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1、冋答題和計算題:1、試舉例說明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系(包括一級結(jié)構(gòu)、高級結(jié)構(gòu)與功能的 關(guān)系)。2、參與維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的力有哪些?蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)主要是靠氨基酸側(cè)鏈之間的疏水鍵,氫鍵,范德華力和鹽鍵 維持的(鹽鍵又稱離子健,是蛋白質(zhì)分子中正、負電荷的側(cè)鏈基團互相接近,通過 靜電吸引而形成的)3、計算下列溶液的pH值:0.2 mol/L Gly溶液與0.1mol/L HCL溶液等體積混 合的混合液。(Gly 的 PK1=2.34 PK2=9.60)4、 試述蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸排列順序測定的一般步驟。1.測定蛋白質(zhì)分子 中多肽鏈的數(shù)目。通過測定末端氨基酸殘基的摩爾數(shù)與蛋白質(zhì)分子量之間的關(guān)系,即
2、可確定多肽 鏈的數(shù)目。2.多肽鏈的拆分幾條多肽鏈借助非共價鍵連接在一起,稱為寡聚蛋白質(zhì),如,血紅蛋白為四聚 體,烯醇化酶為二聚體;可用 8mol/L尿素或6mol/L鹽酸胍處理,即可分開多肽鏈 (亞基.3.二硫鍵的斷裂幾條多肽鏈通過二硫鍵交聯(lián)在一起??稍谟?mol/L尿素或6mol/L鹽酸胍存在下,用過量的 禺巰基乙醇處理,使二硫鍵還原為巰基,然后用烷基化試劑保護生 成的巰基,以防止它重新被氧化。4. 測定每條多肽鏈的氨基酸組成 水解,氨基酸分析儀分析多肽鏈的N-末端和C-末端多肽鏈端基氨基酸分為兩類:N-端氨基酸和C-端氨基酸。在肽鏈氨基酸順序 分析中,最重要的是N-端氨基酸分析法。6.多肽
3、鏈斷裂成多個肽段,可采用兩種 或多種不同的斷裂方法將多肽樣品斷裂成兩套或多套肽段或肽碎片,并將其分離開 來。7.分離肽段測定每個肽段的氨基酸順序。8.確定肽段在多肽鏈中的次序。9.確定原多肽鏈中二硫鍵的位置。1、用圖示說明米氏酶促反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系曲線,并扼要說明其含義。(1)當S很低時,u與S成正比,表現(xiàn)一級反應(yīng)。(2)隨S的增加,u也 隨S的增加而增加,但不成正比。(3)當S很大時,u達到最大值Vm , S增加 u不再增加,表現(xiàn)零級反應(yīng)。2、什么是米氏方程,米氏常數(shù) Km的意義是什么?試求酶反應(yīng)速度達到最大 反應(yīng)速度的99%時,所需求的底物濃度(用 Km表示)當反應(yīng)速度為最大速度一半
4、時,米氏方程可以變換如下:1/2Vmax=VmaxS/( Km+S)- Km=S可知,Km值等于酶反應(yīng)速度為最大速度一半時的底物濃 度。Km值是酶的特征性常數(shù),只與酶的性質(zhì),酶所催化的底物和酶促反應(yīng)條件 (如溫度、pH、有無抑制劑等有關(guān),與酶的濃度無關(guān)。1/Km可以近似表示酶對底物親和力的大小 利用米氏方程,我們可以計算 在某一底物濃度下的反應(yīng)速度或者在某一速度條件下的底物濃度。米氏方程:底物濃度與酶促反應(yīng)速度的關(guān)系 1 于酶促反應(yīng)速度達最大值一半 時的底物濃度。2. Km可以反映酶與底物親和力的大小。 Km越小,酶與底物的親和力越大。3. Km是酶的特征性常數(shù):在一定條件下,某種酶的Km值是
5、恒定的,因而可以通過測定不同酶的Km值,來判斷是否為不同的酶。4. Km可用來判斷酶的最適底物:當酶有幾種不同的底物存在時,通過測定酶 在不同底物存在時的Km值,Km值最小者,即為該酶的最適底物(或天然底 物)。3、試述維生素與輔酶的關(guān)系。維生素缺乏癥是什么?2、DNA和RNA的結(jié)構(gòu)和功能在化學(xué)組成、分子結(jié)構(gòu)、細胞內(nèi)分布和生理功 能上的主要區(qū)別是什么?化學(xué)組成:DNA:磷酸、核糖、A、G、T、CRNA :磷酸、脫氧核糖、 A、G、U、C分子結(jié)構(gòu):DNA含兩條鏈,雙螺旋結(jié)構(gòu)。RNA通常是單鏈,可形成局 部雙鏈結(jié)構(gòu) 細胞內(nèi)分布:生理功能:RNA參與蛋白質(zhì)的合成2.遺傳物質(zhì)3. 具有生物催化劑功能D
6、NA是主要的遺傳物質(zhì)3、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)有些什么基本特點?1. 為右手反平行,雙螺旋,圍繞同一中心軸;2. 主鏈(磷酸和核糖)位于螺旋外側(cè),堿基位于內(nèi)側(cè);3. 兩條鏈間存在堿基互補:A與T或G與C配對形成氫鍵,稱為堿基互補原 則(A與T為兩個氫鍵,G與C為三個氫鍵);4. 螺旋的穩(wěn)定因素為氫鍵和堿基堆砌力;5. 螺旋的螺距為3.4nm,直徑為2nm,每10個核苷酸形成一個螺旋。4、比 較tRNA、rRNA和mRNA的結(jié)構(gòu)和功能。tRNA三葉草結(jié)構(gòu)、攜帶并轉(zhuǎn)運氨基酸rRNA與蛋白質(zhì)一起構(gòu)成核蛋白體,作為蛋白質(zhì)生物合成的場所。mRNA可形成局部雙螺旋結(jié)構(gòu)的二級結(jié)構(gòu)。大多數(shù)真核成熟的mRNA分子具有
7、典型的5'端的7-甲基鳥苷三磷酸(m7GTP )帽子結(jié)構(gòu)和3'端的多聚腺苷酸(polyA尾巴結(jié)構(gòu)。帶有遺傳密碼,為 蛋白質(zhì)的合成提供模板。1、什么是生物氧化?有何特點?試比較體內(nèi)氧化和體外 氧化的異同。物質(zhì)在生物體內(nèi)氧化分解并釋放出能量的過程稱為生物氧化區(qū)割:體外魅燒37環(huán)境中挫能量的聲救部令必離能全部以抽能3、簡述化學(xué)滲透學(xué)說的主要內(nèi)容這一學(xué)說認為氧化呼吸鏈存在于線粒體內(nèi)膜上,當氧化反應(yīng)進行時,H+通過氫泵作用被排斥到線粒體內(nèi)膜外側(cè)(膜間腔),從而形成跨膜pH梯度和跨膜電位差。這種形式的 勢能”可以被存在于線粒體內(nèi)膜上的 ATP合酶利用,生成高能 磷酸基團,并與ADP結(jié)合而行
8、成ATP。 1寫出三羧酸循環(huán)的四步脫氫反應(yīng)及一 步底物水平磷酸化反應(yīng),說明三羧酸循環(huán)的生理意義。p2391三羧酸循環(huán)是機體將糖或者其他物質(zhì)氧化而獲得能量的最有效方式 2,三羧 酸循環(huán)是糖,脂和蛋白質(zhì)3大類物質(zhì)代謝和轉(zhuǎn)化的樞紐。2、磷酸戊糖途徑有何特 點?其生物學(xué)意義何在?特點:無ATP生成,不是機體產(chǎn)能的方式。1)為核酸的生物合成提供5-磷酸 核糖,肌組織內(nèi)缺乏6-磷酸葡萄糖脫氫酶,磷酸核糖可經(jīng)酵解途徑的中間產(chǎn)物3-磷酸甘油醛和6-磷酸果糖經(jīng)基團轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成。 2)提供NADPH a.NADPH是供 氫體,參加各種生物合成反應(yīng),如從乙酰輔酶 A合成脂酸、膽固醇;a酮戊二酸 與NADPH及氨生成
9、谷氨酸,谷氨酸可與其他 a酮酸進行轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)而生成相應(yīng) 的氨基酸。b.NADPH是谷胱甘肽還原酶的輔酶,對維持細胞中還原型谷胱甘肽的 正常含量進而保護巰基酶的活性及維持紅細胞膜完整性很重要,并可保持血紅蛋白 鐵于二價。c.NADPH參與體內(nèi)羥化反應(yīng),有些羥化反應(yīng)與生物合成有關(guān),如從膽 固醇合成膽汁酸、類固醇激素等;有些羥化反應(yīng)則與生物轉(zhuǎn)化有關(guān)。物學(xué)意義1,產(chǎn)生大量的NADPH,為細胞的各種合成反應(yīng)提供還原力 2,1產(chǎn)生NADPH(注 意:不是NADH ! NADPH不參與呼吸鏈2生成磷酸核糖,為核酸代謝做物質(zhì)準 備3分解戊糖意義:1補充糖酵解2氧化階段產(chǎn)生NADPH,促進脂肪酸和固醇合 成。3
10、非氧化階段產(chǎn)生大量中間產(chǎn)物為其它代謝提供原料3.計算在有氧條件下,1摩爾葡萄糖在生物體內(nèi)氧化成 CO 2和H 20,可凈產(chǎn)生多少摩爾的ATP ?(寫出 計算步驟)4. 試述糖異生與糖酵解代謝途徑有哪些差異糖酵解過程的3個個關(guān)鍵酶由糖異生的4個關(guān)鍵酶代替催化反應(yīng),且作用部位不同,糖酵解全部在胞液中,糖異生則在胞液和線粒體進行。書上P2565. 糖酵解作用的場所在哪里?寫出從葡萄糖到丙酮酸過程的三個不可逆反應(yīng)的反應(yīng)式p229區(qū)別點脂肪酸從頭介成脂肪酸P-氧化部位胞質(zhì)洛膠線粒體醸堪載體ACP:0A加入或斷裂的二礦®位丙二酸CO A乙聯(lián)COA電產(chǎn)供體或受體NADPH+H+UAD + FAD酶
11、7種(名酶復(fù)合體或多功能酶)4種D-型廣型能星消耗 ATF 和 NADPH+H+產(chǎn)生106個ATP底物的轉(zhuǎn)運檸檢酸穿梭系統(tǒng)肉堿轉(zhuǎn)運反應(yīng)方向從到竣塞從歿基端開始循環(huán)次數(shù)7次2、寫出1摩爾軟脂酸在體內(nèi)氧化分解成 C02和H20的反應(yīng)歷程,并計算產(chǎn) 生的ATP摩爾數(shù)。1mol軟脂酸共經(jīng)過7次上述的&氧化循環(huán),將軟脂酸轉(zhuǎn)變?yōu)?mol乙酰CoA,并產(chǎn)生7molFADH2和7molNAD+H+。每1molFADH2進入呼吸鏈,生成 1.5molATP ;每1molNADH+進入呼吸鏈,生成2.5molATP。軟脂酸3氧化降解 過程中脫下的氫經(jīng)呼吸鏈共產(chǎn)生 ATP的數(shù)量是:1.5 7+2.5網(wǎng)=28
12、molATP。每1mol乙酰CoA進入三羧酶循環(huán),可產(chǎn)生10molATP。因此,經(jīng)3氧化降解 所產(chǎn)生的8mol乙酰CoA徹底分解,共產(chǎn)生10M=70molATP。另外,軟脂酸在活化時消耗了兩個高能鍵,相當于消耗了2份子ATP。因此,1mol軟脂酸完全氧化時可凈生成 1.5 7+2.5 >7+10X8-2=106mol ATP 1、氨基酸脫氨后產(chǎn)生的氨和 a酮酸有哪些主要的去路?a酮酸的代謝:(一)再氨基化為氨基酸。(二)轉(zhuǎn)變?yōu)樘腔蛑?生糖氨基酸(分解可轉(zhuǎn)變?yōu)楸幔篈la,Gly,Thr,Ser,Cys、琥珀酸:lie. Met , Vai、草酰乙酸:Asp,Asn、延胡索酸 Phe,
13、Tyr、a酮戊二酸:His,Arg,Pro,Glu,Gln )。 2.生酮氨基酸(分解轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴R阴?CoA,生成酮體)Leu, Lys, Phe, Trp, Tyr 3生 糖兼生酮氨基酸:Phe, Tyr(三)氧化供能:進入三羧酸循環(huán)徹底氧化分解供能氨的代謝1、合成尿素2、合成氨基酸3、合成氨酰4、合成其他含氮物5、直接排出2.圖解尿素循環(huán)的過程,簡要說明其生理意義。« *:< < 4+ HjO/ M1P 7 5:2AI)F+Fi *:軌基甲醴碉酸瓜氮酸尿素1天住酸y?酬 綃軾戰(zhàn)代丿Q號審酸乙i®壯洋鞍戰(zhàn)將體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的較高毒性的氨轉(zhuǎn)化為低毒的尿素,從而
14、排出體外。將 體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的較高毒性的氨轉(zhuǎn)化為低毒的尿素,從而排出體外。3. 嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)從頭合成的各原子來源是什么?1.敘述DNA聚合反應(yīng)的特點及DNA復(fù)制的過程(包括各種酶及輔助因子的 作用)。DNA聚合反應(yīng)的特點:(1)以4種dNTP為底物;(2) DNA模板;Mg2+(3)帶3'-0H末端的引物;(4)延長方向5' 3 '(5)產(chǎn)物DNA的性質(zhì)與模板相同。1復(fù)制的起始由蛋白因子識別復(fù)制起始點 解旋解鏈,形成復(fù)制叉: 由拓撲異構(gòu)酶和解鏈酶 作用,使DNA的超螺旋及雙螺旋結(jié)構(gòu)解開堿基間氫鍵斷裂,形成兩條單鏈 DNA。單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB )結(jié)合在兩條單
15、鏈DNA上,形成復(fù)制叉。DNA復(fù)制時,局部雙螺旋解開形成兩條單鏈,這種叉狀結(jié)構(gòu)稱為復(fù)制叉。拓撲異構(gòu)酶(又稱DNA旋轉(zhuǎn)酶)拓撲異構(gòu)酶I可使DNA雙鏈中的一條鏈切斷,松開雙螺旋后再將 DNA鏈連 接起來,從而避免出現(xiàn)鏈的纏繞。拓撲異構(gòu)酶U可切斷DNA雙鏈,使DNA的超螺旋松解后,再將其連接起 來。解螺旋酶,又稱解鏈酶或rep蛋白,是用于解開DNA雙鏈的酶蛋白,每解開 一對堿基,需消耗兩分子ATP。單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB )這是一些能夠與單鏈DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因子。其作用為: 使解開雙螺旋后 的DNA單鏈能夠穩(wěn)定存在,即穩(wěn)定單鏈 DNA,便于以其為模板復(fù)制子代 DNA ; 保護單鏈DNA,避免核
16、酸酶的降解。弓I物酶(合成RNA引物酶本質(zhì)上是一種依賴 DNA的RNA聚合酶,該酶以DNA為模板,聚合一 段RNA短鏈引物,以提供自由的3'-0H,使子代DNA鏈能夠開始聚合。引發(fā)體 組裝:蛋白因子以及引物酶一起組裝形成引發(fā)體。 引發(fā):在引物酶的催化下,以DNA為模板,合成一段短的RNA片段,從而獲得3端自由羥基(3'-0H )2復(fù)制的延長由DNA聚合酶催化,以3 防向的親代DNA鏈為模板,從5 前向聚 合子代DNA鏈。在原核生物中,參與 DNA復(fù)制延長的是DNA聚合酶川。引發(fā)體向前移動,解開新的局部雙螺旋,形成新的復(fù)制叉,滯后鏈重新合成RNA引物,繼續(xù)進行鏈的延長。3.復(fù)制的
17、終止去除引物,填補缺口;連接岡崎片段;在原核生物中,由DNA聚合酶I來水解去除RNA引物,并由該酶催化延長 引物缺口處的DNA,直到剩下最后一個磷酸酯鍵的缺口。在 DNA連接酶的催化 下,形成最后一個磷酸酯鍵,將岡 崎片段連接起來,形成完整的 DNA長鏈。2、 闡述DNA的復(fù)制是半保留半不連續(xù)復(fù)制。 半不連續(xù)復(fù)制:雙鏈DNA分子的兩條 鏈是反向平行的。 而DNA聚合酶的方向都是5' 3。當DNA復(fù)制時,一條鏈是 連續(xù)合成的,稱前導(dǎo)鏈,而另一條在 5'方向合成小片段DNA (岡崎片段),然 后通過酶將這些片段連接起來,這不連續(xù)合成的DNA鏈為滯后鏈。3.DNA復(fù)制(原核)與RNA
18、轉(zhuǎn)錄各有何特點?試比較之。 DNA復(fù)制:只有一個復(fù)制起點, 以雙向等速復(fù)制方式進行的。DNA的兩條模板鏈是反平行的,而 DNA的合成又 總是沿5'方向有關(guān)的酶及蛋白質(zhì) 拓撲異構(gòu)酶,解螺旋酶,單鏈結(jié)合蛋白,DNA 聚合酶,DNA連接酶,引物酶RNA轉(zhuǎn)錄:模板RNA的轉(zhuǎn)錄合成需要DNA做模 板,DNA雙鏈中只有一股鏈起模板作用,即模板鏈轉(zhuǎn) 錄需要RNA聚合酶,合成方向5' 3模板與酶的辨認結(jié)合:轉(zhuǎn)錄模板上有被 RNA聚合酶辨認和結(jié)合的 位點4、DNA復(fù)制的高度準確性是通過什么來實現(xiàn)的?DNA復(fù)制時的保真性主要與下列因素有關(guān):1遵守嚴格的堿基配對規(guī)律;2. DNA聚合酶在復(fù)制時對堿基
19、 的正確選擇;3對復(fù)制過程中出現(xiàn)的錯誤及時進行校正。5.什么是遺傳密碼?簡述其基本特點。指mRNA中的核苷酸排列序列與蛋白質(zhì)中的氨基酸排列序列的關(guān) 系。mRNA中每三個相鄰 的核苷酸組成三聯(lián)體,代表一個氨基酸的信息,此三聯(lián) 體就稱為密碼子或三聯(lián)密碼。共 有64種不同的密碼。一般情況下,一個三聯(lián)體密 碼(密碼子)對應(yīng)著一個氨基酸。 遺傳密碼具有以下特點: 連續(xù)性;簡并性;擺動性;通用性(在線粒體或葉綠體中特殊);方向性,即解讀方 向為5' 3'起始密碼:AUG ;終止密碼:UAA、UAG、UGA。6.mRNA、 tRNA、rRNA在蛋白質(zhì)生物合成中各具什么作用?mRNA是遺傳信息
20、的傳遞者,是蛋白質(zhì)生物合成過程中直接指令氨基酸摻入的模板。(3分).tRNA在蛋白質(zhì)合成中不但為每個三聯(lián)體密碼子譯成氨基酸提供接合體,還為準確無誤地將所需氨基酸運送到核糖體上提供運送載體。(4分.rRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合組成的 核糖體是蛋白質(zhì)生物合成的場所(3分)。7、簡要說明蛋白質(zhì)生物合成的步驟。 蛋白質(zhì)合成存在三個階段:起始、延伸、終止。起始:形成mRNA核糖體復(fù)合物,起始密碼子結(jié)合起始氨酰tRNA (第一個氨酰tRNA , tRNAifMet )延伸:依 次閱讀密碼子,多肽鏈在 C端增加氨基酸而延長。 終止:遇到終止密碼子,因終 止密碼子無對應(yīng)的氨酰tRNA。1為什么說三羧酸循環(huán)是糖、脂、蛋白質(zhì)三大物質(zhì)代謝的共同通路?哪些化合 物可以被認為是聯(lián)系糖、脂、蛋白質(zhì)和核酸代謝的重要環(huán)節(jié)?為什么? 三羧酸 循環(huán)是糖、脂、蛋白質(zhì)三大物質(zhì)代謝的共同氧化分解途徑(2分);三羧酸循環(huán)為糖
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