土壤實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法

1、.測(cè)土配方施肥測(cè)試項(xiàng)目1、 有機(jī)質(zhì)2、 速效磷3、 速效鉀4、 堿解氮5、 緩效鉀6、 全氮7、 電導(dǎo)和pH8、 植物氮磷鉀9、 植物微量元素的測(cè)定（Fe、Mn、Cu、Zn、Ca、Mg）10、 土壤中的微量元素（Fe、Mn、Cu、Zn） 11、 水中銨態(tài)氮的測(cè)定(靛酚藍(lán)比色法)12、 土壤有效S的測(cè)定13、 硝態(tài)氮的測(cè)定一、 有機(jī)質(zhì)的測(cè)定（重鉻酸鉀外加熱法）試劑：1、0.2mol/L的FeSO4溶液：56.0gFeSO4（化學(xué)純）溶于1L水，再加5ml濃硫酸。2、重鉻酸鉀-濃硫酸混合液：稱39.23g（通常可直接稱40g），加1L水溶解，在加1L濃硫酸。（為防止結(jié)晶，經(jīng)驗(yàn)是400ml水溶解重鉻

2、酸鉀，用600ml水稀釋濃硫酸，在混合）。3、鄰啡啰啉指示劑：1.485g鄰啡啰啉+0.695g FeSO4溶于100ml水里，儲(chǔ)存在棕色瓶中。4、Ag2SO4：防止氧化物（Cl-）的干擾，約加0.1g左右。（石灰土壤一般不用）5、重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液的配制：39.2245g重鉻酸鉀（分析純）加400ml水，加熱溶解，定容1L。設(shè)備：消煮爐、消煮管、萬(wàn)分之一天平、2L大燒杯、大儲(chǔ)存瓶、瓶口分液器（10ml）、酸式滴定管、三角瓶、洗瓶實(shí)驗(yàn)步驟：1、 稱0.1000-0.5000g（0.25mm）土樣至消煮管，加入10ml重鉻酸鉀-濃硫酸混合液，搖勻。2、 放入消煮爐（190）沸5min。3、 完全轉(zhuǎn)移

3、至三角瓶中，加入指示劑，用硫酸亞鐵滴定。（橙黃藍(lán)綠轉(zhuǎn)紅）注意：滴至快終點(diǎn)時(shí)用洗瓶洗壁，減少誤差。 每批樣3空白。 每天對(duì)FeSO4標(biāo)定一次。（標(biāo)定方法2：0.2000g重鉻酸鉀溶于5070ml水+5ml濃硫酸+鄰啡啰啉指示劑）計(jì)算公式：方法1：C FeSO4=（標(biāo)準(zhǔn)重鉻酸鉀質(zhì)量/M重鉻酸鉀）*6*5/消耗FeSO4體積 5表示每次吸重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液5ml 方法2：C FeSO4=0.2000/（消耗FeSO4體積*0.04904）ppm 有機(jī)質(zhì)（g/Kg）=C FeSO4*（V0-V）*10-3*3*1.1*1.724*1000/樣重加Ag2SO4時(shí)，校正系數(shù)變?yōu)?.04。（1.1為氧化校正系數(shù)

4、）有機(jī)質(zhì)（g/Kg）=C FeSO4*（V0-V）*10-3*3*1.1*1.724*1000/樣重2重鉻酸鉀+3C重鉻酸鉀+ 6FeSO4滴定平行誤差0.5g/kg二、速效磷（碳酸氫鈉浸提硫酸鉬銻抗比色法）試劑：1、4mol/L NaOH：4g NaOH+25ml水2、0.5mol/L NaHCO3浸提劑：42g NaHCO3+1L水，用4mol/L NaOH調(diào)pH8.53、稀硫酸溶液：153ml濃硫酸+400ml水，待其冷卻4、5g/L酒石酸銻鉀溶液：0.5g酒石酸銻鉀+100ml水5、6.5mol/L鉬銻抗存儲(chǔ)液：10g鉬酸銨+300ml水，水浴加熱到60使其溶解，冷卻后將配好的稀硫酸溶

5、液緩緩到入鉬酸銨溶液，在冷卻后，加入100ml 5g/L的酒石酸銻鉀溶液，總體積定容1L，存儲(chǔ)于棕色瓶中，可以長(zhǎng)期保存。6、鉬銻抗顯色劑：稱1.5g抗壞血酸+100ml鉬銻抗存儲(chǔ)液。（現(xiàn)配現(xiàn)用，24h以內(nèi)）7、二硝基酚指示劑：0.2g 2，6二硝基酚溶于100ml水中8、無(wú)磷活性炭：用1：1的鹽酸（1L水+1L濃鹽酸）浸泡活性炭24h，用NaHCO3淋洗5次，再用水淋洗5次，檢查至無(wú)磷為止。（AgNO3檢查）9、1000ppm P標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存液：取105烘干4h的純磷酸二氫鉀（優(yōu)級(jí)純）0.4390g+水200ml+5ml濃硫酸，定容1L10、P標(biāo)準(zhǔn)液：取磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存液準(zhǔn)確稀釋20倍，其濃度為5mg/

6、L，不易長(zhǎng)期保存。設(shè)備：液槍（1ml、5ml、10ml）、小試管、分光光度計(jì)、混勻器、瓶口分液器（50ml）、細(xì)口瓶、振蕩器、萬(wàn)分之一、百分之一天平、濾紙、烘箱實(shí)驗(yàn)步驟：1、 稱2.50g（1mm）土樣至細(xì)口瓶（必要時(shí)小半勺無(wú)磷活性炭）+50ml NaHCO3，振蕩30min2、 過(guò)濾，吸2ml待測(cè)液至小試管+1ml顯色劑，搖勻（除CO2）+7ml水，搖勻，30min后在660nm下比色（預(yù)熱30min左右）。722分光光度計(jì)是880nm，721是700nm。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：5ppm標(biāo)磷：標(biāo)P00.20.40.60.811.2空白2222222顯色劑1111111水76.86.66.46.26

7、.05.8對(duì)應(yīng)濃度00.10.20.30.40.50.6注意：X比色值（在Excel中第一列） Y對(duì)應(yīng)濃度（在Excel中第二列）計(jì)算公式：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線算出對(duì)應(yīng)P的濃度土壤中含磷量（mg/Kg）=C*100三、 速效鉀（乙酸銨提取法）試劑：1、1mol的乙酸銨溶液：取77.08g乙酸銨+水+用乙酸（氨水）用pH試紙調(diào)節(jié)pH至7.0，后定容至1L 方法二：用冰乙酸57ml與濃氨水69ml+水+用乙酸（氨水）用酸度計(jì)（試紙）調(diào)節(jié)pH至7.0，后定容至1L3、 鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制（濃度為100ppm）取110烘干2h的純氯化鉀0.1907g+水定容1L，可長(zhǎng)期保存 設(shè)備：試管、液槍（1ml、5ml、1

8、0ml）、火焰光度計(jì)、混勻器、瓶口分液器（50ml）、振蕩器、細(xì)口瓶、萬(wàn)分之一天平、百分之一天平、濾紙、烘箱、100ml的容量瓶、1L的容量瓶 步驟：1、 浸提液的制備：稱1mm土樣5g于細(xì)口瓶中，用瓶口分液器加50ml乙酸銨，恒溫震蕩（170轉(zhuǎn)速）30min，過(guò)濾到試管里，做空白2、 浸提液的測(cè)定:用火焰光度計(jì)直接測(cè)定（預(yù)熱30min左右）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：k 100ppm標(biāo)K（100ppm）00.51.01.52.02.53.0乙酸銨定容10ml定容10ml定容10ml定容10ml定容10ml定容10ml定容10ml對(duì)應(yīng)濃度051015202530注意：X火焰光度值（在Excel第一列） Y

9、對(duì)應(yīng)濃度（在Excel第二列）計(jì)算公式： 鉀含量（mg/Kg）=C*10注意：此法只適用于石灰性土壤=四、 堿解氮（擴(kuò)散法）試劑：1、1N的NaOH：40.0gNaOH+水 定容至1L2、混合指示劑：0.099g溴甲酚綠+0.066g甲基紅溶于100ml乙醇3、硼酸指示劑：20g硼酸溶于950ml熱蒸餾水，冷卻后+20ml混合指示劑，混勻，+1N NaOH至溶液呈紫紅色（pH4.5），稀釋至1L4、0.005mol/L硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.128ml濃硫酸稀釋至1L，用Na2CO3標(biāo)定5、1甲基橙指示劑：0.1g甲基橙+水至100ml6、Na2CO3標(biāo)定溶液：0.2077g無(wú)水Na2CO3+水至1

10、L7、堿性膠：40g阿拉伯膠+60ml水（70-80）冷卻后+20ml甘油+20ml飽和碳酸鉀溶液8、硫酸亞鐵粉末：粉碎后密閉陰涼保存設(shè)備：橡皮筋、擴(kuò)散皿、液槍（2ml）、注射器（10ml）、半微量滴定管、烘箱步驟：1、 稱（1mm）土樣2.00g+1.00g硫酸亞鐵于外室2、 加硼酸指示劑2.0ml于內(nèi)室3、 涂膠4、 加蓋，加10mlNaOH（1N）于外室5、 40±1烘24h±0.5h6、 取出后用稀硫酸滴定。（藍(lán)色微紅色）標(biāo)準(zhǔn)酸的標(biāo)定：用硫酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定Na2CO3標(biāo)定溶液+1d甲基橙（終點(diǎn)為橙紅色）清洗擴(kuò)散皿時(shí)應(yīng)用稀鹽酸浸泡20min計(jì)算結(jié)果：堿解氮含量（mg/Kg

11、）=（V-V0）*CH+*14*1000/2.00兩次平行誤差小于5mg/Kg五、 緩效鉀試劑：1、1N HNO3：62.5ml濃硝酸+水稀釋至1L2、1000ppmK標(biāo)準(zhǔn)溶液：1.9070g/百分含量定容至一升設(shè)備：消煮爐、消煮管、瓶口分液器（50ml）、小試管、試管架、濾紙、液槍（1ml、10ml）、火焰光度計(jì)、混勻器步驟：1、 稱2.500g（1mm）至消煮管+25.0ml 1N 硝酸，在210沸10min2、 冷卻后，過(guò)濾3、 吸1ml至小試管+9.0ml水，火焰光度計(jì)測(cè)定（預(yù)熱30min左右）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:標(biāo)鉀（100ppm）0510152025301N HNO35.0ml5.0m

12、l5.0ml5.0ml5.0ml5.0ml5.0ml對(duì)應(yīng)濃度、051015202530定容100ml注意：X火焰光度值（在Excel第一列） Y對(duì)應(yīng)濃度（在Excel第二列）計(jì)算公式：鉀含量（mg/kg）=C*200六、 全氮的測(cè)定試劑：1、 催化劑：硫酸鉀100g+硫酸銅10g+硒1g2、 濃硫酸（化學(xué)純）3、 10mol/L NaOH 溶液：400g NaOH +500ml 無(wú)CO2蒸餾水，定容至1L4、 混合指示劑：0.099g溴甲酚綠+0.066g甲基紅+100ml（95%）乙醇5、 硼酸指示劑：20g硼酸+950ml蒸餾水+20ml混合指示劑+0.1N NaOH至紫紅色6、 0.02

13、mol/L硫酸標(biāo)準(zhǔn)液：0.1mol/L硫酸，再稀釋5倍設(shè)備：消煮管、半微量定氮蒸餾器、半微量滴定管（10ml）消煮步驟：1、稱0.5000-1.0000g至消煮管+1.1g催化劑+5-10ml濃硫酸2、小火加熱，泡沫消失提溫，至灰白帶綠后再煮1h（硫酸高度在試管1/3處）蒸餾法測(cè)定步驟：（200）1、 將所有消煮液轉(zhuǎn)入蒸餾室中2、 蒸餾液達(dá)到40-50ml時(shí)停止蒸餾3、 用0.02N硫酸滴定計(jì)算：N（g/kg）=（V-V0）*CH+*14*（V總/V吸）/m允許誤差0.005%土壤全N 消煮和全K、P一樣。稱取0.4g左右土樣，放入消煮館。加入少許水潤(rùn)濕，再加入5mlH2SO4（濃）在260左

14、右消煮50min。然后再加入1滴高氯酸，半小時(shí)后再加1滴高氯酸，半小時(shí)后再加1滴高氯酸。消煮館內(nèi)接近白色在消煮1h后取出，若不是白色繼續(xù)加高氯酸。 取出后冷卻，加水定容至50ml，將上澄清液倒入白色塑料瓶中，保存。吸取樣液1ml，再加入2滴中性紅溶液（0.5g溶于100ml水），溶液成紫色或紫紅色然后再用NaOH溶液調(diào)制棕黃色。繼續(xù)在樣液中加入次氯酸鈉堿性溶液1ml+1ml苯酚溶液。搖勻，在40下放半小時(shí)后，加入1ml掩蔽劑，以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物定容10ml。最后用分光光度計(jì)，波長(zhǎng)為625nm。試劑：1、 稱取苯酚10g和亞硝基鐵氰化鈉100mg稀釋至1L。此試劑不穩(wěn)定，須儲(chǔ)存于棕色瓶中，在

15、4冰箱中保存。2、 次氯酸鈉堿性溶液：稱取10gNaOH、7.06g磷酸氫二鈉、31.8g磷酸鈉、10ml次氯酸鈉溶于水，定容至1L。存于棕色瓶中，在4冰箱中保存。3、 掩蔽劑：將400g/L的酒石酸鉀鈉與100g/L的EDTA二鈉鹽(乙二胺四乙酸鈉)溶液等體積混合。每100ml混合液中加入10mol/LNaOH溶液0.5ml。4、 標(biāo)液：稱取干燥的0.4717g硫酸銨溶于水，定容1L，制備成100ug/ml的儲(chǔ)存液。使用前再用水稀釋40倍，即配成2.5ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。標(biāo)曲：標(biāo)液0ml0.4ml0.8ml1.2ml1.6ml2.0ml次氯酸鈉堿性溶液1ml1ml1ml1ml1ml1m

16、l苯酚溶液1ml1ml1ml1ml1ml1ml0.5小時(shí)掩蔽劑1ml1ml1ml1ml1ml1ml定容10ml七、 電導(dǎo)和pH的測(cè)定試劑：1、水步驟：1、 稱20.00（1mm）土樣至細(xì)口瓶2、 加50.0ml水振蕩（手震）3min3、 在酸度計(jì)和電導(dǎo)儀測(cè)定八、 植物氮磷鉀的測(cè)定（濃硫酸、雙氧水消煮法，奈氏比色法，釩鉬黃比色法、火焰光度計(jì)法）消煮試劑試劑：1、濃硫酸2、雙氧水（30）消煮設(shè)備：消煮管、消煮爐消煮步驟：1、 稱植物樣品（0.250.5mm）0.20000.4000g（部位不同則稱的量不同）（莖0.35-0.4000.籽 0.2500-0.3000，葉0.2500-0.3000，根

17、0.3500-0.4000殼0.3500-0.4000絮0.4000-0.4500）于消煮管中+濃硫酸5ml，最好放置過(guò)夜2、 先加雙氧水2ml，置于消煮爐上（300），以后每30min滴加10d雙氧水，至消煮液清亮后在加熱30min3、 冷卻后，定容50ml，轉(zhuǎn)移到塑料瓶中備用，做空白（一） 氮的測(cè)定 試劑：1、100g/L酒石酸鈉溶液：稱100g酒石酸鈉+水定容至1L 2、100g/L KOH溶液：稱100gKOH+水定容至1L3、奈氏試劑：45.0g HgI2 +35.0g KI+少量水+112.0g KOH定容至1L，放置數(shù)日后過(guò)濾，將上清液放入棕色瓶中備用 4、100ppm的氮儲(chǔ)存液

18、：稱0.3817g（純） NH4Cl（分析純）+水定容1L，此溶液為儲(chǔ)備液，用時(shí)吸取此液50ml，稀釋至500ml即為10ppm的工作標(biāo)準(zhǔn)液設(shè)備：液槍（1ml、5ml、10ml）、分光光度計(jì)、混勻器步驟：1、 KOH量的確定：吸稀釋十倍空白待測(cè)液1ml+酚酞指示劑，用KOH滴定至剛出現(xiàn)紅色記錄所用的體積數(shù)。（為了方便一般我們將koH的濃度調(diào)到剛好加lml的KOH）2、 吸稀釋十倍待測(cè)液1ml+酒石酸鈉0.5ml+充分搖勻+確定的1mlKOH的+奈氏試劑0.5ml+水7ml（最后體積為10ml）3、 15min后開始比色，420nm（預(yù)熱30min左右）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：N標(biāo)液10ppm00.51

19、.01.52.02.53.0空白1111111酒石酸鈉0.50.50.50.50.50.50.5KOH（1）（1）（1）（1）（1）（1）（1）奈氏試劑0.50.50.50.50.50.50.5補(bǔ)水7.06.56.05.55.04.54.0對(duì)應(yīng)濃度00.51.01.52.02.53.0注意：X火焰光度值（在Excel第一列） Y對(duì)應(yīng)濃度（在Excel第二列）計(jì)算：氮含量(g/kg)=C*10*50*10*10-3/樣重（二）磷的測(cè)定（釩鉬黃比色法）試劑：1、 釩鉬酸銨試劑：稱12.5g鉬酸銨+200ml水，0.625g偏釩酸銨+150ml沸水+125ml濃硝酸，將鉬酸銨溶液緩緩加入釩酸銨溶液+

20、水稀釋至500ml2、 6N NaOH溶液：24gNaOH溶于水，稀釋至100ml3、 2，6-二硝基酚指示劑：0.25g2，6-二硝基酚+100ml水（變色X圍：2.4，無(wú)色；4.0，黃色）4、 50ppmP標(biāo)溶液：稱105烘干的（純）KH2PO40.2195g+水至1000ml容量瓶，+水約400ml，+5ml濃硫酸，用水定容步驟：1、 NaOH量的確定：吸空白/待測(cè)液2ml+2，6-二硝基酚指示劑，用NaOH滴定至剛出現(xiàn)黃色記錄所用體積（為了方便一般我們將NaoH的濃度調(diào)到剛好加lml的NaoH） 吸待測(cè)液2.0ml至小試管+1mlNaOH的量+釩鉬酸銨試劑2ml+水5ml（最后體積為1

21、0ml）2、 30min后450nm比色（預(yù)熱30min左右）標(biāo)曲的制作：P標(biāo)50ppm00.40.81.21.62.02.4空白2222222NaOH1111111顯色劑2222222水54.64.2383.432.6對(duì)應(yīng)濃度02.04.06.08.010.012.0計(jì)算：磷含量(g/kg)= C*V*稀釋倍數(shù)*10-3/樣重（三） 鉀的測(cè)定（火焰光度計(jì)法）試劑：1、100ppm K的標(biāo)準(zhǔn)液：0.1907g（純）KCl（110烘干）+水定容1L步驟：1、 吸1ml待測(cè)液至小試管+9ml水2、 火焰光度計(jì)測(cè)量（預(yù)熱30min左右）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：K100ppm051015202530水(加10

22、ml空白消煮液)然后定容至100ml對(duì)應(yīng)濃度（ppm）051015202530計(jì)算：鉀含量（g/kg）=C*V*稀釋倍數(shù)*10-3/樣重九、 植物微量元素的測(cè)定消煮試劑試劑：1、 濃硝酸（優(yōu)級(jí)純）2、 高氯酸（優(yōu)級(jí)純）消煮步驟：1、 按比例稱取植物樣（各個(gè)部分），總計(jì)1.0000g2、 加濃硝酸10.0ml，消煮，近干時(shí)加5.0ml高氯酸，至清亮為止（經(jīng)驗(yàn)消煮24h）3、 煮好后定容至50.0ml，塑料瓶中存儲(chǔ)試劑：1、1000ppm Fe：稱1.000gFe（光譜純）+60ml HCl（1：1）+少許硝酸氧化+水 稀釋至1L（CHCl=0.3mol/L）2、1000ppm Mn：稱1.000

23、0g純Mn+硫酸（可使其全溶即可）+水定容至1L3、1000ppm Cu：稱1.0000g純銅（用CuSO4）+1：1 HNO3 50ml+水定容至1L4、1000ppm Zn：稱1.0000g純鋅+1：1 HCl 50ml+水定容至1L5、1000ppm Ca：稱2.4972 g 純（CaCO3）+HCl（可使其全溶即可）加熱排氣+水定容至1L6、1000ppm Mg：稱1.0000g純鎂+HCl（可使其全溶即可）加熱排氣+水定容至1L7、5%LaCl3：稱50.00gLaCl3+水定容至1L步驟：1、 吸1ml待測(cè)液于小試管+0.5ml LaCl3+8.5ml水2、 Cu、Mn、Zn稀釋1

24、次3、 Fe稀釋2次4、 Ca、Mg稀釋3次5、 在原子吸收上測(cè)定（預(yù)熱30min左右）注意：每次稀釋都需要加0.5ml LaCl3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：1、 Fe：100ppm標(biāo)Fe02.55.010.015.0水定容至100ml對(duì)應(yīng)濃度02.55.010.015.02、 Mn：100ppm標(biāo)Mn01.02.03.04.05.0水定容至100ml對(duì)應(yīng)濃度0123453、 Cu：100ppm標(biāo)Cu00.51.01.52.0水定容至100ml對(duì)應(yīng)濃度00.51.01.52.04、 Zn：100ppm標(biāo)Zn00.40.81.21.6水定容至100ml對(duì)應(yīng)濃度00.40.81.21.65、 Ca：100p

25、pm標(biāo)Ca01.02.03.04.05.0水定容至100mlLaCl3555555對(duì)應(yīng)濃度01.02.03.04.05.06、 Mg：100ppm標(biāo)Mg00.10.20.30.40.5水定容至100mlLaCl3555555對(duì)應(yīng)濃度00.10.20.30.40.5計(jì)算：含量（mg/Kg）=C*V*稀釋倍數(shù)/樣重十 土壤微量元素測(cè)定（原子吸收）試劑：1、 dtpa：稱1.967gDTPA溶于13.3ml TEA（三乙醇胺）+少許水+1.47gCaCl2定容至一升（用6N的HCl和6N NaOH的）調(diào)節(jié)PH=7.3 2、標(biāo)液同上，全是100ppm，用DPTA稀釋設(shè)備：原子吸收儀、 細(xì)口瓶、搖床、濾

26、紙、塑料瓶（50ml）、塞子步驟1、 稱20.00g 1mm 至細(xì)口瓶+40ml dpta 振蕩（170轉(zhuǎn)速）2h 2、 過(guò)濾至塑料瓶3、 測(cè)定（預(yù)熱30min左右）十一.土壤有效S的測(cè)定：氯化鈣浸提-硫酸鋇比濁法（只適合堿性土） (1) 浸提劑：氯化鈣浸提劑：稱取氯化鈣（CacL2,分析純）1.5g溶于水，稀釋至1L.(2) 過(guò)氧化氫。（w(H2O2)=30%）,化學(xué)純。 （3）HCL 1:4溶液。一份濃鹽酸（HCL,P=1.19g/ml,化學(xué)純）與四分水混合。（4）氯化鋇晶粒。（BaCL*2H2O，分析純）（5）100ug/ml硫（S）標(biāo)準(zhǔn)液。稱硫酸鉀（K2SO4，分析純）0.5636g溶于水，定容1L。步驟：稱取10.00g土樣至細(xì)口瓶中，加浸提劑50ml震蕩1小時(shí)，過(guò)濾，吸取10ml至大試管中，加熱，加23滴雙氧水，繼續(xù)加熱待雙氧水分解完去下，加1ml 1:4 HCL， 再加入2ml 阿拉伯膠液定容至5