的人生境界?？偸强?/p>