玉屏風散的免疫效應研究

1、玉屏風散的免疫效應研究                        【摘要】  就玉屏風散對特異性免疫、非特異性免疫、免疫器官、免疫細胞因子以及遲發(fā)型超敏反應等方面的作用作一綜述，并對其復方藥理的研究方向進行了討論。 【關(guān)鍵詞】  玉屏風散;免疫效應;進展    玉屏風散出自元·朱丹溪的丹溪心法,

2、是中醫(yī)扶正固本的經(jīng)典方劑。該方療效好，應用廣泛，是國家基本中成藥，被中華人民共和國藥典所收載1。該方由黃芪、白術(shù)、防風三味藥組成，具有益氣健脾、固表止汗的功效，用于治療氣虛肌表不固兼感風寒之自汗癥?！胺堑洹逼陂g，北京、上海、廣州、四川等地提供的“非典”防治方中,一般都包含玉屏風散中的黃芪、白術(shù)和防風,結(jié)果病死率大大降低，肯定了玉屏風散在防治“非典”中的作用2?，F(xiàn)代免疫藥理研究表明，玉屏風散對免疫系統(tǒng)有廣泛的影響,包括對體液免疫、細胞免疫、免疫調(diào)節(jié)等。近年來對其進行了較深入的研究,并且取得了一定的進展。    1玉屏風散對非特異性免疫的作用  &

3、#160; 1.1玉屏風散對單核巨噬細胞系統(tǒng)的作用    張磊等3研究發(fā)現(xiàn)，玉屏風散總提物及其總多糖能對抗環(huán)磷酰胺所致的小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的減弱。伍雪芳等4研究發(fā)現(xiàn)，小鼠按體質(zhì)量灌胃玉屏風散,其3090 min時相的血清對小鼠腹腔巨噬細胞均具有顯著活化作用(P<0.01),說明玉屏風散中的某些成分能以較快速率吸收并轉(zhuǎn)化成為對巨噬細胞有活化作用的成分。畢玉霞等5研究玉屏風散對小鼠腹腔巨噬細胞活化作用的實驗結(jié)果表明，實驗組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)均高于對照組,統(tǒng)計處理差異有高度統(tǒng)計意義(P<0.01),說明玉屏風散能增強小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能。張磊

4、等6研究發(fā)現(xiàn)，玉屏風散多糖在連續(xù)14 d灌胃給藥情況下,可對抗注射適量環(huán)磷酰胺的小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的減弱。    1.2  對自然殺傷細胞(NK)的影響    NK細胞是機體免疫監(jiān)視功能的重要執(zhí)行者,可殺傷某些腫瘤細胞或病毒感染的細胞，先于T細胞發(fā)揮作用,處于機體抗腫瘤的第一道防線,對淋巴瘤、白血病細胞最為有效。梁春敏等7進行了血清藥理學研究，結(jié)果表明，與正常對照組比較,1 h時相的玉屏風散含藥血清對NK細胞活性有增強作用(P<0.05),30 min至2 h時相血清對小鼠IL|2的產(chǎn)生有促進作用(P<0.

5、01或P<0.05),1 h時相血清作用最強,2 h時相血清作用次之。陳曙霞8觀察60例病毒性心肌炎患者,在治療前NK細胞活性平均為(9.75±5.44)%,服用玉屏風散為主的中藥23月后復查,NK細胞活性平均提高至(23.23±10.88)%,治療前后比較有高度統(tǒng)計意義(P<0.01)。    2  玉屏風散對特異性免疫的作用    2.1對總淋巴細胞的影響    梁春敏等7報道玉屏風散30 min2 h時相含藥血清對小鼠脾淋巴細胞增殖有明顯促進作用, 其中1

6、h時相血清的促進作用表現(xiàn)最明顯(P<0.01),2 h時相血清也有較強的促進作用(P<0.05)。畢玉霞等5研究了玉屏風散對小鼠脾淋巴細胞增值的影響，結(jié)果顯示,實驗組G0/G1期細胞百分比明顯低于對照組，而S期和G2M期細胞百分率則明顯高于對照組,3 h時相細胞增殖指數(shù)(PI)分別比較均有高度統(tǒng)計意義(P<0.01)。徐啟華等9研究了玉屏風散對免疫抑制小鼠脾抗體形成細胞數(shù)的影響，結(jié)果玉屏風散煎劑與玉屏風散發(fā)酵液均能有效改善由環(huán)磷酰胺所致的脾抗體細胞形成數(shù)的減少，玉屏風散發(fā)酵液組與玉屏風散煎劑組相比,差異無統(tǒng)計意義(P>0.05)。    2

7、.2對T細胞的影響    馬振亞10研究發(fā)現(xiàn)玉屏風散對風寒刺激導致的小鼠末梢血中T淋巴細胞非特異性酯酶(ANAE)陽性率下降有預防作用。玉屏風散加味對正常小鼠和注射氫化可的松引起的免疫低下小鼠可提高玫瑰花環(huán)形成細胞數(shù)，能提高淋巴細胞轉(zhuǎn)化百分率，增加正常小鼠和注射環(huán)磷酰胺引起的免疫低下小鼠的T淋巴細胞數(shù)。張磊等3研究結(jié)果表明,環(huán)磷酰胺能使CD+4/CD+8和對Th有促進作用的IL|2分泌顯著降低，而玉屏風散總提物及總多糖均能使這些指標向正常狀態(tài)恢復,顯著改善免疫低下。    江忠等11對哮喘患兒用玉屏風顆粒治療并觀察其對T淋巴細胞亞群的

8、影響,結(jié)果表明,CD+4/CD+8比值明顯下降(P<0.01),糾正了哮喘患兒體內(nèi)T 淋巴細胞亞群的失調(diào)。楊晨煒等12也觀察到反復發(fā)作呼吸道感染的患兒血清可溶性白細胞介素-2受體(SIL|2R)水平下降,CDs下降,CD+3、CD+4、CD+4/CD+8增高。張磊等6報道了玉屏風散多糖在連續(xù)14 d灌胃給藥情況下,可恢復注射適量環(huán)磷酰胺所降低的CD+4/CD+8比值，按灌胃給藥量的10 %靜脈注射玉屏風散多糖14 d,可使CD+4/CD+8比值提高。    2.3對體液免疫的影響    玉屏風散水煎服能使反復上呼吸道感染動物和病

9、人的血清免疫球蛋白IgA由治療前(1.82±0.07)g/L上升為(2.32±0.06)g/L,差異有高度統(tǒng)計意義(P<0.01)13。對腹腔內(nèi)注射環(huán)磷酰胺的免疫抑制小鼠，玉屏風散能提高其IgG,IgG1數(shù)值(P<0.05),而對IgG2,IgG2b,IgG3均無顯著影響14。超敏反應性鼻炎患者經(jīng)玉屏風散治療后,臨床癥狀基本控制,血清IgE明顯下降(P<0.01)15。玉屏風散臨床用于治療慢性支氣管炎和易感患者結(jié)果表明,治療前后IgM無明顯改變16-17。但玉屏風散在同時使用免疫抑制劑的情況下,能使各類腎小球腎炎患者低于正?；蚋哂谡５腎gM恢復正常18。

10、血清溶血素水平及血空斑形成細胞是檢測體液免疫功能的重要指標,玉屏風散加味對這二項指標均有顯著的增強作用19。也有報道玉屏風散能使綿羊紅細胞致敏小鼠脾臟溶血空斑數(shù)(PFC)基礎水平偏低的增高,偏高的降低,呈現(xiàn)雙向調(diào)節(jié)作用20。    3對紅細胞免疫的影響    紅細胞具有很強的免疫黏附功能，通過此種功能可清除血循環(huán)中的免疫復合物(IC)，促進吞噬，捕獲抗原及增強機體的免疫力。免疫黏附功能的結(jié)構(gòu)基礎是Cab受體，因此檢測Cab受體活性是檢測紅細胞免疫黏附功能的重要指標。張紅軍等21實驗研究結(jié)果表明，玉屏風散能明顯提高免疫抑制小鼠紅細胞的黏

11、附功能，提高C3bR花環(huán)形成率，有效地降低IC花環(huán)形成率。章惠陵等22對120例反復上呼吸道感染患兒治療并觀察結(jié)果表明，90例患兒經(jīng)玉屏風散治療2月后，紅細胞Cab受體花環(huán)率有明顯提高，與治療前相比差異有高度統(tǒng)計意義(P<0.01)。    4對免疫器官的影響    4.1對免疫器官超微結(jié)構(gòu)的影響    畢玉霞等5觀察玉屏風散煎劑對胸腺超微結(jié)構(gòu)的影響結(jié)果表明,實驗組小鼠胸腺小葉結(jié)構(gòu)清晰,皮質(zhì)明顯厚于對照組,淋巴細胞數(shù)量增多,髓內(nèi)的淋巴細胞多于對照組。電鏡下對照組胸腺組織中淋巴細胞的數(shù)量減少,細胞核的

12、間隙明顯擴張,胞漿中有空泡,說明出現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張,溶酶體殘余增多,提示上皮樣網(wǎng)狀細胞退化。實驗組中淋巴細胞發(fā)育良好,細胞密度增大,上皮樣網(wǎng)狀細胞亦未見異常,并多見淋巴細胞分裂相。    4.2對免疫器官重量的影響    侯林江23報道，提前灌服玉屏風散可以預防風寒刺激介導的免疫器官萎縮和重量減少,從而有效地預防淋巴細胞免疫功能的抑制。徐啟華等9研究了玉屏風散煎劑與玉屏風散發(fā)酵液對小鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)的影響，結(jié)果玉屏風散煎劑與玉屏風散發(fā)酵液均能有效改善由環(huán)磷酰胺所導致的脾指數(shù)、胸腺指數(shù)下降,使之基本恢復到正常水平。玉屏風散發(fā)酵液對抗環(huán)磷酰

13、胺所致的脾指數(shù)下降作用顯著強于玉屏風散煎劑。    5對免疫細胞因子的影響    梁春敏等7觀察了玉屏風散試驗血清對小鼠IL|2產(chǎn)生的促進作用，結(jié)果30 min至2 h時相血清可促進脾淋巴細胞產(chǎn)生IL|2,與正常對照組比較,差異均有統(tǒng)計意義(P<0.01或P<0.05),1 h時相血清最為明顯。張磊等6報道，玉屏風散多糖在連續(xù)14 d灌胃給藥情況下,可恢復小鼠注射適量環(huán)磷酰胺所致的外周血IL|1、IL|2濃度的降低。按灌胃給藥量的10 %靜脈注射玉屏風散多糖1 d即可使外周血IL|2水平上升，3 d可使IL|1升高,去蛋白

14、含藥血清連續(xù)注射14 d,可使血清IL|1和IL|2水平提高。    6  對環(huán)核苷酸的影響    環(huán)核苷酸(cAMP,cGMP)是影響免疫功能的重要物質(zhì)。陳新等24研究表明,玉屏風散對風寒刺激導致的小鼠胸腺組織cAMP含量及cAMP/cGMP比值升高有預防作用,從而有效地預防淋巴細胞免疫功能的抑制。進一步地觀察發(fā)現(xiàn)玉屏風散對小鼠脾細胞cAMP呈現(xiàn)雙向調(diào)節(jié)作用,即使cAMP低者升高,高者則降低,且cAMP變化與PFC變化呈逆相關(guān),即cAMP升高則PFC降低，cAMP降低則PFC升高；與cGMP呈正相關(guān),與cAMP/cGMP變

15、化則呈逆相關(guān)。由此證明玉屏風散具有雙向調(diào)節(jié)性免疫藥理活性25。                                 7  對遲發(fā)型超敏反應的影響    遲發(fā)型超敏反應(DTH)實驗是反應機體細胞免疫功能的一個經(jīng)典指標,玉屏風散加味可顯著增

16、強小鼠綿羊紅細胞(SRBC)所致遲發(fā)型超敏反應,并拮抗氫化可的松引起的小鼠DTH反應抑制,使之恢復至正常水平,說明它能刺激細胞免疫功能,并使小鼠受抑制的細胞免疫功能恢復正常26。張磊等3，6研究表明：玉屏風散多糖能顯著對抗DNFB(2,4-二硝基氟苯)所致的遲發(fā)型超敏反應的減弱。玉屏風散多糖在連續(xù)14 d灌胃給藥情況下,可對抗注射適量環(huán)磷酰胺引起的遲發(fā)型超敏反應減弱。    8結(jié)語    由上述可見,玉屏風散對免疫系統(tǒng)效應的可靠性是得到明確論證的，近年藥理學研究也圍繞對機體免疫功能的影響,初步揭示了本方“益氣固表”的藥效學基礎。但對本

17、方藥理作用的物質(zhì)基礎,即其調(diào)節(jié)免疫功能的活性成分的研究成果尚不顯著。由于效應成分群不明確，大多玉屏風散制劑采用水提醇沉最一般的提取工藝，用藥劑量大，限制了劑型的選擇，限制了制劑新技術(shù)、新工藝的實施。而質(zhì)量控制采用黃芪甲苷等幾個成分的鑒別方法也難以代表全方。    目前,中藥復方化學成分組成的高度復雜性和中藥復方藥效物質(zhì)基礎不明確，是中藥藥理學和復方化學研究共同的難點。針對此，在中藥復方藥理的方法學上出現(xiàn)了新的研究思路和設想。近年來對玉屏風散的血清藥理學有較多報道，但血清藥理學方法作為復方的一種體外研究方法仍具有很大的局限性:血清中成分復雜，血清本身的多種成分都可能

18、與中藥成分或?qū)嶒炛械耐饧用赶?、培養(yǎng)細胞等相互作用，很難認識其真正的作用機制。而化學分離方法帶有很大的盲目性，容易造成復方成分的丟失。生物色譜法是一種嶄新的生物活性成分研究方法，它通過中藥中多種效應成分與細胞膜上的已知及未知的靶點相結(jié)合，從而對其色譜行為進行解析，得到效應成分或成分群。目前筆者正采用該方法對玉屏風散進行研究，并初步取得了一些進展?？傊?，研究玉屏風散的免疫功能、調(diào)節(jié)機體免疫狀態(tài)的作用靶點（或靶點群）、有效化學成分（有效化學成分群）對防治病毒感染的中醫(yī)藥理論與臨床實踐、對防治病毒感染的藥物開發(fā)均有重要意義。因此，這是今后研究需要努力的方向。對玉屏風散深層次的開發(fā)，能更好地為人類健康服

19、務?！緟⒖嘉墨I】  1國家藥典委員會.中華人民共和國藥典M.北京：化學工業(yè)出版社，2005：409.2唐國順.玉屏風散防治“非典”機理探討J.中醫(yī)文獻雜志,2003,(3):35.3張磊,吳瑕,王嵐,等.玉屏風散多糖類成分對免疫功能的影響J.中藥藥理與臨床,2006,22(1):2.4伍雪芳,梁春敏.玉屏風散對小鼠腹腔巨噬細胞活化作用的血清藥理學研究J.基層中藥雜志,2001,15(6):11.5畢玉霞,劉詩柱.玉屏風散對小白鼠免疫功能影響的實驗研究J.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2007,(1):31.6張磊,王嵐,吳瑕,等.玉屏風散總多糖不同給藥方式和時相影響小鼠免疫功能的對比研究J.中藥藥

20、理與臨床,2006,22(2):5.7梁春敏,王賢喜,董群,等.玉屏風散對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的血清藥理學研究J.上海免疫學雜志,2003,23(6):385.8陳曙霞.玉屏風散為主治療病毒性心肌炎及體外藥物篩選的研究J.中醫(yī)雜志,1990, (12):22.9徐啟華,趙堃,曹軍.玉屏風散發(fā)酵液對免疫抑制小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用J.齊齊哈爾醫(yī)學院學報,2006,27(6):64.10馬振亞.中藥方劑免疫藥理研究M.西安:陜西科學技術(shù)出版社,1986:53.11江忠,田菊,楊志斌,等.玉屏風顆粒對哮喘患兒T淋巴細胞亞群的影響J.中成藥,2000,22(3):210.12楊晨煒,張學蘭. 維生素A 和玉屏風對反復呼吸道感染兒SIL|2R、T細胞亞群的影響與臨床意義J. 臨床兒科雜志,2002,20(2):93-94.13章惠陵,陳松泉.玉屏風散對上呼吸道感染患兒免疫功能的影響J.中藥藥理與臨床,1995,(4):37.14周然,武玉鵬,賈力莉,等.玉屏風散對小白鼠體液免疫功能的影響J.中醫(yī)藥研究通訊,1990,(34):6.15林文森,石志興,馬思明,等.補氣固表治療變態(tài)反